miRNA-126调控Wnt/β-catenin信号通路对子宫平滑肌肉瘤生物学功能的影响

目的研究miRNA-126在子宫平滑肌肉瘤(ULMS)组织中的表达水平及临床意义,探讨其通过下调Wnt/β-catenin信号通路抑制ULMS细胞增殖和转移能力的作用机制。方法采用qRT-PCR检测miRNA-126在ULMS组织和子宫平滑肌瘤组织中的表达水平,并分析miRNA-126表达与ULMS患者临床病理参数、复发转移及生存率的关系。常规培养ULMS细胞SK-UT-1,随机分为NC对照组和miRNA-126 mimics实验组,分别转染NC mimics和miRNA-126 mimics,qRT-PCR检测各组细胞中miRNA-126的表达;CCK8实验检测各组细胞的增殖能力;Transwell实验检测各组细胞的转移能力;TOP/FOP Flash实验检测各组细胞Wnt/β-catenin信号通路活性;western blotting检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白β-catenin在细胞核中的表达水平,及其相关蛋白Slug、Snail和CyclinD1的表达。结果qRT-PCR检测结果显示,与子宫平滑肌瘤组织相比,miRNA-126在ULMS组织中的表达显著降低(P<0.05),且miRNA-126在肿瘤直径大和存在转移的ULMS患者中表达显著减少(P<0.05),miRNA-126表达对ULMS患者复发转移和生存率无明显影响(P>0.05)。与NC组相比,miRNA-126 mimics组SK-UT-1细胞中的miRNA-126表达水平显著增加(P<0.05),SK-UT-1细胞的增殖和转移能力显著降低(P<0.05),Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白β-catenin及相关蛋白Slug、Snail和CyclinD1表达均显著降低(P<0.05)。结论miRNA-126在ULMS组织中表达降低,miRNA-126可能通过下调Wnt/β-catenin信号通路抑制ULMS细胞的增殖和转移。

miRNA-126、sTREM-1对脓毒症诊断及预后评估价值

探讨血清miRNA-126、sTREM-1对于脓毒症的诊断以及预后评估的价值。方法:收集2022年1月-2022年12月期间在包头医学院第一附属医院ICU治疗的脓毒症患者44例作为试验组,同时抽取在我院健康体检的志愿者44例作为对照组。记录入组24h内的白细胞计数、C-反应蛋白、PCT、乳酸、APACHEⅡ评分、SOFA评分、miRNA-126、sTREM-1。将脓毒症组的患者按照28天后是否存活分为生存组和死亡组。应用logistic回归分析筛选出影响预后的死亡危险因素,利用ROC曲线下的面积预测对脓毒症诊断及预后的评估价值。结果:脓毒症组患者与健康对照组相比,除miRNA-126外,其余检测指标的表达水平均较高。ROC结果显示:PCT、C-反应蛋白、miRNA-126、sTREM-1以及二者联合检测对于脓毒症诊断的AUC分别为:0.995,0.955,0.91,0.96,0.984.敏感度分别为:97.7%,97.5%,87.5%,100%,100%。特异度分别为100%,100%,90.9%,90.9%,90.9%。Logistic回归分析显示:APACHEⅡ评分、miRNA-126、sTREM-1为脓毒症患者预后的危险因素。ROC曲线结果显示,APACHEⅡ评分、血清miRNA-126、sTREM-1以及后两项联合预测患者预后不良的AUC分别为0.69,0.629,0.625,0.775。敏感度分别为:83.3%,54.2%,79.2%,83.3%。特异度分别为:55%,70%,45%,65%。结论:1. miRNA-126、sTREM-1单独检测对于脓毒症的诊断价值不逊于PCT、C-反应蛋白,联合检测对于脓毒症的诊断价值更高。2.miRNA-126、sTREM-1单独检测对于脓毒症的预后评估价值不逊于APACHEⅡ评分,联合检测优于APACHEⅡ评分。

外泌体miRNA-126对缺血性脑卒中合并代谢相关脂肪性肝病患者的相关性研究

脑卒中(cerebral stroke)又称为“中风”、“脑血管意外”,是全球第二大死亡原因及第三大致残原因。根据临床表现和病因分为:缺血性卒中和出血性卒中,前者约占全球所有卒中的71%。代谢相关脂肪性肝病(metabolic related fatty liver disease, MAFLD)曾用名为非酒精性脂肪性肝病(NAFLD),已经取代病毒性肝炎,成为我国慢性肝病的第一大病因。MAFLD作为多系统代谢功能紊乱疾病,可通过代谢相关的多种机制增加2型糖尿病(T2DM)、缺血性脑卒中和心血管疾病的风险。近年来的研究以外泌体的物质构成、运输、细胞间通讯多个功能为出发点,为临床疾病诊断及预后、治疗靶点提供了新手段。外泌体天然存在于各类型体液中,也可被所有类型细胞分泌,目前对外泌体的探究趋势已经从集中于肿瘤源性转变至对自身免疫性疾病、代谢疾病和缺血性疾病等非肿瘤性疾病的研究。外泌体的高度特异性和敏感性,使其可以作为一种疾病早期非侵入性新型诊断指标,本文就外泌体miRNA-126与缺血性脑卒中合并MAFLD患者的相关性作一综述。

miRNA-126基因敲减小鼠肠系膜淋巴结T淋巴细胞比例的变化

目的:研究miRNA-126基因敲减小鼠肠系膜淋巴结T及B淋巴细胞数量的变化。方法:检测miRNA-126基因敲减(KD)小鼠肠系膜淋巴结的体积、重量和淋巴结细胞总数;HE染色检测小鼠肠系膜淋巴结的病理形态学变化;流式细胞术(FACS)检测淋巴结中T及B淋巴细胞数量的变化。结果:与野生型(WT)小鼠相比,miR-126KD小鼠肠系膜淋巴结体积、重量和淋巴结细胞总数均显著增加(P<0.05),且病理形态学发生异常;肠系膜淋巴结中B淋巴细胞比例和数量无变化(P>0.05),CD4+T细胞数量无变化,而CD4+T细胞百分数明显减少(P<0.05),CD8+T细胞百分数和绝对数量均显著增加(P<0.05)。结论:miRNA-126敲减后可显著影响肠系膜淋巴结中T淋巴细胞的数量,提示miRNA-126可能影响肠系膜淋巴结的免疫功能。

通脉养心丸对冠心病合并糖尿病PCI术后患者心肌核素显影SSS评分与血浆标志miRNA-126影响的研究

目的探究通脉养心丸对冠心病合并糖尿病经皮冠状动脉介入(PCI)术后患者心肌核素显影SSS评分与血浆标志miRNA-126的影响。方法随机挑选60例冠心病合并糖尿病PCI术后患者,随机分成对照组及试验组,每组各30例,试验组在规范化西药治疗的基础上给予通脉养心丸进行干预。治疗4周后,通过一般疗效性心绞痛疼指标观察、心肌核素显影对患者进行预后程度判断及血浆中分子标志物miR-126检测。结果临床试验后,试验组患者在心绞痛发作次数及持续时间评分方面显著性低于对照组;心肌核素显影SSS评分结果显示治疗后两组病变均有改善,但试验组效果更为明显;试验组血浆中miR-126表达显著性上调。结论相比常规西药,联合使用通脉养心丸对冠心病合并糖尿病PCI术后患者的治疗效果更为显著,且通脉养心丸中的有效成分可以显著减少微血管病变程度。

miRNA-126-3p与先天性心脏病肺动脉高压发病机制相关性的临床研究

目的探讨miRNA-126-3p与肺动脉高压(以下简称肺高压)发病机制的相关性。方法选取25例先天性心脏病患者,其中,肺高压患者11例,对照组14例,采用qRT-PCR法检测其肺组织miRNA-126-3p的表达,并采用starBase进行靶基因预测,并从mRNA水平和蛋白水平进行验证。结果肺高压患者与对照组在年龄、性别、生化指标检查等方面比较差异无统计学意义(P>0.05);肺高压患者miRNA-126-3p表达水平与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);生物信息学预测发现miRNA-126-3p的生物学功能主要与结合蛋白、信号转导、细胞分化、调控细胞形态、调控MAPK和胰岛素受体信号通路等有关,其靶基因主要有VEGFA、SPRED1、PIK3R2等;肺高压组的VEGFA表达在mRNA水平和蛋白水平与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);miRNA-126-3p与VEGFA呈现正相关(P<0.01)。结论 miRNA-126-3p可能通过调控VEGFA参与先天性心脏病相关性肺动脉高压发病。

针刺对脑缺血大鼠外周血miRNA-126和VEGF表达的干预作用

目的:以脑缺血再灌注损伤后外周血清中血管再生相关信号的表达为切入点,观察针刺百会、足三里穴对脑缺血再灌注损伤大鼠外周血miRNA-126和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:随机数字表法将SD大鼠分为假手术组、模型组、针刺组和药物组,各组大鼠根据再灌注后时间随机分为1天、3天、5天和7天4个时间点。以右侧大脑中动脉线栓法制备脑缺血再灌注损伤模型。TTC法验证模型成功与否。针刺组为造模成功后在规定时间内针刺百会和左足三里穴;药物组为造模成功后腹腔注射依达拉奉。腹主动脉采血后,实时荧光定量PCR法检测血清miRNA-126的表达;ELISA法检测血清VEGF的表达情况。结果:模型组miRNA-126和VEGF表达升高,3天时间点达高峰,高于同时间点的针刺组和药物组;除1天时间点外,针刺组miRNA-126和VEGF表达高于同时间点的药物组。结论:针刺大鼠百会、足三里穴可能通过下调miRNA-126及VEGF的表达干预脑缺血再灌注损伤后血管再生。

老年急性心肌梗死患者血清miRNA-34a和miRNA-126表达与心肌损伤和心功能的相关性

目的 探讨老年急性心肌梗死患者血清微小RNA(miRNA)-34a和miRNA-126表达与心肌损伤和心功能相关性。方法 选择老年急性心肌梗死患者63例作为研究对象;另选择同期老年健康体检者50例作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定miRNA-34a和miRNA-126表达;采用全自动生化分析仪测定心肌肌钙蛋白(cTn)I、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌酸激酶(CK)水平;采用彩色多普勒超声检测仪测定左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)和左心室射血分数(LVEF)。结果 急性心肌梗死组血清miRNA-34a和miRNA-126相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。急性心肌梗死组血清cTnI、CK-MB和CK水平显著高于对照组(P<0.05)。急性心肌梗死组LVEDD和LVESD显著高于对照组,而LVEF显著低于对照组(P<0.05)。经Pearson相关性分析,miRNA-34a及miRNA-126均与cTnI、CK-MB、CK、LVEDD和LVESD呈线性正相关,而与LVEF呈线性负相关(均P<0.05);经受试者工作特征(ROC)曲线分析,miRNA-34a对急性心肌梗死诊断灵敏度73.68%,特异度为64.00%;miRNA-126对急性心肌梗死诊断灵敏度72.09%,特异度为65.00%。结论 老年急性心肌梗死患者血清miRNA-34a和miRNA-126高表达,具有良好诊断效能,且与心肌损伤和心功能密切相关。

miRNA-126在支气管哮喘中的表达及临床意义

目的探讨检测miRNA-126基因在支气管哮喘患者及健康者外周血中的表达及在哮喘急性加重期的临床意义。方法哮喘急性加重期患者24例为哮喘组,健康志愿者24例为对照组。留取外周血标本,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测miRNA-126基因的表达,分析其表达差异情况以及与白细胞介素(IL)-6细胞炎症因子、嗜酸性细胞、IgE的关系,受试者工作特征曲线(ROC)特征评价miRNA-126基因对支气管哮喘诊断的预测价值。结果两组miRNA-126相对含量差异有统计学意义(Z=-2.444,P=0.015)。哮喘组IL-6、嗜酸性细胞、IgE比率显著高于对照组(P<0.01)。miR-126在支气管哮喘患者血浆中ROC曲线下面积(AUC)为0.294,诊断价值较低。结论 miRNA-126在哮喘急性加重期患者外周血中表达,呈下调状态,可能通过辅助T细胞(Th)2优势应答,使炎性细胞因子升高,有可能成为治疗哮喘的新靶点。

血浆miRNA-126表达与妊娠期高血压疾病的相关性分析

目的研究血浆miRNA-126表达与妊娠期高血压疾病的相关性。方法选取2015年2月～2018年2月四川省泸州市人民医院诊治的妊娠高血压疾病患者93例作为研究对象,并将其按照疾病进行分组。其中妊娠期高血压组30例,轻度子痫前期组29例,重度子痫前期组34例。另取同期体检的健康妊娠妇女20名作为对照组。分别采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测各组研究对象的血浆miRNA-126表达情况;同时比较各组收缩压、舒张压、24 h蛋白尿水平,并将其与miRNA-126表达进行相关性分析。结果与对照组比较,妊娠期高血压组血浆miRNA-126表达下调,而轻度子痫前期组血浆miRNA-126表达低于妊娠期高血压组,重度子痫前期组血浆miRNA-126表达低于轻度子痫前期组,差异均有统计学意义(P <0.05)。妊娠期高血压组收缩压、24 h蛋白尿水平均明显高于对照组;轻度子痫前期组收缩压、24 h蛋白尿水平高于妊娠期高血压组;重度子痫前期组收缩压、24 h蛋白尿水平高于轻度子痫前期组;对照组舒张压水平低于妊娠期高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组,差异均有统计学意义(P <0.05)。经Spearman相关性分析,妊娠期高血压疾病患者miRNA-126基因表达与其收缩压、舒张压、24 h蛋白尿水平均呈负相关(r=-0.583、-0.626、-0.611、均P <0.05)。结论妊娠期高血压疾病患者血浆miRNA-126表达明显下调,且随着病情的逐渐加重,血浆miRNA-126表达下调越明显。血浆miRNA-126表达下调可能在妊娠期高血压疾病的发生、发展过程中发挥着至关重要的作用。

循环miRNA-126在冠心病发生发展中的作用

冠心病（CHD）即多种高危因素诱导的冠状动脉发生粥样硬化性（AS）改变，继而引起冠脉血管管腔不同程度的狭窄甚至完全闭塞，造成心肌细胞缺血、缺氧或坏死而导致的心脏病。

miRNA-126对非小细胞肺癌细胞功能的影响及相关机制研究

目的观察miRNA-126对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡侵袭以及迁移能力的影响及相关机制。方法 2015年3-5月在辽宁省葫芦岛市中心医院实验室进行实验。将非小细胞肺癌A549细胞转染,建立稳定转染的miRNA-126组和空白对照组。采用RT-PCR检测miRNA-126基因的表达,MTT比色法检测细胞增殖能力,倒置显微镜观察细胞侵袭能力、细胞迁移能力,Western Blot检测表皮生长因了-受体(EGFR)、AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达。结果 miRNA-126转染组24 h、48 h、72 h时miRNA-126水平均高于空白对照组(t/P=15.112/0.000、8.714/0.012、7.537/0.013),而空白对照组各时间段miRNA-126的相对表达量比较差异无统计学意义(P> 0. 05);miRNA-126转染组72 h miRNA-126的相对表达量显著高于48 h和24 h(F/P=4.575/0.043)。miRNA-126转染组细胞24 h、48 h、72 h增殖率均低于空白对照组(t/P=6.280/0.000,6.804/0.000,6.401/0.000),凋亡率均高于空白对照组(t/P=19.726/0.000,22. 052/0. 000,5.170/0. 000);空白对照组各时间段的细胞增殖率和凋亡率差异无统计学意义(P> 0.05)。miRNA-126转染组72 h的细胞增殖率显著低于48 h和24 h (F/P=5.738/0.001),miRNA-126转染组72 h的细胞凋亡率显著高于48 h和24 h(F/P=2. 681/0. 045); miRNA-126转染组划痕宽度宽于空白对照组(t/P=8. 318/0.000),侵袭细胞数显著低于空白对照组(t/P=24. 394/0. 000)。miRNA-126转染组EGFR、AKT、mTOR蛋白表达量均低于空白对照组(t/P=4.093/0.000、6.325/0.000、3.061/0.000)。结论转染的miRNA-126通过调控EGFR、AKT、mTOR表达,抑制非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、侵袭以及迁移能力。

miRNA-126、miRNA-26a在食管癌中的表达及与患者临床特征的关系分析

目的检测miRNA-126、miRNA-26a在食管癌患者中的表达水平,并分析miRNA-126、miRNA-26a表达情况与食管癌临床特征的关系。方法收集113例食管癌手术切除患者的食管癌组织和癌旁组织,分析miRNA-126和miRNA-26a在食管癌组织和癌旁组织中的相对表达量及相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA-126、miRNA-26a的预测价值。结果食管癌组织中miRNA-126和miRNA-26a相对表达量均明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。ROC曲线分析结果显示,当约登指数最大时,对应的miRNA-126和miRNA-26a为0.92和2.03,可作为诊断食管癌的临界值。miRNA-126和miRNA-26a在食管癌组织中的表达水平呈正相关(r=0.757,P﹤0.01)。不同分化程度、TNM分期及淋巴结转移情况的食管癌患者中miRNA-126和miRNA-26a表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论 miRNA-126、miRNA-26a在食管癌患者中呈低表达,且与食管癌分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关,可反映病情严重程度和预后。

疏血通注射液对急性心肌梗死大鼠组织miRNA-126表达水平的影响

目的:观察急性心肌梗死后大鼠心肌组织mi RNA-126表达水平的变化趋势以及疏血通注射液对急性心肌梗死大鼠心肌组织mi RNA-126表达水平的影响。方法:选取SD大鼠80只,结扎大鼠冠状动脉前降支,建立心肌梗死模型,存活60只,随机分为疏血通组及模型组,另随机选取30只大鼠作为对照组。建模成功后,疏血通组给予疏血通注射液治疗,模型组及假手术组予以等量生理盐水,采用实时定量PCR检测术后不同时间大鼠心肌组织mi RNA-126的表达水平变化。结果:术后第7天和第14天,疏血通组及模型组大鼠心肌组织mi RNA-126表达水平较假手术组明显降低(P<0.05),但2组间比较差异无统计学意义。术后第14天,疏血通组心肌组织mi RNA-126表达水平较前明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:mi RNA-126在大鼠心肌梗死后7 d显著降低;随着时间的推移,mi RNA-126表达水平逐渐升高;疏血通能够上调mi RNA-126的表达水平。

miRNA-126下调细胞骨架调控蛋白Twinfilin-1对心肌细胞肥大的抑制效应

目的探讨miRNA-126下调细胞骨架调控蛋白Twinfilin-1(Twf1)对心肌细胞肥大的抑制效应。方法通过内皮素(ET)-1人工诱导原代培养新生大鼠健康心肌细胞形成心肌细胞肥大,以实时定量PCR检测miRNA-126和心肌细胞肥大标志性基因的表达量,利用化学修饰RNA模拟物转染法使miRNA-126过表达,利用重组腺病毒转染使Twf1过表达。以抗α-辅肌动蛋白(actinin)荧光染色法测量细胞表面积,以Western印迹法检测Twf1和心肌肌钙蛋白(cTn)I的蛋白表达量,荧光素活性检测实验判定miRNA-126与Twf1的3′端非编码区(UTR)嵌和。结果肥大心肌细胞的miRNA-126表达量显著低于健康心肌细胞(P<0.01)。miRNA-126干预后肥大心肌细胞表面积明显缩小(P<0.01)。miRNA-126模拟物转染组心肌细胞肥大标志性基因心房钠尿肽(ANP)、α-actinin、Myh6、Myh7相对表达量均显著低于空白心肌细胞组(P<0.01)。miRNA-126模拟物与Twf1的3′-UTR核心序列重组体共反应组的相对荧光表达显著低于内对照载体组(P<0.01)。miRNA-126组Twf1蛋白相对表达量显著低于空白心肌细胞组和错义miRNA(scr-miRNA)转染组(P均<0.01)。miRNA-126模拟物转染组心肌细胞磷酸化cTnI蛋白表达量显著低于空白心肌细胞组和scr-miRNA转染组(P均<0.01);各组间cTnI蛋白表达量的差异无显著性(P均>0.05)。结论miRNA-126具有心肌肥大抑制效应,调节方式为下调Twf1基因表达抑制cTnI的磷酸化。

miRNA-126调控自噬减轻高糖诱导血管内皮细胞损伤的作用机制

目的探讨miRNA-126对高糖诱导的内皮细胞自噬与凋亡的影响及分子机制。方法采用高糖(HG)诱导HUVECs模型,随机分为4组,即正常葡萄糖(5.5 mmo/L)对照组,HG模型组,miRNA-126-5p mimics组(转染miRNA-126-5p mmics组),miRNA-126-5p inhibitor组(转染miRNA-126 inhibitor组)。HG模型组即终浓度为33.3 mmol/L的葡萄糖诱导24 h,miRNA-126-5p mimics组是miRNA-126-5p mimics转染至HUVECs细胞,48 h后在培养基中加入33.3 mmol/L(终浓度)葡萄糖,培养24 h。miRNA-126-5p inhibitor组是miRNA-126-5p inhibitor转染至HUVECs细胞,48 h后在培养基中加入33.3 mmol/L(终浓度)的葡萄糖,培养24 h。再利用miRNA-126-5p mimics组模型,分别予自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyl adenine,3-MA)5 mmol/L、ERK通路抑制剂(U-0126)10 mmol/L干预24 h。RT-qPCR检测细胞中miRNA-126-5p的表达水平,CCK-8检测细胞活性,划痕实验检测细胞迁移能力,Westernblot检测细胞培养液中血管内皮生长因子(VEGF)和肝细胞生长因子(HGF),p-ERK、ERK蛋白,p-AKT、AKT蛋白,Bax、Bcl-2蛋白,cleaved-caspase-3蛋白,Beclin-1和Lc3蛋白含量。结果与正常组比较,HG模型细胞中miRNA-126水平,p-ERK/ERK蛋白水平低于正常对照组(P<0.05);与HG模型组相比较,miRNA-126-5p mimics组细胞中miRNA-126、p-ERK/ERK蛋白表达明显升高(P<0.01),细胞中Bax/Bcl-2蛋白,cleaved caspase-3蛋白表达下降(P<0.05),Beclin-1和Lc3蛋白的表达水平升高(P<0.01),细胞活性增强(P<0.01),细胞迁移率提高(P<0.01),VEGF水平升高(P<0.05);与miRNA-126-5p inhibitor组比较,miRNA-126-5p mimics组细胞中miRNA-126、pERK/ERK蛋白表达升高(P<0.01),细胞中Bax/Bcl-2蛋白,cleaved caspase-3蛋白表达下降(P<0.05),Beclin-1和Lc3蛋白表达水平升高(P<0.01),细胞活性增强(P<0.05),细胞迁移率提高(P<0.05),VEGF水平升高(P<0.01);在miRNA-126-5p mimics组中加入3-MA后凋亡蛋白表达明显下降(P<0.01),加入ERK抑制剂后,自噬蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论miRNA-126可通过激活ERK信号通路促进细胞的自噬并抑制细胞凋亡,减轻HG诱导的内皮细胞损伤。

miRNA-126基因敲减小鼠脾脏中免疫细胞的组成变化

目的:观察miRNA-126基因敲减(Knock down,KD)小鼠脾脏中免疫细胞组成比例变化并探讨其意义。方法:Realtime PCR探针法检测miR-126KD小鼠脾脏中miR-126表达水平,计算脾脏总细胞数;HE染色观察脾脏组织的病理学变化;流式细胞术(FACS)分别检测脾脏中DCs细胞、巨噬细胞、γδT细胞、NKT细胞,CD3^+T细胞和其亚群以及CD19^+B细胞的比例并计算细胞绝对数;免疫印迹法(Western blot,WB)检测脾脏组织中磷酸化NF-κB和磷酸化Akt的表达水平。结果:与野生型(WT)小鼠相比,miR-126KD脾组织中miR-126表达水平明显降低(P<0.05),细胞总数明显增加(P<0.05),且发生明显病理学改变;固有免疫细胞中NK细胞的比例和细胞绝对数显著增加(P<0.05),但巨噬细胞的比例显著降低(P<0.05);适应性免疫细胞中CD3^+T细胞和CD4^+T细胞的比例和绝对细胞数都显著增加(P<0.05),而CD19^+B细胞仅绝对数显著增加(P<0.05);最后miRNA-126KD小鼠脾脏组织的磷酸化NF-κB和磷酸化Akt水平明显增加(P<0.05)。结论:miRNA-126敲减小鼠脾脏中各免疫细胞亚群的组成发生明显改变,可能与NF-κB和Akt信号通路传递变化有关,为后续探讨miR-126在机体免疫应答中的作用提供了前期实验基础。

miRNA-126和K-Ras及MMP-7在胃癌中的表达及其相关性分析

目的通过检测miRNA-126和预测靶基因K-Ras及MMP-7在胃癌组织中的表达情况,探索miRNA-126在胃癌发生中的作用。为miRNA-126/K-Ras、MMP-7通路研究提供新的理论依据。方法收集2015年3月—2015年12月内蒙古医科大学附属医院收治并确诊的胃癌患者的癌组织和正常组织,共50例。利用免疫组化染色技术检测K-Ras及MMP-7在胃癌组织和正常组织中的表达水平;利用real-time PCR技术检测miRNA-126在胃癌组织和正常组织中的表达水平。结果K-Ras和MMP-7在胃癌组织中高表达;miRNA-126在胃癌组织中低表达;K-Ras和MMP-7在胃癌组织中的表达呈正相关,K-Ras及MMP-7分别表达阳性时,miRNA-126的表达量均偏低。结论K-Ras和MMP-7是胃癌的致癌因子,miRNA-126是胃癌的抑癌因子,K-Ras和MMP-7是miRNA-126的靶基因,且miRNA-126存在抑制K-Ras和MMP-7的作用,miRNA-126/K-Ras、MMP-7通路有望成为胃癌研究和治疗的新方向。

miRNA-126和miRNA-92a在冠心病患者血清中的表达水平及临床意义

目的:探究miRNA-126和miRNA-92a在冠心病(CHD)患者血清中表达水平及临床价值。方法:选择56例CHD患者和30例健康体检者为对象。测定两组血清脂代谢指标、细胞因子、miRNA-126和miRNA-92a含量,Gensini评分法评估两组冠脉病变程度。ROC分析血清miRNA-126和miRNA-92a在CHD诊断和冠脉中重度病变预测中的价值。结果:与对照组比,观察组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和miRNA-92a含量明显增加(均P<0.01),HDL-C、Krüppel样转录因子2(KLF2)、miRNA-126含量明显减少(均P<0.01)。血清miRNA-126含量与KLF2呈显著正相关,与VCAM-1、CXCL-12含量和Gensini评分呈显著负相关(均P<0.01);miRNA-92a含量与KLF2呈显著负相关(P<0.01),与VCAM-1含量和Gensini评分呈显著正相关(P<0.01)。ROC曲线分析显示,CHD诊断中血清miRNA-126和miRNA-92a的AUC为0.962和0.923,敏感度90.0%和85.7%,特异度82.1%和93.3%;冠脉中重度病变预测中血清miRNA-126和miRNA-92a的AUC分别为0.897和0.866,敏感度93.5%和80.0%,特异度84.0%和90.3%。结论:CHD患者血清中miRNA-126表达水平降低,miRNA-92a表达水平升高,且其表达水平变化与冠脉病变程度显著相关,可作为CHD诊断及病情进展状况预测的可靠指标。

颈动脉粥样硬化斑块性质与患者血清miRNA-126,miRNA-155水平的相关性研究

目的探讨血清miRNA-126,miRNA-155检测在评价颈动脉粥样硬化(carotid athero sclerosis,CAS)斑块性质中的临床应用价值。方法选择2015年5月~2017年5月在咸阳市中心医院和石泉县中医医院就诊的CAS患者75例作为研究对象,依据颈部增强CT检测结果分为易损斑块组(35例)和稳定斑块组(40例)。同时选取39例同期体检健康者作为对照组。采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测各组血清miRNA-126,miRNA-155表达水平。采用颈部增强CT检测各组颈动脉最大斑块厚度(MAPT)及内中膜厚度(IMT)。结果颈动脉MAPT及IMT在易损斑块组的检测结果为3.27±1.01mm,1.93±0.51mm;在稳定斑块组的检测结果为2.50±0.79mm,1.60±0.26mm。易损斑块组的颈动脉MAPT及IMT高于稳定斑块组,差异均有统计学意义(t=9.76,7.86,P<0.01)。血清miRNA-126和miRNA-155在易损斑块组中的表达量为0.22±0.06和0.87±0.18;在稳定斑块组的表达量为0.50±0.12和0.47±0.10;在对照组的表达量为0.90±0.19和0.19±0.05。稳定斑块组和易损斑块组血清miRNA-155表达水平显著高于对照组,而miRNA-126表达水平显著低于对照组,差异均有统计学意义(F=119.3,102.9,均P<0.01)。易损斑块组miRNA-155表达水平显著高于稳定斑块组,而miRNA-126表达水平显著低于稳定斑块组,差异均有统计学意义(F=119.3,102.9,P<0.01)。易损斑块组miRNA-126与miRNA-155表达水平呈负相关性(r=-0.912,P<0.01);在该组中miRNA-126表达水平与MAPT及IMT呈负相关(r=-0.913,-0.893,P<0.01),而miRNA-155表达水平与颈动脉两项指标则呈正相关(r=0.899,0.907,P<0.01)。结论血清miRNA-126,miRNA-155检测可应用于颈动脉粥样硬化斑块破裂的预测,并可能成为缺血性脑卒中事件发生的有效预警标志物。