不同BIS值的全凭静脉麻醉对老年腹部手术患者术后认知功能的影响

目的探讨不同脑电双频谱指数(bispectral index,BIS)下全凭静脉麻醉对老年腹部手术患者术后认知功能的影响。方法选择在全凭静脉麻醉下行择期腹部手术的老年患者60例,年龄≥60岁,ASAⅠ~Ⅲ级,根据BIS值随机分为3组:V1(BIS=30~39)、V2(BIS=40~49)、V3(BIS=50~59)。所有患者于术前(T0)、术后1天(T1)、术后3天(T2)及术后5天(T3)以简易智力状态检查表(MMSE)与画钟试验(CDT)评估术后认知功能障碍(POCD)的发生。各组于围术期即麻醉前(TⅠ)、手术切皮即刻(TⅡ)、手术30min(TⅢ)、手术结束时(TⅣ)和出恢复室即刻(或ICU拔除气管导管即刻)(TⅤ)采静脉血测定血清S100β蛋白的浓度。结果3组患者术后MMSE评分、CDT评分及POCD发生情况,围术期血清S100β蛋白检测各时点组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。完成本研究的53例患者中,T1时35例(66.0%)、T2时17例(32.1%)、T3时6例(11.3%)发生POCD。各组不同时间点组内POCD发生情况比较的趋势卡方检验差异有统计学意义(P<0.05)。结论麻醉深度对全凭静脉麻醉下老年腹部手术患者术后认知功能没有影响,POCD与麻醉手术后恢复时间有关。

复方救必应对家兔腹泻的治疗效果及其机制研究

为了深入研究复方救必应(由救必应、香附、东风桔组成)对腹泻家兔的治疗效果和作用机制,试验将54只1月龄健康试验兔随机分为空白组、模型组和试验组(每组18只),空白组正常饲喂兔饲料,模型组和试验组家兔通过高脂高糖饮食+生物因子法构建腹泻模型,模型组家兔饲喂高脂饲料,试验组家兔饲喂按照每只家兔2.8 g/d的剂量用复方救必应拌料的高脂饲料,试验期为14 d。采集家兔耳缘静脉血,用相应的酶联免疫吸附测定试剂盒检测血清白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;利用ETCM获得救必应、香附、东风桔3味中药的活性成分及作用靶点,利用Genecard获得与腹泻疾病相关的基因,进一步获得复方救必应治疗腹泻的潜在靶点;利用Metascape对潜在靶点进行GO功能注释和KEGG信号通路分析;利用Cytoscape 3.7.2软件构建“中药-成分-靶点-通路-疾病”拓扑网络并分析蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络。结果表明:与空白组比较,模型组家兔腹泻率和死亡率明显升高;与模型组比较,试验组家兔腹泻率和死亡率明显降低;试验组家兔血清中IL-1、IL-6、TNF-α含量均极显著低于模型组(P<0.01);3味中药共检索到17种活性成分,127个治疗腹泻的潜在靶点,这些靶点主要被注释到细胞黏附调节、炎症应答、白细胞迁徙等生物过程,以及PI3K-Akt信号通路、趋化因子信号通路和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中;β-莎草醇、香附醇酮、香附醇、β-香树脂醇、isocyperol、鼠李素-3-O-鼠李糖基(1-4)-吡喃鼠李糖甙在复方救必应发挥功能过程中可能具有重要作用,是主要的活性成分;在PPI网络中,IL-6、AKT1、TNF、ACTB为关键节点。说明复方救必应具有一定的治疗家兔腹泻的作用,其作用机制涉及多成分-多靶点-多通路。

BiPAP对OASHS合并代谢综合征患者视黄醇结合蛋白4和心踝指数的影响

目的探讨双水平气道正压通气(Bi PAP)对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAHS)合并代谢综合征(MS)患者视黄醇结合蛋白4(RBP4)、心踝指数(CAVI)的影响。方法收集368例OSAHS合并MS患者,按治疗方法分为对照组及Bi PAP治疗组;选择同期正常人群110例作为健康志愿组。给予对照组常规药物治疗,Bi PAP治疗组在此基础上加用Bi PAP治疗。比较健康志愿组、对照组与OSAHS合并MS组临床基线资料以及对照组和Bi PAP治疗组治疗前后AHI、RBP4、CAVI水平。结果 OSAHS合并MS组收缩压、舒张压、空腹血糖、总胆固醇、低密度脂蛋白、肌酐、高密度脂蛋白、甘油三酯、AHI、RBP4及CAVI高于健康志愿组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组及Bi PAP治疗组基线资料差异无统计学意义(P>0.05)。治疗6个月后,Bi PAP治疗组AHI、RBP4、CAVI均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Bi PAP可能通过降低RBP4、CAVI水平,达到减缓动脉硬化进程及改善临床预后的目的。

BiPAP通气对慢性肺心病急性加重期患者血气和CRP的影响研究

目的探讨双水平正压通气(Bi PAP)对慢性肺源性心脏病(肺心病)急性加重期患者的血气指标和C反应蛋白(CRP)水平的影响。方法 118例慢性肺心病急性加重期患者,随机分为观察组和对照组,各59例。对照组采用常规治疗,观察组除了常规治疗外,实施双水平正压通气。观察两组患者治疗前后的血气和CRP的改变情况。结果观察组治疗后p H值、动脉血氧分压(Pa O2)、动脉血二氧化碳分压(Pa CO2)和CRP水平与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Bi PAP通气能够改善慢性肺心病急性加重期患者的血气指标,降低C反应蛋白水平,值得借鉴。

中药双向发酵液制备及其抗衰老、保湿、美白功效研究

通过对中国灵芝、铁皮石斛、黄精、晚香玉进行双向发酵工艺优化,筛选制备出最优发酵液,利用不同质量分数中药双向发酵液对体外抑制蛋白质非酶糖基化、酪氨酸酶活性抑制、水通道蛋白Aquaporin3(AQP3)含量、2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基清除率、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率、小鼠黑素B16-F10细胞黑色素含量进行测定。研究结果发现,中药双向发酵液能够显著抑制蛋白质非酶糖基化、酪氨酸酶活性、小鼠B16-F10细胞黑色素含量(P<0.05),并且能够显著清除DPPH和ABTS自由基,促进角质形成细胞AQP3蛋白表达(P<0.01),这为化妆品原料的开发提供了新的方向和数据依据。

微生物转谷氨酰胺酶催化乳清蛋白聚合研究

采用SDS-PAGE分析,研究了不同条件下微生物转谷氨酰胺酶(MTGase)催化乳清蛋白(WPI)聚合。结果显示,MTGase可催化乳清蛋白的β-乳球蛋白(β-LG)和α-乳清蛋白(α-LA)聚合,形成低聚物或生物聚合物,其中β-LG更易受MTGase的催化。当TGase酶浓度一定时(0.5U/mL),TGase催化WPI聚合的最佳底物质量分数范围为2%～4%。对WPI进行加热预处理,同时添加还原剂,可明显提高MTGase对WPI的催化活性。MTGase催化WIP的最适pH值范围约为6.5～7.5。当WPI经预热处理(85℃,15min),同时添加20mmol/L的DTT,TGase催化WPI聚合12h,可使质量分数为92%的β-LG和质量分数为75%的α-LA聚合。

双酶复合水解对玉米蛋白酶解效率的影响

采用4种蛋白酶(Neutrase酶、Alcalase酶、Protamex酶、Flavourzyme酶)对高底物浓度(24%)玉米黄粉进行双酶复合水解,研究复合水解对玉米蛋白酶解效率的影响。结果表明:除Alcalase酶与Protamex酶组合外,酶的加入顺序对酶解效率影响较大。Protamex酶和Neutrase酶与其他蛋白酶的复合效果相当。与单酶水解相比,双酶复合水解可有效提高玉米蛋白的酶解效率,尤其是Flavourzyme酶与Alcalase酶复合,可使水解度和可溶性蛋白含量分别提高26.85%和98.05mg/mL。

荧光试剂二(苯并三唑-1-基)乙二酮缩氨基脲的合成及其在蛋白质测定中的应用

由苯并三唑、乙二醛、氨基脲合成了新荧光试剂二(苯并三唑-1-基)乙二酮缩氨基脲希夫碱。通过~1H NMR、红外光谱、元素分析确证了试剂的结构。在pH=4.0的KH_2PO_4-H_3PO_4缓冲溶液中,该试剂在342 nm处(λ_(ex)=284 nm)发射荧光,其强度随蛋白质的加入明显增强,据此建立了测定痕量蛋白质的新方法。在最佳实验条件下,测定牛血清白蛋白、人血清白蛋白的线性范围分别为0～8.0×10^(-6)g/mL和1.0×10^(-5)～0.25g/mL,检测限分别为5.3×10^(-9)g/mL、1.4×10^(-9)g/mL,用于合成样品的测定,结果令人满意。

荧光试剂二(1-H-苯并三唑)乙二酮缩氨基硫脲的合成及其在蛋白质测定中的应用

以苯并三唑、乙二醛、氨基硫脲为基本原料 ,合成了荧光试剂二 (1 H 苯并三唑 )乙二酮缩氨基硫脲席夫碱。通过对试剂进行红外光谱、元素分析确证了试剂的结构 ,并利用荧光分析法研究了它在蛋白质测定中的应用。在pH为 8 0的磷酸缓冲溶液中 ,该试剂在 394nm处 (λex=342nm)发射荧光。实验表明 ,其荧光强度随着蛋白质的加入明显增强 ,据此建立了测定痕量蛋白质的新方法。在最佳实验条件下 ,对牛血清白蛋白、人血清白蛋白的测定 ,其线性范围分别为 0～ 1 0μg·mL-1 ,0 5 0～ 1 0 μg·mL-1 ,检测限分别为 6 3× 1 0 -3 ,1 2× 1 0 -3 μg·mL-1 。

青蒿琥酯引起骨髓瘤细胞RPMI8226 G_2/M期阻滞

目的研究青蒿琥酯对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞周期的影响及可能机制。方法分别以浓度为0、25、50μg/mL的青蒿琥酯作用于RPMI8226细胞,用透射电镜观察细胞变化,流式细胞术检测细胞周期分布,蛋白质印迹法检测细胞周期相关蛋白cyclin B1和p34cdc2的变化。结果 50μg/mL青蒿琥酯处理48h后,多数细胞显示出凋亡细胞的特征性形态。随着青蒿琥酯浓度增加,G0/G1期细胞的比例逐渐下降(P<0.05),G2/M期细胞的比例逐渐上升(P<0.05),细胞明显阻滞于G2/M期。细胞周期蛋白cyclin B1表达水平随青蒿琥酯浓度的增加而增加,p34cdc2表达水平随青蒿琥酯浓度的增加而降低。结论青蒿琥酯能将RPMI8226细胞阻滞于G2/M期,其机制可能与cyclin B1的升高及p34cdc2的降低有关。

丁二酸二异辛酯磺酸钠对微乳液毛细管电泳分离蛋白质的影响

本研究探讨了在生理条件下,同时分离酸性和碱性蛋白质的毛细管电泳方法。在120mmol/L十二烷基硫酸钠(SDS)+5mmol/L丁二酸二异辛酯磺酸钠(AOT)+110mmol/L正辛烷+500mmol/L正丁醇+3mmol/LNa2B4O7+3mmol/LNaH2PO4(pH6.7)的微乳体系中,分离电压20kV,25min内完成核糖核酸A、细胞色素C、牛血清蛋白、α-淀粉酶和β-乳球蛋白5种不同酸、碱性蛋白质基线分离;分离效率为7.8×105～4.4×105/m;迁移时间的RSD为1.5%(n=11)。并讨论了蛋白质在AOT组成的复配微乳体系中的分离机制。

乙型肝炎病毒e抗原基因与绿色荧光蛋白基因的融合及其表达

质粒pS65T含有T7启动子驱动的绿色荧光蛋白突变型gfpS65T基因，经修饰后，在其中插入乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）基因，使两基因同框成为融合基因。在大肠杆菌BL21中由于T7启动子的控制，高效表达了具有双功能（抗原性和发光性）的融合蛋白（GFP－HBeAg）。融合蛋白MW为52kDa，N端有6个组氨酸残基，因而用Ni金属螯合层析柱对融合蛋白进行了分离纯化，利用诊断HBV的ELISA试剂盒检测了融合蛋白的抗原性，在荧光显微镜下观察到了融合蛋白的绿色荧光。并探讨了用其组装成新型免疫诊断试剂的可能性。

低浓度有机磷萃取剂P204促进普通小球藻(Chlore11a vulgaris)生长的研究

本文以普通小球藻为实验对象,研究了有机磷萃取剂P204在低浓度（<EC_（50））时对其生长的影响,结果显示,与对照组相比,普通小球藻的生长量、蛋白质含量、叶绿素含量、碱性磷酸酶活力等都有明显的增长,表明在低浓度时,P204对普通小球藻的生长有明显的刺激和促进作用。

天麻提取物对灰树花深层发酵胞外蛋白合成的影响

在灰树花深层发酵系统中加入天麻提取物,以灰树花生物量和胞外蛋白合成量为指标,对天麻提取物添加量进行优选;利用HPLC对天麻提取物成分进行分析,研究天麻提取物灭菌前后主要成分(天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛及巴利森甙)含量的变化,并研究其促进灰树花生物量和胞外蛋白合成的关键成分在灰树花发酵体系中的含量变化。结果发现,7%(体积分数)天麻提取物可以促进灰树花菌丝体生长和胞外蛋白的合成,生物量和胞外蛋白合成量在发酵第11天时达到最大值;在天麻提取物灭菌后,巴利森甙含量明显减少,天麻素含量明显增加;天麻提取物加入灰树花发酵体系14d后,天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛含量均降低,但巴利森甙含量增加了161.11%。

血尔宝补铁蛋白咀嚼片对大鼠胚胎致畸作用的研究

了解血尔宝补铁蛋白咀嚼片对SD大鼠胚胎的影响,将SD大鼠雌雄1:1交配,发现阴栓作为妊娠“零”天,检出的“孕鼠”随机分到阴性组、阳性组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,并称重和编号。于妊娠第7～16d灌胃;受孕的0、7、12、16、20d称体重,并计算给受试物的量。孕鼠于妊娠20d处死,剖腹取子宫称重、取胎记录并检查胚胎、着床数、吸收胎、死胎和活胎数。活胎鼠记录胎仔体重、体长、尾长并检查胎鼠外观有无异常。半数活胎固定于鲍音氏液中固定两周后徒手切片作内脏检查,另半数活胎以茜素红作骨骼染色,并逐步检查骨骼。结果表示,20d孕鼠体重增长阳性组与阴性组、剂量组相比有显著差异(P<0.05);16d、20d孕鼠体重增长高剂量组与低剂量组相比有显著差异(P<0.05);各组相比着床总数无显著差异;活胎的仔数、吸收胎数、死胎数、平均仔重、体重、及尾长,阳性组与阴性组、剂量组相比有显著差异(P<0.05);阴性组、剂量组相比无显著差异(P>0.05);胚胎外形畸形率敌枯双阳性组为58.96%,与其它各组相比有显著差异(P<0.01)。阴性组和剂量组之间无显著差异(P>0.05)。表明血尔宝补铁蛋白咀嚼片对SD大鼠胚胎无致畸、毒性作用。

联麦氧钒对糖尿病大鼠内质网应激介导心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制

目的:探讨联麦氧钒(BMOV)对糖尿病(DM)大鼠内质网应激(ERS)介导的心肌细胞凋亡的抑制作用及可能的机制,为临床研究糖尿病心肌病(DCM)提供理论依据。方法:健康雄性Wistar大鼠35只,随机选取10只作为对照组,给予柠檬酸缓冲液(55mg·kg-1),正常饮水,维持4周。其余25只大鼠腹腔注射链佐脲酶素(STZ)1周建立DM模型,空腹血糖≥13.3mmol·L-1大鼠定为DM模型;选择20只随机分为DM组和BMOV组,每组10只。DM组大鼠正常饮水,继续维持3周。BMOV组大鼠饮水中加入BMOV,共维持3周。取各组大鼠心肌组织行TUNEL染色观察细胞凋亡情况;Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、X盒结合蛋白1(XBP-1)水平;qPCR法检测各组大鼠心肌组织中XBP-1mRNA表达水平。结果:TUNEL染色,对照组大鼠心肌组织中见极少的凋亡细胞,凋亡指数(AI)为0.80±0.63;DM组较对照组心肌细胞凋亡明显增加,AI升高(P<0.05);BMOV组较DM组心肌细胞凋亡明显减少,AI降低(P<0.05);Western blotting法检测,与对照组比较,DM组大鼠心肌组织中GRP78、CHOP和XBP-1表达水平明显升高(P<0.05);与DM组比较,BMOV组大鼠心肌组织中GRP78、CHOP和XBP-1表达水平明显降低(P<0.05);qPCR法检测,与对照组比较,DM组大鼠心肌组织中XBP-1mRNA表达水平明显升高(P<0.05);与DM组比较,BMOV组大鼠心肌组织中XBP-1mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论:BMOV对DM大鼠心肌细胞具有保护作用,其机制可能与抑制心肌细胞ERS及其介导的细胞凋亡有关联。

酶法水解中国毛虾的研究(英文)

比较了4种常用蛋白酶对中国毛虾的酶解效果,筛选出胰蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶为最佳用酶,并利用正交试验优化了水解条件,在各自最佳水解条件下采用先加胰蛋白酶再加枯草杆菌蛋白酶的酶解方式对中国毛虾进行联合双酶水解,水解度可达67 .83%。

冬虫夏草对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞ILK表达的影响

【目的】观察糖尿病大鼠肾小管上皮细胞整合素连接激酶(ILK)的表达及冬虫夏草对其表达的影响。【方法】雄性Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(N组,n=12)、糖尿病模型组(D组,n=12)、糖尿病冬虫夏草干预组[C组,n=12,冬虫夏草1000mg/(kg·d)灌胃]。成模后第8周末及16周末各组分别处死6只大鼠,测定24h尿蛋白排泄量、血肌酐;HE及MASSON染色法观察肾脏病理改变;免疫组织化学法检测ILK、E钙粘蛋白(E-cad)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。【结果】①与N组比较,D组大鼠肾小管间质损伤指数、肾间质胶原面积明显增加(P<0.01)。②D组大鼠肾小管上皮细胞E-cad阳性表达显著低于N组,TGF-β1、ILK和α-SMA阳性表达均显著高于N组;E-cad表达和TGF-β1表达呈负相关(rs=-0.60,P<0.05);ILK、α-SMA表达和TGF-β1表达呈正相关(rs=0.88,P<0.01;rs=0.91,P<0.05)。③C组大鼠肾小管间质损伤指数、肾间质胶原面积较D组明显减弱,其肾小管上皮细胞的E-cad的表达较D组明显增加,TGF-β1、ILK和α-SMA表达较D组均明显减弱(P<0.01)。【结论】冬虫夏草能通过下调ILK表达发挥肾脏保护作用。

双酶水解制备大豆玉米活性多肽的研究

[目的]研究双酶水解大豆玉米分离蛋白以制备大豆玉米活性多肽的最佳试验条件。[方法]以大豆蛋白和玉米蛋白为主要原料,配制不同浓度的大豆玉米分离蛋白溶液,经预处理后,分别用风味蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶水解,通过测定水解度和酶活力,确定试验用酶。并将所选酶按一定比例两两混合,采用正交试验确定双酶水解的最佳条件。[结果]最佳水解条件为大豆玉米分离蛋白溶液浓度2%,风味蛋白酶与复合蛋白酶的比例1∶1,pH 7.0,水解时间8 h;在该条件下,大豆玉米分离蛋白的水解度可达75.14%。[结论]该研究为大豆玉米活性多肽的开发与应用奠定了基础。

复合反胶束萃取花生蛋白的工艺优化

采用AOT(丁二酸二异辛酯磺酸钠)、SDS(十二烷基硫酸钠)/异辛烷—正辛醇复合反胶束体系,超声辅助萃取花生蛋白,研究超声时间、花生浓度、超声功率、pH、离子浓度、温度、W0(反胶束溶液增溶水与表面活性剂摩尔比)、AOT(g)∶SDS(g)、表面活性剂浓度对蛋白萃取率的影响。结果表明,最佳提取工艺为温度35℃、KCl浓度0 mol/L,pH值8,表面活性剂浓度0.08 g/mL,AOT(g)∶SDS(g)为4∶3,超声功率180 W,W0值15,该工艺条件下,花生蛋白的萃取率为93.33%。