2份蒙桑和长穗桑野生种质资源的染色体数目观察

染色体基数的确定对于桑树种质材料的倍性认定和阐明桑属植物种群的演化路线具有十分重要的作用。以来自云南省的野生蒙桑(Morus mongolica Schneid)种质资源6号和野生长穗桑(Morus wittiorum Hand-Mazz)种质资源7号的种子萌发幼苗(分别命名为云6号与云7号)叶片为材料,采用去壁低渗法制备染色体标本,对其染色体数目进行观察,发现云6号与云7号桑树幼苗的体细胞的染色体数目分别为35条和49条,即:2n=5x=35和2n=7x=49。该研究结果以蒙桑和长穗桑2个桑种的野生种质资源再次证实了桑树的染色体基数为7(x=7)的推论。

野生长穗桑种质资源云7的多倍体诱导和鉴定

以野生长穗桑(Morus wittiorum Hand-Mazz)多倍体(2n=7x=49)种质资源云7组培苗的不定芽为材料,用不同浓度秋水仙碱处理一定时间后进行组织培养,观察、鉴定萌发多倍体植株的染色体加倍的效果。不定芽经2 g/L秋水仙碱溶液(以二甲基亚砜作为渗透剂)浸泡2.5 d后,其死亡率为53.76%。以此接近半致死率的诱导条件诱导供试桑树不定芽的染色体加倍,并对其组培苗的腋芽持续多代分离筛选,经过染色体计数观察与流式细胞技术鉴定其倍性,最终得到2株稳定的十四倍体(2n=14x=98)长穂桑植株。诱变植株移栽至室外环境后生长状态良好,由此实现了对野生长穂桑种质资源染色体的人工加倍。

长穗桑组织培养和四倍体新种质诱导

以长穗桑枝条为外植体,建立其无菌离体快繁体系,综合利用组织培养技术和秋水仙素诱变技术,进行四倍体诱变处理,试验结果表明:长穗桑最佳的增殖培养基为MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L,最佳的生根培养基为1/2MS+BA 0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L+30 g/L蔗糖,四倍体诱导的最佳处理条件为0.2%浓度的秋水仙素浸泡茎段3d,诱导率最高为16.7%。

长穗桑中的苯并呋喃类化合物

为了研究长穗桑中具有抗氧化活性的化学成分,采用硅胶、Sephadex LH-20、RP-C18等色谱方法从长穗桑茎皮的95%乙醇提取物中分离得到7个苯并呋喃类化合物：wittifuran D（1）、wittifuran E（2）、moracin C（3）、moracin M（4）、moracin P（5）、2-（3,5-dihydroxyphenyl）-5,6-dihydroxybenzofuran（6）和mulberroside C（7）,并通过NMR、MS等波谱分析手段鉴定了化合物的结构。化合物1~7均为首次从该种植物中分离得到,其中化合物1和2为新化合物。对化合物3~7进行了抗氧化活性筛选,其中化合物3、4、6浓度在1×10-5mol.L-1时对Fe2＋-半胱氨酸诱导的肝微粒体脂质过氧化产生的丙二醛（malondialdehyde,MDA）的抑制率分别为73%、69%和89%。

长穗桑中的Diels-Alder型加合物

从长穗桑的茎皮中首次分离到9个Diels-Alder型加合物,通过NMR、MS等波谱分析手段分别鉴定为mulberrofuran K(1),mulberrofuran G(2),guangsangon L(3),kuwanon J(4),kuwanon X(5),guangsangon G(6),guangsangon B(7),guangsangon D(8),kuwanon P(9)。化合物1～9进行了抗氧化活性筛选。结果表明,在10-5M浓度下,化合物1,2,5～7,9对Fe2+-半胱氨酸诱导的肝微粒体脂质过氧化产生的丙二醛(malondialdehyde,MDA)有抑制作用(抑制率大于50%)。

湖北咸丰长穗桑的生境与种群结构初探

初步调查了湖北咸丰长穗桑种群 1 7株个体 ,主要结果表明 :咸丰长穗桑种群个体一般生长在人类频繁的干扰区内 ,遭到人们的大肆砍伐和破坏。其种群结构为倒金字塔形 ,缺乏幼苗和幼树 ,为衰老型种群 ;种群雌雄性比为 1 .83∶ 1 ,种群的生殖力和自我更新降低。必须大力加强对咸丰长穗桑的就地和迁地保护的研究和实施。

濒危植物长穗桑有性繁殖的初步研究

研究了长穗桑（ＭｏｒｕｓｗｉｔｉｏｒｕｍＨａｎｄ－Ｍａｚ）有性繁殖的特性，结果表明：桑籽的空秕率达７５％～９０％，千粒重０２５ｇ。饱满种子的发芽率达９２％，但发芽势差。经催芽点播后，种子一般均能成功地转化为幼苗。种子萌发以及幼苗生长有脆弱性。保水、通气、肥效足的土壤能促进幼苗健壮成长，砂壤和粘土不利于幼苗生长。

长穗桑四倍体诱导初步研究

以长穗桑为试验材料,对其进行继代增殖及对最佳增殖培养基进行了筛选,并用组织培养技术结合秋水仙素溶液浸泡法以获得四倍体新材料。结果表明:增殖培养基采用MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30mg/L最佳,其最高的增殖系数为3.2。四倍体诱导率达到26.7%,其染色体数目为2n=4x=56,最佳诱导条件为用0.2%的秋水仙素溶液浸泡3d。所获得的四倍体最适生根培养基为1/2MS+BA0.1mg/L+NAA0.05mg/L+30mg/L蔗糖,生根率达到100%。

野生长穗桑与栽培桑品种远缘杂交的育性研究

为了探讨长穗桑与栽培桑的远缘杂交育性,进行了长穗桑×栽培桑和栽培桑×长穗桑2种远缘杂交试验。结果表明,不同的远缘杂交类型、同一远缘杂交类型的不同组合在受孕率、结实率和可育性上有较大的差异,长穗桑×栽培桑的杂交受孕率在56.76%-90.20%,杂交结实率在52.06%-81.28%,杂交可育性在17.52%-60.57%;栽培桑×长穗桑的杂交受孕率在31.86%-54.07%,杂交结实率在30.69%-48.53%,杂交可育性在6.78%-20.56%。长穗桑×栽培桑的平均杂交受孕率、杂交结实率和杂交可育性比栽培品种×长穗桑分别提高25.27、28.37和23.21百分点。

长穗桑茎皮中的酚类成分及其抗炎和细胞毒活性

目的：研究长穗桑茎皮中具有抗炎和细胞毒活性的化学成分。方法：采用各种柱色谱对长穗桑茎皮95%乙醇提取物的醋酸乙酯部位进行分离纯化,通过NMR,MS等波谱分析手段鉴定化合物结构。结果：从醋酸乙酯部位中分离得到9个酚类化合物,其中6个黄酮类化合物,3个二苯乙烯类化合物。分别鉴定为槲皮素（1）,5,7,3,′4′-四羟基-3-甲氧基黄酮（2）,norartocarpanone（3）,二氢山柰酚（4）,euchrenone a7（5）,morachalcone A（6）,白藜芦醇（7）,高白藜芦醇（8）,4′-异戊烯基高白藜芦醇（9）。化合物18分别进行了抗炎和细胞毒活性筛选。结论：化合物19均为首次从该植物中分离得到。其中化合物6和8浓度在1.0×10^-5mol.L-1时对血小板活化因子刺激的多形核白细胞β-葡萄糖苷酸酶释放的抑制率分别为76.8%,94.2%;化合物2和8分别对人卵巢癌细胞（A2780）和人胃癌细胞（BGC-823）有选择性细胞毒活性,IC50分别为0.66,1.31μmol.L^-1。

长穗桑中的α-葡萄糖苷酶抑制剂成分研究

目的研究长穗桑中具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的化学成分。方法采用各种离子交换树脂对长穗桑水提取物进行分离纯化,通过NMR、MS等波谱分析手段鉴定化合物结构。结果从长穗桑水提取物中分离到11个化合物,其中7个多羟基生物碱类化合物,2个酰胺类化合物,1个氨基酸以及甜菜碱。分别鉴定为1-deoxynojirimycin（1）,fagomine（2）,3-epi-fago-mine（3）,1,4-dideoxy-1,4-imino-D-arabinitol（4）,2-O-α-D-galactopyranosyl-1-deoxynojirimycin（5）,4-O-β-D-glucopyranosyl-fago-mine（6）,1,4-dideoxy-1,4-imino-（2-O-β-D-glucopyranosyl）-D-arabinitol（7）,（2S）-citrullinamide（8）,grateloupinamide（9）,天冬氨酸（10）,甜菜碱（11）。化合物1~10分别进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结论化合物1~11均为首次从该植物中分离得到。4个多羟基生物碱（1,5~7）以及1个酰胺类化合物（9）有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中化合物1的IC50为0.07μmol.L-1;化合物5的IC50为0.39μmol.L-1,与阳性对照阿卡波糖（acarbose,IC50=0.52μmol.L-1）相当;化合物6,7,9的IC50值在1~5μmol.L-1。