诺丽(Morinda citrifolia Linn.)离体培养研究

为诺丽遗传转化奠定基础及诺丽工厂化育苗提供依据,本实验以诺丽茎尖及带芽茎段为外植体,以3%MS培养基添加不同的激素组合进行离体培养,选择最佳的培养组合。实验结果表明,茎尖在MS或添加NAA(0.3 mg/L)的MS培养基中均可得到完整植株,且在后者中的长势更好。该研究成功建立了诺丽离体再生体系,为规模化生产及遗传转化提供了技术支撑。

诺丽茎段的离体再生

以诺丽(Morinda citrifolia Linn.)不含腋芽的茎段薄片为外植体,在添加不同种类和质量浓度的3%MS培养基上离体培养,建立模式Ⅰ为先诱导不定芽后诱导不定根、模式Ⅱ为先诱导不定根后诱导不定芽两种离体再生模式。结果表明:诱导诺丽茎薄片产生愈伤组织的最优培养基为3%MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA;在模式Ⅰ中,诱导诺丽茎薄片愈伤组织分化出不定芽的最优培养基为3%MS+3.0 mg/L 6-BA,诱导不定芽生根的最优培养基为3%MS+0.2 mg/L NAA;在模式Ⅱ中,诱导诺丽茎薄片的愈伤组织先分化出不定根再分化出不定芽的最优培养基为3%MS+0.05 mg/L NAA。

海巴戟天的离体快速繁殖(简报)

从多果无病虫害的母树中选取的幼嫩侧枝，经表面消毒后切取侧芽并接种到MS基本培养基，附加蔗糖浓度30g/L，BA2mg／L，NAA0．1mg／L初代培养基上，培养40d后，侧芽萌发率达80％以上。增殖培养基与初代培养基相同，以40-50d为一增殖周期，增殖系数达2-3倍。当新芽增殖到足够数量时，切取2-3cm的新芽接种到1／2MS大量元素，全量微量元素，蔗糖浓度为30g/L，IBA1mg／L，活性炭1g/L的生根培养基生根培养基上，生根率高达100％，植株在沙床的移栽成活率均达95％以上。30cm高的植株便可种植到大田。

诺丽叶片DNA的提取及ISSR-PCR反应体系的建立

[目的]提取诺丽(Morinda citrifoliaLinn.)叶片DNA,并建立ISSR-PCR反应体系。[方法]以3份采自海南、4份采自美国的诺丽种质的叶片为材料,对其DNA提取和ISSR分子标记方法进行了研究。[结果]采用改进的CTAB DNA微量提取法,可以得到高质量的诺丽叶片基因组DNA。用14条不同的ISSR引物对所提取的诺丽基因组DNA进行了ISSR分子标记分析,其中7条引物在诺丽DNA中可扩增出多态性产物。[结论]建立了诺丽叶片基因组DNA快速、高效的提取方法和ISSR标记体系,可为ISSR分析应用于诺丽遗传研究奠定良好的基础。

诺尼抗肿瘤作用及其机制的研究进展

本文概述了近十多年来国内外有关诺尼抗肿瘤作用及其机制的研究进展，大量试验表明诺尼果汁、果汁提取物、叶子和根提取物均有抗肿瘤作用，可通过诱导肿瘤细胞凋亡、激活宿主免疫系统、抑制血管生成、抗氧化、抑制环氧化酶和阻止致癌物-DNA加合物形成等机制来抑制肿瘤生长。本文希望能为研发以诺尼为原料辅助治疗癌症的药物和食品提供参考。

海巴戟的种子结构及发芽试验

对海巴戟种子的形态和结构进行了观察研究，并从环境温度、播种基质、物理处理等方面，探讨了其种子的萌发特性及生理．试验结果表明：海巴戟种子的萌发特性与其结构特点有关；高温能显著提高其种子的发芽率、发芽势和发芽指数，且高温条件下变温更有利于种子的萌发，最适宜的发芽温度是28-35℃，28℃和33℃则是发芽的最佳变温；海巴戟种子本身存在着某种抑制萌发的特殊物质，但在土壤中这种拟制萌发的状态可被打破而诱导萌发；透气和保水性能良好的播种基质对海巴戟种子的萌发有利，以河沙加泥炭土作为播种基质的海巴戟种子，发芽率最高，达77．0％，其相应的发芽势和发芽指数也最高，分别为63．5％和12．532；温水处理对海巴戟种子的萌发具有明显的促进作用，能提高它的出苗整齐度，且其发芽率和发芽势均最高，分别达74．0％和62．5％，其相应的发芽指数为12．271．

海南岛药用植物海巴戟炭疽病菌的生物学特性研究

[目的]探究海南岛药用植物海巴戟炭疽病菌的生物学特性。[方法]从海南儋州宝岛新村南药种质圃中采集到炭疽病样品,对其病原菌进行了分离纯化及鉴定,并研究了培养基、温度、pH、营养元素对病原菌生长的影响。[结果]炭疽菌在CSA培养基上生长最快,在10～40℃均能生长,其最适生长温度为26℃,最适生长pH为6.0;炭疽菌能利用多种碳源和氮源,其中乳糖是最佳碳源,乙酸铵是最佳氮源。[结论]为进一步研究和防治炭疽病提供了依据。

海巴戟天的栽培及其利用

介绍了药用植物海巴戟天的自然分布、形态特征、栽培管理和病虫害的防治技术,报道了海巴戟天的 药用历史和现代医学研究结果以及产品开发现状,提出种植开发利用建议。

诺丽花叶病及其病原鉴定

主要介绍了近年来诺丽植株严重花叶病的发病特征、病毒病原鉴定方法、昆虫传播媒介,并提出相应的防控建议与措施,为有关政府部门和种植户提供重要科学信息。

诺丽的光合生理特性研究

为了解诺丽的光合生理特性及为其丰产栽培提供科学依据,应用LI-6400便携式光合作用测定仪对诺丽的光合生理特性进行观测,分析与诺丽光合参数相关的环境因子日变化及光合生理特征的日变化,计算诺丽光能利用效率和水分利用效率。结果表明:诺丽Pn日变化呈双峰曲线,具有明显的"光合午休"特征;影响诺丽Pn日变化的主要生理因子是气孔导度和胞间CO_2浓度,主要生态因子是光合有效辐射;诺丽光能利用效率呈"V"型,早上8:00-10:00点最高,达到0.022%。诺丽水分利用效率早上8:00点左右最高,达到2.039μmol/mmol。

诺丽营养器官内的总黄酮含量及消长规律

利用紫外分光光度法对诺丽(Noni)营养器官及枝叶不同生长阶段中总黄酮含量的消长规律进行研究,以探索诺丽营养器官内总黄酮的动态积累,为生产中确定适宜的采收期及其采收部位提供依据。结果表明:(1)该方法测定诺丽中总黄酮含量重复性好,稳定性强,加标回收率达99.66%,测试结果稳定可靠;(2)诺丽各器官总黄酮的含量顺序为:90 d叶>270 d叶>30 d叶>毛状根>210 d叶>150 d叶>侧根>330 d叶>主根>嫩枝>老枝>2年生枝>多年生枝>1年生枝。结果表明,对诺丽中总黄酮的开发利用应重点选择叶片,采摘生长270 d的叶入药,有利于植株生长,并可提高诺丽资源的综合利用率。

诺丽内生真菌的分离鉴定及其次生代谢产物的抗氧化活性

对采自海南省海口市、万宁市、儋州市、琼海市、三亚市和临高县的诺丽果和叶,消毒后,25℃下分离培养得到32株内生真菌,采用26s r DNA D1/D2区域和ITS r DNA测序鉴定菌种。结果表明:32株内生真菌属于担子菌门(Basidiomycota)、子囊菌门(Ascomycota)2个类群。其中,13株酵母菌分别属于金担子菌属(Aureobasidium)、蔷薇色酵母属(Rhodotorula)、隐球菌属(Cryptococcus)3个属5个种;19株霉菌分别属于刺盘孢属(Colletotrichum)、间座壳属(Diaporthe)、炭团菌属(Hypoxylon)、枝孢属(Cladosporium)、镰刀菌属(Fusarium)、叶点霉属(Phyllosticta)和赤霉属(Gibberella)7个属10种。同时,采用乙酸乙酯溶剂对15种诺丽内生真菌发酵液进行提取,获得次生代谢产物。用ABTS+·自由基清除法进行了抗氧化活性评价,用福林-肖卡法和Al Cl3显色法测定各提取次生代谢产物中总多酚含量(TPC)、总黄酮含量(TFC)。结果显示,乙酸乙酯提取的15种诺丽内生真菌都具有抗氧化活性,且m48,j22抗氧化活性显著,诺丽内生真菌具有较丰富的多样性和具有产生抗氧化活性物质的潜力,在医药健康领域具有重要应用价值。

50株诺丽内生真菌抑菌活性的比较及其菌株鉴定

对获得的50株诺丽内生真菌进行了初步鉴定,发现36株分属于9目11科11属,其中,曲霉属17株,为优势种群。以稻瘟病菌、辣椒疫霉、西瓜枯萎病菌为指示菌,评价了各菌株的抑菌活性。结果表明:19株内生真菌至少对2种指示真菌有抑制效果,其中,菌株J7和M35的抑菌作用最强。进一步以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌为指示菌,采用纸片扩散法评价了各内生菌次生代谢产物的抑菌作用,其中,18株内生真菌的乙酸乙酯萃取物至少对1种指示菌有抑制作用,菌株M2,M33,M50,M53对4种细菌均有抑菌效果。

诺丽鲜果与诺丽发酵汁的抗氧化及抑菌活性的对比研究

采用DPPH·自由基法对诺丽鲜果和诺丽发酵汁的抗氧化活性进行了对比研究,研究发现诺丽鲜果的抗氧化活性大于诺丽发酵汁。还采用了滤纸片法对诺丽鲜果及诺丽发酵汁的抑菌活性进行对比研究,研究发现诺丽发酵汁的抑菌活性高于诺丽鲜果的抑菌活性。

诺丽茎段愈伤组织诱导优化及细胞悬浮系的建立

为获取诺丽茎段中的次生代谢物并为建立遗传转化体系奠定基础,以诺丽茎段(无腋芽)为外植体诱导愈伤组织,并建立细胞悬浮系,对影响愈伤组织的诱导及细胞悬浮系的因子进行了研究。结果表明:愈伤组织诱导的最优培养基是MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L2,4-D;悬浮培养的最佳培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L2,4-D+3%蔗糖,pH为5.85,当初始接种量为37.5g/L、摇床转速为110r/min且(25±2)℃暗培养时,悬浮细胞生长良好,生长速率最大;诺丽茎段悬浮细胞生长曲线呈"S"型,最适继代周期为12–20 d;培养过程中,培养基的pH呈先下降后缓慢升高的变化趋势,诺丽茎段愈伤组织悬浮细胞培养的最适pH在4.5–5.0之间。文中成功建立了以诺丽茎段为外植体的稳定的细胞悬浮系。