清肾颗粒对非透析慢性肾脏病湿热证患者血清microRNA-21、Wnt4及β-catenin的影响

目的观察清肾颗粒对非透析慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)湿热证患者血microRNA-21、Wnt4及β-catenin的影响,探讨其保护肾功能、改善临床症状的作用机制。方法选取66例符合纳入标准的CKD湿热证患者,最终完成64例,对照组和观察组各32例。对照组采用CKD常规基础治疗,观察组在对照组治疗基础上加用清肾颗粒口服,疗程均为12周。观察和比较两组患者治疗前后中医症状积分及证候疗效,肾功能指标[血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)],微炎症、营养指标[超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)、白蛋白(albumin,Alb)、前白蛋白(prealbumin,PAB)],血清microRNA-21、Wnt4及β-catenin水平。结果两组患者治疗后中医症状积分较治疗前均显著降低(P<0.05),且观察组降低程度显著大于对照组(P<0.05);两组患者临床疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组BUN、SCr水平,eGFR较治疗前显著改善(P<0.05),且改善程度显著优于对照组(P<0.05);与治疗前比较,两组患者治疗后血清hs-CRP水平均显著降低(P<0.05),Alb、PAB水平均显著升高(P<0.05),且观察组血清hs-CRP、Alb、PAB水平改善程度优于对照组(P<0.05);治疗前两组患者血清microRNA-21、Wnt4、β-catenin水平均显著高于正常组(P<0.05),观察组患者治疗后血清microRNA-21、Wnt4、β-catenin水平均显著降低(P<0.05),且降低程度显著大于对照组(P<0.05)。结论清肾颗粒能够改善CKD湿热证患者肾功能及微炎症、营养不良状态,减轻临床症状,其机制可能与降低microRNA-21表达水平,靶向抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

血清microRNA-155、microRNA-21、趋化素、瘦素与糖尿病肥胖患者胰岛素抵抗的相关性

目的 探讨糖尿病肥胖患者血清microRNA-155(miR-155)、microRNA-21(miR-21)、趋化素、瘦素水平与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法 选取2022年1月—2023年4月山东中医药大学第二附属医院收治的138例2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象,其中肥胖患者73例(肥胖组),非肥胖患者65例(非肥胖组)。肥胖组中有IR 45例(IR组),无IR 28例(非IR组)。收集患者一般资料,包括性别、体质量指数(BMI)、年龄、颈围(NC)、腰围(WC)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、miR-155、miR-21、趋化素、瘦素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平;通过多因素逐步Logistic回归模型分析T2DM肥胖患者发生IR的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的效能;Pearson法分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR的相关性。结果 肥胖组miR-155相对表达量低于非肥胖组(P <0.05),miR-21、趋化素、瘦素、HOMA-IR高于非肥胖组(P <0.05)。IR组miR-155相对表达量低于非IR组(P <0.05),NC、WC、miR-21、趋化素、瘦素水平高于非IR组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:NC [O^R=1.416(95%CI:1.038,1.932)]、WC [O^R=1.227(95%CI:1.049,1.435)]、miR-155 [O^R=1.763(95%CI:1.205,2.579)]、miR-21[O^R=1.932(95%CI:1.356,2.753)]、趋化素[O^R=2.074(95%CI:1.492,2.883)]、瘦素[O^R=1.628(95%CI:1.246,2.127)]是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素(P <0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的曲线下面积分别为0.865、0.909、0.874和0.871;敏感性为77.8%(95%CI:0.614,0.825)、86.7%(95%CI:0.792,0.917)、95.6%(95%CI:0.713,0.965)和80.0%(95%CI:0.692,0.917);特异性为85.7%(95%CI:0.647,0.903)、82.1%(95%CI:0.732,0.914)、75.0%(95%CI:0.675,0.928)和89.3%(95%CI:0.656,0.944)。miR-155与HOMA-IR呈负相关(r=-0.573,P=0.000),miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR均呈正相关(r=0.531、0.558和0.568,均P=0.000)。结论 T2DM肥胖患者中IR较多,且miR-155、miR-21、趋化素、瘦素是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素。

血清microRNA-21、microRNA-193a-3p表达与结直肠癌患者手术预后的关系

目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访16个月,记录患者的预后生存结局,多因素逐步Logistic回归分析结直肠癌患者手术预后的影响因素,评估血清miR-21、miR-193a-3p对结直肠癌患者预后的预测效能。结果112例结直肠癌患者死亡22例,病死率为19.64%;生存90例,生存率为80.36%。死亡组术前血清miR-21 mRNA相对表达量、临床分期Ⅲ期占比、淋巴结转移率均高于生存组(P<0.05),血清miR-193a-3p m RNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期[OR=3.777(95%CI:1.399,10.194)]、淋巴结转移[OR=5.099(95%CI:1.715,15.156)]、miR-21表达升高[OR=4.889(95%CI:1.645,14.533)]、miR-193a-3p表达降低[OR=4.402(95%CI:1.481,13.084)]均是直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特性曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-193a-3p单一及联合预测结直肠癌预后的敏感性分别为69.04%(95%CI:0.487,0.813)、72.73%(95%CI:0.495,0.884)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为62.22%(95%CI:0.513,0.720)、68.89%(95%CI:0.581,0.780)、90.00%(95%CI:0.814,0.950),曲线下面积分别为0.782、0.731和0.901。结论结直肠癌患者术前miR-21、miR-193a-3p表达与术后预后密切相关,且在结直肠癌患者的预后结局中表现出良好的预测效能。

MicroRNA-21/PARP-1作为生物标志物在AR和CARAS中的诊断价值分析

目的:评估外周血microRNA(miR)-21、血浆聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]在过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)和过敏性鼻炎-哮喘综合征(combined allergic rhinitis and asthma syndrome,CARAS)中的诊断价值。方法:收集44例CARAS患者、31例AR患者和42例健康对照的外周血,采用RT-qPCR法检测外周血中miR-21的表达水平,采用ELISA法检测血浆中PARP-1蛋白水平。应用Pearson进行相关性分析。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线判断miR-21和PARP-1的诊断灵敏度与特异度。结果:CARAS组患者外周血miR-21的表达较健康对照组升高。AR组患者血浆PARP-1的水平较CARAS组和健康对照组升高。Pearson相关性分析结果显示,外周血miR-21的表达水平在AR患者中与嗜酸性粒细胞计数相关,在CARAS患者中与鼻呼出气一氧化氮(fractional nasal nitric oxide,FnNO)水平相关;血浆PARP-1在AR患者中与1秒钟用力呼气量占预计值百分比(forced expiratory volume in onesecond percent predicted,FEV_(1)%_(pred))相关,在CARAS患者中与FEV_(1)%_(pred)及1秒钟用力呼气量(forced expiratory volume in one second,FEV_(1))/用力肺活量(forced vital capacity,FVC)(FEV_(1)/FVC)相关。ROC曲线分析显示,外周血miR-21作为CARAS的诊断标志物时,灵敏度为51.35%,特异度为80.95%。血浆PARP-1作为AR的诊断标志物时,灵敏度为90.32%,特异度为54.76%。血浆PARP-1作为AR进展为CARAS的诊断标志物时,灵敏度为45.45%,特异度为90.32%。结论:AR和CARAS患者外周血miR-21、PARP-1存在差异表达,外周血miR-21可作为CARAS的诊断标志物,PARP-1可作为AR的诊断标志物及AR进展为CARAS的生物标志物。这对寻求AR和CARAS的诊治靶点有十分重要的价值。

基于microRNA-21响应的Zn^(2+)/DNA自组装体用于肿瘤的检测和氧化应激治疗

DNA材料具有的特异性、可编程性和生物相容性,使得其在生物检测和药物递送方面具有很大的应用优势。为了进一步拓展DNA材料的应用和合成方法,本文报道了利用DNA与金属离子之间的配合作用,简单高效地制备具有肿瘤标志物micro RNA-21(mi R-21)响应性的Zn^(2+)/DNA自组装纳米粒子(ZDNPs)。通过粒子中DNA发卡结构与mi R-21的特异性互补,激活荧光信号并释放Zn^(2+),导致细胞内产生大量活性氧,从而用于肿瘤的荧光成像和氧化应激治疗。合成的ZDNPs为形状均匀的球形粒子,能有效对Zn^(2+)进行装载。通过ZDNPs对mi R-21的响应性实验,验证了ZDNPs与miR-21浓度之间具有良好的线性响应荧光信号,线性响应范围在5~160 nmol/L,检测限为5 nmol/L,且具备特异性。此外,本文对ZDNPs在细胞内的作用效果也进行了研究,结果表明其能在肿瘤细胞内进行响应性的荧光成像,并能通过氧化应激途径介导肿瘤细胞凋亡。在活体的荧光成像和肿瘤治疗中,ZDNPs在肿瘤病灶部位体现出特异性和持续性的示踪能力,并且对肿瘤产生了明显的生长抑制效果。

MicroRNA-214调控骨关节炎软骨和软骨下骨代谢的机制

背景:microRNA-214(miR-214)在骨质疏松中的作用国内外已有相关报道,而miR-214与骨关节炎关节软骨及软骨下骨退变之间的相互关系尚不清楚。目的:探讨miR-214与小鼠膝骨关节炎软骨及软骨下骨退变之间存在的关系。方法:取30只C57BL/6J小鼠随机分组:①实验一:分为假手术组和内侧半月板失稳组(n=3),分别进行苏木精-伊红染色和荧光定量PCR检测miR-214基因的表达变化;②实验二:分为假手术组、内侧半月板失稳组、内侧半月板失稳+空载腺病毒组(空载组)、内侧半月板失稳+miR-214拮抗剂过表达腺病毒组(拮抗剂组)(n=6),术后4周各组分别取软骨组织,进行苏木精-伊红、番红O固绿、甲苯胺蓝染色分析;荧光定量PCR、Western blot检测关节软骨中相关因子的表达情况。结果与结论:①实验一中,苏木精-伊红染色结果显示,与假手术组相比,内侧半月板失稳组可见软骨退变;荧光定量PCR检测结果显示,所有样本均有miR-214表达,而内侧半月板失稳组软骨样本中miR-214的表达水平明显高于假手术组(P<0.05);②实验二中,苏木精-伊红染色、番红O固绿染色、甲苯胺蓝染色结果显示,拮抗剂组软骨退变程度低于内侧半月板失稳组;腺病毒验证PCR检测结果显示,空载组软骨中miR-214表达水平高于拮抗剂组(P<0.05);③实验二中,X射线片显示,内侧半月板失稳组和空载组呈典型骨关节炎影像学变化,拮抗剂组关节退行性病变程度相对较轻;Mirco-CT检测结果显示,拮抗剂组在注入miR-214拮抗剂后,骨小梁结构模型指数变小,各项数据整体好于内侧半月板失稳组及空载组;④实验二Western blot检测结果显示,内侧半月板失稳组、空载组软骨标本中软骨相关因子Ⅱ型胶原α1、性别决定区Y框转录因子9、Runt相关转录因子2、骨桥蛋白的相对表达水平低于假手术组及拮抗剂组(P<0.05);而金属基质蛋白酶13的相对表达水平在内侧半月板失稳组、空载组高于假手术组及拮抗剂组(P<0.05);⑤实验二荧光定量PCR检测结果显示,与假手术组比较,肿瘤坏死因子α和白细胞介素6 mRNA的相对表达量在内侧半月板失稳组、空载组中表达相对较高,拮抗剂组中表达相对较低(P<0.05);内侧半月板失稳组、空载组高于拮抗剂组(P<0.05);⑥结果表明,骨关节炎小鼠模型的关节软骨中miR-214表达水平明显升高,提示miR-214表达水平的升高与骨关节炎有密切联系;而在骨关节炎小鼠模型膝关节腔内注入miR-214拮抗剂,可以延缓关节软骨退化、促进软骨下骨重塑,改善骨关节炎进展。

MicroRNA-21在肝细胞癌中的作用机制研究

肝细胞癌(HCC)是最常见的恶性肿瘤之一,也是全球癌症相关死亡的第二大原因[1]。HCC是世界上发病率高、死亡率高的原发性肝癌组织学类型之一,占到90%以上[2]。早期诊断的HCC患者手术治疗后预后良好,5年整体生存率可达50%~74%,然而大多数患者在发现时已为中晚期患者,整体生存率不到10%[3,4]。因此,早期积极诊断和治疗对提高HCC患者生存率具有重要的意义。

MicroRNA-218、microRNA-193b在宫颈癌组织中的表达及与化疗耐药性的关系

目的 探讨microRNA-218(miR-218)、microRNA-193b(miR-193b)在宫颈癌组织中的表达及其与化疗耐药性的关系。方法 选取2018年1月-2023年1月成都医学院第一附属医院收治的101例行手术治疗的宫颈癌患者。患者均行紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂药物敏感性试验,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-218、miR-193b表达情况。比较癌组织、癌旁组织中miR-218、miR-193b表达情况,统计化疗药物耐药情况,分析宫颈癌组织中miR-218、miR-193b的表达与化疗耐药性的关系。结果 癌组织中miR-218相对表达量低于癌旁组织(P <0.05),miR-193b相对表达量高于癌旁组织(P <0.05)。宫颈癌患者行体外化疗药物紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂的耐药率分别为38.61%、46.53%、48.51%、26.73%和40.59%。宫颈鳞癌与宫颈腺癌患者对体外化疗药物紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂耐药率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。耐药患者癌组织中miR-218相对表达量均低于敏感患者,miR-193b相对表达量均高于敏感患者(P <0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,miR-218、miR-193b及两者联合预测宫颈癌患者化疗耐药性的敏感性分别为74.51%(95%CI:0.601,0.852)、70.59%(95%CI:0.560,0.821)、82.35%(95%CI:0.686,0.911),特异性分别为74.00%(95%CI:0.594,0.849)、78.00%(95%CI:0.637,0.880)、90.00%(95%CI:0.774,0.963),曲线下面积分别为0.754(95%CI:0.661,0.847)、0.743(95%CI:0.643,0.843)、0.890(95%CI:0.824,0.956)。结论 宫颈癌组织中miR-218表达低于癌旁组织、miR-193b表达高于癌旁组织,miR-218、miR-193b的表达水平与宫颈癌患者化疗耐药性有关,两者联合预测宫颈癌患者化疗耐药性效能良好。

microRNA-21与PDCD5表达交互作用及其对老年非小细胞肺癌患者化疗效果的评估

目的分析microRNA-21与程序性细胞死亡因子(PDCD)5表达的交互作用及其对老年非小细胞肺癌患者化疗疗效的影响。方法回顾性分析老年非小细胞肺癌化疗患者100例的临床资料,均采用顺铂联合吉西他滨化疗方案,对比化疗前后microRNA-21与PDCD5表达水平,分析二者与患者病理特征指标的关系。按照化疗疗效将患者分为有效组及无效组,分析microRNA-21、PDCD5与化疗疗效的关系。结果有效组与无效组化疗前microRNA-21与PDCD5表达水平差异无统计学意义(P>0.05),化疗后两组均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄、病理类型microRNA-21与PDCD5的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。有吸烟史者、分化程度为低分化者、TNM分期为Ⅳ期者、存在淋巴结转移者mi-croRNA-21表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。分化程度为低分化者、TNM分期为Ⅳ期者、存在淋巴结转移者PD-CD5表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论microRNA-21与PDCD5在老年肺癌患者中呈较高表达水平,且均与患者肿瘤病理特征及化疗疗效具有密切关系。

microRNA-21调节Wnt/β-catenin信号通路防治骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症作为老年骨科中的一种代谢性及慢性疾病,主要表现为骨密度降低及骨骼脆性增加。microRNA-21作为最为密切的骨质疏松症相关微小因子,能够发挥调节作用进而抑制骨质疏松症的进展。Wnt/β-catenin信号通路作为与骨质疏松症相关的经典信号通路,对延缓骨质疏松症的进展具有重要的作用。microRNA-21通过调节该信号通路的表达,进而防治骨质疏松症的进展。该文就microRNA-21与该信号通路的相关性及在防治骨质疏松症方面的作用进行综述,以期从微小分子方面探讨新的防治骨质疏松症的途径,为骨质疏松症的研究提供更多的理论依据。

血清TGF-β_(1)、INF-ε及microRNA-21在宫颈癌及癌前病变中的表达变化及与HPV感染的相关性

目的分析血清转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、人干扰素epsilon(INF-ε)及microRNA-21在宫颈癌及癌前病变中的表达变化及与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染负荷量的相关性。方法选择医院2020年1月~2021年1月诊治的宫颈癌和宫颈癌前病变患者各80例,将其分别纳入宫颈癌组、癌前病变组。按照1∶1原则在同期选择体检健康的女性80例,将其纳入对照组。检测血清TGF-β_(1)、INF-ε及microRNA-21水平及HPV感染情况。比较三组血清TGF-β_(1)、INF-ε及microRNA-21水平及不同HPV阳性情况。分析血清TGF-β_(1)、INF-ε及microRNA-21水平与HPV负荷量相关性。结果对照组、宫颈癌前病变组、宫颈癌组血清TGF-β_(1)、INF-ε及microRNA-21水平比较差异均有统计学意义(P<0.05);其中宫颈癌患者血清TGF-β_(1)、microRNA-21水平分别高于宫颈癌前病变组、对照组(P<0.05),INF-ε水平分别低于宫颈癌前病变组、对照组(P<0.05);宫颈癌前病变组血清TGF-β_(1)、microRNA-21水平高于对照组(P<0.05),INF-ε水平低于对照组(P<0.05)。三组HPV阳性率差异比较有统计学意义(P<0.05)。HPV负荷量1~100组、101~1000组、>1000组患者血清TGF-β_(1)、INF-ε及microRNA-21水平差异比较有统计学意义(P<0.05)。其中宫颈癌HPV负荷量>1000组患者血清TGF-β_(1)、microRNA-21水平分别高于1~100组、101~1000组(P<0.05),INF-ε水平分别低于1~100组、101~1000组(P<0.05);101~1000组血清TGF-β_(1)、microRNA-21水平高于1~100组(P<0.05),INF-ε水平低于1~100组(P<0.05)。TGF-β_(1)、microRNA-21水平与HPV负荷量呈正相关(P<0.05),INF-ε水平与HPV负荷量呈负相关(P<0.05)。结论宫颈癌及癌前病变患者的血清TGF-β_(1)、INF-ε及microRNA-21水平不同,其中宫颈癌患者血清TGF-β_(1)、microRNA-21水平相对较高,INF-ε水平较低,且与HPV感染负荷量关系密切。

糖通饮靶向microRNA-21调控Smad7、PTEN抑制糖尿病肾病肾纤维化

目的:探讨糖通饮抑制糖尿病肾病肾纤维化的作用机制。方法:60只SD大鼠中随机选取10只作为正常对照组,其余采用高糖高脂饲料喂养联合STZ多次小剂量腹腔注射制备糖尿病肾病(DKD)大鼠模型,将造模成功的DKD大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦(13.5 mg/kg)阳性对照组及糖通饮低(6.21 g/kg)、中(12.42 g/kg)、高(24.84 g/kg)剂量组,每组10只,灌胃给药,1次/d,共8 w。检测各组大鼠FBG、24 h尿mAlb;HE及Masson染色观察大鼠肾组织病理学变化;Western Blot检测大鼠肾组织Smad7、PTEN、E-cadherin、FN、Vimentin、α-SMA蛋白表达;RT-PCR检测大鼠肾组织Smad7、PTEN、FN、Vimentin α-SMA、E-cadherin mRNA及miRNA-21表达。体外实验对高糖状态下HBZY-1细胞进行miRNA-21过表达慢病毒转染并予糖通饮含药血清进行干预,Western Blot法检测细胞Smad7、PTEN、α-SMA蛋白表达,RT-PCR法检测细胞miR-21、Smad7、PTEN、α-SMA mRNA表达。结果:体内实验结果显示,与模型组比较,糖通饮能显著降低DKD大鼠肾组织FN、Vimentin、α-SMA mRNA及蛋白表达,显著升高Smad7、PTEN、E-cadherin mRNA及蛋白表达,显著降低miRNA-21表达及FBG、24h尿mAlb水平(P<0.05),改善DKD大鼠肾组织病理学变化。体外实验结果显示,经miRNA-21过表达慢病毒转染后,高糖状态下HBZY-1细胞中Smad7、PTEN mRNA及蛋白表达显著降低,α-SMA mRNA及蛋白表达显著升高,糖通饮可使HBZY-1细胞中miRNA-21表达显著降低,Smad7、PTEN mRNA及蛋白表达显著升高,α-SMA mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:miRNA-21是糖通饮防治DKD的靶点之一,糖通饮可通过作用于miRNA-21进而良性调节其靶标Smad7、PTEN的表达,抑制糖尿病肾病肾纤维化。

ZnO@Au的制备及在免分离荧光测定microRNA-21中的应用

本论文利用水热法与原位生长策略,在FTO表面制备了多孔ZnO@Au复合纳米材料,并在其表面修饰捕获探针以特异性识别肿瘤标志物microRNA-21。借助于外切酶ExoⅢ对双链的剪切作用,吸附有目标RNA的捕获探针被剪切从而释放出荧光基团,造成荧光信号的显著增强,以此实现microRNA-21的荧光传感。结果表明,所制备的ZnO@Au复合材料及传感策略有效地避免了荧光分析中分离步骤可能出现的假阳性现象,在1 nM-500 nM浓度范围内具有良好的线性关系,检测限低至1 nM。

妊娠糖尿病患者血清microRNA-21调节Bcl-2/Caspase-9对滋养层细胞生物学行为的影响

目的探讨妊娠糖尿病(GDM)患者血清microRNA-21(miR-21)表达变化及其对滋养层细胞生物学行为的作用机制。方法选取2019年1月—2020年10月三亚市妇幼保健院收治的66例GDM孕妇及同期体检且孕周相近的38例健康孕妇作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清miR-21mRNA表达水平,microRNA转染JAR细胞系构建Control、miR-21 NC、miR-21、miR-21 inhibitor NC和miR-21 inhibitor组细胞。采用CCK-8法检测细胞活力,Brdu检测细胞增殖,Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭,TUNEL法检测细胞凋亡;采用Western blotting检测Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase 9、E-cadherin及Vimentin蛋白表达。结果研究组患者miR-21 mRNA相对表达量及FPG、HbA1c水平较对照组高(P<0.05)。miR-21组细胞miR-21 mRNA相对表达量高于Control组(P<0.05),miR-21 inhibitor组细胞mRNA相对表达量低于Control组(P<0.05)。CCK-8法检测结果显示,miR-21组细胞活力较Control组下调(P<0.05),miR-21inhibitor组细胞活力较Control组上升(P<0.05)。miR-21组细胞增殖能力较Control组减弱(P<0.05),miR-21 inhibitor组细胞增殖能力较Control组增强(P<0.05)。miR-21组细胞凋亡率较Control组升高(P<0.05),miR-21 inhibitor组细胞凋亡率较Control组降低(P<0.05)。miR-21组的穿膜细胞数低于Control组(P<0.05),miR-21 inhibitor组的穿膜细胞数高于Control组(P<0.05)。相较于Control组,miR-21组E-cadherin表达上调,Vimentin表达下调(P<0.05),miR-21 inhibitor组E-cadherin表达下调,Vimentin表达上调(P<0.05)。相较于Control组,miR-21组Cleaved Caspased-9、Bax蛋白相对表达量上升,Bcl-2蛋白相对表达量下降(P<0.05);miR-21 inhibitor组Caspased-9、Bax蛋白相对表达量下降,Bcl-2蛋白相对表达量上升(P<0.05)。结论GDM孕妇存在miR-21高表达,miR-21可通过调节Bcl-2/Caspase-9介导对滋养层细胞增殖、侵袭的抑制作用,继而促进细胞凋亡。

肿瘤抑制因子microRNA-218对前列腺癌细胞恶性进展及肿瘤干细胞特性的调控作用

目的 探究miRNA-218(miR-218)在调节前列腺癌(PCa)细胞干性以及上皮-间质转化(EMT)方面的作用。方法 通过慢病毒转染构建稳定过表达miR-218的前列腺癌细胞系,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测前列腺癌细胞中miR-218的表达;Transwell迁移实验检测不同组细胞迁移能力;Western blot检测各组细胞中EMT相关蛋白的表达;集落形成和肿瘤成球实验检测不同组别肿瘤干细胞特征。结果 qPCR结果显示,miR-218的表达水平在前列腺癌细胞系LNCaP和C4-2中较BPH-1显著下调;Transwell迁移实验结果表明,miR-218可抑制前列腺癌细胞的迁移作用;Western blot结果显示,过表达miR-218后,EMT相关蛋白表达受到抑制;在集落形成和肿瘤成球实验中,过表达miR-218可显著抑制前列腺癌细胞的干性特征。结论 miR-218在PCa细胞系中表达下调,且能抑制PCa细胞迁移、EMT和肿瘤干细胞特性。

MicroRNA-21靶向PDCD4调控JNK/c-Jun信号通路促进胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探究MicroRNA-21 (miR-21)通过靶向PDCD4调控JNK/c-Jun信号通路对胶质瘤细胞的增殖和迁移的影响。方法 采用qRT-PCR和Western blot分别检测胶质瘤及瘤旁组织标本、人脑正常胶质细胞HEB、胶质瘤细胞U251、U87中miR-21和PDCD4的表达水平;将miR-21 inhibitor、inhibitor-NC、miR-21 mimics组、miR-NC组、PDCD4 siRNA、siRNA-NC分别转染至U87细胞中,记为miR-21 inhibitor组、inhibitor NC组、PDCD4 siRNA组和siRNA-NC组;将inhibitor-NC与siRNA-NC共转染至U87细胞,记为inhibitor NC+siRNA NC组;将miR-21 inhibitor分别与siRNA NC组和DCD4 siRNA组共转染,记为miR-21 inhibitor+siRNA-NC组、miR-21 inhibitor+PDCD4 siRNA组。采用qRT-PCR检测转染后细胞miR-21和PDCD4的表达;CCK-8检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证miR-21与PDCD4的靶向关系;Western blotting检测细胞p-JNK1/2、JNK1/2、p-cJun和c-Jun的蛋白表达量。结果 与癌旁组织和人脑正常胶质细胞HEB比较,miR-21在胶质瘤组织和U251、U87细胞中表达量显著升高(P<0.05),PDCD4表达水平显著降低(P<0.05);与Control组和miR-NC组比较,miR-21 inhibitor组miR-21表达和细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05),p-ERK1/2和p-c-Jun蛋白水平显著降低(P<0.05);与Control组和si-NC组比较,PDCD4 siRNA组PDCD4表达显著下降、细胞增殖、迁移和侵袭能力显著升高(P<0.05),p-ERK和p-c-Jun蛋白水平显著升高(P<0.05)。双荧光素报告实验结果表明,miR-21可调控PDCD4表达。此外,与Control组和miR-21 inhibitor+siRNA NC组比较,miR-21 inhibitor+PDCD4 siRNA组细胞PDCD4表达显著升高,细胞增殖、迁移和侵袭能力显著增加(P <0.05),p-ERK1/2和p-c-Jun蛋白水平显著升高(P <0.05)。结论 在胶质瘤细胞中,MicroRNA-21通过靶向PDCD4调控JNK/c-Jun信号通路影响细胞增殖、迁移和侵袭能力。

胃癌患者血清肿瘤标志物检测及其与microRNA-21调控JAK/STAT3信号通路的关系研究

目的:分析胃癌患者血清肿瘤标志物检测情况,并探讨microRNA-21调控胃癌细胞Janus激酶/信号转导与转录激活因子3(JAK/STAT3)信号通路的关系。方法:选择67例胃癌患者作为胃癌组,另选取67例体检健康者作为对照组,检测两组糖链抗原(Carbohydrate antigen,CA)72-4和人胃癌相关抗原(MGAg)含量。胃癌CRL-5822细胞株分为三组-microRNA-21组、microRNA-NC组与空白组。microRNA-21组、microRNA-NC组与空白组分别转染200ng/mL microRNA-21 mimic、200 ng/mL miR-NC与磷酸盐缓冲液,观察三组转染后不同时间点的细胞增殖指数、细胞凋亡指数、细胞迁移与侵袭指数以及JAK蛋白与STAT3蛋白相对表达水平。结果:胃癌组的血清CA72-4和MGAg含量、阳性率都高于对照组(P<0.05)。转染后24h与36h,microRNA-21组的microRNA-21相对表达量、细胞增殖指数、细胞迁移与侵袭指数高于空白组和microRNA-NC组(P<0.05)。转染后24h与36 h,microRNA-21组的细胞凋亡指数高于空白组和microRNA-NC组(P<0.05)。转染后24h与36h,microRNA-21组的JAK蛋白与STAT3蛋白相对表达水平都低于空白组和microRNA-NC组(P<0.05)。结论:胃癌患者多伴随有血清CA72-4和MGAg的高表达,提高microRNA-21的表达能促进胃癌细胞凋亡,抑制JAK/STAT3信号通路的激活,从而抑制胃癌细胞侵袭、迁移、增殖。

血microRNA-214表达水平与窒息新生儿神经系统预后的初步研究

目的初步探讨microRNA-214(miR-214)表达水平与窒息新生儿神经预后的相关性。方法选取深圳市龙华区人民医院2021年3月~2022年3月出生窒息的新生儿30例(观察组)和同期出生的正常新生儿30例(对照组)作为研究对象,比较两组脐带血及出生后第3、7天的血清miR-214表达水平及出生后第3、7天行为神经测定(Behavioral neural measurement,NBNA)评分,采用Pearson法分析血清miR-214水平与NBNA评分相关性,使用二元Logistic回归分析确定影响因素,ROC曲线评估miR-214水平对新生儿窒息的诊断价值。结果与对照组比较,观察组患儿脐带血及出生后第3、7天的血清miR-214表达水平及NBNA评分降低,差异具有统计学意义(P<0.05);Pearson分析结果显示,miR-214水平与NBNA评分呈显著正相关(P<0.05);miR-214水平与NBNA评分是窒息新生儿神经预后的影响因素(P<0.05);miR-214水平鉴别新生儿窒息的曲线下面积(Area under the curve,AUC)为0.839(95%CI:0.732~0.946),敏感度和特异性分别为90%和73.3%。结论窒息新生儿血清miR-214水平降低,与NBNA评分呈正相关,可较好地反映窒息新生儿神经预后情况。

白藜芦醇苷通过抑制microRNA-21表达抑制肝癌细胞增殖和迁移

原发性肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一,目前仍在寻找有效的治疗手段.白藜芦醇苷可抑制肺癌细胞以及大肠癌细胞的增殖,但其在肝癌中的作用及具体作用机制并不清楚.本文探讨白藜芦醇苷对大鼠肝癌是否具有预防作用,及其对肝癌细胞系增殖和侵袭的影响.构建大鼠原发性肝癌模型,将其分为正常组、模型组及白藜芦醇苷预防组.病理检测结果显示,与模型组相比,白藜芦醇苷预防组的肝癌发生率明显降低.检测肝组织中microRNA-21表达情况,结果显示,白藜芦醇苷预防组肝中microRNA-21表达明显降低,并且microRNA-21的靶基因PTEN表达上调.在肝癌细胞系SMMC7721和Hep G2中加入白藜芦醇苷,细胞增殖及侵袭能力明显下降,同时伴随microRNA-21表达降低,PTEN表达升高.这提示,白藜芦醇苷可能通过抑制microRNA-21的表达,抑制肝癌的发生,本文结果为预防原发性肝癌提供了新的理论依据,但其临床疗效还需要进一步验证.

通窍化瘀醒神汤联合奥拉西坦对重度颅脑损伤患者血清NSE、microRNA-210的影响分析

【目的】分析通窍化瘀醒神汤联合奥拉西坦对重度颅脑损伤(severe traumatic brain injury,sTBI)患者疗效及血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、microRNA-210(miRNA-210)水平的影响。【方法】回顾性收集2020年1月至2022年1月在河南省南阳南石医院住院的78例sTBI患者,根据治疗方法的不同将患者分为观察组和对照组,每组各39例。2组患者均给予西医基础治疗,对照组同时给予奥拉西坦治疗,观察组在对照组的基础上联合通窍化瘀醒神汤治疗,疗程为2周。观察2组患者治疗前和治疗3 d、7 d、14 d后美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、格拉斯哥昏迷指数(GCS)评分、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、NSE、miRNA-210水平的变化情况,并比较2组患者的临床疗效、并发症总发生率和不良反应总发生率。【结果】(1)治疗2周后,观察组的总有效率为92.31%(36/39),对照组为69.23%(27/39),组间比较,观察组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)治疗3 d后,2组患者的NIHSS评分和GCS评分均无明显变化(P>0.05);治疗7 d和14 d后,2组患者的NIHSS评分均较治疗前明显降低(P<0.05),GCS评分均较治疗前明显升高(P<0.05),且观察组在治疗7 d、14 d后对NIHSS评分的降低作用及对GCS评分的升高作用均明显优于对照组(P<0.01)。(3)观察组治疗3 d、7 d、14 d后和对照组治疗7 d、14 d后的血清TNF-α、IL-6、NSE水平均较治疗前明显降低(P<0.05),血清miRNA-210水平均较治疗前明显升高(P<0.05),且观察组在治疗3 d、7 d、14 d后对血清TNF-α、IL-6、NSE水平的降低作用及对血清miRNA-210水平的升高作用均明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。(4)观察组的并发症总发生率为2.56%(1/39),明显低于对照组的17.95%(7/39),差异有统计学意义(P<0.05)。(5)观察组的不良反应总发生率为7.69%(3/39),对照组为10.26%(4/39),组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】通窍化瘀醒神汤联合奥拉西坦可有效减轻sTBI患者神经功能受损程度和昏迷程度,降低并发症发生率,并且中西医结合治疗并未增加不良反应,具有一定的安全性。