微型反向重复转座元件(MITE)靶区域扩增多态性:一种基于MITE的分子标记方法在水稻及其他植物上的应用

利用根据水稻微型反向重复转座元件（miniature inverted repeat transposable element，MITE）序列设计的特异引物，以及靶区域扩增多态性（target region amplification polymorphism，TRAP）方法中的随机引物及扩增程序对不同的水稻材料进行PCR扩增来检测MITE侧翼为基因区域的多态性，称之为微型反向重复转座元件靶区域扩增多态性（MITE-TRAP）。每次扩增能产生1条或多条清晰条带，条带的大小为100～1500bp，可在1．5％的琼脂糖凝胶上分离，有较好的可重复性，并发现了不同水稻品种间的多态性条带。进一步用基于水稻预测的MITE序列设计的特异引物对来自棉花、番茄及拟南芥的DNA样品进行MITE-TRAP扩增，均能成功扩增出条带，显示这种方法可以直接在其他植物中应用。还进一步讨论了该方法的优点及其可能的应用。

AhFAD2B基因MITE标记在高油酸花生选育中的应用

高油酸花生因其优质的油脂组成,越来越受到食品、油脂加工、种业等领域的青睐。然而,目前我国育成的高油酸品种遗传背景狭窄,拓宽遗传背景、开发相应的分子标记,有利于高效选育性状优异、适应性广的高油酸花生新品种。本研究针对具有F458背景的花生AhFAD2B基因的MITE插入突变,开发了用以辅助鉴定真杂种及后代材料的MITE分子标记。该方法运用1轮常规PCR反应和普通琼脂糖凝胶电泳就可以区分出3种基因型,简便易行、成本低、稳定性好,显著提高了目标性状选择效率。同时,以耐盐性强、油食兼用型北方大花生品种宇花2号(YH2)做母本,高油酸花生潍花25号(WH25)作父本,配制杂交组合,利用系谱法逐代进行田间农艺性状筛选,并运用MITE标记辅助进行F1真杂种和后代单株基因型鉴别,获得了5个半直立型和1个直立型高油酸花生新品系。并且,对这些品系主要种子品质性状和耐盐性进行了调查分析。

甜菜不育系育性核基因差异对应的2DE蛋白图谱差异分析

通过对内蒙古农牧业科学院特色作物所提供的选育过程中的不育系及对应保持系和选育稳定的不育系及对应保持系进行田间花粉调查分类,并对受试材料进行VNTR微卫星分子标记鉴定,从不育系中选出拥有Owen型不育胞质,然后对不同出粉情况的不育系进行二年生苗期、花期2DE双向蛋白电泳,并进行蛋白图谱差异分析,得出苗期在选定的参考组内385个蛋白点图谱中发现差异点12个,在参考组内的花期比对发现蛋白差异点总和23个,并且包含前者发现的12个蛋白差异点;后者中编号3~9各不育系同参考不育系对比发现差异点数分别为7,5,5,6,8,11,18个;参考组间的差异蛋白点数为23个,在各个差异中所共存的差异蛋白点数为4个,其中对拥有Owen型不育胞质且出粉情况较高的不育植株即编号9进行差异蛋白分析,发现5个不被参考组差异所覆盖的蛋白点,初步推测核质互作的核基因并没有抑制不育质基因的编码表达,而是核质基因共同表达后的蛋白系列调控导致甜菜育性恢复。