外泌体检测在骨肿瘤诊疗中的研究进展

体液检查已成为肿瘤研究领域的重要方向。来源于母体肿瘤细胞的外泌体含有mRNA、miRNA及其他基因组蛋白。这些基因组蛋白具备母体肿瘤的特异性,在肿瘤的发现、诊断以及治疗方面起到了重要作用。该文对外泌体检测在骨肿瘤诊疗中的研究进展作一综述。

miRNA与肿瘤转移调控机制的研究进展

转移是恶性肿瘤的基本特征和重要标志,也是癌症患者治疗失败或死亡的首要原因。微小核糖核酸[micro ribonucleic acid(microRNA,miRNA)]是一类具有调控功能的非编码RNA片段,通过调控下游靶基因的转录和翻译,在肿瘤发生发展过程中发挥重要作用。miRNA参与恶性肿瘤侵袭及转移生物学行为中的多个重要环节,阐明肿瘤转移相关miRNA的转移调控机制,将为我们认识肿瘤发生发展提供新视角,给癌症的诊断和治疗带来新突破。该文对miRNA与肿瘤转移调控机制的研究进展进行综述。

miRNA在非小细胞肺癌诊断及靶向治疗中作用的研究进展

非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）是病死率最高的恶性肿瘤。微小核糖核酸（micro-ribonucleic acid,miRNA）是一种由18-23个碱基组成的非编码单链小分子RNA,其独特的生物学特性可能使之成为NSCLC的分子诊断和治疗新靶点。该文就miRNA在NSCLC诊断与治疗中的研究概况进行综述。

miRNA在银屑病发病机制及治疗作用中的研究进展

银屑病是一种由免疫因素介导的常见慢性、复发性、炎症性疾病。目前,其病因及发病机制尚未明确。随着科学技术的进步,研究发现微小RNA(miRNA)在免疫系统的发育和调节及银屑病发病机制中均起重要作用。该文对参与银屑病发病机制的miRNA的各种研究结果及miRNA对银屑病的治疗作用的研究进展进行综述。

lncRNA HULC对肝癌细胞miRNA差异表达谱及ceRNA调控网络的影响

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)对肝癌细胞微小RNA(miRNA)差异表达谱及竞争内源性RNA(ceRNA)调控网络的影响。方法选取人肝癌细胞系BEL-7402,瞬时转染HULC siRNA以降低lncRNA HULC的表达。通过高通量测序选取表达具有差异的miRNA,并通过实时荧光定量PCR进行验证。基于参考基因组,预测新miRNA。通过基因富集分析及ceRNA调控网络,研究这些基因的潜在功能。结果经敲低lncRNA HULC表达后,通过高通量测序挑选出了9个表达差异显著的miRNA。5个miRNA表达下调,4个miRNA表达上调。通过miRDeep2打分,挑选出了15个分值较高的新miRNA。基因富集分析结果显示,表达下调的miRNA的靶基因的分子功能与丝氨酸tRNA连接酶活性、蛋白激酶活性、阳离子通道活性、钙转运ATP酶活性等有关;表达上调的miRNA的靶基因与硒代半胱氨酸裂解酶活性、过氧化物酶体机制靶向信号1结合、过氧化物酶体靶向序列结合、蛋白质N-末端结合、肿瘤坏死因子受体超家族结合等有关。miRNA-靶基因互作网络、显著富集功能-功能互作网络揭示靶基因与miRNA的关联性以及功能间的相关性。结论在肝癌细胞系BEL-7402中lncRNA HULC具有调节多个表达差异的miRNA的作用,通过ceRNA调控网络模式,影响肝癌的发生、发展。

唾液miRNA-144miRNA-21联合检测对食管癌的诊断价值

目的探讨唾液中miRNA-144、miRNA-21的表达水平及其联合检测对食管癌的诊断价值。方法选择2015年1月至2019年5月暨南大学附属广州市红十字会医院心胸外科收治的食管癌患者85例(病例组),均经病理活检与免疫组化检查确诊;另选择同期健康志愿者32名(对照组),两组年龄均>60岁。采用聚合酶链式反应(PCR)检测两组唾液的miRNA-144、miRNA-21表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线法评估两者对食管癌的诊断价值。结果病例组唾液中miRNA-144、miRNA-21的表达水平显著高于对照组(P<0.05),且与病理分期具有相关性(P<0.05)。ROC分析结果显示,唾液中miRNA-21诊断食管癌的曲线下面积为0.785,miRNA-144为0.777,具有诊断价值,且联合两个指标进行检测可进一步提高诊断效能(曲线下面积为0.851)。结论食管癌患者唾液中的miRNA-144、miRNA-21呈高表达,联合两者检测具有应用于食管癌筛查诊断的前景。

小鼠肾脏缺血-再灌注损伤miRNAs差异表达谱研究

目的筛选小鼠肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)差异性表达的微小核糖核酸(miRNAs),为进一步深入阐明肾脏IRI发生、发展的分子机制奠定基础。方法应用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉制备急性肾缺血损伤模型,将15只小鼠分为IRI组和假手术组(E组),IRI组再分为A组(缺血时间45 min,再灌注时间24 h)、B组(缺血时间25 min,再灌注时间24 h)、C组(缺血时间45 min,再灌注时间4 h)、D组(缺血时间25 min,再灌注时间4 h),每组3只。采用肾脏组织形态学改变和肾功能评估结果来鉴定各组小鼠的IRI程度;采用miRNAs芯片聚类分析对小鼠IRI特定缺血时间(25、45 min)和再灌注时间(4、24 h)下肾脏差异性表达差异表达的miRNAs进行筛选鉴定;采用实时定量逆转录聚合酶链反应(q RT-PCR)对小鼠IRI后差异表达miRNAs芯片miR-695与miR-145进行验证。结果肾脏组织形态学改变和肾功能评估结果显示成功建立IRI模型。与假手术组相比,肾脏IRI组共检出71种差异性表达显著的miRNAs,其中30种下调表达,41种上调表达。q RT-PCR法检测结果表明,以E组特定miRNAs的表达量标准化为1,miR-695及miR-145在肾脏IRI组的相对表达量分别为11.82和0.31(均为P<0.05),与芯片结果基本一致。结论肾脏IRI后,miRNAs表达谱发生差异性改变,这些差异性表达的miRNAs将可作为肾脏IRI的分子标志物而具有潜在的临床及科研应用价值。

microRNA与结直肠癌转移的相关性研究进展

结直肠癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤,严重危害人们的健康和生活质量。结直肠癌的发生发展是一个多因素、多步骤的过程。microRNA(miRNA)是一类近年发现的内源性、非编码单链小分子RNA,它在细胞增殖、分化、凋亡以及肿瘤发生发展等过程中发挥着重要作用。目前许多miRNA已被证实在结直肠癌进程中起着至关重要的作用。该文就miRNA在结直肠癌转移中所起的作用作一综述。

液体活检在乳腺癌诊疗中的研究进展

液体活检作为乳腺癌诊疗的新兴技术,主要通过无创或微创的方式对患者的血液、尿液、唾液等体液取样,检测癌性标志物用以诊断、预后评估及随访。液体活检技术对于乳腺癌的早期诊断、个体化治疗、改善预后具有重要的临床意义。该文从循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA、微小RNA等方面对液体活检在乳腺癌中的研究进展作一综述。

微小RNA在力相关牙周炎症反应和组织改建中的作用

微小核糖核酸(micro-ribonucleic acid,miRNA)是一种非编码单链RNA分子,可通过抑制靶基因mRNA的翻译来调控生物体遗传信息表达,参与体内多种生物学过程的发生发展。miRNA在机械力诱导机体产生的炎症性疾病和组织改建中发挥着重要作用。牙周组织中机械力敏感细胞可在力作用下导致牙周组织炎症反应、组织改建等病理/生理性变化,在这一过程中miRNA可能通过抑制这些细胞中特定基因的翻译,对力相关牙周炎症和组织改建的发生发展起到重要的调控作用。对miRNA在力相关炎症反应和组织改建,尤其是牙周炎症反应和组织改建中的作用展开综述。

莱茵衣藻CrDRBs基因的克隆和生物信息学分析

双链核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)结合蛋白(double-stranded RNA-binding protein,DRB)是一类含有双链RNA结合结构域(dsRBD)的蛋白,在小核糖核酸(micro ribonucleic acid,microRNA或miRNA)的生物合成和作用方式选择方面起着重要作用.为获得莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii,C. reinhardtii)中所有CrDRBs的全长序列并进行生物信息学分析,从蛋白质功能结构域Pfam数据库中下载了dsRBD结构域模块,使用HMMER软件基于dsRBD检索C. reinhardtii全基因组序列,获得C. reinhardtii中4个含dsRBD结构域的CrDRB蛋白相关信息.抽提C. reinhardtii总RNA,反转录获得其cDNA,设计相应引物克隆获得其完整的基因ORF序列.设计实时荧光定量PCR引物,以actin基因为内参,分析C. reinhardtii各CrDRBs基因的相对表达.同源比对分析C. reinhardtii各CrDRBs蛋白的dsRBD序列.通过Phyre2软件在线预测其dsRBD的高级结构.将莱茵衣藻CrDRBs的dsRBD与拟南芥的5个DRB成员构建系统进化树分析,初步探讨分析莱茵衣藻CrDRBs各成员的的进化保守性.本研究共获得了4个莱茵衣藻双链RNA结合蛋白,均具有典型的dsRBD结构域,含有3个保守氨基酸.相比已报道的DUS16,其他3个CrDRBs的CDS序列较长,基因表达较高(除CrDRB2外).本研究为下一步揭示莱茵衣藻CrDRB在miRNA调控途径的功能奠定基础.

Snai1 miRNA干扰质粒构建及胃癌细胞系稳定株筛选

目的:设计并构建针对Snai1的微小干扰核糖核酸(miRNA),最终鉴定出有效干扰质粒并筛选稳定转染的胃癌细胞株SGC-7901。方法:设计并构建4对Snai1的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR microRNA及1对无效对照microRNA干扰质粒。将干扰质粒用罗氏BD转染试剂转染胃癌细胞株SGC-7901,通过倒置荧光显微镜观察绿色荧光确定转染效率。分别用不同浓度l的杀稻瘟菌素作用于SGC-7901细胞,得到杀稻瘟菌素对SGC-7901细胞的筛选浓度。Westernblot检测4对干扰质粒、阴性对照质粒对snai1蛋白水平表达的影响。结果:测序表明,Snai1干扰序列及读码框完全正确,干扰质粒瞬时转染的SGC-7901细胞系在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光达85%以上。杀稻瘟菌素对于SGC-7901细胞的筛选浓度为5μg/ml。Westernblot结果显示,干扰序列Mi-1对Snai1有较强的干扰效果。结论:成功构建了Snai1干扰真核表达载体,同时筛选出有效干扰质粒及稳定转染株,为进一步研究Snai1在胃癌中的作用奠定了基础。

抑癌微小RNAs在鼻咽癌迁移和侵袭中的作用机制及中医药干预作用

鼻咽癌(NPC)发病部位隐匿,早期不易被发现,因此诊断时多为中晚期且伴有转移。NPC侵袭和转移是一个复杂的生物学过程,受到多种因素的影响,研究发现基因的表达调控参与了鼻咽癌侵袭和转移,这是当前研究领域的热点。微小核糖核酸(miRNAs)是一种短小(约22个核苷酸)的非编码RNA分子,通过调控靶基因的转录和翻译,参与了恶性肿瘤细胞侵袭和转移的各个环节并发挥重要作用。在NPC中也发现了miRNAs的异常表达,而这些表达的变化对NPC的侵袭和转移发挥了重要的调控作用,基于目前的研究,总结了不同miRNAs作为抑癌基因在NPC细胞迁移和侵袭中的调控机制,主要包括其对靶基因、迁移和侵袭相关蛋白及重要信号通路的调节,涉及了上皮间质转化(EMT)、新生血管和淋巴管、肿瘤干细胞和放化疗抵抗等生物学过程;另一方面,中医药在NPC的防治,特别是放化疗后改善不良反应、降低转移率等方面疗效显著,因此,该文总结了中医药及中药活性成分经miRNAs发挥抑制NPC细胞迁移和侵袭的作用及机制,以期为后续深入研究和开发抗NPC新药提供一定的理论基础。