miR-155调控巨噬细胞极化并经外泌体介导足细胞损伤的作用机制研究

目的探讨miR-155调控巨噬细胞极化并经外泌体介导足细胞损伤的作用机制。方法选择巨噬细胞RAW264.7和肾小球足细胞MPC5进行实验。将miR-155mimics、miR-155mimicsNC、miR-155inhibitor和miR-155inhibitorNC慢病毒转染至RAW264.7细胞,构建miR-155过表达/低表达巨噬细胞系及其对照,分离巨噬细胞外泌体。采用流式细胞术检测各组巨噬细胞M1/M2表型比值。采用Transwell法将RAW264.7细胞与MPC5细胞进行共培养,分别于共培养12h、24h后采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测巨噬细胞miR-155表达水平;采用Westernblot法检测巨噬细胞IL-6、IL-10表达水平,以及肾小球足细胞synaptoporin和nephrin表达水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肾小球足细胞IL-1β、IL-10表达水平;采用TUNEL染色法检测肾小球足细胞凋亡情况。结果成功构建miR-155过表达/低表达巨噬细胞系并分离其外泌体。miR-155过表达可诱导巨噬细胞极化为M1型,抑制miR-155可诱导巨噬细胞极化为M2型。在miR-155mimics慢病毒转染至巨噬细胞24h后,其miR-155表达水平显著增加(P<0.05),并上调IL-6的表达水平(P<0.05),抑制IL-10的表达水平(P<0.05),经Transwell共培养使足细胞synaptoporin、nephrin表达水平下降(P<0.05),IL-1β表达水平升高(P<0.05),并促进足细胞发生凋亡。而转染miR-155inhibitor慢病毒至巨噬细胞后所得结果趋势与miR-155mimics相反。RT-qPCR检测结果显示,miR-155mimics组巨噬细胞外泌体中miR-155水平显著升高(P<0.05),miR-155inhibitor组巨噬细胞外泌体中miR-155水平显著降低(P<0.05)。结论miR-155过表达可诱导巨噬细胞极化为M1型,并通过外泌体介导引发足细胞损伤,而下调miR-155表达则逆转这一作用。

miRNA-155对调节性T细胞表型和功能的影响

目的探讨微小核糖核酸(miRNA)-155对调节性T细胞(Treg)的两种亚型诱导性Treg(iTreg)和天然性Treg(nTreg)的影响。方法采用健康成人外周血分离获取的外周血单个核细胞(PBMC),利用磁性细胞分选法分别获取幼稚T细胞和nTreg。培养阶段将细胞分为3组:对照组(幼稚T细胞加入白细胞介素-2培养)、iTreg组(幼稚T细胞加入白细胞介素-2和转化生长因子-β培养)和nTreg组(nTreg加入白细胞介素-2培养)。每组再分为3个亚组:未处理亚组、scramble亚组和miRNA-155拮抗剂亚组(每亚组3个孔)。采用低密度芯片分析方法检测3组中的未处理亚组细胞中miRNA-155的基因表达水平。采用流式细胞术检测3组中各亚组细胞的表面标志物CD25、Foxp3、CD127水平。采用流式细胞术检测3组中各亚组细胞的CD4+CD25+Foxp3+SOCS1+Treg比例;采用流式细胞术检测3组中各亚组细胞的Treg抑制功能。结果与对照组和iTreg组比较,nTreg组细胞的miRNA-155表达水平明显降低,差异有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组和iTreg组比较,nTreg组的SOCS1表达水平明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。加入miRNA-155拮抗剂后并未导致Foxp3、CD127和CD25等Treg重要表面标志物发生明显的变化。与对照组和iTreg组比较,nTreg组的SOCS1表达水平明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。iTreg组中的未处理亚组细胞miRNA-155表达水平较低,而拮抗剂抑制其表达之后(miRNA-155拮抗剂亚组),能够使其SOCS1表达升高。iTreg组中,与未处理亚组比较,miRNA-155拮抗剂亚组的Treg抑制功能在1∶8、1∶16、1∶32的比例时,显示出了更强的抑制功能(均为P<0.05)。结论体外拮抗miRNA-155对nTreg的抑制功能无明显影响,但是能够增加iTreg的SOCS1表达水平和体外抑制功能。

miR-155对变应性鼻炎患者ILC2转录因子GATA3调控作用的研究进展

Ⅱ型固有免疫细胞(ILC2)受刺激后可产生Th2型细胞因子,促进变应性鼻炎(AR)迟发相反应。miR-155在免疫系统的发育、免疫细胞的成熟分化以及维持免疫功能中都发挥至关重要的作用。GATA结合蛋白3(GATA3)是能够促进ILC2发育成熟的转录因子,而在肿瘤研究中,GATA3是miR-155的靶基因。该文对参与AR鼻黏膜中的ILC2转录因子GATA3及可干扰其表达的miR-155作一综述。

儿童反复呼吸道感染的危险因素及MCP-1、miR-146a和miR-155的预测价值

目的分析儿童反复呼吸道感染的危险因素及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、微小核糖核酸(miR)-146a和miR-155的预测价值。方法选取2020年1月-2022年7月长江大学附属仙桃市第一人民医院收治的呼吸道感染患儿204例纳入研究,其中67例反复呼吸道感染患儿为研究组,其余137例偶发或不符合反复呼吸道感染标准的患儿为对照组,归纳儿童反复呼吸道感染的危险因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析MCP-1、miR-146a和miR-155检测对儿童反复呼吸道感染的预测价值。结果呼吸道感染患儿204例中反复呼吸道感染患儿共67例,占比为32.84%;多因素Logistic分析结果显示,母乳喂养<6个月、每天户外活动时间<1.5 h、被动烟草暴露、近一年装修、偏食是儿童反复呼吸道感染的危险因素(P<0.05);与对照组比较,研究组MCP-1、miR-146a和miR-155表达水平升高(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,MCP-1、miR-146a和miR-155联合检测预测儿童反复呼吸道感染的临床价值较高,曲线下面积(AUC)为0.902。结论儿童反复呼吸道感染的危险因素较多,MCP-1、miR-146a、miR-155联合检测对儿童反复呼吸道感染预测价值高,可作为临床诊治的新靶点。

血清miR-223、miR-155、CCL17对小儿肺炎支原体感染的诊断价值及其与疾病严重程度的关系

目的探讨血清微小核糖核酸(miR)-223、miR-155、趋化因子配体17(CCL17)对小儿肺炎支原体(MP)感染的诊断价值及其与疾病严重程度的关系。方法选取乐清市人民医院2020年4月-2023年4月收治的71例小儿MP感染(研究组)与72名同期健康体检儿童(对照组),根据病情程度将研究组患儿分为轻症组(46例)、重症组(25例);比较研究组与对照组血清miR-223、miR-155、CCL17水平,比较轻症组与重症组患儿血清miR-223、miR-155、CCL17水平,分析血清miR-223、miR-155、CCL17与疾病严重程度相关性,分析miR-223、miR-155、CCL17对小儿MP感染的诊断价值。结果研究组血清miR-223、miR-155、CCL17水平较对照组高,且重症组较轻症组高(P<0.05);血清miR-223、miR-155、CCL17水平与疾病严重程度呈正相关,三者联合检测对小儿MP感染的诊断曲线下面积(AUC)值高于单独检测(P<0.05),且联合检测的敏感度为88.73%,特异度为88.89%。结论小儿MP感染后,血清miR-223、miR-155、CCL17水平升高,小儿MP感染重症患儿趋势变化更为明显,血清miR-223、miR-155、CCL17水平与病情严重程度密切相关,三者联合检测对小儿MP感染具有较高的诊断价值。

急性呼吸窘迫综合征合并肺部感染血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p、miR-98-5p表达及临床意义

目的分析急性呼吸窘迫综合征(ARDS)合并肺部感染血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)mRNA、微小核糖核酸(miR)-155-5p、miR-98-5p表达及临床意义。方法将2020年1月-2023年5月潍坊医学院附属医院收治的ARDS合并肺部感染患者104例纳入感染组(其中轻度组40例、中度组39例和重度组25例,入院28 d死亡31例),ARDS未合并肺部感染患者105例纳入未感染组。分析两组临床资料,比较两组、不同病情、不同预后ARDS合并肺部感染患者血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p、miR-98-5p表达水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p、miR-98-5p表达水平单独及联合检测对ARDS合并肺部感染患者预后的预测价值。结果相较未感染组,感染组血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p表达水平升高,而血清miR-98-5p表达水平降低(P<0.05)。轻、中和重度组血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p表达水平呈升高趋势,血清miR-98-5p表达水平呈降低趋势(P<0.05)。相较预后良好组,预后不良组血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p表达水平更高,血清miR-98-5p表达水平更低(P<0.05)。绘制ROC曲线,血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p、miR-98-5p表达水平联合检测对ARDS合并肺部感染预后的预测价值较高(P<0.05),曲线下面积(AUC)为0.899。结论ARDS合并肺部感染患者肺部感染程度、ARDS病情加重与血清NLRP3 mRNA、miR-155-5p、miR-98-5p表达密切相关,联合检测对ARDS合并肺部感染患者预后具有良好的预测。

血清标志物的变化与脓毒症患者SOFA评分的相关性及临床意义

目的:分析血清内皮细胞特异分子-1(ESM-1)、微小核糖核酸-155-5p(miR-155-5p)水平变化与脓毒症患者预后的相关性。方法:选取福建医科大学附属第一医院2019年4月至2021年2月收治的脓毒症患者122例,根据病情严重程度分为三组,依次为普通脓毒症组(52例)、严重脓毒症组(39例)、脓毒症休克组(31例),另选取同期健康体检者30例为对照组,均抽取空腹静脉血,以酶联免疫法检测血清ESM-1水平,以逆转录聚合酶链反应法检测miR-155-5p水平,比较四组血清ESM-1、miR-155-5p及序贯器官衰竭评分(SOFA),并比较不同SOFA脓毒症患者血清ESM-1、miR-155-5p水平,并分析相关性。结果:四组血清ESM-1、miR-155-5p及SOFA比较差异有统计学意义(P<0.05),且脓毒症休克组>严重脓毒症组>普通脓毒症组>对照组;不同SOFA脓毒症患者血清ESM-1、miR-155-5p比较,差异具有统计学意义(P<0.05),且SOFA越高,血清ESM-1、miR-155-5p水平越高;脓毒症患者SOFA与血清ESM-1、miR-155-5p均呈正相关关系。结论:ESM-1水平提高可促使趋化因子富集而加大血管内皮损伤,miR-155-5p高水平表达可诱导免疫失衡、导致氧化还原反应异常,二者均与脓毒症患者预后关系密切,且高水平表达提示患者病情较严重。

脓毒症病原菌和耐药性及血清miRNA对其预后评估价值

目的探讨脓毒症病原菌和耐药性及血清微小核糖核酸(miR)对其预后评估价值。方法选择2020年7月-2023年7月江苏省南通市南通大学附属医院急诊医学重症监护室收治的99例脓毒症患者为研究对象,根据随访28 d结果分为生存组74例和死亡组25例。检测脓毒症感染病原菌分布及耐药性;实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-122、miR-181b、miR-10a、miR-155水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析四指标对脓毒症患者预后评估价值。结果脓毒症患者分离出103株病原菌,革兰阴性菌多。构成比高的是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和金黄色葡萄球菌。大肠埃希菌对头孢唑林和氨苄西林耐药性强,亚胺培南和阿米卡星敏感;肺炎克雷伯菌对头孢唑林和头孢曲松耐药性强,头孢哌酮敏感;金黄色葡萄球菌对万古霉素敏感,青霉素和红霉素耐药性强。死亡组血清miR-122、miR-10a、miR-155水平比生存组高(P<0.05),miR-181b水平低于生存组(P<0.05)。绘制ROC曲线获得四指标联合诊断脓毒症患者预后曲线下面积(AUC)高于单独检测(P<0.05),敏感度和特异度为88.00%和90.50%。结论脓毒症患者感染多是革兰阴性菌,各病原菌耐药性有差异,对常用抗菌药物有较高耐药性。miR-122、miR-181b、miR-10a、miR-155参与脓毒症患者预后不良的发生,联合检测有助于诊断脓毒症预后。

儿童肺炎支原体耐药性及血清miR-126、miR-155、LncRNA GAS5表达对肺炎病情程度的预测价值

目的探讨儿童肺炎支原体耐药性及血清微小核糖核酸(miR)-126、miR-155、长链非编码RNA生长抑制特异因子5(LncRNA GAS5)表达对肺炎病情程度的预测价值。方法选取2022年1月-2023年9月南通市妇幼保健院收治的82例肺炎支原体感染患儿为病例组,随机选取98名同期正常健康体检儿童为对照组,病例组根据病情程度分为轻度组57例和中重度组25例,分析肺炎支原体耐药性,比较病例组和对照组、中重度组和轻度组血清miR-126、miR-155、LncRNA GAS5水平,并分析其预测价值。结果82株肺炎支原体对阿奇霉素、乙酰螺旋霉素耐药性较高,对克林霉素敏感性较高。血清miR-126、miR-155水平病例组高于对照组(P<0.05),中重度组高于轻度组(P<0.05),LncRNA GAS5水平病例组低于对照组(P<0.05),中重度组低于轻度组(P<0.05)。血清miR-126、miR-155、LncRNA GAS5水平联合检测对肺炎支原体感染患儿病情严重程度的诊断曲线下面积(AUC)值高于单独检测(P<0.05),且联合检测的敏感度、特异度分别为84.00%和94.74%。结论肺炎支原体感染患儿对阿奇霉素、乙酰螺旋霉素相对较耐药,血清miR-126、miR-155水平呈高表达,LncRNA GAS5水平呈低表达,三指标表达水平变化与肺炎支原体感染患儿病情严重程度关系密切,三指标联合检测对肺炎支原体感染患儿病情严重程度预测价值较高。