微小RNA-494过表达与RNA干扰抑制Survivin基因对前列腺癌移植瘤生长的比较

目的比较过表达微小RNA（microRNA）-494与采用RNA干扰抑制前列腺癌PC．3细胞中Survivin基因的表达，对前列腺癌移植瘤生长的影响。方法将过表达mieroRNA-494的腺病毒载体Ad494及负载Survivin短发卡RNA（shRNA）腺病毒载体Ad-sur分别或联合感染PC-3细胞后，将相应PC-3细胞接种于裸鼠右前肢皮下，建立前列腺癌移植瘤模型。并以磷酸盐缓冲液（PBS）组及空载体组（Ad-GFP）作为对照。动态测量肿瘤体积。55d后处死各组裸鼠，瘤体称重计算抑瘤率。Westernblot检测肿瘤组织中Survivin表达变化。免疫组织化学测定Survivin、B淋巴细胞／白血病-2（bcl-2）、bcl-2相关x蛋白（bax）及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3表达变化。结果Ad-sur组、Ad-494组、Ad-sur＋Ad-494组裸鼠前列腺癌移植瘤的生长明显被抑制。第35天时即表现差异。其中Ad-sur＋Ad-494组瘤体积最小，为（40．69±0．69）mm3，Ad-sur、Ad-494组瘤体体积分别为（102．11±5．32）mm3、（99．03±3．50）mm3，3组肿瘤体积均明显小于PBS组（572．72±10．46）mm3、Ad．GFP组（544．85±10．28）mm3（P〈0．05）。但Ad-sur组与Ad_494组间瘤体大小差异无统计学意义（P〉0．05）。55d后，Ad-sur、Ad-494、Ad-sur＋Ad-494组对移植瘤抑制率分别64．62％、65．98％、86．67％，Ad-sur＋Ad-494组具有抑瘤增效的相加作用（Q=0．99）。同对照组比较，实验各组的Survivin基因均表达下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。其中，Ad-494组与Ad-sur组间差异无统计学意义（P〉0．05），Ad．sur＋Ad-494组较Ad-494、Ad-sur组更为显著；实验各组中的bax、Caspase-3表达上调，bcl-2表达下调，且Ad-sur＋Ad-494组效果优于Ad-sur、Ad-494组。结论过表达microRNA-494与RNA干扰方法均可抑制前列腺癌裸鼠移植瘤Survivin基因表达，从而抑制移植瘤的生长，且两者联合效果更加显著。