Mechanistic action of the acute toxicity of Bajitian(Morinda officinalis)in zebrafish embryos

Objectives:To investigate acute toxicity of Bajitian(Morinda officinalis)in zebrafish embryos.Methods:Zebrafish embryos at 48-h post fertilization(hpf)were exposed to Bajitian ethanol extract for72 h.The causative action of a delay in yolk sac absorption by Bajitian was investigated by RT-PCR analysis of lipid metabolism-related microsomal triglyceride transfer protein(MTP),apolipoprotein CII(ApoC2)and lipogenesis-related liver x receptor(LXR)genes.The effect of Bajitian eliciting an inflammatory response was studied by exposing 72 hpf myeloperoxidase(MPO):GFP transgenic zebrafish embryos to Bajitian extract for 4 h.Assessment was done by TUNEL,caspase-3/7,and RT-PCR analysis of the apoptosis related pathway B-cell lymphoma 2 associated X protein(Bax),Nuclear factor kappa-lightchain-enhancer of activated B cells(NF-k B)genes,neutrophil development-related stem cell leukaemia(SCL)and transcription factor PU.1 genes,to reveal the causative action of Bajitian reducing neutrophils.Results:RT-PCR analysis found that Bajitian extract had no effect on the expression of MTP or ApoC2 genes,but upregulated LXR gene,which might explain the delay in yolk sac absorption.Analysis of the inflammatory response showed that compared with negative controls,Bajitian extract significantly(P<.05)reduced the number of neutrophils in MPO:GFP embryos.TUNEL,caspase-3/7,and RT-PCR analysis of Bax and NF-k B genes found that Bajitian extract did not trigger the cell apoptosis.Further RT-PCR analysis found that Bajitian extract did not affect SCL expression,but did lead to down-regulation of PU.1.The inhibition of neutrophil development/differentiation may explain the decline in the total number of neutrophils following Bajitian treatment,which could be attributed to the anti-inflammatory effects found clinically for this drug.Conclusions:This study demonstrated that Bajitian caused a delay in yolk sac absorption and a decrease neutrophil in zebrafish embryos,which may be related to the inhibition of neutrophil development.

柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量及营养价值评价

建立柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量,采用氨基酸比值系数法评价其营养价值。采用盐酸水解法制得巴戟天氨基酸供试品溶液,以异硫氰酸苯酯和三乙胺为柱前衍生化试剂,采用高效液相色谱法,使用Ultimate Amino Acid色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)以0.1 mol/L无水乙酸钠-乙腈为流动相,梯度洗脱,柱温40℃,检测波长为254 nm,测定氨基酸含量;通过氨基酸比值、氨基酸比值系数、氨基酸比值系数分等评价其营养价值,并采用系统聚类和主成分分析对其进行分类分析。结果表明,15种氨基酸线性关系良好,相关系数r≥0.9996。16份巴戟天氨基酸总含量为17.87~102.15 mg/g,均检测到15种氨基酸,其中包含6种必需氨基酸,占总氨基酸含量的14.15%~32.06%;8种药用氨基酸,占总氨基酸含量的45.20%~56.31%。限制氨基酸为苏氨酸和亮氨酸,氨基酸比值系数分为33.87~61.31。不同巴戟天样品氨基酸组成相关性显著;主成分分析提取2个主成分,累计方差贡献率为97.085%,可将16批巴戟天分为三类。该实验测定方法简单有效,可同时分离测定15种氨基酸,精密度与重复性良好,有较高的药用价值,可为巴戟天的品质分析和资源开发利用提供参考。

不同产地巴戟天HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的:利用HPLC指纹图谱及化学模式识别对巴戟天药材进行评价。方法:采用Shodex Asahipak NH2P-504E色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相梯度洗脱,使用蒸发光散射检测器(ELSD)。利用相似度评价、聚类分析和主成分分析等化学模式识别方法,对不同产地的巴戟天药材进行分析。结果:所建立的HPLC指纹图谱共识别了18个共有峰,经与对照品图谱比较,鉴定其中的4个共有峰分别为果糖、蔗糖、蔗果三糖和耐斯糖。6个产地巴戟天的相似度在0.861~0.995;经聚类分析和主成分分析,6个产地巴戟天共聚为3类。结论:本研究采用的巴戟天HPLC指纹图谱及化学模式识别技术可反映出不同产地的巴戟天样品的差异,可为巴戟天的质量控制提供参考。

基于BDNF/CREB信号通路探讨巴戟天对慢性应激抑郁大鼠海马神经元损伤的影响

目的研究巴戟天对慢性应激抑郁大鼠海马神经元损伤及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)/细胞内环磷腺苷效应元件结合蛋白(cyclic adenosine phosphate response element binding protein,CREB)信号通路的影响。方法从40只SD大鼠随机选取其中10只为正常组,对其余大鼠构建慢性不可预知温和应激模型后,再将其分为3组,即模型组,盐酸氟西汀组(3.17 mg·kg^(-1)),巴戟天组(3.17 g·kg^(-1))。持续灌胃后给药8周,1次/d,并先后在造模前、造模后和给药后开展了行为学实验,以判断大鼠的抑郁情况。通过苏木素-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)研究大鼠海马形态学改变,用免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)测定大鼠海马BDNF蛋白表达,用HE染色研究大鼠海马组织病理损伤并评分,用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)测定大鼠海马BDNF、TrkB、CREB mRNA相对表达,用蛋白免疫印迹法(western blot,WB)测定大鼠海马BDNF、TrkB、CREB蛋白的相对表达。结果与正常组比较,模型组大鼠活动总路程显著减少(P<0.05),自主游泳时间显著减少(P<0.05),悬尾挣扎时间显著减少(P<0.05)。HE染色结果中表明海马神经元组织受到破坏,病理损伤评分显著下降(P<0.05),免疫组织化学染色中海马BDNF表现显著下降(P<0.05),BDNF、TrkB、CREB mRNA的基因相对表达显著下降(P<0.05);与模型组对比,盐酸氟西汀组和巴戟天组大鼠活动的总里程明显提高(P<0.05),自主游泳时间显著增加(P<0.05),悬尾挣扎时间显著增加(P<0.05),HE染色结果表明海马神经元组织明显复原,病理损伤评分增加(P<0.05),免疫组织化学染色中BDNF表现显著增加(P<0.05),BDNF、TrkB、CREB mRNA的基因相对表达明显增加(P<0.05)。结论经慢性应激刺激后,巴戟天可能通过激活BDNF/TrkB/CREB信号通路对抑郁大鼠海马神经元损伤发挥神经保护作用,改善其抑郁样行为。

巴戟天多糖对文昌鸡生长性能、血清免疫和抗氧化指标及免疫器官发育的影响

【目的】本试验通过研究饲粮中添加巴戟天多糖(Morinda officinalis polysaccharide,MOP)对文昌鸡生长性能、血清免疫和抗氧化指标及免疫器官发育的影响,旨在为MOP在肉鸡生产中得到深入应用提供参考依据。【方法】选取6日龄体重相近、健康的雌性文昌鸡600只,随机分为5组,每组8个重复,每个重复15只鸡,对照组鸡饲喂基础饲粮,试验组鸡分别在基础饲粮中添加250、500、1000和2000 mg/kg的MOP,试验期40 d。在试验第1、40天分别称重,试验期间以重复为单位记录采食量和剩料量,计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G);在试验第40天每重复选取1只试验鸡采血,屠宰后采集胸腺、脾脏、法氏囊并称重,测定血清生化指标、抗氧化指标和免疫指标,并测定免疫器官指数。【结果】与对照组相比,①饲粮中添加不同水平的MOP对文昌鸡的终末体重、ADG和ADFI无显著影响(P>0.05),但250 mg/kg MOP组的F/G显著提高(P<0.05),其余试验组F/G无显著变化(P>0.05)。②250 mg/kg MOP组文昌鸡血清免疫球蛋白G(IgG)含量、500 mg/kg MOP组血清IgM含量均显著提高(P<0.05);500和1000 mg/kg MOP组血清丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);2000 mg/kg MOP组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著提高(P<0.05)。③500、1000和2000 mg/kg MOP组文昌鸡法氏囊指数均显著提高(P<0.05)。【结论】饲粮中添加250及500 mg/kg MOP可提高文昌鸡血清免疫球蛋白含量,添加500、1000和2000 mg/kg MOP可改善文昌鸡血清抗氧化指标,促进免疫器官法氏囊的生长发育。本试验中,MOP添加量以500 mg/kg为宜。

巴戟天多糖对文昌鸡肠道形态、肠道免疫屏障功能和盲肠微生物的影响

试验旨在研究饲粮中添加巴戟天多糖(Morinda officinalis polysaccharide,MOP)对文昌鸡肠道形态、肠道免疫屏障功能和盲肠微生物的影响。选取6日龄健康雌性文昌鸡600只,随机分为5组,每组8个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂基础饲粮,各试验组分别在基础饲粮中添加250、500、1000、2000 mg/kg的MOP。试验期40 d。结果表明:与对照组相比,各试验组十二指肠和空肠绒毛高度/隐窝深度均显著提高(P<0.05),500、1000、2000 mg/kg MOP组回肠绒毛高度/隐窝深度显著提高(P<0.05);250、500、1000 mg/kg MOP组十二指肠紧密连接蛋白Occludin mRNA相对表达量显著提高(P<0.05),1000、2000 mg/kg MOP组十二指肠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);250、500 mg/kg MOP组盲肠观测物种数和Ace指数显著提高(P<0.05);各试验组Shannon指数均显著上升(P<0.05);2000 mg/kg MOP组的Simpson指数显著提高(P<0.05);250、500、1000 mg/kg MOP组的Chao1指数均显著增加(P<0.05)。各试验组盲肠弯曲杆菌门相对丰度均显著降低(P<0.05),1000、2000 mg/kg MOP组文昌鸡盲肠另枝菌属相对丰度显著降低(P<0.05),有益菌副拟杆菌属相对丰度显著提高(P<0.05);2000 mg/kg MOP组链球菌相对丰度显著降低(P<0.05);250、2000 mg/kg MOP组拟杆菌属相对丰度显著降低(P<0.05),CHKCI001菌属相对丰度显著提高(P<0.05)。研究表明,在文昌鸡的饲粮中添加适量MOP可改善肠道黏膜形态,提高十二指肠紧密连接蛋白Occludin mRNA表达量,降低炎症因子TNF-αmRNA表达量,增加盲肠微生物Alpha多样性和均匀度,增加肠道有益菌含量,促进肠道健康,MOP添加量以500 mg/kg为宜。

基于BMSCs淫羊藿-仙茅-巴戟天角药抗骨质疏松药效物质提取工艺研究

目的筛选淫羊藿-仙茅-巴戟天角药抗骨质疏松药效物质的最佳提取工艺。方法采用正交设计,选取提取时间、料液比、乙醇浓度为考察因素,以BMSCs细胞增殖率结合淫羊藿苷、总黄酮含量为考察指标,筛选淫羊藿-仙茅-巴戟天角药抗骨质疏松药效物质的最佳提取工艺,并对最佳提取条件进行验证。结果兼顾生产效率和节约能源,优选出淫羊藿-仙茅-巴戟天角药药效物质的最佳提取条件为提取时间1.5 h,乙醇浓度55%,溶剂用量10倍。验证实验结果BMSCs细胞增殖率、淫羊藿苷及总黄酮含量与工艺考察结果非常接近。结论该方法在保证淫羊藿-仙茅-巴戟天角药治疗骨质疏松的药效基础上,结合淫羊藿苷及总黄酮含量进行综合评价,优化提取工艺,使得实验结果更科学合理。

益肾固本法治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病的用药经验

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以慢性、进展性气流受限和呼吸道症状为表现的肺部疾病,西医治疗效果尚不完全满意,病情反复加重和高致死率给个人和社会带来沉重的负担。中医药历史悠久,经验丰富,治疗COPD疗效较好。本病多属中医学“喘证”“肺胀”等范畴,曹世宏教授认为,COPD是由多种慢性肺系疾病反复发作,迁延不愈,导致肺气胀满,不能敛降而引起的一种病证。病机为本虚标实,多在久病肺虚的基础上损及五脏,其中尤以肺肾两脏为甚,并强调痰浊和血瘀为其发病的关键病理因素。曹教授治疗稳定期COPD主张衷中参西、取长补短,采用支气管舒张剂吸入等西医基础治疗的同时,联合中药补益肺肾之气,治病求本,其中党参、黄芪、巴戟天等是曹教授临床常用中药,有平补肺脾之气,温补肾阳之功。同时注意化痰祛瘀,因人制宜,临床疗效颇佳。本研究附验案1则以佐证。

施用复合肥对巴戟天产量、养分吸收和寡糖累积量的影响

【目的】研究复合肥施用量对巴戟天产量、养分吸收和主要有效成分寡糖累积量的影响,为巴戟天的施肥管理提供理论依据。【方法】以巴戟天为研究对象,通过盆栽试验,设置每株施用复合肥0、2、4、6、8和10 g(CK、T1、T2、T3、T4和T5)共6个处理,测定巴戟天在不同施肥处理下的产量、养分含量和寡糖含量,分析各指标间的相关性,并运用主成分分析方法进行综合评价。【结果】施用复合肥可以显著提高巴戟天产量和N、P、K含量,并有利于提高寡糖的累积量。其中,单株施肥量为6 g处理的巴戟天产量和寡糖总累积量最高,与CK相比,分别提升114.47%和75.36%。施肥在一定程度上降低了巴戟天的寡糖含量,与CK相比,降幅最高达35.65%。巴戟天对复合肥中养分的利用效率表现为N>K>P,其中T3处理N、P、K累积量均高于其他处理。影响巴戟天寡糖累积量的最关键因素是产量,巴戟天产量与全株N/P/K含量、4种寡糖累积量呈显著或极显著正相关,但耐斯糖、1F−果呋喃糖基耐斯糖含量与产量、全株N/P/K含量呈显著或极显著负相关。主成分分析的综合得分由高到低为T3>T5>T4>T2>T1>CK,T3处理最佳。【结论】建议巴戟天的种植以N肥为主,适量补充K和P肥,适当施肥可显著提高巴戟天药材产量和寡糖累积量。

巴戟天多糖调控精索静脉曲张大鼠睾丸修复的作用机制研究

目的:探讨巴戟天多糖(MOP)对精索静脉曲张型(VC)大鼠睾丸的保护作用。方法:使用左肾静脉缩窄法制备VC模型,将60只大鼠按简单随机法分为空白对照组、模型组、VC组、VC+100 mg/kg巴戟天多糖组、VC+200 mg/kg巴戟天多糖组、VC+300 mg/kg巴戟天多糖组。通过GeneCards数据库筛选VC睾丸修复相关基因;酶联免疫吸附试验法检测促性腺激素释放激素(GnRH)、睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平;检测左侧睾丸相关指标及活性氧(ROS)含量;TUNEL检测细胞凋亡;蛋白质免疫印迹检测磷酸酯酶与人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因蛋白(PTEN)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)蛋白表达。结果:相较于模型组,VC组睾丸间质面积、细胞凋亡率、ROS、GnRH、LH、FSH及PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达显著升高,睾丸与附睾系数、曲精小管直径、附睾精子数、T及PTEN蛋白表达显著降低(P<0.05);相较于VC组,VC+100 mg/kg组睾丸间质面积、细胞凋亡率、ROS、FSH及PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达显著降低,睾丸与附睾系数、曲精小管直径、附睾精子数、T及PTEN蛋白表达显著升高(P<0.05);相较于VC组,VC+200 mg/kg组、VC+300 mg/kg组上述指标结果均相反(P<0.05)。结论:MOP可能通过调控PTEN/PI3K/AKT通路来修复VC大鼠睾丸。

基于DNA条形码ITS1、ITS2及其二级结构对药材巴戟天及易混伪品进行鉴定

[目的]利用DNA条形码ITS1、ITS2碱基序列及其二级结构对巴戟天药材及其混伪品进行鉴定.[方法]利用Codon Code Aligner 17.0或SeqMan软件对测序获得的双向序列进行拼接,从GenBnak上下载巴戟天及其混伪品的ITS1、ITS2碱基序列并利用MEGA 11.0软件分别与测序获得的碱基序列进行比对分析,获得测序样品的ITS1、ITS2碱基序列.将所有ITS1、ITS2碱基序列利用MEGA 11.0软件比对分析,分别构建NJ、ML系统聚类树并计算种内、种间遗传距离及各物种种间碱基变异位点、简约信息位点,利用在线网页构建各物种ITS1、ITS2碱基序列二级结构.[结果]基于ITS1碱基序列巴戟天与大果巴戟、虎刺、鸡眼藤、假巴戟、南五味子、香巴戟、羊角藤的种间遗传距离分别为0.034、0.233、0.052、0.052、1.004、1.004、0.049,种间简约信息位点分别为6、30、9、9、90、90、10个,根据NJ系统聚类树显示虎刺与羊角藤、香巴戟与南五味子无法鉴别,ML系统聚类树显示香巴戟与南五味子无法鉴别.基于ITS2碱基序列巴戟天与大果巴戟、虎刺、鸡眼藤、假巴戟、南五味子、香巴戟、羊角藤的种间遗传距离分别为0.014、0.113、0.034、0.015、0.509、0.516、0.017,种间简约信息位点分别为7、34、15、8、91、88、9个,根据NJ系统聚类树显示除香巴戟与南五味子无法鉴别外,其他各物种均独立聚为一支,ML系统聚类树显示各物种均独立聚为一支.基于ITS2构建的二级结构能够准确对各物种进行鉴别.[结论]基于ITS2构建的ML系统发育树、二级结构均能够对巴戟天及其混伪品进行鉴别,ITS2序列的物种鉴定能力优于ITS1序列.

巴戟天多糖对炎性微环境牙周膜成纤维细胞FN及FN-EDA表达的影响

目的:探讨巴戟天多糖(morinda officinalis polysaccharides,MOP)对炎性微环境牙周膜成纤维细胞纤连蛋白(fibronectin,FN)及含额外结构域A的纤连蛋白(fibronectin containing extra domain A,FN-EDA)表达的影响。方法:将36只大鼠随机分为对照组(n=12)和模型组(n=24),模型组采用正畸丝结扎法建立牙周炎,3周后每组各取6只大鼠通过Micro-CT确认建模完成;剩余模型组大鼠随机分为牙周炎组、生理盐水组(NS组)和MOP组。MOP组于大鼠左侧上颌第一磨牙腭侧注射MOP(200 mg/kg、3 d,50μL、4周),NS组注射等体积NS,牙周炎组不做任何处理。取大鼠左侧上颌骨组织,采用H-E染色观察牙周组织病理改变,免疫组织化学染色检测FN、FN-EDA的表达。体外培养牙周膜成纤维细胞,CCK-8法检测MOP对细胞活性的影响。将第4代细胞分为对照组、炎症组(10 mg/mL脂多糖)及实验组(12.5μg/mL MOP,12.5μg/mL MOP+10 mg/mL脂多糖)。利用qRT-PCR及Western印迹法检测FN和FN-EDA的表达变化。采用Prism 8.0软件包对数据进行统计学分析。结果:体内实验中,MOP组较牙周炎组和NS组FN-EDA表达显著下降(P<0.05),炎细胞浸润减少;但各组FN表达量未见统计学差异。体外实验中,与对照组相比,炎症组FN-EDA mRNA和蛋白表达量显著增高(P<0.0001);MOP显著降低炎症细胞FN-EDA表达,但对FN表达无明显影响。结论:FN-EDA在炎症牙周膜组织和细胞中表达升高,MOP可能通过下调FN-EDA而发挥炎症抑制作用。

基于药理学分析巴戟天治疗阿尔茨海默病的机制

目的:基于网络药理学、分子对接和GEO数据分析巴戟天治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的潜在靶点和作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),获取巴戟天的主要活性成分,用SwissTargetPrediction获取巴戟天全部作用靶点。从DrugBank、PathCard、Chemogenomic Database和PubChem数据库获得AD相关靶点。使用韦恩图取交集,得到巴戟天治疗AD的共同作用靶点。利用Cytoscape3.8.0构建靶点的“成分-靶点”网络图,并分析靶点的相互作用PPI网络图、基因本体论(GO)和KEGG信号通路等。使用Autodock对关键成分和靶点进行分子对接,并用Pymol和Discovery Studio展示对接结果。最后利用GEO数据库Alzdata分析关键靶点基因在AD中的表达。结果:预测得到巴戟天的50种主要活性成分,636个作用靶点,674个AD相关靶点,其中巴戟天治疗AD共同靶点124个。GO富集分析得到蛋白质磷酸化、磷酸化的正调控、细胞对氮化合物的反应、水解酶活性的调节、细胞对化学刺激的反应。KEGG富集分析显示阿尔茨海默病为最显著的通路。分子对接显示,巴戟天的5个核心成分2-羟基-1,5-二甲氧基-6-(甲氧基甲基)-9,10-蒽醌、1-羟基-3-甲氧基-9,10-蒽醌、大黄素-A、甲基异茜草素、甲基异茜草素-1-甲醚和3个核心靶点EGFR、PARP1、FTO的结合较好,并且Egfr在AD病人中显著(P<0.05)上调表达,Parp1和Fto在AD病人中显著(P<0.05)下调表达。结论:巴戟天可能通过多个成分、多个靶点、多个通路,参与调控AD疾病进程。

巴戟天寡糖抗抑郁作用机制的研究进展

抑郁症是一种心理精神障碍疾病。近些年,全世界抑郁症发病率的不断升高,给社会带来沉重的经济负担。巴戟天寡糖(Morinda officinalis oligosaccharides,MOOs)是从中草药巴戟天中提取的活性物质,可以舒郁安神、补肾益智,同时对患者的认知障碍有一定的改善作用。本文基于抑郁症的假说机制,通过查阅现有的研究阐释MOOs与抑郁症之间的联系,提出MOOs通过调节单胺类神经递质水平、增强神经可塑性、调节HPA轴功能和细胞因子水平以及影响肠道菌群等机制改善抑郁症,为MOOs抗抑郁的研究提供新思路。

中药巴戟天抗骨质疏松症作用机制的研究进展

目的 综述巴戟天的抗骨质疏松作用研究进展,为骨质疏松症的临床治疗提供有价值的建议和新的思考方式。方法 通过在中国知网、万方、PubMed等数据库中检索近5年巴戟天及其有效成分在预防和治疗骨质疏松症方面的作用及机制的临床及实验研究的相关文献,并进行系统性总结。结果 巴戟天能够通过促进成骨细胞的增殖分化、发挥抗炎、类雌激素样作用,并通过OPG/RANK/RANKL通路抑制骨吸收、调节脂代谢等多种途径发挥抗骨质疏松作用。结论 巴戟天抗骨质疏松机制愈趋明确,但仍缺乏深入研究。

巴戟天水提液对双酚A染毒小鼠性激素及受体表达的影响

目的探讨巴戟天水提液对双酚A(BPA)染毒小鼠性激素及受体表达的影响。方法将60只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组和巴戟天水提液低、中、高剂量组(20、40、60 mg/kg),每组12只。模型组和巴戟天水提液各剂量组小鼠灌胃BPA[50 mg/(kg·d),每天1次,连续4周]以建立BPA染毒模型。造模后,各药物组小鼠灌胃相应药液,每天1次,连续4周。末次给药后,称定各组小鼠的体重和睾丸质量,观察其睾丸组织病理改变,检测其血清性激素[黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)]含量和睾丸组织中LH受体(LHR)、FSH受体(FSHR)mRNA及蛋白的表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠睾丸组织存在结构变性,生精细胞与支持细胞之间连接松散、出现明显裂隙,且生精细胞数量减少;睾丸组织中LHR、FSHR mRNA及蛋白的表达均显著下调(P<0.01),但其体重、睾丸质量和血清LH、FSH含量均无明显变化(P>0.05)。与模型组比较,巴戟天水提液各剂量组小鼠睾丸组织病理改变均有不同程度改善;睾丸组织中LHR、FSHR mRNA及蛋白的表达亦有不同程度上调(P<0.05或P<0.01),且部分指标水平与对照组相当(P>0.05),但其体重、睾丸质量和血清LH、FSH含量无明显变化(P>0.05)。结论巴戟天水提液对BPA染毒小鼠睾丸损伤有一定的改善作用,可能与其提高LHR、FSHR蛋白及mRNA的表达有关。

巴戟天提取物对地塞米松诱导小鼠肌少症的治疗效果及作用机制研究

目的:旨在探究巴戟天提取物(MoE)在地塞米松(Dex)诱导的肌少症小鼠中的治疗效果及可能作用机制。方法:首先利用网络药理学方法研究巴戟天的药效成分、重要靶点并富集通路,以预测MoE的作用机制。在动物实验中,50只KM小鼠随机分为5组(control、sarcopenia、MoE-H、MoE-M、MoE-L)。除control组,其他组皮下注射Dex 45 d诱导形成肌少症,3个治疗组同时经口给予不同剂量的MoE。实验过程中定期检测动物体重、运动能力(跑台和拉力计)和体成分。处死动物后计算后肢肌肉系数,进行组织学及相关基因表达检测。结果:网络药理学结果表明MoE可能通过上调IGF-1/AKT/mTOR信号通路来治疗肌少症。动物实验结果显示MoE显著逆转Dex导致的小鼠体重、肌肉系数的下降,提升运动能力,改善组织学病变,上调了IRS-1、mTOR、MFN2、OPA1、MYOD、MYOG等基因的表达,下调了Atrogin-1、MuRF-1、MSTN等基因的表达。结论:MoE对Dex引起的肌肉萎缩具有治疗作用,可改善肌肉组织学形态,其作用机制可能是激活IGF-1/AKT/mTOR通路。

基于表型和分子标记分析24份巴戟天遗传多样性

【目的】广东省德庆县是道地药材巴戟天的产地,该文对广东德庆不同地区的24份巴戟天进行了种质资源的遗传多样性分析。【方法】以德庆县各地收集来的24份巴戟天资源为研究对象,使用主成分分析和SRAP、CDDP两种分子标记方法对24份巴戟天材料进行遗传多样性分析。【结果】在表型分析中,基于主成分分析的聚类图发现,官圩镇和高良镇、凤村镇和高良镇分别聚类至4个类群中。此外,18对SRAP引物组合和16条CDDP引物扩增后分别获得100条和98条总条带,其中SRAP多态性条带为50条,多态性比率达50%,平均遗传相似系数(GS)为0.87,遗传相似系数变化范围为0.71~0.97;CDDP多态性条带为80条,条带之间多态性比率达79.0%,各种质间遗传系数范围为0.71~0.96,平均遗传相似系数为0.86,且当系数为0.82时,两种分子标记结果均表明高良镇、官圩镇和凤村镇的种质之间具有一定的相似性。【结论】结合表型和分子标记聚类结果,高良镇和官圩镇、高良镇和凤村镇的亲缘关系最近,SRAP和CDDP两种分子标记方法对巴戟天遗传多样性的结果具有一定的差异,而联合分析可以更好地反映巴戟天遗传多样性研究及其资源的系统发育关系。

基于分子对接技术探讨巴戟天改善子宫内膜容受性的机制

目的运用分子对接技术分析巴戟天改善子宫内膜容受性的作用机制。方法将60只Wistar雌性大鼠随机分为正常组、模型组、枸橼酸氯米芬组、巴戟天组,每组15只。模型组、枸橼酸氯米芬组和巴戟天组构建不孕症大鼠模型;正常组、模型组给予生理盐水2 mL灌胃,1次/d;枸橼酸氯米芬组给予0.83 mg/mL枸橼酸氯米芬溶液2 mL灌胃,1次/d;巴戟天组给予0.5 g/mL巴戟天溶液2 mL灌胃,2次/d。给药15 d后取大鼠子宫检测,比较子宫内膜厚度、子宫内膜下血流参数[子宫动脉搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、收缩期/舒张期流速比值(S/D)]和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平。结合实验结果,通过网络药理学分析巴戟天可能的作用机制,并通过分子对接预测活性成分的结合部位。结果与正常组比较,模型组大鼠子宫内膜厚度、PI、RI、eNOS、VEGF降低,S/D升高(P<0.05)。与模型组比较,枸橼酸氯米芬组大鼠子宫内膜厚度、PI、RI、eNOS、VEGF升高,枸橼酸氯米芬组大鼠S/D降低(P<0.05)。与枸橼酸氯米芬组比较,巴戟天组大鼠子宫内膜厚度、PI、RI、eNOS、VEGF升高,巴戟天组大鼠S/D降低(P<0.05)。网络药理学共筛选出巴戟天有效成分199种,子宫内膜容受性相关靶点792个,其交集靶点99个。PPI网络分析巴戟天主要作用于ESR1、NCOA1、NCOA2、MAPK14、PGR和AR等关键靶点。分子对接结果表明筛选得到的主要活性成分与靶点有较强的结合。结论巴戟天对改善子宫内膜容受性或许具有积极作用,其作用机制可能与调节ESR1、NCOA1、NCOA2、MAPK14、PGR和AR等信号通路有关。

巴戟天联合运动对小鼠坐骨神经损伤修复的影响

目的 研究巴戟天和运动对坐骨神经损伤小鼠神功能恢复的作用。方法 建立小鼠坐骨神经损伤模型,80只小鼠随机分为对照不运动、对照运动、巴戟天不运动和巴戟天联合运动组,每组20只。巴戟天组每天按0.1 ml/10 g巴戟天水提液灌胃、对照组每天按0.1 ml/10 g生理盐水灌胃,适应性喂养5 d后,灌胃半小时后对照运动组和巴戟天联合运动组小鼠在动物跑台上跑步训练,1次/天,连续28 d。通过观察神经元变化和神经胶质细胞数量、检测小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化歧化酶(SOD)活力值、坐骨神经功能指数、腓肠肌湿重等,观察巴戟天和运动对坐骨神经功能的恢复情况。结果 各组都存在神经元浓缩、破碎,尼氏Nissl数量减少,但巴戟天联合运动组神经元浓缩、破碎的情况明显减少,神经胶质细胞数量明显增加。腓肠肌湿重结果显示,对照组与巴戟天联合运动相比差异有统计学意义(P<0.01);坐骨神经功能指数结果显示,21 d时对照组与巴戟天联合运动相比差异有统计学意义(P<0.01),巴戟天联合运动和巴戟天不运动相比差异有统计学意义(P<0.05),28 d时对照不运动与巴戟天组相比差异有统计学意义(P<0.05);MDA含量测定结果显示,对照组与巴戟天联合运动相比差异有统计学意义(P<0.05);SOD活力值检测显示,对照运动与巴戟天组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 巴戟天可能有助于小鼠坐骨神经损伤的恢复,其与运动联合的恢复效果更佳。