蔓性千斤拔种子处理及常温贮藏研究

研究不同处理方法及常温贮藏时间对蔓性千斤拔种子发芽的影响。结果表明:(1)浓硫酸和机械磨擦处理均能显著改善种子的发芽状况,其中浓硫酸处理以处理10～15min最佳,其发芽率、发芽势、发芽指数分别较对照高2倍、14.6倍和14.29倍;机械处理以处理180s最佳,其发芽率、发芽势和发芽指数分别较对照高2.67倍、15.17倍和7.51倍。(2)贮藏时间以当年种子的发芽特性最佳,常温下贮藏1年,种子发芽率下降至83%,与当年种子发芽率无明显差异;贮藏2年,发芽率降至65.5%,与当年种子发芽率达到显著差异;贮藏3年,与当年采收种发芽率差异达到极显著水平。

蔓性千斤拔与大叶千斤拔的鉴别研究

目的:对蔓性千斤拔及大叶千斤拔进行鉴别研究,建立其全面、准确的鉴别方法。方法:采用薄层色谱法和高效液相色谱法对两种千斤拔干燥根中的染料木苷进行定性定量分析,通过DNA分子鉴定技术建立其DNA条形码。结果:在TLC的基础上,运用HPLC建立了检测千斤拔药材中染料木苷含量的方法;建立了基于ITS2序列的蔓性千斤拔与大叶千斤拔的DNA条形码,从分子水平上将二者区分。结论:运用不同的鉴定方法可对蔓性千斤拔及大叶千斤拔进行准确、全面、快速的鉴定,避免了因为方法的局限性影响鉴别的准确性,为千斤拔药材的鉴别提供新的科学依据。

广西蔓性千斤拔资源调查研究

【目的】调查广西蔓性千斤拔的野生资源地理分布特点、生长特性和种群特征,为广西蔓性千斤拔的种质资源保存和良种选育提供依据。【方法】采用文献检索与样本调查的方法对广西蔓性千斤拔的植物学特征、生物学特征进行汇总整理;采用实地调查和走访调查相结合的方法对广西蔓性千斤拔的野生资源的分布及生态环境、群落特征、生长特性等进行调查。【结果】野生蔓性千斤拔群落特征与生长的地形地貌有一定的相关性,通常生于河边、田埂、丘陵地区,适应性强,对温度、土壤及光照的适应范围较宽;野生蔓性千斤拔在不同的生长环境中其生长特性存在较大的差异;人工栽培蔓性千斤拔各产量构成因素指标均远高于野生。【结论】系统探清了广西蔓性千斤拔的野生资源地理分布特点、生长特性和种群特征,为蔓性千斤拔的种质资源保存和良种选育提供依据。广西蔓性千斤拔野生资源濒于枯竭,亟待保护。

蔓性千斤拔醋酸乙酯部位的化学成分研究

目的研究蔓性千斤拔的化学成分。方法采利用硅胶柱分离蔓性千斤拔醋酸乙酯提取物,并通过理化性质和TLC、UV、1H-NMR、13C-NMR等分析鉴定化合物结构。结果分离得到3个化合物,分别鉴定燃料木素(Ⅰ);5,7,2',4'-四羟基异黄酮(Ⅱ);3,5,7,3',5'-五羟基-4'-甲氧基黄烷(Ⅲ)。结论为千斤拔的进一步开发研究提供依据。

正交设计法优选千斤拔总生物碱的提取工艺

目的:筛选千斤拔药材中总生物碱的提取工艺.方法:以总生物碱的最大吸光度值为指标,采用正交实验设计法筛选生物碱的提取方法及其工艺参数.结果:千斤拔中总生物碱的最佳提取工艺为:酸水渗漉提取法,最佳提取工艺参数为硫酸浓度为3%,渗漉时间为12 h,流速为1 ml.min-1.结论:采用该提取方法,可以得到较高产率的生物碱类成分;符合工业化生产要求.

RP-HPLC法筛选千斤拔有效成分的提取工艺

研究了千斤拔有效成分提取分离的最佳工艺条件,通过RP-HPLC法进行了单因素和正交试验考察提取工艺.结果表明,千斤拔有效成分的最佳提取分离工艺为:分别用石油醚、三氯甲烷脱脂,脱脂后药渣加入料液比为1∶14的醋酸乙酯100℃回流提取3h,提取2次.

不同种不同药用部位不同产地千斤拔中总黄酮的含量测定

目的用紫外分光光度法对不同入药部位、不同产地5种千斤拔中总黄酮的含量进行测定,评价其非传统入药部位及不同种、不同产地的药材质量,以期寻找新药用资源和新的药用部位。方法紫外-可见分光光度法于510nm波长处测定总黄酮的量。结果芦丁在9.17～64.19μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率99.63%,RSD为1.36%(n=9)。不同种千斤拔中,与蔓性千斤拔、大叶千斤拔(《中国药典》收载)比较,球穗千斤拔、宽叶千斤拔根中总黄酮的含量较低,腺毛千斤拔根中总黄酮的含量接近;各个种叶中总黄酮的含量普遍较高,茎中量较低。不同产地千斤拔根中:大叶千斤拔以购于四川成都(云南产)含量最高,蔓性千斤拔采于湖北宜昌夷陵区最高,球穗千斤拔含量均较低。结论该方法简便、快速、准确,可用于千斤拔药材质量控制。不同产地中千斤拔总黄酮含量差异较大,说明产地的海拔高度、气候、土壤等条件、生长年限、贮藏年限等对千斤拔总黄酮含量有明显影响。从有效成分总黄酮、资源的综合及可持续利用角度考虑,千斤拔各种的叶可以与其根同等入药,其茎的含量也可以考虑使用;腺毛千斤拔可以与药典收载种同等入药。

不同生长素处理对蔓性千斤拔试管苗生根及移栽的影响

以蔓性千斤拔无菌试管苗作为试材,探讨NAAI、BA和IAA及不同浓度处理对生根及移栽的影响。结果表明：NAA不适合用于蔓性千斤拔试管苗的生根及移栽,当IBA在较低浓度范围0.5-1.0 mg/L时,对生根及移栽有显著的促进作用。IAA在0.5-1.5 mg/L浓度范围内对蔓性千斤拔试管苗生根及移栽有一定的促进作用,但其促进作用不如0.5-1.0 mg/L IBA处理。

大叶千斤拔与蔓性千斤拔的高效液相色谱指纹图谱鉴别研究

目的鉴别大叶千斤拔、蔓性千斤拔。方法采用HPLC法,Krosmasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,检测波长为274 nm,流速为1 ml/min,柱温为30℃。结果在选定色谱条件下,建立了稳定可控的高效液相色谱图;应用主成分分析法、系统聚类分析法将药材分成两类,并计算相似度。结论应用高效液相色谱法鉴别大叶千斤拔、蔓性千斤拔是可行的。

千斤拔总黄酮的提取与纯化工艺研究

目的:筛选千斤拔药材中总黄酮的提取与纯化工艺.方法:以芦丁含量为指标,采用正交实验设计法筛选总黄酮的提取方法及其工艺参数,用大孔吸附树脂分离纯化千斤拔总黄酮的条件优化.结果:千斤拔根中总黄酮的最佳提取工艺为:乙醇回流提取法,最佳提取工艺参数为回流时间为3h,料液比为1:14,乙醇浓度为50%,提取2次;D101型大孔树脂对千斤拔黄酮的静态饱和吸附量为35.40mg·g-1,解吸率为90.63%;动态吸附量为32.30mg·g-1,解吸率为87.63%;经大孔树脂分离纯化后总黄酮纯度提高了2.3倍.结论:该方法简单可行,适合用于千斤拔总黄酮的分离与纯化.

蔓性千斤拔挥发性成分的研究

研究蔓性千斤拔中的挥发性成分,将其与文献进行比较。方法:利用水蒸气蒸馏法提取蔓性千斤拔(Flemingia philippinensis Merr. et Rolfe)挥发油,用GC-MS进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果:鉴定出38个化学成分,其中相对百分率含量大于4%的分别确定为α-衣兰烯(1),异长叶烯(2),β-石竹烯(3),卡达烯(4),金合欢醇异构体(5)。结论:千斤拔挥发油中近84%成分已查清,与文献报道有所差异。

共有及变异峰率双指标序列法分析两种不同来源千斤拔红外指纹图谱

目的通过共有及变异峰率双指标序列法分析两种不同来源的千斤拔红外指纹图谱.方法以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水四种溶剂依次提取千斤拔药材不同极性部位成分及其药材测定其红外指纹图谱,研究各个样品之间的异同.结果采用该方法可区别出不同来源千斤拔药材.结论该方法便于两个及以上样品之间的比较,应用范围广,为不同来源的千斤拔药材鉴别及质量评价提供了简便的方法.

蔓性千斤拔组织培养中种子灭菌和芽增殖的研究

[目的]研究蔓性千斤拔组织培养中种子灭菌的方法,筛选适宜芽增殖的外植体及激素组合。[方法]用乙醇、次氯酸钠和升汞的不同组合对种子进行灭菌,然后比较顶芽和带腋芽的茎段作为外植体进行继代增殖的效果,探讨不同激素组合对芽增殖的影响。[结果]较好的种子灭菌方法为:75%乙醇30 s+10%NaClO10 min+0.1%HgCl25 min;带腋芽的茎段为较好的继代增殖外植体。6-BA对芽增殖有显著促进作用;KT对芽的增殖效果不如6-BA;芽增殖的最佳激素组合为6-BA2.0 mg/L+IAA0.1 mg/L,增殖倍数为6.74。[结论]获得了较好的种子灭菌方法,筛选出适合继代增殖培养的外植体和激素组合,为蔓性千斤拔组织培养的深入研究提供实验基础。

共有峰率和变异峰率双指标序列法鉴别千斤拔

目的以共有峰率和变异峰率双指标序列法分析不同种千斤拔指纹图谱。方法采用石油醚、氯仿、95%乙醇、水等四种溶剂分别提取千斤拔药材不同极性部位成分,测定其紫外、红外指纹图谱,研究各个样品之间的异同。结果该方法可以区别出不同种千斤拔药材。结论该方法便于两个及以上样品之间的比较,应用范围广,为千斤拔药材质量评价提供了简便的方法。

小叶千斤拔的生药学初研

目的：为研究和开发蝶形花科千斤拔属植物蔓性千斤拔Flemingia philippinensis Merr．et Rolfe Li提供理论依据，为其制定质量标准提供资料。方法：采用来源鉴别、性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别的方法对蔓性千斤拔进行系统的生药学研究。结果：根呈长圆柱形，上粗下细，极少分枝。蔓性千斤拔根横切面主要特征为木栓层细胞6～8列，排列整齐，切向延长；皮层窄，细胞多破碎；韧皮部窄，有少数韧皮纤维聚集成束；形成层成环；木质部十分发达，木射线由1～5列细胞构成。理化实验表明：蔓性千斤拔根含多种黄酮类化合物。结论：蔓性千斤拔是一味具有开发前景的民间药材，该研究为开发利用及制定质量标准提供生药学资料。

高效液相色谱法测定千斤拔中染料木苷的含量

建立用高效液相色谱法测定千斤拔中染料木苷含量的方法。千斤拔药材粉碎后，用甲醇浸泡、超声提取、过滤，取滤液进样。色谱仪为岛津LC-2010A，色谱柱为Agilent Extend-RP柱，流动相为乙腈-0．1％磷酸水溶液（19：81）洗脱，流速为1．0mL／min，紫外检测波长为262nm。结果表明：在范围内，线性关系良好，方法回收率高。本方法快速、简便、准确。

不同种千斤拔总酚、鞣质、水分、灰分的含量测定

目的:测定千斤拔的不同种、不同药用部位及不同产地根中多酚和鞣质的含量,不同种根中水分、灰分的含量测定,以期评价不同种的药材质量,为寻找新药源和新的药用部位提供一定的实验数据。方法:采用中国药典2005版总酚、鞣质、水分、灰分测定方法。结果:不同种千斤拔中:与蔓性千斤拔、大叶千斤拔(药典收载)比较,各种叶中鞣质、多酚的含量与根接近或更高,茎的含量较低;不同种以宽叶千斤拔、腺毛千斤拔较高,球穗千斤拔较低。不同种千斤拔根中灰分、酸不溶性灰分、水分含量差别不大,以采于广西恭城的球穗千斤拔含量较高。不同产地千斤拔根的鞣质、多酚含量中:大叶千斤拔以采于四川华西植物园的含量最高,蔓性千斤拔以购于深圳解放路(广东产)最高,球穗千斤拔含量均较低。结论:不同产地中千斤拔总酚、鞣质含量差异较大,说明产地的环境条件对其含量有明显影响。从有效成分总酚、鞣质和资源的综合、可持续利用角度考虑,建议进一步进行药理实验研究,考查千斤拔各种的叶和茎能否与其根同等入药;宽叶千斤拔、腺毛千斤拔能否与药典收载种同等入药。

蔓性千斤拔最佳采收期及根部总黄酮含量提取工艺研究

为研究蔓性千斤拔[Moghania philippinensis(Merr.Et Rolfe)Li.]的最佳采收期及根部总黄酮含量最佳提取工艺,采用紫外分光光度计法和L9(34)正交试验对其进行了优化。结果表明,蔓性千斤拔在次年10月总黄酮含量最高;在乙醇浓度90%、提取时间60 min、提取2次、提取温度100℃时,根部总黄酮得率最高。

千斤拔化学成分研究

目的研究千斤拔Flemingia philippinensis根的化学成分。方法采用硅胶、反向硅胶及葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等色谱手段进行化学成分的分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果从千斤拔根的75%乙醇提取物中分离出18个化合物,分别鉴定为lupinifolin(Ⅰ)f、lemichin D(Ⅱ)、5,7,3′,4′-四羟基异黄酮(Ⅲ)、5,7,2′,3′,4′-五羟基异黄酮(Ⅳ)、染料木苷(Ⅴ)、槐属苷(Ⅵ)、大黄酚(Ⅶ)、大黄素甲醚(Ⅷ)、大黄素(Ⅸ)、岛青霉素(islandicin,Ⅹ)、咖啡酸二十八烷酯(Ⅺ)、单棕榈酸甘油酯(ⅩⅡ)、滨蒿内酯(ⅩⅢ)、水杨酸(ⅩⅣ)、对甲氧基苯丙酸(ⅩⅤ)、白桦酸(ⅩⅥ)、羽扇豆醇(ⅩⅦ)、β-谷甾醇(ⅩⅧ)。结论以上化合物中,除Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、ⅩⅦ、ⅩⅧ外均为首次从千斤拔属植物中分离得到,其中化合物Ⅳ为首次从植物中分离得到的天然产物。

蔓性千斤拔根的化学成分研究

目的研究蔓性千斤拔Flemingia philippinensis根的化学成分。方法采用多种色谱方法进行分离纯化,运用各种波谱学方法鉴定化合物的结构。结果从蔓性千斤拔乙醇提取物的正丁醇萃取物中分离得到6个化合物,分别鉴定为3,5,7,4′-四羟基-3′-甲氧基黄酮-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、山柰酚-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、染料木苷(3)、芒柄花苷(4)、印度黄檀苷(5)和3′-O-甲基-香豌豆酚-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)。结论化合物1为新的黄酮醇碳苷类化合物,命名为千斤拔苷A,化合物2和4为首次从该属植物中分离得到。