重构本草——巴戟天

通过古籍文献调研、中医药现代研究成果的梳理,结合中医临床及中药学等学科领域内知名专家学者的认识及应用经验,归纳出巴戟天功效主要为:补肾阳,强筋骨,祛风湿。症靶为阳痿、月经不调、哮喘。标靶为少精死精。现代药理发现巴戟天及其有效成分具有抗氧化、延缓衰老、免疫调节、抗疲劳、抗骨质疏松、平喘、改善生殖功能、抗炎、调血糖、降压、心脑血管保护等作用。本品无毒,但阴虚火旺有热者,不宜使用。临床常用剂量为10~20 g。当根据不同疾病,或同一疾病的不同阶段进行辨证使用,并积极探索巴戟天用量与症靶、标靶的量效关系构建。

诺丽(Morinda citrifolia L.)离体快速繁殖研究

以诺丽（Morinda citrifolia L．）种子为试材．诺丽子叶和下胚轴均能单独由细胞分裂素BA0．7～2．0mg／L谤导不定芽发生，不定芽可直接从外植体发生，也可从愈伤组织发生，添加生长素NAA0．05～0．1mg／L则完全抑制不定芽发生，同时强烈促进愈伤组织和不定根发生．茎段在BA0．5～5．0mg／L或ZT 1．5mg／L或KN 1．5mg／L时均能通过腋芽萌发和不定芽发生而增殖．芽梢在NAA 0．1mg／L、IBA 0．1mg／L或IAA 0．1mg／L均有根群发生，但NAA 0．1mg／L诱导生根时切口愈伤组织较多，部分不定根由愈伤组织发生，而IAA 0．1mg／L诱导生根时根群欠发达，以IBA 0．1mg／L为最佳．试管苗移植到泥炭上10d后即可在全光照下生长．

海巴戟(Morinda citrifolia L.)组织培养研究

以海巴戟（Morinda citrifolia L．）种子为试材，在不剥除种皮的情况下，在MS无激素培养基上播种1年内未见发芽，在剥除种皮的情况下，在MS无激素培养基上发芽率最高，50d内可达75％。海巴戟子叶和下胚轴均能单独由细胞分裂素BA0．7～2．0mg／L诱导不定芽发生，不定芽可直接从外植体发生，也可从愈伤组织发生，添加生长素NAA0．05～0．1mg／L则完全抑制不定芽发生，同时强烈促进愈伤组织生长和不定根发生。带芽茎段在BA1．5mg／L配合低浓度生长素时均能通过腋芽萌发和不定芽发生而增殖。芽梢在NAA0．1mg／L、IBA0．1mg／L或IAA0．1mg／L均有根群发生，但NAA0．1mg／L诱导生根时切口愈伤组织较多，部分不定根由愈伤组织发生。而IAA0．1mg／L诱导生根时根群欠发达，以IBA0．1mg／L最佳。

巴戟天对骨关节炎小鼠软骨细胞自噬、凋亡的影响及机制

目的探讨巴戟天对骨关节炎小鼠软骨细胞自噬、凋亡的影响及机制。方法将40只健康C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量巴戟天组、中剂量巴戟天组及高剂量巴戟天组,每组8只。模型组和低、中、高剂量巴戟天组小鼠建立骨关节炎模型,随后模型组小鼠每日给予1 mL生理盐水灌胃,低、中、高剂量巴戟天组小鼠每日分别将100、200、400 mg·kg^(-1)巴戟天溶于1 mL生理盐水灌胃,均持续4周;对照组小鼠制备骨关节炎假模型,随后每日给予1 mL生理盐水灌胃,持续4周。处死各组小鼠,无菌条件下提取右侧膝关节软骨组织,并制备软骨细胞悬液。原位末端转移酶标记染色检测各组小鼠软骨组织中软骨细胞凋亡率,流式细胞术检测各组小鼠软骨细胞悬液中软骨细胞的凋亡情况,Western blot法检测各组小鼠软骨细胞悬液中磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、自噬效应蛋白1(Beclin1)、人微管相关蛋白轻链3B(LC3B)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组小鼠软骨细胞悬液中p-PI3K、p-Akt mRNA的表达。结果模型组和低、中、高剂量巴戟天组小鼠软骨组织中软骨细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05);低、中、高剂量巴戟天组小鼠软骨组织中软骨细胞凋亡率显著低于模型组(P<0.05);中、高剂量巴戟天组小鼠软骨组织中软骨细胞凋亡率显著低于低剂量巴戟天组(P<0.05);高剂量巴戟天组小鼠软骨组织中软骨细胞凋亡率显著低于中剂量巴戟天组(P<0.05)。模型组和低、中、高剂量巴戟天组小鼠软骨细胞悬液中软骨细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05);低、中、高剂量巴戟天组小鼠软骨细胞悬液中软骨细胞凋亡率显著低于模型组(P<0.05);中、高剂量巴戟天组小鼠软骨细胞悬液中软骨细胞凋亡率显著低于低剂量巴戟天组(P<0.05);高剂量巴戟天组小鼠软骨细胞悬液中软骨细胞凋亡率显著低于中剂量巴戟天组(P<0.05)。模型组和低、中剂量巴戟天组小鼠软骨细胞悬液中Beclin1、LC3B、p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量及p-PI3K mRNA、p-Akt mRNA相对表达量显著低于对照组(P<0.05);高剂量巴戟天组与对照组小鼠软骨细胞悬液中Beclin1、LC3B、p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量及p-PI3K mRNA、p-Akt mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);低、中、高剂量巴戟天组小鼠软骨细胞悬液中Beclin1、LC3B、p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量及p-PI3K mRNA、p-Akt mRNA相对表达量显著高于模型组(P<0.05);中、高剂量巴戟天组小鼠软骨细胞悬液中Beclin1、LC3B、p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量及p-PI3K mRNA、p-Akt mRNA相对表达量显著高于低剂量巴戟天组(P<0.05);高剂量巴戟天组小鼠软骨细胞悬液中Beclin1、LC3B、p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量及p-PI3K mRNA、p-Akt mRNA相对表达量显著高于中剂量巴戟天组(P<0.05)。结论巴戟天能通过调控PI3K/Akt信号通路促进骨关节炎小鼠软骨细胞的自噬,抑制软骨细胞凋亡。

诺丽联合EDTA应用对牙本质机械性能的影响

目的研究诺丽提取物溶液(Morinda citrifolia juice,MCJ)联合EDTA对牙本质机械性能的影响,评估MCJ作为根管冲洗液应用于根管治疗的效果。方法选取21颗人单根前磨牙和36颗人第三磨牙,根据冲洗液不同随机分为阴性对照组和5个实验组。阴性对照组:蒸馏水;实验组:A组5.25%NaClO、B组6%MCJ、C组17%EDTA、D组5.25%NaClO-17%EDTA、E组6%MCJ-17%EDTA。随机取12颗人单根前磨牙,近远中向劈开,每个半根为一个样本,共24个样本。不同冲洗液浸泡后进行显微硬度测试;剩余的9颗人单根前磨牙,制备36个沙漏型牙本质样本块,浸泡后进行极限拉伸强度测试;36颗人第三磨牙截根后切割,冠部牙本质制备72个矩形牙本质本块,浸泡后每组随机取6个样本分别进行三点弯曲强度和压缩强度测试。结果(1)根颈1/3区,B、E组牙本质显微硬度明显大于A组、C组和D组(P<0.05);根中1/3区,B组牙本质显微硬度明显大于A、C、D、E组(P<0.05);根尖1/3区,B、E组牙本质显微硬度明显大于A组牙本质显微硬度(P<0.05)。(2)B、D、E组牙本质极限抗拉强度明显高于A、C组(P<0.05)。(3)B组牙本质三点弯曲强度明显高于A、C组,E组牙本质三点弯曲强度明显高于D组(P<0.05)。(4)B、E组牙本质压缩强度明显高于A、D组(P<0.05)。结论诺丽对牙本质机械性能的影响小于5.25%NaClO;诺丽联合17%EDTA应用对牙本质机械性能的影响小于5.25%NaClO联合17%EDTA。

巴戟天根皮中的醌类成分的分离与鉴定

目的研究巴戟天（Morinda officinalisHow.）化学成分。方法运用多种色谱学方法对巴戟天根皮体积分数70%乙醇提取物的化学成分进行分离,并根据光谱数据鉴定化合物的结构。结果从该植物中分离得到17个化合物,分别鉴定为rubiasin A（1）、rubiasin B（2）、2-羟基-1-甲氧基蒽醌（2-hydroxy-1-methoxy-anthraquinone,3）、3-羟基-1-甲氧基-2-甲基蒽醌（3-hydroxy-1-methoxy-2-methyl-anthraquinone,4）、1,3-二羟基-2-甲氧基蒽醌（1,3-dihydroxy-2-methoxy-anthraquinone,5）、2-甲基蒽醌（2-methyl-anthraquinone,6）、1,3-二羟基-2-甲基蒽醌（1,3-dihydroxy-2-methyl-anthraqui-none,7）、2-羟甲基蒽醌（2-hydroxymethyl-anthraquinone,8）、3-羟基-1,2-二甲氧基蒽醌（3-hydroxy-1,2-dimethoxy-anthraquinone,9）、1,8-二羟基-3-甲氧基-6-甲基蒽醌（1,8-dihydroxy-3-methoxy-6-methyl-anthraquinone,10）、苯乙醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2-phenylethyl-O-β-D-glucopyranoside,11）、2-丁醇-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（sec-butyl-O-β-D-glucopyranoside,12）、3,4-二羟基苯乙醇（3,4-di-hydroxyphenylethanol,13）、3-（4-羟基-苯基）-1,2-丙二醇（3-（4-hydroxyphenyl）-1,2-propandiol,14）、阿魏酸（ferulic acid,15）、熊果酸（ursolic acid,16）、β-谷甾醇（β-sitosterol,17）。结论化合物1,2,11~14为首次从巴戟天属植物中分离得到。

巴戟天根的结构及其与蒽醌类化合物积累的关系

应用石蜡切片法、荧光显微镜和紫外分光光度法,对不同年生巴戟天根组织结构的变化进行了观察、对蒽醌类化合物在根中的分布场所及其积累动态进行了研究。结果表明:巴戟天根的结构类似一般多年生草本植物,薄壁细胞是巴戟天根中蒽醌类化合物的分布储存场所,蒽醌类化合物含量随着根生长年限的增加而增加。由以上研究总结出巴戟天以四年或四年以上采收为好,并以根皮厚、木心细者为上品。

复方巴戟天合剂治疗股骨头缺血性坏死的临床研究

观察复方巴戟天合剂对股骨头缺血性坏死的临床疗效。选择符合中西医诊断标准的临床门诊病人87例,按就诊顺序分以复方巴戟天合剂的治疗组和仙灵骨葆的对照组,总疗程90天,同时进行治疗前后疼痛积分变化、治疗组与对照组疗效、治疗前后血脂及血液流变学等一系列统计分析比较。结果显示:治疗前后疼痛积分变化有非常显著性差异(P<0.01);治疗组总有效率为97.7%,对照组为81.8%,差异显著(P<0.05);治疗前后血脂及血液流变学比较有非常显著性差异(P<0.01)。说明复方巴戟天合剂能有效的改善股骨头缺血性坏死的临床症状。

巴戟肉、盐巴戟天调节阳虚内寒证大鼠能量代谢的比较研究

目的:比较不同剂量巴戟肉、盐巴戟天对阳虚內寒证大鼠能量代谢的影响,探讨巴戟天补肾壮阳的作用机制,为巴戟天的临床合理应用提供科学依据。方法:采用甲巯咪唑灌胃给药的方法制备阳虚内寒证模型,分别给予巴戟肉、盐巴戟天2种炮制品高、中、低浓度的水煎液,以右归丸为阳性对照药,以肝糖元、肌糖元、游离脂肪酸(NEFA)、脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)、肝脏和骨骼肌Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶、琥珀酸脱氢酶(SDH)以及体脂系数等为评价指标。结果:巴戟肉和盐巴戟天对阳虚内寒证大鼠的能量代谢均有一定的改善作用,盐巴戟天较相同剂量的巴戟肉好,治疗效果更为显著。结论:巴戟天的补肾壮阳作用与调节能量代谢有关,在临床使用中应注意对炮制品的选择和剂量的应用。

巴戟天与雌激素对骨质疏松大鼠破骨细胞RANK和CAII的表达影响分析

目的:探讨巴戟天与雌激素对骨质疏松大鼠破骨细胞RANK和CAII的表达影响。方法:选用4月龄SPF级健康成年雌性SD大鼠,建立去势大鼠骨质疏松模型,分离大鼠原代破骨细胞并分为3组:B组给予17β-雌二醇10-6mmol/L,C组给予1.0 mmol/L巴戟天,D组给予17β-雌二醇10-6mmol/L和1.0 mmol/L巴戟天进行培养,观察比较各组CAII、RANKmRNA表达等指标差异。结果:B、C和D组破骨细胞数量均较A组明显减少,而D组减少最明显(P<0.05);B、C、D组骨吸收陷窝面积相均低于A组(P<0.05),而D组骨吸收陷窝面积明显低于其他组(P<0.05);B、C、D组CAII、RANKmRNA基因表达水平明显低于A组(P<0.05),B组和C组RANKmRNA基因表达水平差异无统计学意义(P>0.05),而CAIImRNA基因表达水平差异有统计学意义(P<0.05),D组CAII、RANKmRNA基因表达水平最低(P<0.05)。结论:巴戟天联合雌激素能明显降低骨质疏松大鼠破骨细胞RANK和CAII的表达,起到抑制骨质疏松的作用。

四倍体巴戟天根的结构与其蒽醌类化合物的关系

目的研究四倍体巴戟天Morinda officinalis How.根的结构与其蒽醌类化合物的关系。方法石蜡切片和荧光显微镜鉴定四倍体巴戟天根的结构,紫外分光光度法测定蒽醌类化合物的含有量。结果四倍体巴戟天根的结构与其二倍体相似。蒽醌类化合物的含有量增加,但密度略有下降。结论四倍体与二倍体巴戟天的品质无明显差异。

巴戟和鸡骨草的根系研究

调查研究了巴戟和鸡骨草两种药用植物根系的生长和分布与植株年龄、地上部生长及光照条件之间的关系。结果表明，随着植株年龄的增大，根系的生长和吸收中心逐渐下移，根生物量和根长垂直分布的变化反映了这种转移，地上部生长与根生物量有着显著相关性。荫蔽度是影响根系分布面积和深度的重要因素之一。文章还对这两种药用植物人工驯化栽培提出了意见。

巴戟天的临床应用及其用量探究

通过搜集古医集及现代医家临床应用经验,总结出巴戟天具有以下量效特点:临床汤剂用量为5~41.4 g,常用剂量10~20 g,丸剂用量为1~6 g。根据疾病、证型、症状寻求最佳用量,如补肾阳、强筋骨治疗阳痿不育、宫冷不孕、重症肌无力等,汤剂用量为5~41.4 g,丸散剂1~6 g;祛风湿治疗腰痛、类风湿关节炎等,用量为10~20 g。根据疾病、证型和症状,配伍相应中药,如肾阳不足、筋骨痿软时常配伍淫羊藿、仙茅、杜仲等;风湿痹痛时常配伍羌活、威灵仙、防风等。

淫羊藿、肉蓉、巴戟天对果蝇寿命影响的研究

目的研究淫羊藿、肉蓉、巴戟天3种药物对果蝇寿命的影响。方法采用在实验组的培养基中适量加入上述的3种药物,而在对照组的培养基中则不加药物,观察各组的生存时间。结果实验组果蝇的平均寿命高于对照组果蝇的平均寿命。结论适量应用淫羊藿、肉蓉、巴戟天,具有延缓衰老的功效。

南药巴戟天毛状根诱导条件优化研究

为探索巴戟天毛状根的诱导条件,该研究选择不同发根农杆菌ATCC15834、AR10、Msu440菌株诱导巴戟天无菌苗的幼芽、叶片、叶柄、茎段等外植体形成毛状根,并研究了共培养时间和乙酰丁香酮(AS)浓度等因素对巴戟天毛状根转化率的影响。结果表明:巴戟天毛状根的最佳诱导条件为:以幼芽为外植体,ATCC15834为转化菌,侵染时间20 min,并在培养基中添加300μmol/L乙酰丁香酮条件下,巴戟天毛状根的诱导转化率最高,可达36.7%。

巴戟天净制工艺的优化

目的:比较巴戟肉与巴戟心之间的化学成分的差异,优选巴戟天净制去心工艺。方法:采用HPLC方法,以甲基异茜草素-1-甲醚、水晶兰苷、和耐斯糖为指标,测定巴戟天的木心与趁鲜去心、润制去心和蒸制去心得到的巴戟肉的化学成分的含量。结果:巴戟肉(趁鲜去心)中的主要有效成分最高,而巴戟心的化学成分与巴戟肉相似,但是含量均较低。结论:巴戟天最好是在产地趁鲜去心,得到巴戟肉的质量最好。

基质配比和生根时长对南药巴戟天组培苗驯化移栽的影响

目的:为提升南药巴戟天现代种业竞争力,应用生物技术优化组培苗驯化移栽过程,建立高效、优质的种苗繁育技术体系。方法:以肇庆道地巴戟天脱毒组培苗为材料,研究不同基质配比和生根时长对其驯化移栽的成效。结果:河沙和黄泥基质的有机质及有效矿质元素含量较低,不适宜巴戟天组培苗的生长。组培苗在泥炭土与河沙的组合基质中成活率较高,150 d时成活率保持在70.03%~75.33%;其中组合基质(泥炭土∶河沙=2∶1,V/V)最有利于组培苗的驯化移栽,种植150 d时,幼苗的根系长度、株高、叶长及地上部鲜重均显著高于其他基质中的幼苗。生根时长为2月龄的巴戟天组培苗,移栽的成活率、株高和叶片的生长状况优于4月龄和8月龄的组培苗。结论:在气候大棚中,取2月龄巴戟天组培苗,放置于大棚驯化7~10 d后,移栽至组合基质(泥炭土∶河沙=2∶1,V/V)中驯化培养120~150 d,株高可达15 cm左右,节数8~9个,对生叶数约14片,生长的种苗整齐、质量好,完成组培苗向种苗的过渡,适合规模化生产。

仝小林运用仙茅、淫羊藿、巴戟天助阳经验

心阳主一身之阳气,肾阳即"元阳",为先天之阳,两者具有密切关系,且在五脏之阳气中尤为重要。慢性疾病危重阶段或迁延日久常损及心阳和肾阳,见心肾阳衰。仙茅、淫羊藿、巴戟天是仝小林院士临床常用的助阳三味小方,尤擅扶助心肾之阳。仙茅可补肾阳、强筋骨、祛寒湿、补命门之火,常用剂量6~30 g;淫羊藿可补命门、益精气、坚筋骨,常用剂量9~30 g;巴戟天可补肾助阳、强壮筋骨、祛风除湿,常用剂量9~15 g。

IBA激素对巴戟天扦插条生根的影响

为提高巴戟天的扦插育苗率,对不同年龄巴戟天插条进行不同浓度的IBA激素浸泡扦插处理。结果表明：浓度为50mg/L、100mg/L和150mg/L的IBA溶液均可显著提高不同年龄巴戟天扦插条的生根率、平均生根数和最长根平均长以50mg/L的IBA溶液的处理效果最佳;1~3年生的扦插条以3年生的生根效果最佳,其生根率为88.3%,平均生根数为20.92条,最长根平均长为2.12cm。在生根过程中,POD活性呈先上升后下降的变化趋势,PPO活性呈先升高后下降再升高的变化趋势,IAAO活性呈先下降后升高的变化趋势;POD、PPO活性比对照组的高,而IAAO活性比对照组的低,IBA处理改变了POD、PPO及IAAO的活性进而影响插条生根。

海滨木巴戟组织培养研究

以海滨木巴戟(Morinda citrifolia)的嫩芽为外植体进行组培研究,以1/2MS+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L为基本培养基,以TDZ、BA、IBA三种激素进行不定芽的诱导分化实验,以IBA、NAA进行生根实验。结果表明,各因素对外植体分化的影响皆不显著(p<0.05),IBA抑制外植体分化;在只添加BA的培养基中,随着BA浓度的升高,外植体玻璃化的现象有增加的趋势;生根实验结果表明,NAA和IBA诱导生根效果相差不大(p<0.05),但是IBA在外植体基部诱导出更多的愈伤组织。