匹罗卡品诱导颞叶癫痫大鼠齿状回苔藓纤维出芽及突触重建

目的 :探讨匹罗卡品致痫鼠大脑海马齿状回苔藓纤维出芽、突触重建及其与颞叶癫痫发生的关系。方法 :急性诱导癫痫持续状态及慢性颞叶癫痫形成后 ,采用Neo Timm银染观察苔藓纤维出芽及突触重建 ,并用原位杂交方法检测苔藓纤维出芽标志物生长相关蛋白 (GAP 4 3)mRNA ,用免疫组织化学方法检测突触重建标志物突触体素 (P38)的动态变化。结果 :癫痫持续状态后 6～ 1 2h ,海马齿状颗粒细胞GAP 4 3mRNA表达显著增高 ;从第 7d开始 ,P38免疫反应性在齿状回内分子层呈进行性增加 ,与Neo Timm显示的异常苔藓纤维出芽一致 ,而此时颗粒细胞GAP 4 3mRNA表达显著减少。结论 :匹罗卡品癫痫发作后 。

人参皂甙Rd对慢性颞叶癫痫大鼠空间学习记忆能力的影响

[ 目的：研究人参皂甙Rd（GsRd）对氯化锂一匹罗卡品点燃慢性白发性颞叶癫痫（TLE）大鼠空间学习记忆能力及海马苔藓纤维发芽（MFS）的干预作用。方法：建立氯化锂一匹罗卡品点燃TLE大鼠模型，将24只造模成功的TLE大鼠随机分为单纯TLE组（生理盐水10ml／kg腹腔注射）12只及加用GSRd干预组12只（GsRd2mg／kg腹腔注射），另选6只正常大鼠作为正常对照组。采用Morris水迷宫进行行为观察以了解各组大鼠空间学习记忆能力，取脑进行Timms染色作病理学观察以了解海马MFS情况。结果：与正常对照组相比，TLE组大鼠空间学习记忆功能下降，海马齿状回MFS明显增多（P〈0．05）；与TLE组相比，GSRd干预组可显著提高大鼠空间学习记忆能力及减少MFS（P〈0．05）。结论：GSRd可能通过抑制MFS减轻TLE大鼠的认知功能损害，有助于阻断慢性自发性TLE的形成和发展。

大脑皮层发育不良鼠脑皮层和海马中的突触生长相关蛋白表达

目的：探寻皮层发育不良（diffuse cortical dysplasias，DCD）大鼠大脑半球、海马的突触生长相关蛋白（growth-associated protein 43, GAP-43）免疫组化病理学特点，探讨DCD所致难治性癫癎（Intractable epilepsy，IE）的皮层发生机制。方法：建立X-射线照射诱导的皮质下异位结节大鼠DCD模型，采用SP免疫组织化学方法检测GAP-43，在大鼠脑皮质下异位结节和海马中的表达，光镜观察并在Gundersen测试系统下计数，图文分析，SPSS18．0软件统计。结果：与正常对照组或母鼠组白质比较，皮质下异位结节内GAP-43免疫阳性产物数密度增加10倍（P〈0．05）。同龄DCD鼠脑皮质Ⅰ-Ⅲ层异位结节、皮质下异位结节和CAI异位结节中GAP-43数密度比较无变化。GAP-43数密度仅在CA3区多形层增加，提示苔藓纤维发芽（mossy fibers sprouting，MFS）。结论：DCD鼠脑GAP-43的分布变化也可佐证海马MFS，提示海马兴奋性神经网络的形成及导致癫癎发生的蛋白质表达异常。

5-HTR6参与氯化锂-匹罗卡品致慢性颖叶癫痫大鼠海马苔藓纤维出芽的机制

目的:探讨5-HTR6参与氯化锂-匹罗卡品致慢性额叶癫痫大鼠海马苔藓纤维出芽的机制。方法:动物分组:分为空白组及癫痫组,分别于造模后1、2、4周观察苔藓纤维出芽变化及5-HTR6、Fyn、p-ERK1/2蛋白及GAP-43 mRNA表达变化.将实验鼠分为空白组、癫痫组、药物干预组,药物干预组又分为6个亚组,分别给予溶剂二甲基亚砜DMSO、5-HTR6受体拮抗剂SB271046、Fyn 拮抗剂 PP2、ERK1/2 拮抗剂 PD98059、SB271046 + PP2、SB271046 + PD98059,观察海马苔藓纤维出芽及5-HTR6、Fyn、p-ERK1/2、GAP-43mRNA表达变化。结果:①造模后第2周进入慢性期,在造模后7-28 d开始出现慢性自发性发作,5-HTR6受体拮抗剂SB-271046能够降低癫痫发作等级及发作频率;②癫痫发作后1周即观察到少量海马CA3区苔藓纤维出芽,随时间延长进行性增加,而空白组未见或只有极少量海马苔藓纤维出芽。SB-271046干预后海马苔藓纤维出芽明显减少,与空白组比较差异有统计学意义;③造模后5-HTR6、Fyn、p-ERK1/2及GAP-43 mRNA表达水平增高,于造模后4周时表达最高,给予5-HTR6受体、Fyn、ERK1/2拮抗剂后p-ERK1/2表达均减少,其中联合应用5-HTR6受体、ERK1/2受体拮抗剂最为明显。结论:氯化锂-匹罗卡品点燃的大鼠癫痫模型痫样放电后出现苔藓纤维出芽,随时间延长出芽程度加重,5-HTR6可能在苔藓纤维出芽过程中发挥重要作用。而SB271046通过抑制5-HTR6介导的Fyn/ERK通路.调控下游GAP-43mRNA表达,从而减少苔群纤维出芽。

匹罗卡品癫痫模型中蛋白质netrin-1的表达与苔藓纤维出芽的动态变化

目的：探讨神经诱向因子蛋白质netrin-1在癫痫持续状态后海马苔藓纤维出芽（MFS）中的作用。方法：氯化锂-匹罗卡品建立大鼠颞叶癫痫（TLE）模型，采用Timm染色和免疫组化的方法分别检测MFS和netrin-1在大鼠海马组织中的表达。结果：TLE组大鼠在模型形成的第2周和第4周，海马齿状回内netrin-1的表达较正常对照组明显增加，并可见到MFS，穿越齿状回颗粒细胞层到达内分子层，并形成一条致密的层状带。结论：癫痫状态后在海马齿状回netrin-1的表达上调，证明其可能参与了癫痫后MFS过程。