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血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行根治性前列腺切除术老年前列腺癌患者预后的评估价值
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作者 符红霞 周治彦 +1 位作者 王声兴 韩一南 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第17期2113-2116,共4页
目的分析血清微小RNA(miRNA)-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行腹腔镜根治性前列腺切除术(LRP)的老年前列腺癌患者预后的评估价值。方法选取2014年1月至2018年9月该院收治的行LRP治疗的213例老年前列腺癌患者作为研究对象,根据5年随访... 目的分析血清微小RNA(miRNA)-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行腹腔镜根治性前列腺切除术(LRP)的老年前列腺癌患者预后的评估价值。方法选取2014年1月至2018年9月该院收治的行LRP治疗的213例老年前列腺癌患者作为研究对象,根据5年随访结局将患者分为预后优良组(87例)和预后不良组(126例)。收集患者术前临床基线资料及血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平。采用Logistic回归分析筛选影响患者预后的因素,并以独立危险因素构建预后预测模型,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析其预测价值。结果多因素Logistic回归分析结果显示,患者血清前列腺特异性抗原(PSA)水平、切缘阳性、血清miRNA-21-5p与miRNA-5189-5p表达水平均为行LRP的老年前列腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05),以独立危险因素构建联合预测模型,各因素单独预测行LRP的老年前列腺癌患者预后的曲线下面积均小于4项联合(P<0.05)。结论血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行LRP的老年前列腺癌患者预后的预测具有较高价值。 展开更多
关键词 mirna-21-5p mirna-5189-5p 前列腺癌 根治性前列腺切除术 预后 预测模型
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miRNA-432-5p在脂多糖诱导的肺泡上皮细胞损伤中的作用及可能机制研究
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作者 吴畏 杨飞云 +1 位作者 牛丽丹 石金河 《海南医学》 CAS 2024年第11期1521-1526,共6页
目的探讨miRNA-432-5p在脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞损伤中的作用及可能机制。方法人肺泡上皮细胞A549随机分为对照组、LPS组、miRNA-432-5p mimics组及miRNA-432-5p siRNA组。利用CCK-8实验检测细胞的活性;利用ELISA法检测细胞培养... 目的探讨miRNA-432-5p在脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞损伤中的作用及可能机制。方法人肺泡上皮细胞A549随机分为对照组、LPS组、miRNA-432-5p mimics组及miRNA-432-5p siRNA组。利用CCK-8实验检测细胞的活性;利用ELISA法检测细胞培养液中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)的含量;利用RT-qPCR检测细胞中miRNA-432-5p mRNA的表达;利用Hoechst染色检测细胞的凋亡情况;利用Western blot检测细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase1)、白细胞介素1β(IL-1β)蛋白的表达。结果LPS组细胞的活性OD值(6 h:0.809±0.09;12 h:0.601±0.09;24 h:0.485±0.43)明显低于对照组的1.000±0.00,差异均具有统计学意义(P<0.05);LPS组细胞中miRNA-432-5p mRNA表达水平为1.563±0.10,明显高于对照组的1.000±0.00,细胞凋亡率为(41.52±1.83)%,明显高于对照组的(0.000±0.00)%,差异均有统计学意义(P<0.05);LPS组培养液中的TNF-α、IL-6和IL-1β含量分别为(36.32±6.07)pg/mL、(45.08±3.75)pg/mL、(40.87±6.65)pg/mL,明显高于对照组的(5.27±0.84)pg/mL、(5.57±0.65)pg/mL、(3.26±0.85)pg/mL,差异均具有统计学意义(P<0.05),LPS组细胞中的NLRP3、Caspase1和IL-1β蛋白表达水平分别为0.734±0.08、0.305±0.06、0.430±0.05,明显高于对照组的0.163±0.03、0.025±0.01、0.032±0.01,差异均具有统计学意义(P<0.05)。miRNA-432-5p mimics组细胞凋亡率为(24.23±3.09)%,明显低于LPS组的(41.52±1.83)%,细胞活性为0.639±0.09,明显高于LPS组的0.468±0.07,差异均有统计学意义(P<0.05);miRNA-432-5p mimics组培养液中的TNF-α、IL-6和IL-1β含量分别为(22.85±4.01)pg/mL、(29.15±5.22)pg/mL、(20.63±3.89)pg/mL,明显低于LPS组的(36.32±6.07)pg/mL、(45.08±3.75)pg/mL、(40.87±6.65)pg/mL,差异均具有统计学意义(P<0.05);miRNA-432-5p mimics组细胞中的NLRP3、Caspase1和IL-1β蛋白表达水平分别为0.473±0.04、0.121±0.02、0.279±0.04,明显低于LPS组的0.734±0.08、0.305±0.06、0.430±0.05,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-432-5p siRNA组细胞凋亡率为(56.44±3.25)%,明显高于LPS组的(41.52±1.83)%,细胞活性为0.348±0.06,明显低于LPS组的0.468±0.07,差异均有统计学意义(P<0.05);miRNA-432-5p siRNA组培养液中的TNF-α、IL-6和IL-1β含量分别为(51.08±4.12)pg/mL、(53.61±4.83)pg/mL、(59.97±3.62)pg/mL,明显高于LPS组的(36.32±6.07)pg/mL、(45.08±3.75)pg/mL、(40.87±6.65)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);miRNA-432-5p siRNA组细胞中的NLRP3、Caspase1和IL-1β蛋白表达水平分别为0.969±0.12、0.430±0.09、0.575±0.07,明显高于LPS组的0.734±0.08、0.305±0.06、0.430±0.05,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论miRNA-432-5p可通过抑制NLRP3炎性小体通路的激活,对受损细胞发挥保护作用。 展开更多
关键词 mirna-432-5p NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 凋亡 细胞损伤
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肺部超声评分及血浆miRNA-21-5p对脓毒症患者肺损伤程度及预后预判价值
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作者 张红玉 唐永军 《新疆医学》 2024年第5期530-535,共6页
目的分析外周血miRNA-21-5p水平与肺部超声评分(LUS)对脓毒症患者并发急性肺损伤(ALI)的病情及预后的预测价值。方法选择我院就诊的90例ALI患者作为研究对象,根据ALI患者病情严重程度分为3组:低危组(38例,APACHEⅡ评分≤10分)、中危组(3... 目的分析外周血miRNA-21-5p水平与肺部超声评分(LUS)对脓毒症患者并发急性肺损伤(ALI)的病情及预后的预测价值。方法选择我院就诊的90例ALI患者作为研究对象,根据ALI患者病情严重程度分为3组:低危组(38例,APACHEⅡ评分≤10分)、中危组(32例,APACHEⅡ评分10-20分)及重危组(20例,APACHEⅡ评分≥20分)。检测比较3组血浆miRNA-21-5p、B型脑钠肽(BNP)、D二聚体(D-dimer)、氧合指数(OI)、血管外肺水指数(EVLWI)以及LUS评分。采用Pearson直线分析评估血浆miRNA-21-5p水平及LUS评分和APACHEⅡ评分相关程度。依据患者预后结局分为存活组(71例)和死亡组(19例),比较上述临床指标的差异。应用多元Logistic回归分析上述指标与患者预后结局的危险程度。应用受试者工作特征曲线(ROC)分析血浆miRNA-21-5p水平与LUS评分对ALI患者预后的诊断价值。结果中危组血浆miRNA-21-5p、BNP、EVLWI及LUS评分均低于重危组(P<0.05),但均高于轻危组(P<0.05);而中危组OI高于重危组(P<0.05),但低于轻危组(P<0.05)。三组D-dimer均无统计学差异(P>0.05)。血浆miRNA-21-5p水平及LUS评分和APACHEⅡ评分均呈正相关(r=0.857,P=0.026;r=0.795,P=0.036)。死亡组的血浆miRNA-21-5p、BNP、EVLWI及LUS评分显著高于存活组(P<0.05),但OI则显著低于存活组(P<0.05)。血浆miRNA-21-5p水平与LUS评分是ALI患者预后结局的危险因素(OR=3.656,P=0.013;OR=2.913,P=0.029)。血浆miRNA-21-5p切点3.25与LUS评分切点17.50对预测ALI患者短期预后的曲线下面积为0.856,灵敏度为84.2%和特异度为81.7%(P=0.018)。结论血浆miRNA-21-5p与LUS评分能有效评估ALI患者病情严重程度,对短期预后结局预测有较好价值。 展开更多
关键词 mirna-21-5p 肺部超声评分 急性肺损伤 预后
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长链非编码RNA NEAT1、miRNA-182-5p与2型糖尿病合并代谢性脂肪性肝病患者肝纤维化风险的相关性研究 被引量:1
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作者 贺佳 李永平 +3 位作者 魏枫 刘美岚 吴亚玲 韶龙格 《中国全科医学》 北大核心 2024年第3期300-307,共8页
背景随着慢性代谢性疾病的发病率逐年增加,已威胁全民健康,目前非编码RNA与内分泌代谢相关疾病的研究已成为国内外研究热点,其中长链非编码RNA核富集转录体(lncRNA NEAT1)及微小RNA(miRNA)-182-5p在2型糖尿病(T2DM)合并代谢相关脂肪性肝... 背景随着慢性代谢性疾病的发病率逐年增加,已威胁全民健康,目前非编码RNA与内分泌代谢相关疾病的研究已成为国内外研究热点,其中长链非编码RNA核富集转录体(lncRNA NEAT1)及微小RNA(miRNA)-182-5p在2型糖尿病(T2DM)合并代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)中的研究鲜有报道。目的探讨T2DM合并MAFLD患者lncRNA NEAT1、miRNA-182-5p在肝纤维化发生、发展中的机制及临床意义。方法纳入2021年10月—2022年6月在内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院内分泌科就诊的T2DM患者236例为研究对象,同时纳入49名健康志愿者为健康对照组。收集研究对象一般资料与实验室检测结果。测定内脏脂肪面积(VFA)、皮下脂肪面积(SFA)。采集外周血,测定lncRNA NEAT1、miRNA-182-5p。将T2DM患者其分为T2DM合并非MAFLD组(n=82)与T2DM合并MAFLD组(n=154)。进一步根据肝纤维化指数(FIB-4)将T2DM合并MAFLD组分为肝纤维化低危亚组(n=55)、肝纤维化中危亚组(n=69)、肝纤维化高危亚组(n=30)。采用Spearman秩相关分析探究肝纤维化高危亚组lncRNA NEAT1、miRNA-182-5p表达水平的相关性,采用多因素有序Logistic回归分析探究T2DM合并MAFLD患者肝纤维化风险的影响因素。结果健康对照组年龄、颈围(NC)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)低于T2DM合并MAFLD组、T2DM合并非MAFLD组,白蛋白(Alb)高于T2DM合并MAFLD组、T2DM合并非MAFLD组(P<0.05);T2DM合并MAFLD组BMI、腰围(WC)、VFA、SFA、稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、三酰甘油(TG)、血尿酸(SUA)、lncRNA NEAT1高于健康对照组、T2DM合并非MAFLD组,血小板计数(PLT)低于健康对照组、T2DM合并非MAFLD组,总胆固醇(TC)低于健康对照组(P<0.05);T2DM合并非MAFLD组HOMA-IR、lncRNA NEAT1高于健康对照组,miRNA-182-5p高于健康对照组、T2DM合并MAFLD组,丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)低于健康对照组、T2DM合并MAFLD组(P<0.05)。肝纤维化低危亚组VFA、SFA、AST、lncRNA NEAT1低于肝纤维化中危亚组、肝纤维化高危亚组,PLT、miRNA-182-5p高于肝纤维化中危亚组、肝纤维化高危亚组,BMI、WC、NC低于肝纤维化高危亚组,TC高于肝纤维化高危亚组(P<0.05);肝纤维化中危亚组PLT、miRNA-182-5p高于肝纤维化高危亚组,AST、lncRNA NEAT1低于肝纤维化高危亚组(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,肝纤维化高危亚组患者lncRNA NEAT1与miRNA-182-5p呈负相关(r_(s)=-0.438,P<0.05)。多因素有序Logistic回归分析结果显示,lncRNA NEAT1(OR=1.326,95%CI=1.087~1.616)、VFA(OR=1.019,95%CI=1.006~1.033)、miRNA-182-5p(OR=0.083,95%CI=0.027~0.257)、PLT(OR=0.956,95%CI=0.942~0.970)、AST(OR=1.048,95%CI=1.022~1.075)是T2DM合并MAFLD患者肝纤维化风险的影响因素。结论外周血lncRNA NEAT1、miRNA-182-5p与T2DM合并MAFLD患者并发肝纤维化密切相关,为该病的早期预测及诊治提供依据。 展开更多
关键词 2型糖尿病 代谢相关脂肪性肝病 核富集转录体1 微小RNA-182-5p 肝纤维化 影响因素分析
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miRNA-424-5p靶向VEGFA对胎衣不下奶牛胎盘胶原蛋白降解的影响
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作者 刘炳琦 罗春海 +4 位作者 姚伟佳 王薇 刘佳金 李丹阳 付世新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期3083-3092,共10页
【目的】通过探究miRNA-424-5p对奶牛母体胎盘组织胶原蛋白降解的影响,进而明确miRNA-424-5p对奶牛胎衣不下(retained fetal membranes,RFM)发生的调控作用及机制。【方法】检测胎衣正常排出与胎衣不下奶牛母体胎盘组织miRNA-424-5p表... 【目的】通过探究miRNA-424-5p对奶牛母体胎盘组织胶原蛋白降解的影响,进而明确miRNA-424-5p对奶牛胎衣不下(retained fetal membranes,RFM)发生的调控作用及机制。【方法】检测胎衣正常排出与胎衣不下奶牛母体胎盘组织miRNA-424-5p表达水平,采用qRT-PCR和Western blot方法进行胎衣正常排出与胎衣不下奶牛的母体胎盘组织VEGFA、MMP-2、MMP-9、COL-IV的表达水平检测。应用生物信息学分析对miRNA-424-5p进行靶基因预测,并通过双荧光素酶试验验证miRNA-424-5p与VEGFA的靶向关系。在奶牛子宫内膜上皮细胞中转染miRNA-424-5p mimics和miRNA-424-5p inhibitor进行过表达和沉默miRNA-424-5p。采用免疫荧光技术观察VEGFA在奶牛子宫内膜上皮细胞的表达变化,qRT-PCR和Western blot检测VEGFA、MMP-2、MMP-9、COL-IV的mRNA与蛋白表达水平的变化。【结果】与健康组相比,RFM组母体胎盘组织中的miRNA-424-5p mRNA表达水平显著升高(P<0.01),VEGFA、MMP-2、MMP-9 mRNA与蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),COL-IV mRNA与蛋白表达水平极显著升高(P<0.01)。miRNA-424-5p的潜在靶基因共有152个,并经双荧光素酶试验结果证实VEGFA是miRNA-424-5p的靶基因。过表达和沉默miRNA-424-5p后,免疫荧光结果显示,与对照组相比miRNA-424-5p mimics组VEGFA的表达较低,而miRNA-424-5p inhibitor组VEGFA表达较高;qRT-PCR和Western blot结果显示,过表达miRNA-424-5p,靶基因VEGFA mRNA与蛋白表达水平极显著降低,基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9 mRNA与蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),胶原蛋白COL-IV mRNA与蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),而沉默miRNA-424-5p时VEGFA、MMP-2、MMP-9 mRNA与蛋白表达显著升高(P<0.01),COL-IV mRNA与蛋白表达水平极显著降低。【结论】miRNA-424-5p可靶向VEGFA调控MMPs表达、胶原蛋白的分解从而引起细胞外胶原降解障碍,是引起胎衣不下发生的重要因素。 展开更多
关键词 奶牛 胎衣不下 mirna-424-5p 血管内皮生长因子A 胶原蛋白降解
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过表达miRNA-424-5p靶向AKT3对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡的影响
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作者 姚伟佳 罗春海 +4 位作者 刘佳金 王薇 李丹阳 刘炳琦 付世新 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3635-3642,共8页
[目的]本试验通过过表达miRNA-424-5p,明确miRNA-424-5p与其靶基因丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT serine/threonine kinase 3,AKT3)对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡影响的机制,为阐明miRNA-424-5p在奶牛胎盘分离过程中的作用机制提供试验基础和理... [目的]本试验通过过表达miRNA-424-5p,明确miRNA-424-5p与其靶基因丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT serine/threonine kinase 3,AKT3)对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡影响的机制,为阐明miRNA-424-5p在奶牛胎盘分离过程中的作用机制提供试验基础和理论依据。[方法]试验分为3组:空白对照组(Control)、阴性对照组(miRNA-424-5p mimics NC)和过表达组(miRNA-424-5p mimics)。采用茎环法实时荧光定量PCR检测转染miRNA-424-5p mimics后奶牛子宫内膜上皮细胞miRNA-424-5p的表达变化;采用Western blotting及实时荧光定量PCR检测过表达后AKT3和凋亡相关因子的表达变化,采用Annexin V-FITC/PI法检测奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡情况。[结果]与空白对照及阴性对照组相比,转染miRNA-424-5p mimics后子宫内膜上皮细胞miRNA-424-5p mRNA的表达量极显著升高(P<0.01),B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase3)和Caspase9的mRNA表达量极显著升高(P<0.01),AKT3和Bcl-2的mRNA表达量极显著降低(P<0.01);Bax和Caspase3蛋白表达量极显著升高(P<0.01),Caspase9蛋白表达量显著升高(P<0.05),AKT3和Bcl-2蛋白表达量极显著降低(P<0.01);细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。[结论]过表达miRNA-424-5p可通过靶向调控AKT3使奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡因子Bax、Caspase3和Caspase9的表达量增加,使Bcl-2的表达量降低,进而促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 奶牛 mirna-424-5p AKT3 子宫内膜上皮细胞 凋亡
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血清miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3水平对早期肝细胞癌的诊断价值
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作者 李睿尧 李丹 +2 位作者 李膺函 吴雪峰 于秀艳 《中国肝脏病杂志(电子版)》 CAS 2024年第1期7-12,共6页
目的探讨微小RNA(micro RNA,miRNA)-574-5p、miRNA-106b、高敏甲胎蛋白异质体(highly sensutive-alpha fetoprotein heterogeneity L3,hs-AFP-L3)水平检测对早期肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的诊断价值。方法选择吉林省肿瘤... 目的探讨微小RNA(micro RNA,miRNA)-574-5p、miRNA-106b、高敏甲胎蛋白异质体(highly sensutive-alpha fetoprotein heterogeneity L3,hs-AFP-L3)水平检测对早期肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的诊断价值。方法选择吉林省肿瘤医院2020年3月至2022年3月收治的HCC患者186例(HCC组)、肝硬化患者120例(肝硬化组)、接受体检的健康人员120例(对照组)为研究对象。比较各组血清miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3水平,并比较HCC组不同病理特征患者血清miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3水平,绘制受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线分析miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3对早期HCC的诊断价值。结果HCC组、肝硬化组和对照组患者血清miRNA-574-5p(1.09±0.33比0.84±0.27比0.61±0.18)、miRNA-106b(1.22±0.39比0.71±0.22比0.56±0.19)、hs-AFP-L3[(23.08±4.36)μg/L比(2.61±0.79)μg/L比(0.47±0.14)μg/L]水平差异有统计学意义,HCC组患者各项指标均显著高于肝硬化组和对照组,肝硬化组患者各项指标均显著高于对照组(P均<0.05)。HCC肿瘤个数为多发、肿瘤最大径≥5 cm、中晚期、有远处转移、有静脉瘤栓患者血清miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3水平分别高于单发[miRNA-574-5p:1.24±0.43比0.83±0.27;miRNA-106b:1.46±0.45比0.97±0.31;hs-AFP-L3:(25.73±5.21)μg/L比(19.15±4.25)μg/L]、肿瘤最大径<5 cm[miRNA-574-5p:1.29±0.46比0.82±0.24;miRNA-106b:1.51±0.44比0.95±0.29;hs-AFP-L3:(26.82±5.03)μg/L比(19.12±3.99)μg/L]、早期[miRNA-574-5p:1.31±0.44比0.90±0.28;miRNA-106b:1.49±0.51比0.99±0.32;(26.60±4.98)μg/L比(18.94±4.02)μg/L]、无远处转移[miRNA-574-5p:1.36±0.46比0.88±0.25;1.45±0.41比0.96±0.32;hs-AFP-L3:(26.79±5.44)μg/L比(19.04±3.83)μg/L]、无静脉瘤栓患者[miRNA-574-5p:1.39±0.43比0.92±0.31;miRNA-106b:1.43±0.39比1.0±0.34;hs-AFP-L3:(26.41±4.54)μg/L比(20.11±4.01)μg/L](P<0.05);肝功能Child-Pugh分级A级、B级、C级患者血清miRNA-574-5p(0.85±0.26比1.08±0.37比1.27±0.40)、miRNA-106b(0.92±0.29比1.15±0.35比1.41±0.38)、hs-AFP-L3[(18.69±3.72)μg/L比(23.17±4.88)μg/L比(26.45±5.32)μg/L]含量逐渐增加(P均<0.05)。miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3联合检测诊断早期HCC的曲线下面积为0.919(95%CI为0.873~0.980),敏感度和特异度分别为0.882、0.901。结论miRNA-574-5p、miRNA-106b、hs-AFP-L3联合检测对早期HCC的诊断具有较高的临床价值。 展开更多
关键词 肝细胞癌 mirna-574-5p mirna-106b 高敏甲胎蛋白异质体
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miRNA-140-5P在甲状腺癌细胞TPC-1中的表达及对其增殖迁移侵袭能力的影响
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作者 罗义 李阳敏 +3 位作者 鲜童丞 杨闵叶 王杰 苏强 《西部医学》 2024年第9期1277-1281,共5页
目的探讨miR-140-5p在甲状腺癌发展中的作用及其分子生物调节机制,miRNA-140-5P对甲状腺癌细胞TPC-1侵袭、迁移的调控作用机制。方法收集2021年1月—2022年1月南充市中心医院手术切除的甲状腺恶性肿瘤36例和良性肿瘤32例的肿瘤标本。qt-... 目的探讨miR-140-5p在甲状腺癌发展中的作用及其分子生物调节机制,miRNA-140-5P对甲状腺癌细胞TPC-1侵袭、迁移的调控作用机制。方法收集2021年1月—2022年1月南充市中心医院手术切除的甲状腺恶性肿瘤36例和良性肿瘤32例的肿瘤标本。qt-PCR检测miRNA-140-5P在甲状腺恶性肿瘤和良性肿瘤组织中mRNA的表达水平,外购甲状腺癌细胞TPC-1,WB实验检测miRNA-140-5P在甲状腺恶性肿瘤和良性肿瘤细胞中的蛋白表达水平,评估miRNA-140-5P在两种组织中的表达差异;实验引入miRNA-140-5Pmimics转染细胞,Transwell小室实验、CCK-8对甲状腺肿瘤细胞迁移、侵袭、增殖能力进行检测;实验对甲状腺癌细胞TPC-1中NLRP3炎性小体进行检测,并对NLRP3表达进行干预,评估甲状腺肿瘤细胞中miR-140-5P与NLRP3的调控关系。结果miRNA-140-5P在甲状腺恶性肿瘤组织和细胞中呈低表达(P<0.05)。而miRNA-140-5P mimics可增强甲状腺癌细胞TPC-1的增殖、迁移和侵袭能力,miRNA-140-5P可减弱甲状腺癌细胞中炎性介质NLRP3的表达。结论miRNA-140-5P可降低甲状腺癌细胞TPC-1的增殖、迁移和侵袭能力;并在甲状腺恶性肿瘤细胞中与NLRP3炎性小体存在交互调控,其可能降低了对NLRP3的抑制作用,从而激发了NLRP3参与的活化调控而诱发了甲状腺癌的发生发展。 展开更多
关键词 mirna-140-5p 甲状腺癌 增殖 迁移 侵袭
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高表达miRNA-9-5p的骨髓间充质干细胞对呼吸机引起的肺损伤大鼠的影响及机制研究
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作者 林新 余天兴 +3 位作者 许俊平 陈丽芳 谢万 包宇旺 《基层医学论坛》 2024年第16期1-5,共5页
目的研究具有高表达miRNA-9-5p的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)对呼吸机引起的肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)大鼠的影响以及机制。方法建立机械通气的肺损伤模型,通过慢病毒转染构建高miRNA-9-5... 目的研究具有高表达miRNA-9-5p的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)对呼吸机引起的肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)大鼠的影响以及机制。方法建立机械通气的肺损伤模型,通过慢病毒转染构建高miRNA-9-5p表达的BMSCs,评估BMSCs和高miRNA-9-5p表达的BMSCs对VILI大鼠的影响。通过蛋白质印迹和qRT-PCR方法检测BMSCs和高表达miRNA-9-5p的BMSCs对VILI大鼠肺部的LC3、Atg5和Atg7表达的影响。结果移植BMSCs可显著降低VILI大鼠肺部损伤的严重程度以及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage,BAL)中的IL-1β和IL-2水平。移植高表达miRNA-9-5p的BMSCs能显著降低VILI大鼠的肺部损伤严重程度和BAL液中的IL-1β和IL-2水平。与VILI大鼠相比,移植的BMSCs明显增加了自噬相关蛋白的表达,包括Atg5和Atg7。与对照组相比,移植高表达miRNA-9-5p的BMSCs可显著提高VILI大鼠的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比例以及Atg5和Atg7水平。结论BMSCs可能通过上调miRNA-9-5p表达提高LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比例、Atg5和Atg7介导的自噬水平,进而缓解VILI。 展开更多
关键词 BMSCS VILI mirna-9-5p 自噬
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Gga-miRNA-181-5p family facilitates chicken myogenesis via targeting TGFBR1 to block TGF-βsignaling
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作者 Xiaoxu Shen Yongtong Tian +10 位作者 Wentao He Can He Shunshun Han Yao Han Lu Xia Bo Tan Menggen Ma Houyang Kang Jie Yu Qing Zhu Huadong Yin 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2024年第8期2764-2777,共14页
MicroRNAs(miRNAs)have been demonstrated to control chicken skeletal muscle growth,however,the potential function of the miR-181-5p family in chicken myogenesis remains largely unknown.Here,our study identified the two... MicroRNAs(miRNAs)have been demonstrated to control chicken skeletal muscle growth,however,the potential function of the miR-181-5p family in chicken myogenesis remains largely unknown.Here,our study identified the two chicken(Gallus gallus;Gga)miR-181-5p family members widely expressed in various tissues,specifically miR-181a-5p and miR-181b-5p.Besides,the breast muscles of fast-growing broilers expressed higher levels of miR-181a-5p and miR-181b-5p than those of slow-growing layers.Functionally,miR-181a-5p and miR-181b-5p both promote the expression level of myogenic factors including myogenin(MyoG),myogenic differentiation 1(MyoD1),and myosin heavy chain(MyHC),meanwhile accelerating the myotube formation of skeletal muscle satellite cells(SMSCs).Mechanistically,miR-181a-5p and miR-181b-5p directly bind to the 3′untranslated region(UTR)of the transforming growth factor beta receptor 1(TGFBR1)mRNA,further reducing the expression of TGFBR1.TGFBR1 is a key Transforming growth factor beta(TGF-β)signaling transduction receptor and had a negative function in muscle cell differentiation.Furthermore,knockdown of TGFBR1 facilitated the expression of chicken myogenic factors,boosted myotube formation,and decreased the SMAD family member 2/3(SMAD2/3)phosphorylation in chicken SMSCs.SMAD2/3 are downstream of TGF-βsignaling,and miR-181a-5p and miR-181b-5p could reduce the expression of TGFBR1 to further diminish the SMAD2/3 phosphorylation.Our findings revealed that the miR-181-5p family targets TGFBR1 to break the TGF-βsignaling transduction,which resulted in promoting chicken skeletal muscle development. 展开更多
关键词 mirna-181-5p family SMSCs differentiation TGFBR1 TGF-βsignaling
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miRNA-93-5p通过调控FBXW7基因参与宫颈癌进展
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作者 王江 《河北医学》 2024年第1期35-40,共6页
目的:探究miRNA-93-5p是否可通过调控FBXW7基因影响宫颈癌进展。方法:收集20例临床宫颈癌患者组织,分组为癌旁组织、宫颈癌组织,RT-qPCR检测宫颈组织中miRNA-93-5p、FBXW7 mRNA水平,并检测人正常宫颈上皮细胞H8、宫颈癌细胞Caski、HeLa... 目的:探究miRNA-93-5p是否可通过调控FBXW7基因影响宫颈癌进展。方法:收集20例临床宫颈癌患者组织,分组为癌旁组织、宫颈癌组织,RT-qPCR检测宫颈组织中miRNA-93-5p、FBXW7 mRNA水平,并检测人正常宫颈上皮细胞H8、宫颈癌细胞Caski、HeLa、C33A细胞miRNA-93-5p、FBXW7 mRNA水平。选择宫颈癌细胞C33A,分为对照组(正常培养)、miRNA-93-5p抑制组(转染低表达miRNA-93-5p),FBXW7激活组(转染高表达FBXW7),转染48h后收集细胞,RT-qPCR检测各组细胞中miRNA-93-5p、FBXW7 mRNA水平,Western blotting检侧C33A细胞中FBXW7蛋白水平,流式细胞术检测C33A细胞凋亡率,平板克隆检测C33A细胞克隆能力,划痕实验检测C33A细胞迁移能力,Transwell实验检测C33A细胞侵袭能力。结果:与癌旁组织相比,宫颈癌组织中miRNA-93-5p mRNA水平增加、FBXW7 mRNA水平减少(P<0.001)。与H8细胞相比,Caski、HeLa、C33A细胞中miRNA-93-5p mRNA水平增加、FBXW7 mRNA水平减少(P<0.05),后续实验中选择C33A宫颈癌细胞株进行研究。与对照组相比,miRNA-93-5p抑制组C33A细胞中miRNA-93-5p mRNA水平显著降低(P<0.001),细胞凋亡率增加(P<0.001),克隆能力下降(P<0.01),细胞迁移距离减少(P<0.01),侵袭能力下降(P<0.01),FBXW7蛋白及mRNA水平显著增加(P<0.01)。与对照组相比,FBXW7激活组C33A细胞中FBXW7 mRNA水平显著增加(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.001),克隆能力下降(P<0.001),迁移距离减少(P<0.01),侵袭能力下降(P<0.01)。结论:miRNA-93-5p可通过调控FBXW7基因影响宫颈癌细胞的凋亡、增殖、迁移、侵袭水平。 展开更多
关键词 宫颈癌 mirna-93-5p FBXW7 细胞凋亡 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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恒温扩增检测miRNA-21-5p系统的构建和初步评价
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作者 曾元清 邓宁波 《中国当代医药》 CAS 2024年第13期4-9,共6页
目的建立一种基于滚环扩增和CRISPR-Cas9系统的荧光检测miRNA-21-5p方法,并对检测性能进行初步评价。方法设计一种特异性的锁式探针识别靶标miRNA-21-5p,在大肠杆菌DNA连接酶和Phi29 DNA聚合酶的作用下,进行滚环扩增,扩增形成一条长重... 目的建立一种基于滚环扩增和CRISPR-Cas9系统的荧光检测miRNA-21-5p方法,并对检测性能进行初步评价。方法设计一种特异性的锁式探针识别靶标miRNA-21-5p,在大肠杆菌DNA连接酶和Phi29 DNA聚合酶的作用下,进行滚环扩增,扩增形成一条长重复单链。在Cas9酶的辅助下进行特异性识别,并形成双链DNA,然后通过加SYBR GreenⅠ荧光染料与形成双链DNA产物结合,产生荧光信号的荧光强度与双链DNA产物浓度成正比,并对该系统进行特异性和灵敏度进行分析。用构建的方法对胃癌患者血清和健康人血清进行miRNA检测,是否成功检测miRNA,同时检测两组血清中胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅠ/Ⅱ)水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,根据曲线下面积(AUC)分析miRNA-21-5p、胃蛋白酶原对胃癌的诊断价值。结果构建的扩增系统能检测到血清中miRNA,胃癌血清中miRNA-21-5p荧光强度高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线结果显示,miRNA-21-5p、PGⅠ/Ⅱ单独诊断胃癌的AUC分别为0.72、0.80,两者联合检测诊断的AUC为0.85,高于任意单个指标诊断。结论用该方法直接检测miR-21-5p操作方便快捷,不需要复杂热循环仪器,适用范围广。 展开更多
关键词 RCA扩增 mirna-21-5p Cas9酶 胃癌 胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ
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miRNA-28-5p对胆管细胞癌患者预后的预测作用及对肿瘤增殖和侵袭的作用
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作者 程立超 于国秀 李洁旭 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2024年第4期521-525,共5页
目的:探讨miR-28-5p表达与胆管细胞癌患者预后的关系及其对肿瘤增殖和侵袭的作用。方法:纳入2017年10月—2020年12月在我院接受根治性切除的胆管细胞癌患者112例。选取其胆管细胞癌组织和相邻癌旁组织,在胆管癌细胞系TFK-1、RBE、HuH28... 目的:探讨miR-28-5p表达与胆管细胞癌患者预后的关系及其对肿瘤增殖和侵袭的作用。方法:纳入2017年10月—2020年12月在我院接受根治性切除的胆管细胞癌患者112例。选取其胆管细胞癌组织和相邻癌旁组织,在胆管癌细胞系TFK-1、RBE、HuH28、HuCCT-1、QBC939及正常胆管上皮细胞HIBEpic中检测miR-28-5p的表达水平。采用Kaplan-Meier曲线和Cox回归分析miR-28-5p与患者预后的关系。采用CCK-8和Transwell实验分析miR-28-5p对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果:胆管细胞癌组织和细胞系中miR-28-5p表达水平均显著高于癌旁组织和正常上皮细胞。miR-28-5p低表达与患者的不良预后显著相关。下调miR-28-5p可促进胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭,而过表达miR-28-5p则可抑制细胞的增殖、迁移和侵袭。结论:miR-28-5p有作为胆管细胞癌患者的预后标志物和潜在治疗靶点的前景。 展开更多
关键词 胆管细胞癌 mirna-28-5p 预后 增殖 侵袭
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血清miRNA-199a-5p、α-1-B-糖蛋白反义RNA1水平与脑胶质瘤患者术后复发的关系
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作者 单永双 万学锋 王晓英 《癌症进展》 2024年第4期457-460,464,共5页
目的检测脑胶质瘤患者的血清微小RNA(miRNA)-199a-5p、α-1-B-糖蛋白反义RNA1(A1BG-AS1)水平,并分析其与患者术后复发的关系。方法选取94例接受手术治疗的脑胶质瘤患者和84例健康体检者,分别作为研究组和对照组。术后所有脑胶质瘤患者... 目的检测脑胶质瘤患者的血清微小RNA(miRNA)-199a-5p、α-1-B-糖蛋白反义RNA1(A1BG-AS1)水平,并分析其与患者术后复发的关系。方法选取94例接受手术治疗的脑胶质瘤患者和84例健康体检者,分别作为研究组和对照组。术后所有脑胶质瘤患者均随访2年,依据是否复发分为复发组(n=71)和非复发组(n=23)。采用聚合酶链反应(PCR)检测血清miRNA-199a-5p、A1BG-AS1水平,比较研究组和对照组、复发组和非复发组的血清miRNA-199a-5p、A1BG-AS1水平。采用Spearman相关分析法分析血清miRNA-199a-5p、A1BG-AS1水平与脑胶质瘤患者术后复发的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),分析血清miRNA-199a-5p、A1BG-AS1单独及联合检测对脑胶质瘤患者术后复发的评估价值。结果研究组患者血清miRNA-199a-5p水平明显低于对照组,血清A1BG-AS1水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。复发组患者血清miRNA-199a-5p水平低于非复发组,血清A1BG-AS1水平高于非复发组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。血清miRNA-199a-5p水平与脑胶质瘤患者术后复发呈负相关(r=-0.382,P﹤0.05),血清A1BG-AS1水平与脑胶质瘤患者术后复发呈正相关(r=0.423,P﹤0.05)。ROC曲线显示,血清miRNA-199a-5p、A1BG-AS1联合检测评估脑胶质瘤患者术后复发的AUC和灵敏度均高于二者单独检测。结论脑胶质瘤患者血清miRNA-199a-5p水平降低,血清A1BG-AS1水平升高,且其表达水平与脑胶质瘤患者术后复发有关,联合检测对术后复发具有较好的评估价值。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 mirna-199a-5p α-1-B-糖蛋白反义RNA1 复发
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MiRNA-3p/5p在肿瘤中的研究进展 被引量:3
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作者 张凌宇 陈昌杰 杨清玲 《分子诊断与治疗杂志》 2017年第4期284-288,共5页
Pre-miRNA经Dicer酶剪切产生2个产物,分别是miRNA-3p和miRNA-5p,以往的研究多数都是以单一的miRNA-3p或者miRNA-5p为主,而miRNA-3p/5p成对调控肿瘤的发生发展却少有报道。本文就近年来miRNA-3p/5p与肿瘤的研究进展做一综述。
关键词 mirna-3p mirna-5p 肿瘤 作用机制
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血清miRNA-107、miR-18a-5p对胃癌和癌前病变的鉴别诊断价值
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作者 王丽 田密昌 《四川生理科学杂志》 2024年第8期1840-1844,共5页
目的:探究在胃癌和癌前病变中血清miRNA-107、miR-18a-5p的鉴别诊断价值。方法:选取2020年6月至2023年6月我院收治的60例胃癌患者作为胃癌组,50例癌前病变患者作为癌前病变组,另选取在我院进行体检的健康人群30例作为健康对照组。比较... 目的:探究在胃癌和癌前病变中血清miRNA-107、miR-18a-5p的鉴别诊断价值。方法:选取2020年6月至2023年6月我院收治的60例胃癌患者作为胃癌组,50例癌前病变患者作为癌前病变组,另选取在我院进行体检的健康人群30例作为健康对照组。比较三组受检者血清miRNA-107、miR-18a-5p水平,探讨其表达水平在临床诊断价值。结果:三组受检者性别、年龄无统计学差异(P>0.05);与健康对照组相比,胃癌组与癌前病变组血清miRNA-107、miR-18a-5p指标较高(P<0.05);与癌前病变组相比,胃癌组血清miRNA-107、miR-18a-5p指标较高(P<0.05)。本次研究中以病理结果为“金标准”发现,本次研究中联合miRNA-107与miR-18a-5p阳性例数高于单独血清检测阳性例数,统计学有差异性(P<0.05)。与血清miRNA-107、miR-18a-5p相比,二项联合灵敏度、特异度和准确度均较高,统计学有差异性(P<0.05)。结论:血清miRNA-107、miR-18a-5p在胃癌和癌前病变患者均存在高表达,说明其在胃癌和癌前病变中具有较高的鉴别诊断价值。 展开更多
关键词 mirna-107 mirna-18a-5p 胃癌 癌前病变
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血清miRNA-155-5p和miRNA-133a-3p表达对脓毒症心肌损伤的诊断价值 被引量:14
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作者 蔡华忠 秦晓梦 +4 位作者 周峰 苗振军 王艳 贾珏 任国庆 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期736-738,共3页
目的利用受试者工作特征曲线(ROC)评价血清miRNA-155-5p及miRNA-133a-3p表达对脓毒症心肌损伤的诊断价值.方法前瞻性收集江苏大学附属医院收治的脓毒症患者,根据心脏超声分为对照组(n=48例)和心肌损伤组(n=40例).检测88例脓毒症患者血清... 目的利用受试者工作特征曲线(ROC)评价血清miRNA-155-5p及miRNA-133a-3p表达对脓毒症心肌损伤的诊断价值.方法前瞻性收集江苏大学附属医院收治的脓毒症患者,根据心脏超声分为对照组(n=48例)和心肌损伤组(n=40例).检测88例脓毒症患者血清miRNA-155-5p及miRNA-133a-3p的表达量,采用ROC曲线评价血清miRNA-155-5p及miRNA-133a-3p对脓毒症心肌损伤的诊断价值.结果与对照组比较,脓毒症心肌损伤组患者的miRNA-155-5p[(2.02-±0.45)vs.(2.89-±0.37)]和miRNA-133a-3p[(1.93±0.37)vs.(2.42±0.22)]表达量均明显增高(P<0.05).ROC曲线分析提示,miRNA-155-5p(AUC=0.92,95%CI 0.86~0.97,P=0.028,敏感度97.50%,特异度72.92%)和miRNA-133a-3p(AUC=0.87,95%CI0.80~0.95,P=0.040,敏感度95.00%,特异度70.00%)对脓毒症患者心肌损伤有较高的诊断价值.结论血清miRNA-155-5p及miRNA-133a-3p的表达有助于诊断脓毒症心肌损伤. 展开更多
关键词 mirna-155-5p mirna-133a-3p 心肌损伤 脓毒症 受试者工作特征曲线(ROC)
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半夏白术天麻汤对癫痫大鼠海马miRNA-146a-5p表达的影响及生物信息学分析 被引量:8
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作者 田茸 舍雅莉 +4 位作者 董晓丽 史正刚 陈丽 程小丽 王宇 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2018年第7期34-40,共7页
目的通过对癫痫大鼠海马miRNA-146a-5p进行靶基因预测及信号通路生物信息学分析,为探讨癫痫的可能发病机制及半夏白术天麻汤抗癫痫作用机制的研究奠定基础。方法采用氯化锂-匹鲁卡品诱导制作癫痫发作大鼠模型。将实验大鼠随机分为正常... 目的通过对癫痫大鼠海马miRNA-146a-5p进行靶基因预测及信号通路生物信息学分析,为探讨癫痫的可能发病机制及半夏白术天麻汤抗癫痫作用机制的研究奠定基础。方法采用氯化锂-匹鲁卡品诱导制作癫痫发作大鼠模型。将实验大鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组20只。使用miRNA芯片技术分析检测大鼠海马神经元细胞miRNA表达谱。实时荧光定量PCR检测miRNA-146a-5p表达。利用miRDB对miRNA-146a-5p进行靶基因预测,并运用miRTar Base、DAVID进行GO功能和KEGG信号通路的富集分析。结果行为学观察显示,中药组大鼠发作次数和级别均较模型组明显降低。miRNA芯片结果显示,模型组miRNA-146a-5p表达水平是正常组的2.107倍(P<0.05),经半夏白术天麻汤治疗后其表达量降至1.377倍(P<0.05)。RT-PCR结果与芯片结果一致,表达差异有统计学意义(P<0.05)。miRNA-146a-5p靶基因预测结果共有140个靶基因,GO注释共得到14个GO生物学过程注释信息(P<0.05),9个细胞组分注释信息(P<0.05),11个分子功能注释信息(P<0.05)。KEGG生物通路富集显示,其140个靶基因显著富集于EB病毒感染信号通路,以及甲状腺激素信号通路上(P<0.05)。结论 miRNA-146a-5p与癫痫发生后的炎症反应密切相关,半夏白术天麻汤可能通过控制癫痫发生后的炎症反应发挥抗癫痫的效应。 展开更多
关键词 癫痫 海马 mirna-146a-5p 半夏白术天麻汤 大鼠
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急性心肌梗死患者血浆miRNA-423-5p与整合素连接激酶水平表达对评价近期临床预后的价值 被引量:8
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作者 达晶 张超 +3 位作者 吴红葵 刘刚 王文科 孙向阳 《现代检验医学杂志》 CAS 2020年第5期33-37,共5页
目的急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血浆miRNA-423-5p与整合素连接激酶水平表达对评价近期临床预后的价值。方法按照研究标准,从宝鸡市中心医院老年心脑血管病科2016年1月~2018年1月收治患者中选取160例作为研究对... 目的急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者血浆miRNA-423-5p与整合素连接激酶水平表达对评价近期临床预后的价值。方法按照研究标准,从宝鸡市中心医院老年心脑血管病科2016年1月~2018年1月收治患者中选取160例作为研究对象,将80例急性心肌梗死患者随机编入实验组,80例稳定性心绞痛患者编入对照组,开展临床研究分析。结合抽血检查结果分析患者的心肌酶谱(LDH,AST,CK和ALT),心肌损伤(cTnI,Mb和CK-MB)指标,血浆miRNA-423-5p,利用酶联免疫法分析整合素连接激酶的表达水平,并在此基础上将实验组患者编入高表达组与低表达组,分析心室重构情况及生活质量评分。结果治疗后,血浆miRNA-423-5p相对表达量实验组(0.6±0.2)高于对照组(0.3±0.1),差异具有统计学意义(t=12.000,P<0.05);整合素连接激酶表达水平实验组(3.2±0.4)高于对照组(1.8±0.1),差异具有统计学意义(t=30.370,P<0.05);对照组心肌酶谱指标、心肌损伤指标、心室重构指标和生活质量评分均优于观察组,两组差异具有统计学意义(t=0.043~102.176,均P<0.05)。结论血浆miRNA-423-5p与整合素连接激酶均可作为急性心肌梗死近期预后监测的评估依据。 展开更多
关键词 mirna-423-5p 整合素连接激酶 急性心肌梗死
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miRNA-129-5p靶向调控VCP基因在人骨肉瘤细胞中表达初步探讨 被引量:4
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作者 龙新华 周云飞 +4 位作者 刘志礼 周扬 张志宏 陈文昭 黄山虎 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第7期679-682,共4页
目的含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,VCP)基因高表达能通过AKT/PI3K/NF-KappaB/MMP-9等信号通路促进骨肉瘤转移,但VCP基因上游调控机制仍不清楚。文中初步探讨miRNA-129-5p是否调控人骨肉瘤细胞中VCP基因表达及调控靶点。方... 目的含缬酪肽蛋白(valosin-containing protein,VCP)基因高表达能通过AKT/PI3K/NF-KappaB/MMP-9等信号通路促进骨肉瘤转移,但VCP基因上游调控机制仍不清楚。文中初步探讨miRNA-129-5p是否调控人骨肉瘤细胞中VCP基因表达及调控靶点。方法运用生物信息学预测软件TargetScanhuman 6.2(http://www.targetscan.org/)预测miRNA-129-5p在VCP基因(NM_007126)可能的作用位点。构建野生型VCP 3'UTR报告基因载体(psi-VCP Vector)及预测位点突变型VCP3'UTR报告基因载体(psi-VCPmut Vector),测序鉴定。细胞转染分4组,psi-VCP Vector+miRNA-129-5p mimic共转染U2-OS细胞为VCP实验组,psi-VCP Vector+阴性miRNA mimic共转染U2-OS细胞为VCP对照组;psi-VCP突变Vector+miRNA-129-5p mimic共转染U2-OS细胞为VCP突变实验组,psi-VCP突变Vector+阴性miRNA mimic共转染U2-OS细胞为VCP突变对照组。分别检测荧光海肾素酶活性。结果 Targetscan软件预测结果显示miRNA-129-5p在VCP 3'UTR163-169bp有且仅有1个保守作用位点;VCP实验组荧光海肾素酶活性(15.529±1.902)低于VCP对照组(21.781±0.854)、VCP突变实验组(19.978±1.377)、VCP突变对照组(21.952±1.516),差异有统计学意义(P<0.05);VCP突变对照组(21.952±1.516)与VCP对照组(21.781±0.854),差异无统计学意义(P=0.276)。结论 miRNA-129-5p在骨肉瘤细胞U2-OS中可能靶向调控VCP基因的表达及调控位点。 展开更多
关键词 mirna-129-5p 含缬酪肽蛋白 骨肉瘤 靶向调控
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