血清microRNA-155、microRNA-21、趋化素、瘦素与糖尿病肥胖患者胰岛素抵抗的相关性

目的 探讨糖尿病肥胖患者血清microRNA-155(miR-155)、microRNA-21(miR-21)、趋化素、瘦素水平与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法 选取2022年1月—2023年4月山东中医药大学第二附属医院收治的138例2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象,其中肥胖患者73例(肥胖组),非肥胖患者65例(非肥胖组)。肥胖组中有IR 45例(IR组),无IR 28例(非IR组)。收集患者一般资料,包括性别、体质量指数(BMI)、年龄、颈围(NC)、腰围(WC)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、miR-155、miR-21、趋化素、瘦素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平;通过多因素逐步Logistic回归模型分析T2DM肥胖患者发生IR的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的效能;Pearson法分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR的相关性。结果 肥胖组miR-155相对表达量低于非肥胖组(P <0.05),miR-21、趋化素、瘦素、HOMA-IR高于非肥胖组(P <0.05)。IR组miR-155相对表达量低于非IR组(P <0.05),NC、WC、miR-21、趋化素、瘦素水平高于非IR组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:NC [O^R=1.416(95%CI:1.038,1.932)]、WC [O^R=1.227(95%CI:1.049,1.435)]、miR-155 [O^R=1.763(95%CI:1.205,2.579)]、miR-21[O^R=1.932(95%CI:1.356,2.753)]、趋化素[O^R=2.074(95%CI:1.492,2.883)]、瘦素[O^R=1.628(95%CI:1.246,2.127)]是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素(P <0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的曲线下面积分别为0.865、0.909、0.874和0.871;敏感性为77.8%(95%CI:0.614,0.825)、86.7%(95%CI:0.792,0.917)、95.6%(95%CI:0.713,0.965)和80.0%(95%CI:0.692,0.917);特异性为85.7%(95%CI:0.647,0.903)、82.1%(95%CI:0.732,0.914)、75.0%(95%CI:0.675,0.928)和89.3%(95%CI:0.656,0.944)。miR-155与HOMA-IR呈负相关(r=-0.573,P=0.000),miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR均呈正相关(r=0.531、0.558和0.568,均P=0.000)。结论 T2DM肥胖患者中IR较多,且miR-155、miR-21、趋化素、瘦素是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素。

血清 microRNA-155、microRNA-23b-3p、 microRNA-16-5p与难治性肺炎支原体肺炎 患儿病情严重程度及预后的关系

目的探讨血清microRNA-155(miR-155)、microRNA-23b-3p(miR-23b-3p)、microRNA-16-5p(miR-16-5p)水平与难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)患儿病情严重程度及预后的关系。方法前瞻性选取2023年6月—2023年12月杭州市儿童医院收治的101例RMPP患儿为研究对象,收集治疗前血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p水平。根据病情严重程度将患儿分为重症组39例与轻症组62例。所有患儿自治疗起随访1个月,根据治疗效果将患儿分为预后不良组22例与预后良好组79例。分析不同病情严重程度及不同预后RMPP患儿血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p水平;采用多因素逐步Logistic回归模型分析影响RMPP患儿预后的因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p预测RMPP患儿预后的价值。结果重症组患儿血清miR-155基因相对表达量高于轻症组(P<0.05),miR-23b-3p、miR-16-5p基因相对表达量均低于轻症组(P<0.05)。预后不良组患儿血清miR-155基因相对表达量高于预后良好组(P<0.05),miR-23b-3p、miR-16-5p基因相对表达量均低于预后良好组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,儿童器官功能障碍评分2(PELOD-2)[O^R=5.129(95%CI:2.111,12.466)]、miR-155[O^R=3.924(95%CI:1.614,9.535)]、miR-23b-3p[O^R=3.850(95%CI:1.584,9.356)]、miR-16-5p[O^R=3.777(95%CI:1.554,9.179)]是影响RMPP患儿预后的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p及三者联合预测RMPP患儿预后的敏感性分别为63.64%(95%CI:0.408,0.820)、72.73%(95%CI:0.496,0.884)、68.18%(95%CI:0.451,0.853)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为70.89%(95%CI:0.594,0.803)、78.48%(95%CI:0.675,0.866)、72.15%(95%CI:0.608,0.814)、91.14%(95%CI:0.820,0.961),曲线下面积分别为0.725(95%CI:0.622,0.827)、0.718(95%CI:0.604,0.831)、0.710(95%CI:0.591,0.829)、0.923(95%CI:0.866,0.980)。结论血清miR-155、miR-23b-3p、miR-16-5p水平与RMPP患儿病情严重程度及预后有关,三者联合预测RMPP患儿的效能良好。

风险预测模型评估MicroRNA-155对急性髓系白血病患者接受异基因造血干细胞移植不良预后的影响

目的:分析异基因造血干细胞移植是否能够克服miR-155过表达在急性髓系白血病患者中不良预后影响。方法:筛选癌症基因组图谱(TCGA)数据库中有miRNA表达信息并接受过异基因造血干细胞移植的急性髓系白血病患者,以miR-155表达水平的中位数为临界值将其分为高表达组与低表达组。描述性统计总结两组患者的性别、年龄、染色体核型、预后分组等临床特征及常见基因突变,采用Mann-Whitney U检验、χ2检验、单因素和多因素分析进行比较。结果:除骨髓肿瘤细胞及FLT3-ITD突变、TP53突变外,两组间临床及遗传资料均存在显著差异。两组患者的年龄、性别、白细胞计数、外周血肿瘤细胞百分率、FAB分型等临床特征差异均无统计学意义。单因素分析发现,miR-155高表达OS降低,PHF6、RUNX1、TP53和MLL-PTD突变患者OS降低。多变量分析表明,miR-155高表达是OS较差的独立因素。结论:miR-155高表达与AML患者接受同种异体造血干细胞移植的不良预后相关,是AML预后不良的生物标志物。

携载microRNA-140外泌体/海藻酸钠/胶原水凝胶修复关节软骨损伤

背景:研究已证实,上调microRNA-140表达可部分抑制膝关节软骨组织与细胞的骨关节炎样改变,延缓骨关节炎进程,提示microRNA-140参与了骨关节炎的发病机制。目的:采用海藻酸钠/胶原水凝胶负载过表达microRNA-140的外泌体,进一步分析microRNA-140参与骨关节炎的相关机制。方法:利用慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞使其过表达microRNA-140,随后分离提取外泌体,得到过表达microRNA-140的外泌体。制备负载外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。采用随机数字表法将32只SD大鼠随机分为4组,每组8只:正常对照组不进行任何处理,骨关节炎组、未转染外泌体组、转染外泌体组均通过膝关节腔内注射碘乙酸钠的方式建立骨关节炎模型,造模2周后,骨关节炎组膝关节腔内注射PBS,未转染外泌体组、转染外泌体组膝关节腔内分别注射负载未过表达microRNA-140与过表达microRNA-140外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。造模后第6周,检测大鼠机械刺激缩足反应阈值、滑膜液炎症因子浓度、软骨相关基因表达、膝关节软骨组织的组织学变化与焦亡相关蛋白表达。结果与结论:①与正常对照组比较,骨关节炎组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均减少(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平增加(P<0.05),基质金属蛋白酶13、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)mRNA表达增加(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18蛋白表达均增加(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1免疫荧光强度增强(P<0.05),软骨组织损伤严重。②与骨关节炎组比较,两外泌体组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均增加(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平减少(P<0.05),基质金属蛋白酶13 mRNA表达减少(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18的蛋白表达均减少(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1的免疫荧光强度减弱(P<0.05),软骨组织损伤减轻(P<0.05),并且转染外泌体组的作用更强。③结果表明,microRNA-140可通过抑制炎症、维持软骨稳态、抑制软骨焦亡来减轻骨关节炎大鼠的疼痛反应,降低软骨损伤,发挥骨关节炎治疗作用。

MicroRNA-214调控骨关节炎软骨和软骨下骨代谢的机制

背景:microRNA-214(miR-214)在骨质疏松中的作用国内外已有相关报道,而miR-214与骨关节炎关节软骨及软骨下骨退变之间的相互关系尚不清楚。目的:探讨miR-214与小鼠膝骨关节炎软骨及软骨下骨退变之间存在的关系。方法:取30只C57BL/6J小鼠随机分组:①实验一:分为假手术组和内侧半月板失稳组(n=3),分别进行苏木精-伊红染色和荧光定量PCR检测miR-214基因的表达变化;②实验二:分为假手术组、内侧半月板失稳组、内侧半月板失稳+空载腺病毒组(空载组)、内侧半月板失稳+miR-214拮抗剂过表达腺病毒组(拮抗剂组)(n=6),术后4周各组分别取软骨组织,进行苏木精-伊红、番红O固绿、甲苯胺蓝染色分析;荧光定量PCR、Western blot检测关节软骨中相关因子的表达情况。结果与结论:①实验一中,苏木精-伊红染色结果显示,与假手术组相比,内侧半月板失稳组可见软骨退变;荧光定量PCR检测结果显示,所有样本均有miR-214表达,而内侧半月板失稳组软骨样本中miR-214的表达水平明显高于假手术组(P<0.05);②实验二中,苏木精-伊红染色、番红O固绿染色、甲苯胺蓝染色结果显示,拮抗剂组软骨退变程度低于内侧半月板失稳组;腺病毒验证PCR检测结果显示,空载组软骨中miR-214表达水平高于拮抗剂组(P<0.05);③实验二中,X射线片显示,内侧半月板失稳组和空载组呈典型骨关节炎影像学变化,拮抗剂组关节退行性病变程度相对较轻;Mirco-CT检测结果显示,拮抗剂组在注入miR-214拮抗剂后,骨小梁结构模型指数变小,各项数据整体好于内侧半月板失稳组及空载组;④实验二Western blot检测结果显示,内侧半月板失稳组、空载组软骨标本中软骨相关因子Ⅱ型胶原α1、性别决定区Y框转录因子9、Runt相关转录因子2、骨桥蛋白的相对表达水平低于假手术组及拮抗剂组(P<0.05);而金属基质蛋白酶13的相对表达水平在内侧半月板失稳组、空载组高于假手术组及拮抗剂组(P<0.05);⑤实验二荧光定量PCR检测结果显示,与假手术组比较,肿瘤坏死因子α和白细胞介素6 mRNA的相对表达量在内侧半月板失稳组、空载组中表达相对较高,拮抗剂组中表达相对较低(P<0.05);内侧半月板失稳组、空载组高于拮抗剂组(P<0.05);⑥结果表明,骨关节炎小鼠模型的关节软骨中miR-214表达水平明显升高,提示miR-214表达水平的升高与骨关节炎有密切联系;而在骨关节炎小鼠模型膝关节腔内注入miR-214拮抗剂,可以延缓关节软骨退化、促进软骨下骨重塑,改善骨关节炎进展。

MicroRNA-155对人肺癌95D细胞生长的影响

背景与目的近年来的研究发现miRNAs(microRNAs)家族成员miR-155与肺癌的发生相关,然而具体机制不明。本研究拟探讨上调miR-155表达对人肺癌95D细胞体外生长的影响及其可能的作用机制,为后续深入研究miR-155在肺癌发生、发展中的作用提供新的实验依据。方法人肺癌95D细胞分为空白对照组、miR-155阴性对照组和miR-155转染组,分别作加入转染试剂、转染miR-155阴性对照和转染miR-155处理。Real-time PCR特异性探针法检测转染后95D细胞中miR-155的表达水平;应用MTT法检测miR-155对95D细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测95D细胞周期的分布;Western blot检测95D细胞SOS1蛋白的表达变化。结果 Real-time PCR结果显示,与对照组相比,转染组95D细胞miR-155的表达水平明显增加(P<0.05);镜下可见转染miR-155的95D细胞生长减缓,形态发生改变;M结果表明miR-155转染后,95D细胞增殖受到抑制,转染组和对照组存在明显差异(P<0.05);流式细胞术分析显示,与对照组相比,转染miR-155的95D细胞周期发生改变,G0/G1期细胞明显增多,而S期则明显减少(P<0.05);Western blot结果显示转染组95D细胞SOS1蛋白的表达明显降低(P<0.05)。结论 miR-155能明显抑制人肺癌95D细胞的体外生长,这可能与miR-155下调SOS1表达及诱导95D细胞G0/G1期阻滞相关。

MicroRNA-155在碘致NOD.H-2h4小鼠自身免疫性甲状腺炎发病中的变化研究

目的:观察高碘诱发NOD.H-2 h4小鼠发生自发性自身免疫性甲状腺炎(SAT)动物模型中Th1及Th2细胞的动态变化及甲状腺、脾脏、肝脏、肾脏中mi R-155的动态改变,探讨mi R-155对碘致自身免疫性甲状腺炎(AIT)的可能影响及作用机制。方法:4周龄NOD.H-2 h4雌性小鼠随机分为对照组及高碘饮水组。高碘组饲以含0.05%碘化钠的无菌水,对照组饲以无菌双蒸水,于实验开始后第0、2、4、6、8、10、12周麻醉处死。留取甲状腺,制备石蜡切片行HE染色;酶联免疫吸附试验测定血清甲状腺球蛋白抗体(Tg Ab)水平;流式细胞仪检测脾脏单个核细胞悬液Th1、Th2细胞表达水平;实时定量RT-PCR检测脾细胞中Th1和Th2细胞转录因子T-bet及GATA-3,细胞因子IFN-γ及IL-4的m RNA表达水平及甲状腺、脾脏、肝脏、肾脏mi RNA-155表达水平。结果:发生SAT的小鼠血清Tg Ab滴度较对照组升高(P<0.05)。脾细胞中Th1细胞比例及T-bet,IFN-γm RNA表达量自6周后较对照组升高(P<0.05)。脾脏、甲状腺miR-155表达量分别自8周及10周后较对照组升高(P<0.05)。脾脏mi R-155水平与Tg Ab滴度显著正相关(r=0.825,P<0.01),与Th1细胞比例显著正相关(r=0.872,P<0.01);甲状腺mi R-155水平与TgAb滴度显著正相关(r=0.575,P<0.01);与Th1细胞比例显著正相关(r=0.642,P<0.01)。结论:发生SAT的NOD.H-2 h4小鼠脾脏Th1细胞比例显著升高,提示Th1细胞可能参与该模型AIT的发生发展,占免疫优势地位。脾脏及甲状腺mi R-155水平与Tg Ab滴度及Th1细胞比例显著正相关,提示mi R-155可能通过影响Th1细胞在AIT的发生发展中发挥作用。

MicroRNA-155在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的探讨microRNA-155(miR-155)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)患者中的表达情况及与临床病理特征的相关性,miR-155指导PTC预后的可行性。方法收集86例PTC患者的癌及癌旁新鲜组织,用荧光定量PCR的方法检测miR-155在上述组织中的表达,并结合其临床病理特点进行回顾性分析。结果 69.8%(60/86)的PTC患者癌组织的miR-155表达较癌旁正常组织上调,相对上调倍数为2.63±2.73倍;而在表达上调组中,PTC原发灶更大[(1.66±0.96)cm vs(1.19±0.52)cm,P=0.021];更容易出现甲状腺包膜外侵犯(56.7%vs 23.1%,P=0.004);淋巴结转移率更高(70%vs 46.2%,P=0.036);具有更晚的TNM分期,Ⅲ~Ⅳ期的比例更高(20%vs 0%,P=0.014)。PTC癌组织中miR-155相对表达量(ΔCT)高低与淋巴结转移个数具备一定的相关性(r=0.531,P=0.001)。结论 PTC中miR-155的高表达具有更大肿瘤病灶,更易甲状腺包膜外侵犯,更高颈部淋巴结转移率及更晚的TNM分期等临床病理特点,可能作为不良临床预后的判断指标之一。

MicroRNA-155对糖尿病大鼠脑缺血损伤血管再生的调控

目的:观察microRNA-155(miRNA-155)表达对糖尿病大鼠脑缺血损伤及CD31、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨miRNA-155对糖尿病加重脑缺血血管再生的调控作用。方法:SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,继而应用栓线法建立永久性局灶性脑缺血模型。随机分为5组:(1)假手术组(sham组);(2)脑缺血组(CI组);(3)糖尿病脑缺血组(DCI组);(4)糖尿病脑缺血+miRNA-155抑制物组(inhibitor组);(5)糖尿病脑缺血+阴性对照组(scramble组)。于缺血后24 h采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miRNA-155的表达水平;参照Zea-Longa 5分制行神经功能缺损评分;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测梗死体积;Western blotting检测血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1/CD31)、VEGF的表达水平。结果:糖尿病脑缺血+miRNA-155抑制物组大鼠脑缺血侧皮质区的miRNA-155表达水平显著低于糖尿病脑缺血组(P<0.05)。miRNA-155表达下调可显著减少糖尿病脑缺血大鼠的神经功能缺损评分及脑梗死体积,但显著增加CD31表达水平与VEGF表达水平(均P<0.05)。结论:miRNA-155对糖尿病加重脑缺血损伤血管再生有重要的调控作用,miRNA-155表达下调可显著减轻糖尿病大鼠脑缺血损伤。

小鼠巨噬细胞中microRNA-155促进急性心肌梗死后心室重构的作用机制

为探究巨噬细胞中microRNA-155(miR-155)表达水平对急性心肌梗死(AMI)后心室重构的影响及其机制,将miR-155基因过表达(miR-155+/+)和基因敲除(miR-155-/-)小鼠的骨髓细胞分别移植给野生型(WT)小鼠进行血液重建,并建立AMI模型,检测血浆及心肌组织中炎症因子TNF-α和IL-10的表达水平,评价小鼠心脏功能并观察巨噬细胞浸润、心室重构的情况,进而利用病毒包装技术敲降细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS1)基因后验证其作为miR-155靶基因的影响.结果显示:miR-155+/+组较miR-155-/-组小鼠的心脏收缩功能显著受限(p<0.01);巨噬细胞中miR-155表达水平显著影响血浆中炎症因子的释放(p<0.01),并促进心室重构的发生(p<0.01);miR-155表达水平与SOCS1的mRNA及蛋白质表达水平呈显著负相关(p<0.01).综上可知,抑制AMI后巨噬细胞中miR-155的表达可以促进靶基因SOCS1的表达,从而减轻AMI后的炎症反应,有利于减轻心室重构.

microRNA-155在寻常型银屑病中的表达及意义

目的:探讨micro RNA-155(mi R-155)在寻常型银屑病中的表达及意义。方法:采用Taq Man探针实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测35例寻常型银屑病患者皮损区(皮损组)和非皮损区(非皮损组)中的mi R-155表达水平,并与30例正常对照(对照组)进行比较,研究mi R-155含量与患者银屑病面积和严重程度指数(PASI)评分和白细胞介素-17A(IL-17A)含量之间的关系。结果:mi R-155和IL-17A在皮损组和非皮损组中的表达高于对照组,在皮损组中的表达高于非皮损组,差异均有统计学意义(均P<0.01);皮损组中,mi R-155和IL-17A含量分别与PASI评分呈显著正相关(均P<0.05),mi R-155和IL-17A含量之间亦存在显著正相关(P<0.01)。结论:mi R-155的过表达与银屑病的发病有关,银屑病中mi R-155的过表达与Th17细胞的功能亢进有关。

重组人血管内皮抑制素、顺铂和氟尿嘧啶联合治疗对宫颈癌患者血清肿瘤标志物及microRNA-24和microRNA-155水平的影响

目的探讨重组人血管内皮抑制素、顺铂和氟尿嘧啶联合治疗对宫颈癌患者血清肿瘤标志物及microRNA-24(miR-24)和microRNA-155(miR-155)水平的影响。方法选择2017年1月至2019年1月邯郸市第一医院收治的106例宫颈癌患者为研究对象,按照治疗方法分为观察组和对照组,每组53例。2组患者均给予放射治疗和顺铂、氟尿嘧啶化学治疗,在此基础上,观察组患者给予重组人血管内皮抑制素治疗。对2组患者治疗前后血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、癌胚抗原相关细胞黏附分子6(CEACAM6)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、糖链抗原15-3(CA15-3)、糖链抗原19-9(CA19-9)、糖链抗原125(CA125)、miR-24、miR-155水平进行比较,治疗期间观察患者不良反应发生情况,治疗后评估患者临床疗效。结果治疗前2组患者血清SCCA、CA15-3、CA19-9、CA125、MMP-9、VEGF、CEACAM6水平比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者治疗后血清SCCA、CA15-3、CA19-9、CA125、MMP-9、VEGF、CEACAM6水平显著低于治疗前(P<0.05);治疗后,观察组患者血清SCCA、CA15-3、CA19-9、CA125、MMP-9、VEGF、CEACAM6水平显著低于对照组(P<0.05)。治疗前2组患者血清中miR-24、miR-155相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);与治疗前比较,治疗后2组患者血清中miR-24相对表达量升高,血清中miR-155相对表达量降低(P<0.05);治疗后,观察组患者血清中miR-24相对表达量显著高于对照组,血清中miR-155相对表达量显著低于对照组(P<0.05)。观察组患者肿瘤缓解率为52.83%(28/53),肿瘤控制率为83.02%(44/53);对照组患者肿瘤缓解率为32.07%(17/53),肿瘤控制率为73.58%(39/53);观察组患者肿瘤缓解率显著高于对照组(χ^(2)=4.673,P<0.05),2组患者肿瘤控制率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.388,P>0.05)。2组患者呕吐恶心、血小板减少、肝功能损伤、肾功能损伤及骨髓抑制发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论顺铂、氟尿嘧啶和重组人血管内皮抑制素联合治疗可有效降低宫颈癌患者血清肿瘤标志物水平,抑制肿瘤生长,提高治疗效果,其机制可能与重组人血管内皮抑制素调节血清MMP-9、VEGF、CEACAM6、miR-24和miR-155水平有关。

microRNA-155在病毒性心肌炎患者血清中的表达及临床意义

目的 探讨病毒性心肌炎患者（viral myocarditis）血清中microRNA-155（miR-155）的表达水平及其临床意义.方法 采用定量逆转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR）检测38例病毒性心肌炎患者和38例健康体检者血清中miR-155的水平,采用电化学发光检测血清中肌钙蛋白T（cardiac troponin T,cTnT）的水平,统计分析miR-155与cTnT水平的相关性.结果 病毒性心肌炎患者血清中miR-155水平为1.72＆#177;0.59,明显高于对照组血清中miR-155水平（1.27＆#177;0.34）,二者差异具有统计学意义（t=4.074,P＜0.01）;病毒性心肌炎患者血清中miR-155水平与cTnT呈明显正相关（r=0.624,P＜0.05）.结论 病毒性心肌炎患者血清中miR-155水平增高,且与心肌损伤程度相关,提示miR-155参与病毒性心肌炎的发生发展过程.

胰腺导管腺癌患者血清中microRNA-155的表达及其临床意义

目的检测microRNA-155(miR-155)在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)组织中、患者血清中的含量,探讨其作为PDAC血清学诊断标志物的可能性。方法应用荧光实时定量PCR法检测miR-155在20对PDAC组织和癌旁组织、70例PDAC患者和40例健康人血清、10对荷人PDAC小鼠和对照组小鼠血清及6株PDAC细胞株和其培养上清中的含量。结果实验结果显示,PDAC组织中miR-155表达高于癌旁胰腺组织(P=0.005);并且miR-155在PDAC患者血清中表达量高于健康对照组(P=0.004);在荷人PDAC小鼠血清中miR-155含量高于对照组小鼠(P=0.012);同时,6株PDAC细胞株miR-155的表达存在差异(P=0.000),miR-155在细胞内和在其培养上清中的表达具有高度一致性(r=0.628,P=0.005)。结论 miR-155在PDAC组织和患者血清中表达上调,提示其可能是PDAC血清学的潜在标志物。

系统性红斑狼疮患者B细胞中microRNA-155的表达及干预后效应

目的分析micro RNA-155(miR-155)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血B细胞中的表达及干预后B细胞表达IgG水平。方法收集66例SLE患者及10例健康人群外周血,分离出B细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-155在B细胞中的表达水平,利用电转染技术使miRNA抑制剂干预SLE患者外周血B细胞miR-155的表达,然后以ELISA检测B细胞干预后培养液上清液IgG的水平。结果 qRT-PCR结果显示,与健康人比较,SLE患者外周血B细胞中miR-155表达上调(P<0.05),通过miRNA抑制剂下调SLE患者B细胞中的miR-155的表达后,B细胞分泌的IgG水平明显降低。结论 SLE患者的B细胞中表达上调的miR-155可能参与了SLE患者B细胞功能调控。

MicroRNA-155通过调节CXCR4/PI3K/AKT途径影响滋养细胞的侵袭与迁移

目的:以人绒毛膜滋养层细胞系JEG-3细胞为研究对象,结合该细胞侵袭和迁移能力的变化情况,研究转染miR-155 mimics和miR-155 inhibitor之后CXCR4的表达变化及其对下游PI3K/AKT信号通路的影响作用,从而探讨miR-155参与子痫前期发生发展的分子机制。方法:设计miR-155 mimics和miR-155 inhibitor,对JEG-3进行转染,通过Transwell侵袭实验、划痕实验,观察转染后细胞的侵袭和迁移能力的变化;利用Real-time PCR检测CXCR4 mRNA的表达;利用Western blot检测CXCR4及下游p-AKT蛋白的表达水平。结果:Real-time PCR结果显示,miR-155 mimics转染组CXCR4 mRNA相对表达量(0.589±0.096)明显低于空白对照组(1.503±0.090)和阴性对照组(1.146±0.153),差异有统计学意义(P<0.05);miR-155 inhibitor转染组CXCR4 mRNA相对表达量(1.739±0.083)与两组对照组相比差异也有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示miR-155 mimics转染组CXCR4蛋白和下游p-AKT蛋白表达水平均明显降低,而miR-155 inhibitor转染组CXCR4和p-AKT蛋白水平则升高,与空白对照组和阴性对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示,与空白对照组(63.46±2.37)和阴性对照组(49.29±5.81)侵袭细胞数相比,miR-155 mimics转染组侵袭细胞数(22.89±9.42)明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);同时,miR-155 inhibitor转染组侵袭细胞数(81.50±11.25)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验结果显示,转染miR-155 mimics后,JEG-3细胞相对迁移距离(0.159±0.058)低于空白对照组(1.080±0.045)和阴性对照组(0.823±0.201),差异有统计学意义(P<0.05);而miR-155 inhibitor转染组,JEG-3细胞相对迁移距离(1.640±0.078)明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-155可能通过抑制CXCR4的表达进而抑制其下游PI3K/AKT信号通路的活化,从而影响滋养细胞的侵袭及迁移能力,最终导致子痫前期的发生发展。

microRNA-155在小儿急性髓性白血病中的差异表达及分析

目的探讨microRNA-155在初诊急性髓性血病(AML)患儿和非白血病对照儿童之间的差异表达情况,分析其意义。方法随机抽取我院标本库中自2012至2013年间收集的19例初诊AML骨髓标本以及20例非白血病对照儿童标本,利用Taqman探针实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测microRNA-155的相对表达水平(结果以2-△△Ct表示)。结果 microRNA-155的表达水平在AML患儿和对照组之间有显著差异(AML患儿组增高)(Z=-4.382;P=0.001);在预后分组中,不良组、中等组和良好组之间microRNA-155的表达水平无明显差异(P>0.05);在早期治疗反应分组中,缓解组和未缓解组之间表达水平无显著差异(P>0.05)。结论与对照组相比,microRNA-155在初诊小儿AML中发生显著的差异高表达现象,过表达的microRNA-155与危险度分组和早期治疗反应、预后等无显著相关性。microRNA-155有希望成为小儿AML的一个早期诊断标记物,但对于预后的意义尚有待于进一步的深入研究。

GLP-1受体激动剂对糖尿病动脉粥样硬化大鼠microRNA-155及Toll样受体4表达的影响

目的:观察GLP-1受体激动剂(利拉鲁肽)对糖尿病大鼠microRNA-155(miR-155)及Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:取8周龄雄性SD大鼠40只,适应性喂养1周后随机分为对照组(n=10)和高脂饮食组(n=30),6周后,高脂饮食组大鼠给予STZ诱导2型糖尿病动脉粥样硬化模型,对照组给予等量柠檬酸缓冲液。模型大鼠随机分为糖尿病组、利拉鲁肽中剂量组[200μg/(kg·d)]和利拉鲁肽大剂量组[400μg/(kg·d)],各组10只,干预8周。取血用于测定空腹血糖(FBG),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);RT-PCR法检测各组大鼠主动脉粥样硬化病变部位miR-155、TLR4和核因子-κB(NF-κB)mRNA的水平。结果:与对照组相比,糖尿病组大鼠FBG、TC、TG、LDL-C水平均升高(P<0.01),体重下降(P<0.01);miR-155、TLR4和NF-κB mRNA水平升高(P<0.01)。与糖尿病组相比,利拉鲁肽中、大剂量组血糖、血脂均显著减低(P<0.05);miR-155和TLR4、NF-κB mRNA水平明显下降(P<0.05和P<0.01),其中在利拉鲁肽大剂量组对三者的下调作用更显著。结论:GLP-1受体激动剂不仅显著降低血糖,调节血脂,还能下调动脉粥样硬化病变部位miR-155水平,呈剂量依赖性抑制TLR4/NF-κB炎症因子表达,发挥血管保护作用。

microRNA-155在长白猪和通城猪骨骼肌发育过程中的表达分析

本研究旨在分析miR-155在长白猪(瘦肉型)和通城猪(脂肪型)骨骼肌发育过程中的表达变化,以了解其在猪肌肉发育中的重要作用。选用长白猪和通城猪不同发育时期(胚胎期12个时期,出生后10个时期)骨骼肌为材料,利用Stem-Loop RT-PCR方法检测miR-155的表达变化。此外,本研究还分析了miR-155在成年通城猪各组织的表达。结果,miR-155在长白和通城猪骨骼肌发育过程中差异表达呈现不同的表达模式。在通城猪中,miR-155在小肠和肺中表达量较高,在心脏和胎盘中度表达,而在其他组织中表达较低。结果提示,miR-155可能参与猪肌细胞增殖和分化,从而影响猪骨骼肌发育,与猪肌肉的表型有关。

microRNA-155对重症急性胰腺炎大鼠急性肺损伤作用的研究

目的探讨microRNA-155(miRNA-155)及其抑制剂对重症急性胰腺炎大鼠急性肺损伤的影响。方法将Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠27只随机分为:对照组(B1组)、重症急性胰腺炎组(B2组)、miRNA-155抑制组(B3组),每组9只。采取经逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠(0.1 ml/100 g)制作SD大鼠重症急性胰腺炎肺损伤动物模型,miRNA-155抑制组(B3组)于造模前24 h经大鼠尾静脉注射miRNA-155抑制物siRNA(80mg/kg)进行干预。动物模型制作12 h后处死所有大鼠。检测3组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α及淀粉酶水平,计算各组大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子(ICAM-1)的蛋白表达情况(Western Blot法),测量肺湿干比(W/D),并观察各组大鼠肺组织病理变化。结果B2、B3组大鼠与B1组比较,IL-1β、IL-6、TNF-α及淀粉酶水平、W/D、肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子(ICAM-1)的蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.01),B2、B3组高于B1组;B3组较B2组降低(P<0.01),肺组织病理损伤较B2组轻。结论miRNA-155抑制剂能够降低重症急性胰腺炎大鼠炎症因子,能够减少肺组织ICAM-1及TNF-α的蛋白表达,减轻重症急性胰腺炎急性肺损伤。