组蛋白乙酰化/去乙酰化在冬凌草甲素诱导Molt-4细胞凋亡中的作用

目的:探讨组蛋白乙酰化/去乙酰化在冬凌草甲素(oridonin,Ori)诱导Molt-4细胞凋亡中的作用。方法不同浓度Ori(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L)作用于Molt-4细胞,MTT法检测细胞增殖;瑞氏染色光镜下观察细胞形态学变化;Western blot检测Cas-pase-3、组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylase inhibitor,HDAC1)及组蛋白H3乙酰化水平。结果:Ori抑制Molt-4细胞增殖,诱导细胞凋亡,呈时间-剂量依赖性;光镜下Molt-4细胞染色质固缩,凋亡小体出现。Ori活化Caspase-3,下调HDAC1表达,使组蛋白H3乙酰化水平上调。结论:Ori可能通过提高组蛋白H3乙酰化水平,抑制HDAC1活性诱导Molt-4细胞凋亡。

SDF—1a／54／KDEL基因电穿孔Molt-4细胞株的转染条件优化

目的探索以绿色荧光蛋白（GFP）为报告基因的重组质粒pEGFP／SDF-1a／54／KDEL电穿孔悬浮培养的Molt-4细胞的高效转染条件。方法通过控制脉冲幅度、脉冲电压、细胞生长状态等三个主要条件，采用不同条件组合后用电穿孔法将转入悬浮培养的Molt-4，用荧光显微镜和流式细胞仪观察转染率。结果传代后第二天的Molt-4细胞在260V、950μF得到最大转染率51．2％。荧光显微镜下可观察到被转染目的基因的细胞发出绿色荧光。结论优选260V、950μF和良好的细胞生长状态等条件下的Molt-4，可获得目的基因SDF—1a／54／KDEL的最高转染效率。