褐飞虱唾液腺中水稻抗性适应基因的分离

褐飞虱Nilaparvatalugens（StM）是一种危害水稻的重要害虫，在取食水稻时其唾液腺分泌的一些物质能激发水稻产生一系列生理生化反应。为了从褐飞虱唾液腺中得到编码这些分泌物的基因，本研究运用抑制差减杂交法（suppressedsubtractivehybridization，SSH）和镜像选择（mirrororientationselection，MOS）法，分别以取食抗虫水稻B5和敏感水稻TNl的褐飞虱唾液腺cDNA为tester和driver，构建了一个含有768个克隆子的抑制差减杂交文库。经筛选得到102个EST，插入序列长250～1000bp，代表35个单基因。其中28个表达上调，7个表达下调。经GenBank里的blastx在线分析工具分析，除了约1／3的转录序列没有相匹配的蛋白质外，其他EST所代表的氨基酸序列与已知蛋白存在不同程度的相似度，如海藻溏酶、卵黄蛋白原、ca。’结合蛋白、组织蛋白酶B（cathepsinB）、黏液样蛋白（putativemucin—likeprotein）、羧酸酯酶（carboxylesterase）和碳酸酐酶（cah·3carbonicanhydrase）等，且多数蛋白含有信号肽，推测与分泌有关。本研究将为进一步研究刺吸式昆虫中的激发子蛋白奠定了一定的基础。

猪霍乱沙门菌疫苗株C500毒力致弱的主要原因是rpoS基因的缺失（英文）

目的猪霍乱沙门菌疫苗株C500在我国应用于仔猪副伤寒的防控已长达50多年,然而由于C500是通过化学诱变法获得,因此其遗传背景仍不清楚。本文从基因组水平揭示C500疫苗株毒力致弱的主要原因。方法利用MOH-SSH方法比较了强毒株C78-2与C500之间的基因组差异,结合荧光定量PCR与动物实验检测缺失基因对疫苗株毒力的影响。结果发现C500缺失了6个基因(asr、ydgF、ydgD、ydgE、rpoS和ptsG)。其中,作为调控基因的rpoS在沙门菌致病过程中发挥着重要的作用。荧光定量PCR检测发现rpoS调控的基因在C500中的表达出现不同程度的下调。此外,动物实验结果显示rpoS缺失的C78-2突变株C78-2ΔrpoS毒力下降了100 000倍。结论 rpoS基因的缺失是导致C500致弱的主要因素。