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Changes in bacterial community and abundance of functional genes in paddy soil with cry1Ab transgenic rice 被引量:1
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作者 SONG Ya-na CHEN Zai-jie +2 位作者 WU Ming-ji LI Gang WANG Feng 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2021年第6期1674-1686,共13页
A field experiment involving cry1Ab transgenic rice(GM) and its parental non-cry1Ab rice(M) has been on-going since 2014. The diversity of the bacterial communities and the abundance of the microbial functional genes ... A field experiment involving cry1Ab transgenic rice(GM) and its parental non-cry1Ab rice(M) has been on-going since 2014. The diversity of the bacterial communities and the abundance of the microbial functional genes which drive the conversion of nitrogen in paddy soil were analyzed during the growth period of rice in the fifth year of the experiment, using 16 S rRNAbased Illumina Mi Seq and real-time PCR on the amoA, nirS and nirK genes. The results showed no differences in the alpha diversity indexes of the bacterial communities, including Chao1, Shannon and Simpson, between the fields cultivated with line GM and cultivar M at any of the growth stages of rice. However, the bacterial communities in the paddy soil with line GM were separated from those of paddy soil with cultivar M at each of the growth stages of rice, based on the unweighted Uni Frac NMDS or PCoA. In addition, the analyses of ADONIS and ANOSIM, based on the unweighted Uni Frac distance, indicated that the above separations between line GM and cultivar M were statistically significant(P<0.05) during the growth season of rice. The increases in the relative abundances of Acidobacteria or Bacteroidetes, in the paddy soils with line GM or cultivar M, respectively, led to the differences in the bacterial communities between them. At the same time, functional gene prediction based on Illumina Mi Seq data suggested that the abundance of many functional genes increased in the paddy soil with line GM at the maturity stage of rice, such as genes related to the metabolism of starch, amino acids and nitrogen. Otherwise, the copies of bacterial amo A gene, archaeal amo A gene and denitrifying bacterial nir K gene significantly increased(P<0.05 or 0.01) in the paddy soil with line GM. In summary, the release of cry1Ab transgenic rice had effects on either the composition of bacterial communities or the abundance of microbial functional genes in the paddy soil. 展开更多
关键词 cry1Ab transgenic rice bacterial community microbial functional gene Illumina miseq platform real-time PCR
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1株H6N6亚型禽流感病毒分子遗传特性分析 被引量:2
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作者 祁思敏 宋勇春 +2 位作者 崔仑标 焦永军 祁贤 《微生物与感染》 2017年第5期287-293,共7页
本研究采用无特定病原体(specific pathogen free,SPF)鸡胚,从某活禽市场环境中分离出1株H6N6亚型禽流感病毒(A/environment/Zhenjiang/zj18/2013,en/zj18)。通过二代测序技术进行全基因组测序,通过BLASTn进行同源性检索,并采用MEGA5.0... 本研究采用无特定病原体(specific pathogen free,SPF)鸡胚,从某活禽市场环境中分离出1株H6N6亚型禽流感病毒(A/environment/Zhenjiang/zj18/2013,en/zj18)。通过二代测序技术进行全基因组测序,通过BLASTn进行同源性检索,并采用MEGA5.0软件构建系统发生树。基因进化树分析表明,分离株en/zj18的所有8个基因节段(PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS)均与近年来中国华东地区流行的H6N6亚型禽流感病毒的相应基因位于同一进化分支,与参考株的核苷酸同源性达96.7%~99.6%。分离株en/zj18的HA蛋白裂解位点为PQIETR↓GL,是低致病性禽流感病毒的分子特征。HA蛋白上关键受体结合位点190和228位(按H3亚型的HA蛋白序列排序)氨基酸分别是E和G,理论上更易与α2,3-半乳糖苷唾液酸受体结合。结果提示,需加强活禽市场禽流感病毒的持续监测,从而为有效应对禽流感病毒对公共卫生的持续威胁提供科学依据。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H6N6亚型 病毒分离 基因组测序
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100重微单倍型复合检测体系建立及其在BGI-500RS和MiSeq测序平台的应用 被引量:4
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作者 陈邦柳 冯耀森 +5 位作者 王羽 赵杰 张驰 康克莱 叶健 王乐 《中国法医学杂志》 CSCD 2022年第6期531-537,共7页
目的 建立一个在BGI-500RS和MiSeq测序平台均适用的微单倍型复合检测体系,评估此微单倍型体系在两个测序平台的检测效能。方法 针对100个微单倍型基因座设计扩增引物并优化复合检测体系,分别采用扩增后酶连接头的方法实现BGI-500RS和Mi... 目的 建立一个在BGI-500RS和MiSeq测序平台均适用的微单倍型复合检测体系,评估此微单倍型体系在两个测序平台的检测效能。方法 针对100个微单倍型基因座设计扩增引物并优化复合检测体系,分别采用扩增后酶连接头的方法实现BGI-500RS和MiSeq双平台的文库构建,对11名个体DNA样本分别在两个平台进行测序。结果 本研究建立了一个包含100个微单倍型基因座的复合检测体系,该体系在BGI-500RS和MiSeq测序平台均适用。利用本体系在BGI-500RS和MiSeq平台检测11份样本,97%以上的基因座在两平台均可稳定检出。两个平台所有杂合子基因座的平均等位基因覆盖率都在0.7以上,说明基因座内均衡性良好。同一样本在两平台均检出的基因座的分型一致性达100%。结论 本研究建立了一个包含100个微单倍型基因座的复合扩增体系,该体系在BGI-500RS和MiSeq测序平台检测结果的均衡性、稳定性相当。相同样本在两个平台均检出的基因座分型完全一致,测序深度的差异源自测序平台的通量差异。 展开更多
关键词 法医遗传学 微单倍型 二代测序 BGI-500RS miseq
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人粪便和阴道菌群16S rRNA基因Illumina MiSeq平台和NovaSeq平台测序结果的比较
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作者 胡楚翘 王璐璐 +3 位作者 周方玥 黄荷凤 吴琰婷 申剑 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期254-271,共18页
Illumina MiSeq是最常用的人体共生菌群16S rRNA基因高通量测序平台之一,NovaSeq是Illumina最新推出的、通量更高的测序平台。虽然两个平台的测序原理相同,但软硬件和试剂有差异,目前尚不清楚在两个平台进行16S rRNA基因测序得到的人体... Illumina MiSeq是最常用的人体共生菌群16S rRNA基因高通量测序平台之一,NovaSeq是Illumina最新推出的、通量更高的测序平台。虽然两个平台的测序原理相同,但软硬件和试剂有差异,目前尚不清楚在两个平台进行16S rRNA基因测序得到的人体共生菌群alpha和beta多样性结果的异同。本研究分别在两个平台对10个人粪便样本和8个人阴道拭子样本的16S rRNA基因V3-V4区进行PCR扩增、建库和测序,用统一的生物信息学流程处理数据。在相同测序深度下,NovaSeq检测到更多的低丰度细菌;在门、纲、目、科、属和扩增子序列变体(amplicon sequence variant,ASV)水平上,两个平台检测到的优势细菌的种类一致,且相对丰度呈显著正相关,同一样本中若干优势细菌的丰度在两个平台之间有显著差异。在两个平台之间,所有样本的alpha多样性指数Shannon、Pielou′s evenness、观测到的ASV数以及粪便样本的Faith′s PD指数呈显著正相关,前3个alpha多样性指数的绝对数值有显著差异。在beta多样性方面,所有样本的菌群整体结构在两个平台之间没有显著差异,两个平台鉴定的粪便菌群和阴道菌群之间的差异细菌大多数(23个ASV中的19个)是相同的。以上结果表明,对于人粪便样本和阴道拭子样本,MiSeq和NovaSeq平台不改变不同样本之间优势细菌丰度、alpha多样性指数和beta多样性的相对差异,但相同样本在两个平台测定的细菌的种类数目和丰度、alpha多样性指数的绝对数值会有显著差异。 展开更多
关键词 16S rRNA基因 miseq平台 NovaSeq平台 肠道菌群 阴道菌群
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Biostyr曝气生物滤池的沿程微生物多样性 被引量:6
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作者 王琳 肖娇玲 窦娜莎 《环境工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期6283-6289,共7页
采用高通量测序Illumina MiSeq方法对Biostyr曝气生物滤池(BAF)沿程微生物多样性进行研究,分析了滤池内不同高度样品中菌群类别、群落组成及不同样品间物种差异及进化关系等;同时测定各高度样品的COD、NH_4^+-N和磷变化规律,与微生物特... 采用高通量测序Illumina MiSeq方法对Biostyr曝气生物滤池(BAF)沿程微生物多样性进行研究,分析了滤池内不同高度样品中菌群类别、群落组成及不同样品间物种差异及进化关系等;同时测定各高度样品的COD、NH_4^+-N和磷变化规律,与微生物特性进行了对应性分析。结果表明,Biostyr曝气生物滤池优势菌群主要为拟杆菌、疣微菌门、厚壁菌门和变形菌门,滤池沿程微生物的变化主要表现在数量上的变化,而群落结构的变化不明显,这是沿程理化条件变化引发微生物在空间上发生变化的结果。 展开更多
关键词 ILLUMINA miseq平台 曝气生物滤池 脱氮除磷 微生物多样性
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石油污染对土壤细菌结构特征的影响 被引量:7
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作者 谭银萍 马媛 吕杰 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期193-198,共6页
[目的]探究准东油田地区石油污染对土壤细菌结构特征的影响。[方法]提取准东油田的背景土和油污土中的细菌DNA并进行PCR扩增,利用Miseq平台对其16S r DNA进行测序统计。[结果]总共得到93 033个细菌16S rRNA有效序列,划分为371个OTU单元... [目的]探究准东油田地区石油污染对土壤细菌结构特征的影响。[方法]提取准东油田的背景土和油污土中的细菌DNA并进行PCR扩增,利用Miseq平台对其16S r DNA进行测序统计。[结果]总共得到93 033个细菌16S rRNA有效序列,划分为371个OTU单元;样品中优势菌群是放线菌门(Actinobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)及变形菌门(Proteobacteria),厚壁菌门在背景样本中总数为29 732个,污染样本中为8 097个,数量剧减;变形菌门和放线菌门在石油污染土样中数目分别增长70%和47%;污染样品中多样性shannon指数平均为3.77,高于背景样品的2.77。[结论]证明了石油污染物对环境中的细菌结构影响显著,石油污染土壤中细菌结构多样性高于背景土壤,环境中能降解利用石油烃的菌种可能属于放线菌门和变形菌门。 展开更多
关键词 石油污染 细菌16SrRNA 细菌群落结构 miseq平台 多样性
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松嫩平原盐碱土细菌群落结构及环境互馈关系 被引量:1
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作者 仇大成 廖子亚 +3 位作者 邢庆花 王海胜 刘杰 赵百锁 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期2037-2049,共13页
【背景】松嫩平原盐碱土中孕育着能抗衡外界盐碱双重胁迫的细菌群。【目的】通过分析松嫩平原盐碱土的理化性质、细菌群落组成及其主控环境因子,为阐明未培养细菌在盐碱土的生物地球化学循环过程中的作用和定向培养功能细菌提供数据支... 【背景】松嫩平原盐碱土中孕育着能抗衡外界盐碱双重胁迫的细菌群。【目的】通过分析松嫩平原盐碱土的理化性质、细菌群落组成及其主控环境因子,为阐明未培养细菌在盐碱土的生物地球化学循环过程中的作用和定向培养功能细菌提供数据支持。【方法】以松嫩平原西部的黑龙江省大庆和吉林省的松原、白城3个地区采集的21份盐碱土样为样本,以细菌16S rRNA基因V4高变区为靶向序列,应用Illumina MiSeq平台,结合生物信息学手段进行深入解析。【结果】松嫩平原盐碱土属于“苏打型(Na^(2+)CO_(3)和NaHCO_(3)^(-))”,主要含Na^(2+)和K^(+)及HCO_(3)^(-),pH范围为8.47–10.40。黑龙江省大庆市萨尔图区DC11样本细菌的多样性最高,而黑龙江省肇州县DC2样本的多样性最低。21个样本中的细菌群被归为26个门423个科845个属。其中,以放线菌门(47.3%)、变形菌门(30.3%)、绿弯菌门(7.5%)、芽单胞菌门(7.0%)、拟杆菌门(2.5%)、厚壁菌门(1.7%)和酸杆菌门(1.5%)为主(共计97.8%)。在科水平上,通过聚类热图和主成分分析(principal component analysis,PCA),21个样本被分为3组。冗余分析(redundancy analysis,RDA)发现总盐、Na^(2+)、HCO_(3)^(-)含量和pH是影响细菌群落组成的主要环境因子。【结论】松嫩平原盐碱土中栖息繁殖多种类型的细菌群,可为微生物及其基因等资源的开发利用提供理论基础。 展开更多
关键词 松嫩平原 “苏打型”盐碱土 Illumina miseq平台 细菌群落结构
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