血清miR-122表达水平与冠心病心绞痛患者PCI后非靶血管斑块进展的关系

目的探讨血清微小核糖核酸(miR)-122表达水平与冠心病心绞痛患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后非靶血管斑块进展的关系。方法选取拟行PCI术治疗的168例冠心病心绞痛患者为研究组,另选取同期经冠状动脉造影(CAG)检查显示冠脉血管正常者145例为对照组,均采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测血清miR-122表达水平并进行对比。根据研究组PCI后非靶血管斑块进展情况将其分为进展组与未进展组,对比进展组、未进展组血清miR-122表达水平,并采用多因素Logistic回归性分析法分析血清miR-122表达水平与冠心病心绞痛患者PCI后非靶血管斑块进展的关系,且采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-122表达水平对冠心病心绞痛患者PCI后非靶血管斑块进展的评估价值。结果研究组血清miR-122表达水平明显高于对照组(P<0.05);研究组PCI术后非靶血管斑块进展发生率为14.88%;进展组血清miR-122表达水平明显高于未进展组(P<0.05);性别、心脏外科与介入治疗狭窄冠状动脉研究(SYNTAX)评分、糖尿病、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平、血清miR-122水平均为患者PCI术后非靶血管斑块进展的独立危险因素(P<0.05),非靶血管参考直径、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)均为患者PCI后非靶血管斑块进展的独立保护因素(P<0.05);血清miR-122表达水平对冠心病心绞痛患者PCI后非靶血管斑块进展预测的最佳截断点为3.28,灵敏度、特异度、曲线下面积(AUC)、95%CI分别为92.00%(23/25)、81.12%(116/143)、0.905、0.850~0.944。结论冠心病心绞痛患者血清miR-122表达水平异常增高,可增加患者PCI术后非靶血管斑块进展风险,并对患者PCI术后非靶血管斑块进展具有一定的评估价值。

胰腺癌外周血miR-122-5p、NOC2L表达与临床病理特征及预后的相关性

目的研究胰腺癌(PAC)外周血miR-122-5p、NOC2类核仁相关转录阻遏物(NOC2L)表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选择2020年1月—2023年1月荆州市第一人民医院肝胆胰外科诊治的胰腺癌患者(PAC组,97例)及胰腺良性疾病患者(对照组,53例)为研究对象,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血miR-122-5p、NOC2L表达;比较不同临床病理特征中miR-122-5p、NOC2L表达差异;Spearman秩相关分析miR-122-5p、NOC2L与临床病理特征的相关性;采用ROC曲线及DeLong法比较miR-122-5p、NOC2L在胰腺癌预后不良预测中的敏感度及特异度;多因素Cox回归分析胰腺癌预后不良的危险因素。Kaplan-Meier生存模型分析并Log Rank比较不同外周血miR-122-5p和NOC2L表达中生存期的差异。结果PAC组患者外周血miR-122-5p表达低于对照组,NOC2L表达高于对照组(t/P=28.061/<0.001、29.701/<0.001)。组织学分级3级、原发肿瘤直径≥4 cm、淋巴结转移N2、远处转移M1及TNM分期Ⅲ~Ⅳ期患者外周血miR-122-5p表达低于组织学分级1~2级、原发肿瘤直径<4 cm、淋巴结转移N0~1、远处转移M0及TNM分期Ⅰ~Ⅱ期患者(t/P=5.935/<0.001、2.801/0.006、3.284/0.001、3.583/<0.001、6.567/<0.001),NOC2L表达高于组织学分级1~2级、原发肿瘤直径<4 cm、淋巴结转移N0~1、远处转移M0及TNM分期Ⅰ~Ⅱ期患者(t/P=2.039/0.044、3.318/0.001、2.287/0.024、2.417/0.018、3.943/<0.001);胰腺癌患者外周血miR-122-5p表达与组织学分级、原发肿瘤直径、淋巴结转移、远处转移及TNM分期呈负相关(r_(s)/P=-0.713/0.016、-0.678/0.021、-0.764/0.009、-0.695/0.011、-0.732/0.004),NOC2L表达与组织学分级、原发肿瘤直径、淋巴结转移、远处转移及TNM分期呈正相关(r_(s)/P=0.657/0.039、0.701/0.014、0.726/0.019、0.672/0.028、0.717/0.015);miR-122-5p、NOC2L及二者联合预测胰腺癌预后不良的AUC分别为0.735、0.719、0.863,二者联合优于各自单独预测效能(Z/P=9.412/<0.05、10.013/<0.05);miR-122-5p≤0.69、NOC2L≥1.21、组织学分级3级、原发肿瘤直径≤4 cm、淋巴结转移N2、远处转移M1、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期为胰腺癌预后不良的独立危险因素[HR(95%CI)=4.051(1.217~6.885)、4.063(1.159~6.968)、1.723(1.013~2.433)、1.831(1.022~2.641)、2.036(1.141~2.932)、2.300(1.097~3.503)、2.474(1.115~3.834)]。miR-122-5p≤0.69且NOC2L≥1.21胰腺癌患者中位生存期显著短于其他患者(miR-122-5p>0.69或NOC2L<1.21)(Log Rank=12.573,P<0.001)。结论胰腺癌外周血miR-122-5p及NOC2L表达与临床病理特征及预后密切相关,在预后及病情预测中具有一定临床价值,两者联合检测时可提高在胰腺癌预后不良预测中的敏感度及特异度。

miR-122-5p靶向调控人骨髓间充质干细胞诱导成骨分化的分子机制研究

目的:研究miR-122-5p对人骨髓间充质干细胞hBMSCs细胞成骨分化诱导的作用分子机制。方法:运用茜素红S、碱性磷酸酶活性ALP染色试剂盒检测hBMSCs成骨分化的钙结节与成骨活性;使用双荧光素酶报告基因实验验证miR-122-5p与BRCC3之间的靶向关系;运用qRT-PCR分别检测Runx2、Osterix、wnt3a、β-catenin、GSK3-β、miR-122-5以及BRCC3基因的表达情况;Western印迹检测β-catenin蛋白的表达量。结果:过表达miR-122-5p对人骨髓间充质干细胞hBMSCs细胞成骨分化诱导21天后的钙结节与干细胞成骨活性均有明显促进作用,对成骨分化中wnt/β-catenin信号通路主要转录因子Runx2、Os‐terix及wnt3a、β-catenin、GSK3-β主要基因均激活作用,过表达BRCC3对干细胞成骨分化中wnt/β-catenin信号通路主要转录因子Runx2、Osterix及wnt3a、β-catenin、GSK3-β主要基因有抑制作用;并且通过双荧光素酶报告基因与回复性实验确定miR122-5p与BRCC3之间的靶向关系,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-122-5p靶向抑制BRCC3的表达诱导hBMSCs细胞通过wnt/β-catenin通路进行成骨分化诱导。

彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值

目的 探讨彩色多普勒超声检查联合血清微小RNA(miRNA)-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的早期诊断价值以及与卵巢癌周围血管侵袭的相关性。方法 回顾性选取2019年5月至2021年12月沧州市中心医院收治的102例卵巢肿瘤患者为研究对象,所有患者均行彩色多普勒超声检查,采用实时定量聚合酶链反应测定血清中miR-122-5p和miR-106b的表达水平。以病理诊断结果作为金标准,将研究对象分为卵巢癌组(n=51)和良性卵巢肿瘤组(n=51);卵巢癌组又分为侵袭组(n=32)和非侵袭组(n=19)。比较卵巢癌组与良性卵巢肿瘤组的临床资料(年龄、体重指数、生育和绝经)、彩色多普勒超声图像特征(实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4、肿瘤最大直径>10 cm)、彩色多普勒超声血流参数[搏动指数(PI)和血流阻力指数(RI)]、血清miR-122-5p、miR-106b水平。应用多因素Logistic回归模型探究相关变量对卵巢癌的独立预测作用。应用受试者工作特征(ROC)曲线评估彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值。并比较侵袭组与非侵袭组彩色多普勒超声血流参数及血清miR-122-5p、miR-106b水平,采用Pearson相关性分析对彩色多普勒超声血流参数、miR-122-5p、miR-106b与卵巢癌周围血管侵袭的相关性进行分析。结果 卵巢癌组实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4以及肿瘤最大直径>10 cm所占比例分别为80.39%、76.47%、74.51%、78.43%,均高于良性卵巢肿瘤组(9.80%、11.76%、29.41%、45.10%),PI、RI、血清miR-122-5p表达水平分别为0.94±0.27、0.48±0.11、1.01±0.27,均低于良性卵巢肿瘤组(1.47±0.32、0.71±0.19、1.42±0.30),miR-106b表达水平为4.57±1.13,高于良性卵巢肿瘤组(2.86±0.65),差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归模型分析显示,PI、RI、miR-122-5p、miR-106b是卵巢癌的独立预测因子,OR值分别为1.080、1.116、1.689、1.301(P<0.05)。ROC曲线分析显示,PI、RI、miR-122-5p和miR-106b以及联合诊断卵巢癌的曲线下面积(AUC)分别为0.869、0.874、0.859、0.898、0.969,其联合诊断的价值高于单独应用。侵袭组PI、RI和血清miR-122-5p表达水平均低于非侵袭组,血清miR-106b表达水平高于非侵袭组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,彩色多普勒超声血流参数PI、RI及血清miR-122-5p水平与卵巢癌周围血管侵袭呈负相关(r=-0.743、-0.696、-0.822,P<0.05),血清miR-106b水平与卵巢癌周围血管侵袭呈正相关(r=0.863,P<0.05)。结论 彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平可以提高卵巢癌的早期诊断价值,并且可根据这些指标评估卵巢癌周围血管侵袭程度,值得应用推广。

miR-122-5p和miR-183-5p在脑出血患者中的表达水平及其与神经损伤的相关性

目的 分析脑出血患者神经损伤的影响因素和微小RNA-122-5p(miR-122-5p)、微小RNA-183-5p(miR-183-5p)血清水平对患者神经损伤的诊断价值,探讨二者水平与患者神经损伤的关系。方法 选取2021年6月至2023年7月于绵阳市中心医院住院治疗的146例脑出血患者作为研究对象,依据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)将患者分为轻度损伤组(85例)和中重度损伤组(61例)。实时荧光定量PCR检测两组患者血清miR-122-5p、miR-183-5p水平;比较两组患者的一般临床资料和血清水平;分析患者血清miR-122-5p、miR-183-5p水平与神经损伤之间的相关性;多因素Logistic回归分析脑出血患者神经损伤程度的影响因素,并分析血清miR-122-5p、miR-183-5p水平对患者神经损伤程度的诊断价值。结果 中重度损伤组患者NIHSS评分和血清miR-122-5p水平均高于轻度损伤组,血清miR-183-5p水平则低于轻度损伤组。miR-122-5p与miR-183-5p水平之间、miR-183-5p水平与NIHSS评分之间均呈负相关;miR-122-5p水平与NIHSS评分呈正相关。多因素Logistic回归分析表明,血肿体积、NIHSS评分、血清miR-122-5p水平为脑出血患者中重度神经损伤的危险因素,miR-183-5p血清水平为其保护因素。ROC曲线分析表明,miR-122-5p和miR-183-5p血清水平可作为脑出血患者中重度神经损伤程度的诊断指标,联合诊断的ROC曲线下面积(AUC)和Youden指数更高。结论 脑出血患者的血清miR-122-5p、miR-183-5p水平与神经损伤密切相关,二者联合检测对脑出血患者神经损伤具有较高的临床诊断价值。

lncRNA SNHG7通过miR-122-5p/CCND1轴调节胃癌细胞的增殖、凋亡及肿瘤免疫逃逸

目的探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因(lncRNA SNHG)7通过miR-122-5p/细胞周期蛋白(CCN)D1轴对胃癌细胞的增殖、凋亡及肿瘤免疫逃逸的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测体外培养的人胃癌细胞株NCI-N87、SNU-1、MKN-45和人胃癌组织源细胞、人胃黏膜上皮细胞中lncRNA SNHG7、miR-122-5p与CCND1表达。体外培养的人胃癌细胞MKN-45,随机分为对照组、lncRNA SNHG7 siRNA(si-lncRNA SNHG7)组、lncRNA SNHG7 siRNA阴性对照(si-NC)组、lncRNA SNHG7 siRNA(si-lncRNA SNHG7)+miR-122-5p inhibitor组,分组转染后,检测各组MKN-45细胞增殖、凋亡、活化CD8+T细胞杀伤率、miR-122-5p及CCND1、细胞增殖核抗原(PCNA)、凋亡蛋白〔B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3〕表达,并检测lncRNA SNHG7对MKN-45细胞miR-122-5p的靶向调节作用。结果与胃黏膜上皮细胞相比,胃癌组织源和MKN-45、SNU-1、NCI-N87细胞lncRNA SNHG7、CCND1 mRNA表达明显升高,miR-122-5p表达明显降低(P<0.05)。与对照组相比,si-lncRNA SNHG7组细胞活力、EdU阳性率、细胞CCND1、PCNA蛋白表达明显降低,凋亡率、活化CD8+T细胞对各组MKN-45细胞的杀伤率、miR-122-5p及Bax、caspase-3蛋白表达明显升高(均P<0.05);si-NC组细胞各指标均无显著差异(P>0.05);lncRNA SNHG7 siRNA和miR-122-5p inhibitor联合可逆转lncRNA SNHG7 siRNA对细胞各指标的作用。lncRNA SNHG7可靶向下调MKN-45细胞miR-122-5p表达。结论下调lncRNA SNHG7可通过上调miR-122-5p而降低CCND1表达,进而抑制胃癌细胞增殖,促进其凋亡,并减轻其免疫逃逸。

冠心病患者血清miR-122-5p变化及与斑块稳定程度、预后的关系

目的分析冠心病(CHD)患者血清微小RNA-122-5p(miR-122-5p)变化及与斑块稳定程度、预后的关系。方法选取2019年8月至2021年8月张家口市第五医院186例CHD患者作为研究组,根据斑块稳定程度分为不稳定斑块组(n=58)及稳定斑块组(n=128),另取同期健康体检者90名作为对照组,检测比较所有受试者血清miR-122-5p水平,采用ROC曲线分析血清miR-122-5p水平对CHD患者斑块稳定程度的诊断价值。记录CHD患者治疗后随访1年内心血管不良事件发生情况,并将心血管不良事件发生情况作为评估预后的标准,将研究组分为预后不良组(n=50)及预后良好组(n=136),采用单因素及多因素Logistic分析影响CHD患者预后的因素。结果研究组血清miR-122-5p水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不稳定斑块组血清miR-122-5p水平均高于稳定斑块组,差异有统计学意义(P<0.05);由ROC曲线可知,血清miR-122-5p诊断CHD患者斑块稳定程度的AUC为0.845(P<0.05);预后不良组血清miR-122-5p水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic分析显示,血清miR-122-5p水平过高是CHD患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论miR-122-5p在CHD患者血清中呈高表达,对斑块稳定程度具有一定的诊断价值,其水平过高是CHD患者预后不良的独立危险因素。

妊娠期糖尿病患者血清microRNA-122联合microRNA-7047-5p预测不良围生儿结局价值

目的探讨妊娠期糖尿病患者血清microRNA-122(miR-122)联合microRNA-7047-5p(miR-7047-5p)预测不良围生儿结局价值。方法选取2018年4月—2023年4月亳州市人民医院接收的100例妊娠期糖尿病患者作为观察组,选取同期该院孕检的90例健康孕妇作为对照组。检测两组血糖水平、血清miR-122、miR-7047-5p,采用Pearson法分析评估血清miR-122、miR-7047-5p水平与血糖水平的相关性;根据随访结果将观察组围生儿结局分为良好组(85例)与不良组(15例),比较两组血清miR-122、miR-7047-5p相对表达量,构建受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-122、miR-7047-5p联合预测妊娠期糖尿病患者不良围生儿结局的价值。结果观察组空腹血糖(FBG)、2 h餐后血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平高于对照组(P<0.05)。观察组miR-122相对表达量高于对照组(P<0.05),miR-7047-5p相对表达量低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,miR-122与FBG、2hPG、HbA1c均呈正相关(r=0.167、0.228和0.255,均P<0.05),miR-7047-5p与FBG、2 hPG、HbA1c均呈负相关(r=-0.358、-0.408和-0.386,均P<0.05)。不良组miR-122相对表达量高于良好组(P<0.05),miR-7047-5p相对表达量低于良好组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-122和miR-7047-5p联合预测GDM患者不良围生儿结局的敏感性为73.3%(95%CI:0.449,0.922),特异性为85.9%(95%CI:0.766,0.925),曲线下面积为0.836(95%CI:0.720,0.952)。结论在妊娠期糖尿病患者中,血清microRNA-122和microRNA-7047-5p与血糖水平相关,且两者联合检测可以有效预测GDM患者的不良围生儿结局,具有较高的预测敏感性和特异性。

血清miR-122-5p、miR-618、miR-202联合检测对原发性肝癌的诊断价值分析

目的分析血清微小核糖核苷酸-122-5p(miR-122-5p)、微小核糖核苷酸-618(miR-618)、微小核糖核苷酸-202(miR-202)联合检测对原发性肝癌的诊断价值。方法选取应急总医院2022年1月~2023年1月收治的原发性肝癌患者118例纳入原发性肝癌组,另择同期120例良性肝脏疾病患者纳入良性组,120例健康体检者为健康对照组,回顾性收集临床资料。比较3组研究对象血清miR-122-5p、miR-618、miR-202水平,通过Pearson相关性分析分析血清miR-122-5p、miR-618、miR-202水平之间的相关性;以原发性肝癌组作为阳性组,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-122-5p、miR-618、miR-202单独及联合检测对原发性肝癌的诊断价值。结果原发性肝癌组血清miR-122-5p、miR-618、miR-202水平低于良性组和健康对照组,良性组低于健康对照组,差异有统计学意义(F=193.644、88.486、105.045,P<0.05)。年龄≥60岁、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、乙型肝炎病毒(HBV)感染、肿瘤数目多发的原发性肝癌患者血清miR-122-5p、miR-618、miR-202水平更低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,原发性肝癌患者血清miR-122-5p、miR-618、miR-202间表达水平均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线结果显示,miR-122-5p、miR-618、miR-202单独及联合检测对原发性肝癌的预测价值分析曲线下面积(AUC)分别为0.839、0.814、0.807、0.932,灵敏度分别为85.59%、84.75%、79.66%、88.98%,特异度分别为75.00%、68.75%、70.00%、85.42%,联合检测均为最高。结论随着原发性肝癌发生及病情进展患者血清miR-122-5p、miR-618、miR-202表达水平降低,联合检测对原发性肝癌的诊断价值较高。

UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究

目的探讨尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)/miR-122-5p/pcDNA-胞质多聚腺苷酸元件结合蛋白1(CPEB1)轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究。方法通过实时荧光反转录定量PCR(RT-qPCR)检测UCA1相关miRNA分子,并通过细胞转染获得miR-122-5p和CPEB1相关细胞株。通过双荧光素酶报告实验分别验证UCA1与miR-122-5p、CPEB1与miR-122-5p的结合。药物敏感性实验获得顺铂药物半抑制浓度(IC50);通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析CPEB1在肺腺癌中的表达情况以及与免疫细胞功能的关系。结果miR-122-5p在肺腺癌细胞中的表达水平明显升高,并通过双荧光素酶报告实验以验证UCA1与miR-122-5p结合,构建miR-122-5p抑制物和模拟物转染肺腺癌细胞株,发现miR-122-5p抑制后,顺铂IC50浓度下降,而miR-122-5p过表达后,顺铂IC50浓度升高。CPEB1在肺腺癌细胞中的表达水平明显降低,双荧光素酶报告实验证实CPEB1是与miR-122-5p结合,CPEB1过表达后,顺铂IC50浓度减低;对TCGA数据库分析显示肺腺癌组织CPEB1 mRNA明显低于癌旁组织,ROC曲线分析显示CPEB1表达水平能较好地用于诊断肺腺癌(AUC=0.849),进一步分析显示CPEB1表达水平与肺腺癌患者的细胞功能如T细胞、B细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞存在密切关联。结论UCA1与miR-122-5p存在结合位点,后者可影响肺腺癌的顺铂耐药,并与靶基因CPEB1结合;肺腺癌中CPEB1呈低表达,降低肺腺癌顺铂药物的敏感性。UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴有望为干预肺腺癌顺铂耐药的靶点。

胎盘源性外泌体miR-122-5p改善妊娠糖尿病脐静脉内皮细胞功能损伤的机制研究

目的探讨胎盘源性外泌体(Exo)miR-122-5p改善妊娠糖尿病(GDM)小鼠脐静脉内皮细胞(MUVECs)功能损伤的机制。方法取妊娠小鼠腹腔注射0.25%链脲佐菌素溶液以诱导GDM模型(GDM组),对照组小鼠腹腔注射等体积0.9%氯化钠溶液,检测两组FPG和胰岛素水平验证模型。采用HE染色观察小鼠胎盘组织形态,qRT-PCR法检测miR-122-5p表达情况,Western blot法检测核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)炎症小体相关蛋白[包括NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白、半胱氨酸蛋白酶-1]表达。采用差速离心法获得胎盘源性Exo,并采用透射电子显微镜和纳米颗粒追踪分子对Exo表征进行鉴定;与MUVECs共培养后,采用免疫荧光法观察MUVECs对Exo的摄取。采用噻唑蓝法、流式细胞术、Transwell实验和血管形成实验检测MUVECs细胞活性、凋亡能力、迁移能力和成管能力。结果GDM组小鼠FPG水平明显高于对照组(P<0.001),胰岛素水平低于对照组(P<0.001),提示模型构建成功。与对照组相比,GDM组小鼠胎盘组织出现明显损伤,miR-122-5p表达水平降低,NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。MUVECs能对胎盘源性Exo进行摄取,且GDM小鼠胎盘Exo上调了MUVECs中miR-122-5p表达水平(P<0.001)。GDM小鼠胎盘Exo共培养的MUVECs较对照小鼠胎盘Exo共培养的MUVECs细胞活性增强,凋亡能力减弱,迁移能力和成管能力均增强,且NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。过表达miR-122-5p的MUVECs细胞活性增强,凋亡能力减弱,迁移能力和成管能力均增强,NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);抑制miR-122-5p表达后,MUVECs细胞活性减弱,凋亡能力增强,迁移能力和成管能力均减弱,NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论胎盘源性Exo的miR-122-5p对GDM MUVECs起到保护作用,且可能通过调控NLRP3炎症小体的活化来改善MUVECs的损伤。

外周血微RNA-122-5p和解整合素金属蛋白酶10在桥本甲状腺炎中的表达及临床意义

目的探究外周血微RNA-122-5p(miR-122-5p)和解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)在桥本甲状腺炎(HT)病人中的表达情况及临床意义。方法选择2020年1月至2022年1月在南京医科大学第四附属医院经病理诊断的HT病人86例作为HT组,同期选择经甲状腺腺瘤切除手术的非癌病人62例作为对照组。收集两组病人的一般资料并检测甲状腺功能。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组外周血中miR-122-5p表达水平,ELISA法检测两组外周血中ADAM10水平。Pearson法分析miR-122-5p或ADAM10水平与甲状腺功能参数的相关性。logistic回归分析模型评估HT的影响因素。ROC曲线用于评估miR-122-5p和ADAM10对HT发生的诊断价值。结果与对照组比较,HT组游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)[(8.79±0.85)nmol/L比(13.15±1.21)nmol/L]、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)[(3.74±0.15)nmol/L比(4.56±0.24)nmol/L]水平及ADAM10表达[(3.21±1.13)μg/L比(5.02±1.69)μg/L]降低(P<0.05);促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、C反应蛋白(CRP)水平及miR-122-5p表达(1.57±0.46比1.02±0.34)均升高(P<0.05)。HT组和对照组miR-122-5p与TGAb、TPOAb、CRP水平呈正相关(P<0.05);ADAM10与TGAb、TPOAb及CRP均呈负相关(P<0.05)。HT组中miR-122-5p与ADAM10水平呈负相关(r=−0.46,P<0.05)。MiR-122-5p、ADAM10、TGAb和TPOAb是HT发生的影响因素(P<0.05)。MiR-122-5p、ADAM10及二者联合区分HT组和对照组的最佳截断值分别为1.22、4.74μg/L、0.42,曲线下面积分别为0.83(0.76,0.89)、0.85(0.78,0.90)、0.91(0.85,0.95)。结论HT病人外周血中miR-122-5p表达升高,ADAM10水平降低,二者与甲状腺微结构损伤有关,且对HT的早期诊断具有一定价值。

miR-122-5p通过靶向Circ_MTM1在HBV相关肝纤维化中的分子机制研究

目的:研究微小核糖核酸microRNA-122-5p (miR-122-5p)对HBV感染相关肝纤维化的作用及分子机制。方法:分别用采用HBsAg、HBeAg酶联免疫吸附剂测定(ELISA)试剂盒和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HBV表面抗原(HBsAg)、抗原(HBeAg)水平以及HBV DNA、HBV共价闭合环状DNA (cccDNA)水平,并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测相应蛋白水平。RT-qPCR检测人肝星状细胞(LX-2细胞)和HBV相关肝纤维化组织细胞中Circ_MTM1、miR-122-5p的表达情况。应用生物信息学软件StarBaseV3.0预测miR-122-5p的可能靶基因,并应用双荧光素酶检测方法判定miR-122-5p对其靶基因Circ_MTM1表达的调节作用。结果:miR-122-5p在HBV相关性肝纤维化组织和细胞中低表达,而Circ_MTM1在HBV相关性肝纤维化组织和细胞中高表达。miR-122-5p靶向下调Circ_MTM1的表达,通过下调Circ_MTM1可抑制HBV相关肝纤维化的进程。结论:miR-122-5p与Circ_MTM1在HBV相关肝纤维化中存在靶向关系,Circ_MTM1通过调控肝纤维化相关蛋白的水平在HBV相关肝纤维化进程中起到启动子作用。

miR-122-5p靶向KDM2A对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的探讨miR-122-5p靶向组蛋白去甲基化酶2A(histone demethylation protein 2A,KDM2A)对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法体外培养人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC),利用qRT-PCR和Western blot方法检测miR-122-5p和KDM2A对BMSC成骨相关指标(OPN、OCN和RUNX2)表达情况的影响;茜素红染色和碱性磷酸酶染色检测miR-122-5p和KDM2A对BMSC钙沉积和碱性磷酸酶活性的影响;双荧光素酶实验验证miR-122-5p和KDM2A之间的结合关系;miR-122-5p inhibitor和si-KDM2A共转染研究两者对BMSC成骨分化的影响。结果miR-122-5p mimic和si-KDM2A能够促进BMSC成骨相关基因的表达水平、钙结节沉积及碱性磷酸酶活性,miR-122-5p和KDM2A两者之间存在靶向结合关系,且miR-122-5p能够靶向抑制KDM2A表达,进而促进BMSC成骨相关基因的表达水平、钙结节沉积及碱性磷酸酶活性。结论miR-122-5p靶向抑制KDM2A表达,进而促进BMSC成骨分化。

MicroRNA-122-5P通过靶向MMP-9抑制TPA诱导的SW480细胞侵袭迁移能力

目的:研究miR-122-5p对TPA诱导人结直肠癌SW480细胞MMP-9表达及侵袭迁移的影响。方法:利用生物信息学筛选结直肠癌差异基因,预测其靶基因miRNA。用TPA(100nM)处理SW480细胞,通过RT-qPCR、Western blot法检测基因和蛋白表达水平;明胶酶谱法检测MMP-9细胞外分泌情况;Transwell检测细胞侵袭和迁移能力。结果:MMP-9在结肠癌组织中高表达,筛选出上游靶基因miR-122-5P;TPA诱导MMP-9 mRNA表达呈时间依赖性上调(P<0.01),诱导miR-122-5p的表达下调(P<0.01);过表达miR-122-5p明显下调TPA诱导的MMP-9 mRNA和蛋白表达(P<0.05),且MMP-9胞外分泌减少,细胞的侵袭、迁移能力显著下降(P<0.01)。结论:miR-122-5p可能通过调控TPA诱导MMP-9的表达,进而抑制结直肠癌SW480细胞侵袭和迁移能力,为克服结直肠癌转移研究提供新的思路。

血清miR-122-5p、miR-34a水平与急性颅脑损伤减压术患者临床预后的关系

目的探讨血清微小核糖核酸-122-5p(miR-122-5p)、微小核糖核酸-34a(miR-34a)水平与急性颅脑损伤减压术患者临床预后的关系。方法选取2019年1月—2020年1月绵阳市中心医院接受的急性颅脑损伤减压术治疗患者83例作为研究对象,根据疾病预后情况分为预后良好组51例与预后不良组32例,同期选择体检健康人员38例作为健康组,检测3组受试者血清miR-122-5p、miR-34a水平,分析两种血清与急性颅脑损伤减压术患者临床预后的关系,再根据受试者操作特征曲线(ROC)分析疾病诊断的灵敏度、特异度。结果血清miR-122-5p、miR-34a水平健康组与预后良好组均高于预后不良组,差异具有统计学意义(P<0.005)。急性颅脑损伤与血清miR-122-5p、miR-34a水平呈正相关(P<0.001)。根据ROC曲线可知,miR-122-5p灵敏度、特异度分别为65.6%、81.6%(P<0.001),miR-34a灵敏度、特异度分别为84.4%、63.2%(P<0.000),miR-122-5联合miR-34a灵敏度、特异度分别为87.5%、86.8%(P<0.000)。结论血清miR-122-5、miR-34a与急性颅脑损伤减压术患者临床预后有关,可以作为评估急性颅脑损伤减压术患者临床预后的主要方法,且miR-122-5联合miR-34a检测效果更好。

HIV-1感染患者外周血单核细胞miR-20a、miR-122表达与HIV-1 DNA、HIV-1 RNA及CD4+T淋巴细胞计数的关系

目的检测人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)微小RNA(miR)-20a、miR-122表达水平,探讨其与HIV-1 DNA、HIV-1 RNA及CD4+T淋巴细胞计数关系。方法选取2021年5月~2023年1月南通市第三人民医院收治的HIV-1感染患者110例作为HIV-1组,依据HIV-1 DNA分为HIV-1 DNA高表达组(DHG组,n=65例)、HIV-1 DNA低表达组(DLG组,n=45例);依据HIV-1 RNA分为HIV-1 RNA高表达组(RHG组,n=49例)、HIV-1 RNA低表达组(RLG组,n=61例);根据CD4+T淋巴细胞计数分为<200 cellsμl组(n=36例)、200~350 cellsμl组(n=48例)、>350 cellsμl组(n=26例)。另选取同时间段健康体检者110例作为健康对照组。荧光定量PCR法检测PBMCs miR-20a、miR-122、HIV-1 DNA以及血浆HIV-1 RNA,流式细胞仪获取CD4+T淋巴细胞计数。比较各组患者PBMCs中miR-20a、miR-122水平差异。Pearson法分析两指标间相关性。结果HIV-1组PBMCs中miR-20a、miR-122水平高于健康对照组[(1.72±0.45)vs.(1.09±0.12)、(1.51±0.38)vs.(1.04±0.07)],差异有统计学意义(t=14.188、12.757,P<0.05)。与DLG组相比,DHG组患者PBMCs中miR-20a、miR-122水平均明显升高[(1.91±0.48)vs.(1.45±0.41)、(1.64±0.39)vs.(1.32±0.37)],差异有统计学意义(t=5.239、4.320,P<0.05)。RHG组PBMCs中miR-20a、miR-122水平高于RLG组[(1.85±0.46)vs.(1.62±0.44)、(1.70±0.40)vs.(1.36±0.36)],差异有统计学意义(t=2.670、4.685,P<0.05)。<200 cellsμl组、200~350 cellsμl组、>350 cellsμl组miR-20a、miR-122水平逐次降低[(2.04±0.55)、(1.67±0.46)、(1.37±0.29),(1.73±0.40)、(1.51±0.39)、(1.21±0.33)],差异有统计学意义(F=16.525,14.117,P<0.05)。相关性结果显示,HIV-1组PBMCs中miR-20a与miR-122呈正相关(r=0.651,P<0.05),miR-20a、miR-122均与HIV-1 DNA(log 2 DNA)有明显正相关(r=0.569、0.471,P<0.05),与HIV-1 RNA(log 2 RNA)有明显正相关(r=0.491、0.444,P<0.05),但与CD4+T淋巴细胞计数呈负相关性(r=-0.555、-0.536,P<0.05)。结论HIV-1感染者PBMCs中miR-20a、miR-122表达水平升高,与CD4+T淋巴细胞计数及HIV-1病毒的DNA和RNA定量检测结果相关,可能与病毒储存库建立有关,检测二者水平可反映患者感染状况。

超声造影联合血清miR-122-5p、miR-133a-3p水平对肝细胞癌的诊断价值

目的探究超声造影(CEUS)联合血清miR-122-5p、miR-133a-3p水平对肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法选取45例HCC患者及45例慢性乙型肝炎患者作为研究对象。采集患者血液标本,分离血清,采用荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测患者血清miR-122-5p、miR-133a-3p表达量。同时为患者进行CEUS,评估其诊断价值。另外绘制受试者工作曲线(ROC)、进行COX多因素分析评估CEUS联合血清miR-122-5p、miR-133a-3p水平对肝细胞癌的诊断价值。结果HCC组始消时间、持续时间、达峰时间及始增时间均低于对照组(P<0.05);绘制CEUS各项指标诊断HCC的ROC曲线显示,单独检测时始增时间的敏感度最高,始消时间、持续时间的特异度最高,联合检测的AUC为0.978,特异度及敏感度均处于较高水平。HCC组血清miR-122-5p、miR-133a-3p表达水平均明显低于对照组;绘制血清miR-122-5p、miR-133a-3p水平诊断HCC的ROC曲线,单独检测时,miR-133a-3p的敏感度最高,miR-122-5p的特异度最高,两者联合检测具有较高的敏感度及特异度。CEUS联合血清miR-122-5p、miR-133a-3p水平诊断HCC的ROC曲线显示,AUC为0.999,截断值为0.712,敏感度、特异度分别为97.78%,99.99%,约登指数为0.9778,95%CI为0.958~1.000。行多因素COX分析显示,始消时间、达峰时间、始增时间、血清miR-122-5p、miR-133a-3p均为影响HCC诊断的因素(P<0.05)。结论CEUS联合血清miR-122-5p、miR-133a-3p水平对肝细胞癌具有较高的诊断价值。

慢性萎缩性胃炎患者血清和胃黏膜组织中hsamiR-122-5p的表达及临床意义

目的探究慢性萎缩性胃炎(CAG)患者血清和胃黏膜组织中hsamiR-122-5p的表达水平及临床意义。方法选择2019年12月至2021年6月琼海市中医院消化内科收治的60例CAG患者纳入研究组,另选择同期在该院接受胃镜检查的60名健康体检者纳入对照组。采用实时荧光定量PCR法测定血清和胃黏膜组织中hsa-miR-122-5p的表达水平,并采用ROC曲线分析其对CAG的诊断效能。比较不同病理特征CAG患者的血清和胃黏膜组织中hsa-miR-122-5p的表达水平,采用Pearson相关系数法分析其与患者病理特征的相关性。结果与对照组比较,研究组血清和胃黏膜组织中hsa-miR-122-5p的表达水平均显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。血清和胃黏膜组织中hsa-miR-122-5p的表达水平诊断CAG的敏感度分别为77.59%和71.24%,特异度分别为79.74%和69.98%,ROC曲线下面积(AUC)分别为0.687和0.623;2项联合检测诊断CAG的敏感度、特异度和AUC分别为79.83%、80.11%和0.695。随着CAG患者胃黏膜萎缩程度、肠上皮化生程度及异型增生程度加重,其血清和胃黏膜组织中hsa-miR-122-5p的表达水平均显著升高,组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。相关性分析结果显示,CAG患者血清和胃黏膜组织中hsa-miR-122-5p的表达水平与胃黏膜萎缩程度、肠上皮化生程度及异型增生程度均呈显著正相关(P均<0.05)。结论CAG患者血清和胃黏膜组织中hsa-miR-122-5p表达上调,其可能参与了CAG的发生和发展过程,并有可能成为该疾病临床诊断和病情评估的新指标。

食管鳞癌中miR-122-5P的表达及其临床病理学意义

目的探究食管鳞癌组织中miR-122-5P的表达、临床病理学意义及生物学行为。方法选取食管鳞癌患者74例,收集手术切除的食管鳞癌组织及其配对的癌旁正常食管组织。采用原位杂交技术检测miR-122-5P的表达,比较食管鳞癌组织与癌旁正常食管组织miR-122-5P表达差异,分析其表达及与肿瘤直径、病理分级、淋巴结转移等临床病理特征的关系。结果miR-122-5P在食管鳞癌中的阳性表达率35.1%(26/74)明显低于癌旁正常食管组织77.0%(57/74)(χ^(2)=26.363,P=0.000)。miR-122-5P与食管鳞癌的肿瘤部位、浸润深度表达差异有统计学意义(χ^(2)=16.662,P=0.000;χ^(2)=10.723,P=0.005)。食管鳞癌组织中miR-122-5P的表达水平与患者性别、年龄、病理类型、肿瘤直径、病理分级、脉管转移、神经转移及淋巴结转移差异均无统计学意义(P>0.05)。结论miR-122-5P在食管鳞癌组织和癌旁组织表达不同,食管鳞癌组织中表达下调,推测其可能具有抑癌基因的功能。