用2D Micro-HPLC/MS分析六种蛋白质混合物的胰蛋白酶解多肽产物

采用2D Micro-HPLC系统,用MS对六种蛋白质的胰蛋白酶解多肽产物进行了分析,实现了蛋白质的高灵敏度、高分离度的检测。结合离子交换色谱法和反相毛细管色谱法,利用六个捕集柱和脱盐系统,可对各种分离条件进行优化。因此,可以实现对多种痕量酶解多肽的分离检测。该系统是痕量蛋白质和未知蛋白质检测的有力工具,结合高性能质谱仪,可以达到非常高的灵敏度。

微柱高效液相色谱-质谱/质谱快速鉴定混合蛋白质新方法

发展了一种混合蛋白质快速鉴定的新方法 .将几种蛋白质的混合物于热变性后直接在溶液中酶解 ,利用微柱高效液相色谱 -离子阱串级质谱进行肽谱 /氨基酸序列分析 ,并结合 Mascot数据库搜索处理功能 。

毛细管内固相微萃取微柱高效液相色谱在线联用

介绍了一种毛细管内固相微萃取器和微柱高效液相色谱在线联用方法。该萃取器替代定量管直接安装在进样阀上,无需特制接口和专门洗脱液。用10cm×0.32mmi.d.×0.6μm交联OV 1作为萃取柱,对0.4mL样品萃取富集,用流动相为洗脱液,在15cm×0.32mmi.d.微柱液相色谱分析,该方法使检测灵敏度比直接进样提高10～20倍。对蒽的检出限为0.4μg/L。

固相微萃取－高效液相色谱法快速测定水中孔雀石绿

提出了固相微萃取-高效液相色谱法测定水中孔雀石绿的含量。为使固相微萃取达到更高的效率，选择85μm的聚丙烯酸酯（PA）涂层萃取纤维，萃取时间为15min。以Shim-packVP—ODS C18色谱柱为固定相分离，用pH4．5的50mmol·L-1乙酸铵溶液与乙腈按体积比为20比80混合的溶液为流动相进行洗脱，在波长595nm处进行测定。孔雀石绿的质量浓度在0．05～2mg·L-1范围内呈线性，检出限（3S／N）为0．003mg·L-1。以鱼塘水为基体进行回收试验，方法的回收率在98．1％～109．6％之间。

葛根素普通粉及其微粉在Beagle犬体内的生物利用度

目的:比较葛根素普通粉及其微粉在Beagle犬体内的生物利用度。方法:分别于给药后不同时间取血,HPLC法测定血清中葛根素的血药浓度,应用3P97药动学统计软件对血药浓度数据拟合。结果:葛根素普通粉及其微粉在Beagle犬体内过程均符合二室开放模型。结论:葛根素微粉较葛根素普通粉相比能明显提高在Beagle犬体内的生物利用度。

微透析结合高效液相色谱法检测牛奶中的磺胺类药物

目的:以微透析装置连结高效液相色谱(MD—HPLC)仪分析牛奶中的6种磺胺类药物(简称 SFDs):磺胺嘧啶(SDA)、磺胺一甲基嘧啶(SME)、磺胺二甲基嘧啶(SMZ)、磺胺恶唑(SMX)、磺胺一甲氧嘧啶(SMM),磺胺二甲氧嘧啶(SMO)的含量。方法:采用 pH 7.5的0.5 mol·L^(-1)NaCl 作为微透析灌流液,流速为1.0 μL·min^(-1),收集样品透析液20 min 后用 HPLC 分离检测。采用 Zorbax,Eclipse XDB C_8(150.0 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃。以乙腈-0.01 mol·L^(-1)NaH_2PO_4(pH=5.0)(25:75)为流动相,流速为0.6 mL·min^(-1),检测波长260 nm。结果:在最佳色谱及微透析条件下,各 SFDs 的浓度在21～3000 ng·mL^(-1)范围内线性关系均良好(r=0.995～0.997)。回收率为:SDA(105.0%),SME(104.0%),SMX(93.0%),SMZ(98.0%),SMM(98.0%),SMO(102.0%)。检测限为:SDA(0.41μg·L^(-1)),SME(0.86μg·L^(-1)),SMX(0.09μg·L^(-1)),SMZ(0.45μg·L^(-1)),SMM(0.19μg·L^(-1)),SMO(0.08μmg·L^(-1))。结论:本方法准确,灵敏度高,易于质控,适用于市售牛奶中SFDs 的分离检测。

40%毒死蜱微乳剂的高效液相色谱法分析

采用ODS–C18反相色谱柱,用高效液相色谱法测定40%毒死蜱微乳剂制剂含量。方法的相关系数为0.9998,标准偏差为0.0242,变异系数为0.06%,平均回收率为98.6%。

多西他赛亚微乳注射液在犬体内的药动学

目的研究多西他赛(DTX)亚微乳注射液在比格犬体内的药动学,比较亚微乳注射液与普通注射液犬体内药动学差异。方法采用单剂量双周期自身交叉设计,Beagle犬前肢分别静脉滴注(20 mg.m-2)DTX亚微乳注射液和DTX注射液(泰素帝),分别于0、0.33、0.67、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12、24 h采血,血浆中DTX采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)法测定。结果相同剂量的DTX亚微乳或普通注射液的AUC0-24分别为(476.80±96.18)和(451.94±43.91)μg.h.L-1,Cmax分别为(510.06±168.58)和(466.71±73.14)μg.L-1,t1/2分别为(5.76±4.24)和(4.40±0.51)h,2种制剂的各药动学参数无显著性差异(P>0.05)。结论多西他赛制成亚微乳制剂后,两者具有相似的体内药动学行为。亚微乳制剂DTX的药-时曲线下面积和峰浓度有所增加,消除半衰期延长可能与制剂形式不同有关。

茶多酚鸡蛋营养成分分析

实验旨在测定茶多酚鸡蛋中的粗蛋白、水分、灰分、脂肪、胆固醇等营养成分的含量,为养殖企业改进饲养管理提供理论依据。粗蛋白的测定用凯氏定氮法,水分、灰分的测定用恒重法,脂肪用索氏提取法测定,胆固醇的含量应用HPLC(高压液相色谱)法测定[色谱条件:Eclipse XPB C18柱(250 mm×4.5 mm);流动相:乙腈-异丙醇(4/1,V/V);检测波长:208 nm;流速1 ml/min;柱温:室温]。实验结果表明,茶多酚鸡蛋中蛋白质、脂肪明显高于普通鸡蛋,水分、灰分、胆固醇则无显著性差异。说明茶多酚鸡蛋是一种高蛋白和富含脂类的蛋品。

手性微柱高效液相色谱用于对映体的分离

报道了实验室自制的手性微柱高效液相色谱系统和纤维素类手性填料的制备方法,以及用于对映体分离的应用研究.研究了手性微柱的装填技术并考察了影响填料性能的关键因素.优化了流动相的组成和流速对对映体拆分的影响.成功地分离了5种对映体.结果表明,该系统操作简便、分离度高,而且流动相消耗低,分析速度快.该系统可以用于实验室手性分离分析.

微泵给药时输液器对尼莫地平注射液的吸附作用

目的 考察微泵给药时输液器对尼莫地平注射液的吸附作用 ,为临床合理用药提供依据。方法 模拟临床给药方式 ,分别取给药后 0 ,2 5 ,6 0 ,90 ,12 0 ,180 ,2 4 0 ,30 0 ,36 0 ,4 80 ,6 0 0min时输出的尼莫地平注射液 ,用RP HPLC法测定尼莫地平浓度 ,计算吸附率。结果 药物浓度 6 0min时最低至 119.0mg·L-1,90min时升至 178.1mg·L-1,后渐趋平稳。吸附率在 6 0min时高达 4 0 % ,90min后降到 11% ,然后缓慢降低。结论 由于吸附作用的存在 ,临床维持给予尼莫地平时 ,应避免使用微泵。

微柱高效液相色谱与火焰光度检测器联用的初步研究

本文研究了常规高效液相色谱（ＨＰＬＣ）及微柱高效液相色谱（Ｍｉｃｒｏ－Ｃｏｌｕｍ ｎ ＨＰＬＣ）与气相色谱火焰光度检测器（ＦＰＤ）的联用技术及其应用。丁基锡等化合物经ＨＰＬＣ分离后，流出液通过ＦＰＤ 进行特效检测。接口采用将毛细管直接引入燃烧头的方式。文中对各有关参数进行了选择、优化和讨论， 对ＦＰＤ 作为ＨＰＬＣ的在线检测器的可能性作了初步探讨。

染料木素自微乳在家兔体内的相对生物利用度研究

目的研究染料木素自微乳在家兔体内的药物动力学和相对生物利用度。方法家兔分别灌胃染料木素自微乳和染料木素CMC-Na混悬液,用HPLC法测定不同时间血浆样品中染料木素的浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数及相对生物利用度。结果染料木素自微乳和染料木素混悬液药-时曲线下面积(AUC0→10h)分别为(24.90±1.24)和(10.71±0.86)μg·h·mL-1,血药峰浓度(Cmax)分别为(4.02±0.20)和(0.99±0.04)μg·mL-1,达峰时间(Tmax)分别为2h和4h,染料木素自微乳较染料木素混悬液的相对生物利用度为232.49%。结论染料木素自微乳可显著提高染料木素的生物利用度。

水溶液中制备分子印迹聚合物微球及其分子识别特性研究

采用聚乙烯醇 40 0作为分散剂 ,利用模板分子与功能单体 /聚合物残基之间的离子键 (静电 )相互作用形成复合物 ,用水溶液微悬浮聚合法制备了 4 氨基吡啶 (4 AP)和甲氧苄氨嘧啶 (TMP)分子印迹聚合物微球 .并通过色谱行为表征 ,比较了它们对各自的模板分子作用的强弱 .结果表明 ,采用甲基丙烯酸为功能单体制备的分子印迹聚合物微球 (MIMs) ,对带有氨基的模板分子主要靠离子键 (静电 )相互作用 ,且作用力的大小与氨基的个数有关 .色谱研究表明 ,模板分子中氨基数目越多 ,这种作用越强 .而且这种作用不是简单的加合 ,而是协同增强作用 .

大孔树脂SPE-RP-HPLC检测大枣中的cAMP

目的:建立测定大枣中环磷酸腺苷成分的反相高效液相色谱方法。方法:市售大枣切碎用20%乙醇水提取,pH与有机溶剂协同作用下经过大孔树脂梯度分离纯化环磷酸腺苷。采用WatersXterraRP18色谱柱(150mm×3.9mm,5μm);流动相为甲醇-(0.050mol/L磷酸二氢钠溶液)(10:90)系统;柱温为(30±1)℃;流速为1.0ml/min;检测波长为254nm。结果:环磷酸腺苷与其它组分的色谱峰得到基线分离。环磷酸腺苷的线性范围在0.08～0.8μg之间,相关系数r=0.9999。加样平均回收率为100.04%,环磷酸腺苷的相对标准偏差为1.21%(n=6)。最低检测限为0.5ng。结论:本方法分离效果好,快捷准确,灵敏度高,重复性好,可作为评价大枣及其制品的参考依据。

酶水解法制取大米蛋白的机理研究

根据糖类化合物成分和蛋白质形态特征的变化研究了淀粉酶水解法从米渣中制取高纯度大米蛋白的机理。高压液相色谱(HPLC)分析显示,随着淀粉酶水解时间的延长,高分子糖组分含量降低,而低聚糖含量增加,表明α-淀粉酶通过水解米渣中的多糖物质使蛋白质与糖得以分离。扫描电子显微镜(SEM)对不同纯度蛋白质表面微观形态观察发现,随着蛋白质纯度的提高,其表面结构变化依次为连续光滑-蜂窝状结构-凝胶状片层结构,表明去除糖类物质可有效提高蛋白质的纯度。

紫杉醇口服自乳化给药系统的处方研究

通过对油相、水、乳化剂、助乳化剂的选择和配比优化,成功地将紫杉醇包埋在乳液中,由伪三元相图得到相应的微乳区域,并结合自乳化速率、粒径、Zeta电位及紫杉醇溶解性能的研究,来筛选处方,最终确立微乳的较优配方为:十四酸异丙酯∶(聚氧乙烯蓖麻油∶正丁醇))(3∶7(4∶1)).并以简便、快捷的高效液相色谱法(HPLC)测定紫杉醇在微乳中的含量.制备的紫杉醇微乳液为泛乳光的澄清透明液体,透射电镜下观察为球状液滴,平均粒径均小于50 nm.

悬浮聚合法制备咖啡因分子印迹聚合物微球及其性能研究

目的建立一种分析测定中草药的方法,并对生物碱有效成分进行分离。方法以咖啡因为模板分子,采用水溶液悬浮聚合法制备了用于色谱分离(作HPLC的固定相)的微米级分子印迹聚合物微球(M IPM s)。结果当以茶叶碱为竞争分子时,M IPM s对咖啡因有强的吸附和特异性选择识别能力。结论该M IPM s能对茶叶中的咖啡因进行分离富集。

铁炭微电解法降解1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐

使用铁炭微电解法降解1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([BMIM]PF6),并探讨了铁炭微电解法降解[BMIM]PF6的影响因素、工艺条件及其反应动力学.结果表明,影响铁炭微电解降解[BMIM]PF6的因素按从大到小的顺序为:炭铁比、pH、反应时间;铁炭微电解降解[BMIM]PF6的最佳工艺条件是:铁粉用量3g.l-1、水样pH2.5、炭铁比2、反应时间为60—90min;在此条件下,[BMIM]PF6的去除效率可以达到90%以上且该降解反应为三级反应.

微泵中奥美拉唑持续给药的稳定性考察

目的:考察微泵中奥美拉唑持续给药的稳定性。方法:模拟临床给药方式,分别于给药24h内从微泵出液口取样,采用高效液相色谱法测定奥美拉唑在各时间点的浓度。结果:奥美拉唑注射液在给药后6h内稳定。结论:临床上在微泵给予奥美拉唑时应控制维持时间在6h内。