宫颈癌前病变患者阴道微生物群落的构成研究

目的 探讨妇女阴道微生物群落构成与宫颈癌前病变的关系.方法 采集2014年7月至2015 年7月于中南大学湘雅二医院就诊的22名健康女性（对照）及宫颈上皮内瘤变Ⅰ级（CINⅠ）患者18例和宫颈上皮内瘤变Ⅱ/Ⅲ级（CINⅡ/Ⅲ）患者24例的阴道分泌物,分别对每份标本进行细菌基因组DNA提取、16S rRNA V3、V4区基因扩增及采用高通量测序技术对扩增的PCR产物进行测序等步骤,再采用Uparse软件、Mothur分析流程和LefSe统计软件,分析阴道微生物群落物种丰度和结构,并对各组女性的阴道微生物群落构成进行比较.结果 CINⅡ/Ⅲ组标本的Alpha多样性指标（Chao：63±32;ACE：72±38;辛普森指数：0.70±0.27;香农指数：0.70±0.63）与对照组（Chao：48±24;ACE：54±25;辛普森指数：0.71±0.27;香农指数：0.65±0.58）比较,差异均无统计学意义（W=192,P=0.11;W=189,P=0.10;W=281,P=0.72;W=241,P=0.62）;CINⅠ组样本的ACE值（85±37）和Chao值（66±25）与对照组（ACE：54±25;Chao：48±24）比较,差异有统计学意义（W=99,P=0.006;W=113,P=0.02）.在门水平,对照组中阴道菌群78.69%（309 020/392 722）由厚壁菌门组成,放线菌门占16%（62 846/392 722）.CINⅠ组中厚壁菌门减少至64.86%（208 422/321 318）,放线菌门增加至27.71%（89 040/321 318）.CINⅡ/Ⅲ组阴道菌群构成和对照组相似.在属水平,CINⅡ/Ⅲ组和对照组菌群结构相似,以乳酸杆菌为优势菌属[71.81%（307 658/418 424）],同时还包括加德纳菌属[12.91%（55 299/428 424）],其他如普雷沃菌属、奇异菌属等含量较少.在CINⅠ组中,乳酸杆菌属含量下降[56.26%（180 787/321 318）],加德纳菌属相对丰度上升[19.62%（63 057/321 318）],奇异菌属含量上升[7.7%（24 746/321 318）].本研究发现大部分样本阴道菌群类型（CST）为CSTⅢ、CSTⅠ,分别以惰性乳杆菌、卷曲乳杆菌为优势菌.3组间阴道菌群类型差异无统计学意义（χ2=2.72, P=0.949）.LEfSe分析发现CIN组和对照组中某些细菌类群丰度发生变化.在属水平,地杆菌属、奇异菌属、脲原体属等丰度差异有统计学意义（P〈0.05;P〈0.05;P〈0.01）.在种水平,血清9型解脲脲原体丰度差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 不同级别CIN患者阴道菌群多样性及菌群类型与健康妇女相似,但部分细菌类群丰度发生了改变;解脲脲原体等条件致病菌在CIN患者丰度增加.