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Enhanced radioimmunotherapeutic efficacy of a monoclonal antibody cocktail against SMMC-7721 human hepatocellular carcinoma 被引量:2
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作者 SONG YI QIANG GEN FENG WANG +1 位作者 XIN LAN DAI HONG XIE(Shanghai Institute of Cell Biology, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China) 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 1998年第3期241-247,共7页
The improved tumoricidal effect of the radioatibody mixture ("cocktail") has been reported recently for the treatment of colon tumor. In the present study, we demonstrated the enhanced radioimmunotherapeutic... The improved tumoricidal effect of the radioatibody mixture ("cocktail") has been reported recently for the treatment of colon tumor. In the present study, we demonstrated the enhanced radioimmunotherapeutic efficacy of a monoclonal atibody (MAb) cocktail against human hepatocellular carcinoma. Therapeutic efficacy was determined by measuring the change in tumor size over a period, determining the percentage of growth inhibition of each treatment at various times after radioantibody therapy. boioimmunotherapy of SMMC-7721 human hepatoma xenografts in athymic nude mice with combination of 131I labeled Hepama-1 and 131Llabeled 9403 mouse MAbs was more effective than using either Hepeam-1 or 9403 Mab alone The MAb cocktail could target a greater number of hepstoma cells and increase the magnitude of hepatoma cen uptde of radioamibodies. The in vjtro results explain the enhanced effect of the MAb cocktail in in vjvo model system. 展开更多
关键词 mouse monoclonal antibody human hepatocellular carcinoma RADIOIMMUNOTHERAPY antibody cocktail
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Preparation and Identification of Rat Monoclonal Anti-idiotope Antibody to the Antibody against Erythrocytic Stages of Plasmodium Falciparum
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作者 李纪良 巢穗 +1 位作者 欧阳明辉 李英杰 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1989年第1期57-59,共3页
A hybridoma cell line secreting monoclonal antibody to idiotope of the monoclonalantibody 94D1 specific for asexual erythrocytic stages of Plasmodium falciparum was established byfusion of SP2/0 mouse myeloma cells wi... A hybridoma cell line secreting monoclonal antibody to idiotope of the monoclonalantibody 94D1 specific for asexual erythrocytic stages of Plasmodium falciparum was established byfusion of SP2/0 mouse myeloma cells with spleen cells of Wistar rats immunized with monoclonalIgG of 94D1 purified from ascitic fluid of BALB/C mouse by affinity chromatography on ProteinA- Sepharose CL- 4B. Specificity of the anti - idiotope antibody (anti - Id), 41RF5, was deter-mined with indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The results showedthat 41RF5 reacted only with 94D1 IgG2b, not with normal mouse IgG and other seven mousemonoclonal antibodies - five specific for erythrocytic stages of P. falciparum, one for erythrocyticstages of P. inui, and one for Dengue fever virus type III, which indicates that 41RF5 does recognizespecifically the idiotope of 94D1 monoclonal antibody. In 41RF5 heterohybrid culture supernatant,anti-Id titre measured by ELISA was above 1:1 280. Up to the present, the heterohybrid cell linehas been cultured stably for 16 months. 展开更多
关键词 IDIOTYPE monoclonal anti-idiotope antibody mouse-rat heterohybridoma Plasmodium FALCIPARUM
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体外检测试剂盒阻断剂的制备方法及特性分析
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作者 何汝琴 雷鹏 +3 位作者 邓龙芝 朱文武 朱雄伟 熊梦瑶 《发育医学电子杂志》 2024年第1期1-6,19,共7页
目的探讨体外检测试剂盒阻断剂的制备方法及特性。方法采用6周龄BALB/c小鼠进行抗原免疫,构建杂交瘤细胞并克隆。采用动物体内诱导单克隆抗体的方法大量制备单克隆抗体,分别采用G柱亲和层析、蓝胶+Q柱离子交换层析两种方法进行纯化,核... 目的探讨体外检测试剂盒阻断剂的制备方法及特性。方法采用6周龄BALB/c小鼠进行抗原免疫,构建杂交瘤细胞并克隆。采用动物体内诱导单克隆抗体的方法大量制备单克隆抗体,分别采用G柱亲和层析、蓝胶+Q柱离子交换层析两种方法进行纯化,核酸蛋白检测仪记录波长280 nm下的光密度(optical density,OD),紫外分光光度计测量成品浓度。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测抗体纯度。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)双抗体夹心法检测该阻断剂(CN302)对假阳性样本的阻断能力。结果G柱亲和层析法提取阻断剂的收率(3个批次分别为6.49、6.12、6.27 g/L)高于蓝胶+Q柱离子交换层析法(3个批次分别为1.78、1.68、1.61 g/L)。两种纯化方法的纯度均高达95%以上。G柱亲和层析法、蓝胶+Q柱离子交换层析法所得阻断剂的活性分别为106.54%、92.45%;与空白组相比,两种纯化方式所得阻断剂CN302对假阳性样本的检出率均降低,其OD值均小于0.2,与基准阻断剂大致相同。G柱亲和层析法所得阻断剂CN302未冻融的活性为99.86%,冻融5次后活性为99.83%。无阻断剂存在时,对假阳性样本检测的OD值约为2.5,最高可达到4.0;加入阻断剂后,OD值明显降低;阻断剂CN302对假阳性样本检测的OD值低于其他阻断剂。结论本研究所得阻断剂能显著消除样本内源性干扰,且活性几乎全部保留。G柱亲和层析法提取抗体的收率和阻断能力均高于蓝胶+Q柱离子交换层析法。 展开更多
关键词 阻断剂 体外检测试剂盒 小鼠 单克隆抗体 G柱亲和层析 蓝胶+Q柱离子交换层析
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间接竞争抑制性酶联免疫吸附试验测定豚毒鱼类中河豚毒素的研究 被引量:28
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作者 王健伟 罗雪云 +2 位作者 计融 张镝 张靖 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期106-109,共4页
将河豚鱼样品的组织匀浆用0.1%乙酸溶液煮沸2次,合并滤液用乙醚脱脂2次,将水相用0.05mol/LPBS稀释后(调pH6.5~7.0)供ELISA检测之用。结果表明,本法的最低检出浓度为1.0×10-3mg/L... 将河豚鱼样品的组织匀浆用0.1%乙酸溶液煮沸2次,合并滤液用乙醚脱脂2次,将水相用0.05mol/LPBS稀释后(调pH6.5~7.0)供ELISA检测之用。结果表明,本法的最低检出浓度为1.0×10-3mg/L(0.1ng/检测孔),线性范围为0.01~1.0mg/L,方法的加标回收率为73.8%~117.4%。用传统的小鼠生物试验比较了方法的准确性。测定结果表明,两种方法之间在统计学上无显著性差异(配对t检验,P>0.2),并具有良好的相关性(r=0.916)。 展开更多
关键词 河豚毒素 测定 豚毒鱼 ELISA
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抗人非小细胞肺癌单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:17
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作者 徐婷 潘世扬 +10 位作者 王芳 张丽霞 黄珮珺 徐建 孙瑞红 黄蕾 夏文颖 陆雅春 耿雁 彭蘡 秦雪君 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期216-218,共3页
目的制备抗人非小细胞肺癌(NSCLC)的单克隆抗体(McAb),并对其生物学特性及特异性进行鉴定。方法以人肺腺癌细胞株SPC-A1为抗原,免疫BALB/c小鼠,常规细胞融合,间接细胞ELISA法筛选阳性细胞克隆;多种细胞间接ELISA及间接免疫荧光法鉴定其... 目的制备抗人非小细胞肺癌(NSCLC)的单克隆抗体(McAb),并对其生物学特性及特异性进行鉴定。方法以人肺腺癌细胞株SPC-A1为抗原,免疫BALB/c小鼠,常规细胞融合,间接细胞ELISA法筛选阳性细胞克隆;多种细胞间接ELISA及间接免疫荧光法鉴定其特异性;western blot分析其特异性结合抗原的相对分子量;免疫组化染色分析单抗的组织特异性。结果得到1株高效价的、稳定分泌IgG1抗人NSCLC单抗的细胞株(NJ488-1),纯化后效价为2×106;间接细胞ELISA及间接免疫荧光法证实NJ488-1能特异地识别肺癌细胞系,其识别抗原定位于SPC-A1细胞胞浆区;western blot显示NJ488-1特异性结合的抗原相对分子量(Mr)为70 000左右;免疫组化结果表明NJ488-1与NSCLC组织有强阳性反应。结论成功地制备并鉴定了抗人NSCLC单抗NJ488-1,为肺癌的进一步研究及NJ488-1的临床应用奠定了基础。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 单克隆抗体 BALB/C小鼠
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一种利用HCIC快速纯化抗rhTF_(243)单克隆抗体方法的研究 被引量:3
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作者 赵峰梅 齐延红 +4 位作者 何永吉 潘薇薇 卢晓霞 粱雅丽 赵邑 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期548-551,共4页
目的:建立从小鼠腹水中快速纯化抗人重组组织因子243(recombine human tissue factor243,rhTF243)单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的方法。方法:含抗rhTF243单克隆抗体的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换等预处理后,先经疏水电荷诱... 目的:建立从小鼠腹水中快速纯化抗人重组组织因子243(recombine human tissue factor243,rhTF243)单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的方法。方法:含抗rhTF243单克隆抗体的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换等预处理后,先经疏水电荷诱导层析纯化处理,去除大部分杂蛋白,再经Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析柱进一步纯化。结果:经两步纯化后获得抗rhTF243单克隆抗体,其生物学活性高、纯度大于95%,抗体效价保持良好,抗体总回收率达73%,且具有明显的抗促凝作用。结论:建立的单克隆抗体纯化方法简便、高效,所得mAb的纯度高、生物学活性好。 展开更多
关键词 MEP HyperCel疏水层析 PROTEIN A-Sepharose CL-4B亲和层析 单克隆抗体 腹水 纯化
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阿莫西林人工抗原的合成及其单克隆抗体的制备 被引量:5
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作者 薛添 宋凯 薛小平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期770-772,共3页
目的:合成阿莫西林(AMX)完全抗原,获得稳定、高效分泌抗AMX单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。方法:采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯(NHS)法制备AMX-OVA(免疫原)AMX-BSA(检测抗原),紫外光谱分析检测偶联物克分子比,以AMX-OVA免疫BALB/c小鼠,... 目的:合成阿莫西林(AMX)完全抗原,获得稳定、高效分泌抗AMX单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。方法:采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯(NHS)法制备AMX-OVA(免疫原)AMX-BSA(检测抗原),紫外光谱分析检测偶联物克分子比,以AMX-OVA免疫BALB/c小鼠,用细胞融合技术筛选分泌抗AMX mAb的杂交瘤细胞,体内诱生法制备腹水,辛酸-硫酸胺法从腹水中纯化mAb,ELISA法测定mAb亚类。结果:紫外光谱显示偶联物表现出小分子与蛋白载体叠加的特征,具有良好的免疫原性和反应原性。获得了5株可稳定分泌特异性抗AMX mAb的杂交瘤细胞株,亚类鉴定均为IgG1。mAb对AMX最小检测极限(limit of detection,LOD)为0.25 ng/mL,但与同属β-内酰胺类抗生素的氨苄青霉素有一定程度的交叉反应。结论:该细胞株可满足建立免疫学检测方法的需要和开发应用的要求。 展开更多
关键词 阿莫西林 单克隆抗体 小鼠
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在共培养体系中单克隆抗体AH_6对小鼠胚泡着床的影响 被引量:6
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作者 王晓琦 曹宇静 +1 位作者 曾国庆 朱正美 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1998年第4期443-449,共7页
以单克隆抗体AH6[特异结合LeY寡糖,Fucα12Galβ14(Fucα13)GlcNAc]以及其它3种与LeY寡糖结构近似的寡糖特异结合的单克隆抗体αLea、αLeb和FEA5为工具,采用小鼠体外着床模型,研究细... 以单克隆抗体AH6[特异结合LeY寡糖,Fucα12Galβ14(Fucα13)GlcNAc]以及其它3种与LeY寡糖结构近似的寡糖特异结合的单克隆抗体αLea、αLeb和FEA5为工具,采用小鼠体外着床模型,研究细胞表面LeY寡糖抗原与着床的关系及其在着床过程中的具体作用环节。结果显示:不论子宫上皮细胞表面还是胚胎滋养层细胞表面的LeY寡糖抗原被封闭后,都能导致胚胎在单层子宫上皮细胞表面粘附和扩展生长的延迟,但对胚胎最终的扩展程度并无影响,而其它3种单克隆抗体对胚胎的粘附则均无影响。说明这种作用具有明确的寡糖结构特异性。另外,运用免疫荧光方法观察到,胚胎在单层子宫上皮细胞表面的粘附与LeY寡糖在细胞表面的消长密切相关。因而认为LeY寡糖抗原在胚胎着床中可能是作为一种中介分子参与着床始发阶段的胚胎与母体间的识别和粘着。实验中经单克隆抗体处理后胚胎和单层子宫上皮细胞与对照组比较,其形态与发育未见不同。 展开更多
关键词 单克隆抗体AH6 Le^Y寡糖抗原 小鼠 体外着床
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大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体的鉴定 被引量:2
9
作者 张国荣 吴江声 +2 位作者 肖士云 冯继明 陈慰峰 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期317-320,共4页
根据小鼠胸腺冰冻切片免疫组织化学染色,将已获得的30种大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体分为8组:1.髓质胸腺基质细胞(TSC)阳性,皮质TSC阴性;12.髓质部分TSC阳性,皮质TSC阴性;3.皮、髓交界部分TSC阳性;4.皮、髓质部分TSC阳性;5.髓质TS... 根据小鼠胸腺冰冻切片免疫组织化学染色,将已获得的30种大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体分为8组:1.髓质胸腺基质细胞(TSC)阳性,皮质TSC阴性;12.髓质部分TSC阳性,皮质TSC阴性;3.皮、髓交界部分TSC阳性;4.皮、髓质部分TSC阳性;5.髓质TSC阳性,皮质部分TSC阳性,6.皮、髓质大部分TSC阳性;7.被膜和血管内皮细胞呈阳性;8.髓质TSC和皮质胸腺细胞为阳性。用这8组单抗对本室建立的5株小鼠胸腺基质细胞系进行免疫荧光染色,发现它们与各细胞系的反应各不相同。对这些单抗的鉴定不仅有利于鉴别TSC亚群,并且为研究T细胞与基质细胞的相互作用提供了新的抗体。 展开更多
关键词 单克隆抗体 胸腺基质细胞 免疫组化
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表面等离子体共振生物传感器的构建及对柠檬黄的检测 被引量:9
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作者 王曼丽 明华蜜 +1 位作者 尹洪宗 徐坤 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期53-58,共6页
建立了傅里叶-表面等离子体共振传感器(FT-surface plasmon resonance,FT-SPR)检测食品色素柠檬黄的方法。利用柠檬黄与柠檬黄小鼠单克隆抗体特异性结合的原理,将碳酰二亚胺盐酸盐法制备出的柠檬黄-牛血清白蛋白偶联物成功结合到传感器... 建立了傅里叶-表面等离子体共振传感器(FT-surface plasmon resonance,FT-SPR)检测食品色素柠檬黄的方法。利用柠檬黄与柠檬黄小鼠单克隆抗体特异性结合的原理,将碳酰二亚胺盐酸盐法制备出的柠檬黄-牛血清白蛋白偶联物成功结合到传感器芯片上,通过溶液竞争法检测柠檬黄。建立了标准曲线,获得检出限13μg/L;研究了pH值对检测的影响,得到pH 7.4为适宜的体系酸度;回收实验、实际样品检测及干扰实验的结果表明,本方法对柠檬黄有高选择性。与紫外检测方法相比较,FT-SPR传感器检测柠檬黄方法表现出了选择性高和检出限低等优势。 展开更多
关键词 表面等离子体共振传感器 柠檬黄 小鼠单克隆抗体 饮料
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实验小鼠H-2抗原单克隆抗体的效价研究 被引量:2
11
作者 谭萍萍 谢青莲 +4 位作者 岳作军 翁忠辉 成志恒 白琴华 金玫蕾 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2003年第2期74-76,共3页
目的 研究实验小鼠H - 2抗原单克隆抗体在初建时和经冷冻保存后的效价变化规律 ,为长期保存小鼠H - 2抗原单抗及规模性推广这一遗传监测方法奠定技术基础。方法 制备 6种抗小鼠H 2抗原的单克隆抗体 ,将具备一定抗体效价 (16 0倍以上 ... 目的 研究实验小鼠H - 2抗原单克隆抗体在初建时和经冷冻保存后的效价变化规律 ,为长期保存小鼠H - 2抗原单抗及规模性推广这一遗传监测方法奠定技术基础。方法 制备 6种抗小鼠H 2抗原的单克隆抗体 ,将具备一定抗体效价 (16 0倍以上 )的细胞株保存在 - 196℃的液氮中 ,数月后将复苏后的部分细胞株培养 4 8h后 ,取其上清液用微量细胞毒试验法测定抗体的效价 ,并与其原有效价进行比较。结果 单抗初建时效价达到 16 0倍以上的细胞株占总株数的 37%~ 5 3% ,H 2K抗体复苏后效价持平的细胞株占 13% ,效价下降的为 74 % ,效价上升的是 13% ;H 2D抗体效价持平的细胞株占 5 3% ,下降的为 31% ,上升的是 16 %。复苏后的抗体效价大部分与原效价持平或略有下降 ,个别的会有所提高。结论 单克隆抗体的效价略低于同种单价特异性抗血清 ;能否使冻存后的抗体保持原有的效价是抗体能否大量生产并推广的关键 ;要长期保存和生产H 2抗原单抗 ,应加强克隆和检测工作 ,建立稳定的制备、保存和检测系统 。 展开更多
关键词 实验小鼠 H-2抗原 单克隆抗体 效价 遗传 监测
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Toll样受体4单克隆抗体对急性期溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜Toll样受体4介导的核因子-κB信号通路的影响 被引量:4
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作者 刘懿 王磊 +7 位作者 张志军 孙旭 黄剑平 陈坚 岳文杰 李娟 董乐 钟良 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期702-705,共4页
目的探讨Toll样受体4(TLR4)单克隆抗体(TLR4mAb)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性期溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠黏膜TLR4介导的核因子(NF)-κB信号通路中磷酸化IκB激酶(p-IKK)及NF-κB的影响情况。方法30只BALB/c小鼠均分为正常对照组(A组)... 目的探讨Toll样受体4(TLR4)单克隆抗体(TLR4mAb)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性期溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠黏膜TLR4介导的核因子(NF)-κB信号通路中磷酸化IκB激酶(p-IKK)及NF-κB的影响情况。方法30只BALB/c小鼠均分为正常对照组(A组)、UC模型组(B组)及低、中、高剂量TLR4mAb干预组(C、D、E组)。A组小鼠饮用蒸馏水7d;B、C、D、E组小鼠饮用5%DSS水溶液7d以制成UC模型。造模同时,C、D、E组小鼠分别腹腔注射低、中、高剂量TLR4mAb。造模及干预7d后处死小鼠,观察指标包括疾病活动指数(DAI)、结肠组织病理学评分(HPS)。采用Western印迹法检测各组肠黏膜p-IKK的蛋白表达,蛋白凝胶电泳迁移率变动分析法(EMSA法)检测NF-κB的活性变化。结果B组小鼠的结肠黏膜DAI及HPS均显著高于A组(P值均<0.01)。与模型组相比,使用TLR4mAb干预后中、高剂量组HPS有不同程度的缓解(P值均<0.01)。②与B组相比,D、E组的TLR4mAb后p-IKK表达及NF-κB的活性均显著下降(P值分别<0.05、0.01)。结论TLR4mAb可以减轻肠道炎症,发挥干预作用,其机制可能是通过抑制TLR4介导的NF-κB通路关键蛋白的表达,降低NF-κB的活性,继而减少下游炎性因子过度表达。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 Toll样受体4单克隆抗体 核因子-κB抑制蛋白激酶 核因子-ΚB 小鼠
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抗人类疱疹病毒6型南京分离株E5单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:3
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作者 姜兰兰 姚堃 +4 位作者 尹全章 茌静 周锋 卢士强 刘英霞 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期416-419,428,共5页
目的:制备并鉴定人疱疹病毒6型(HHV-6)单克隆抗体。方法:用纯化的HHV-6南京分离株E5免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA法筛选,间接免疫荧光法、免疫印迹实验等方法鉴定单抗。并采用套式PCR法和ELISA法,在口... 目的:制备并鉴定人疱疹病毒6型(HHV-6)单克隆抗体。方法:用纯化的HHV-6南京分离株E5免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA法筛选,间接免疫荧光法、免疫印迹实验等方法鉴定单抗。并采用套式PCR法和ELISA法,在口腔癌中进行了初步的应用。结果:获得了一株分泌抗HHV-6单克隆抗体的杂交瘤细胞系,命名为JA9。单克隆抗体亚类鉴定表明:其为IgG1亚类,轻链为κ。用间接ELISA法检测细胞上清单抗效价为1∶500;单抗腹水滴度为1∶8.0×104。免疫印迹实验结果表明:JA9单抗腹水与约75kuHHV-6E5病毒蛋白结合。口腔癌患者唾液的HHV-6阳性检测率结果分别是:套式PCR法60%,ELISA法40%。结论:成功制备并鉴定一株抗HHV-6南京分离株E5单克隆抗体,为HHV-6进一步的基础研究及临床快速诊断提供可能。 展开更多
关键词 人类疱疹病毒6型 单克隆抗体 BALB/C小鼠
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人源化Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病小鼠模型的建立 被引量:2
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作者 孔圆 王亚哲 +1 位作者 胡玥 黄晓军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期73-77,共5页
本研究旨在建立一种新型人源化Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)小鼠异种移植模型。4-6周NOD/SCID小鼠经亚致死剂量60Co全身照射后,给予抗小鼠CD122单克隆抗体腹腔注射,在预处理后24 h内经小鼠膝关节骨髓腔注射Ph+ALL患者骨髓单... 本研究旨在建立一种新型人源化Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)小鼠异种移植模型。4-6周NOD/SCID小鼠经亚致死剂量60Co全身照射后,给予抗小鼠CD122单克隆抗体腹腔注射,在预处理后24 h内经小鼠膝关节骨髓腔注射Ph+ALL患者骨髓单个核细胞。于移植后8-12周通过流式细胞术检测受鼠骨髓和脾脏中人源细胞的植入水平及其免疫表型,应用实时定量聚合酶链式反应(RQ-PCR)和荧光原位杂交(FISH)检测受鼠骨髓和脾脏中人BCR/ABL1水平,并通过苏木精-伊红染色和抗人CD19,抗人CD34免疫组化染色评价人源Ph+ALL细胞在受鼠各组织器官中的迁移浸润能力。结果表明,在接受Ph+ALL患者细胞移植的受鼠骨髓和脾脏细胞中,人源Ph+ALL(huCD45+CD19+)细胞不仅有不同程度植入,而且植入细胞具有与Ph+ALL患者相似的细胞形态学、免疫表型和细胞遗传学特征。此外,人源Ph+ALL细胞还广泛迁移浸润到受鼠的脑、肝脏和肾脏等组织器官中。结论:抗CD122抗体预处理的NOD/SCID小鼠联合骨髓腔注射能够支持Ph+ALL患者骨髓单个核细胞的有效植入,为人类Ph+ALL白血病启动细胞鉴定及临床新药筛选研究提供一种新型异种移植模型。 展开更多
关键词 NOD SCID小鼠 抗小鼠CD122 异种移植小鼠模型 急性淋巴细胞白血病 PH染色体
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抗人CD28激发性单抗对T细胞淋巴瘤的抑制作用研究 被引量:2
15
作者 胡玲玲 陈昌友 +4 位作者 张益红 郭静雅 陆海波 旬神美 邱玉华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期880-883,共4页
目的:研究鼠抗人CD28单克隆抗体(克隆号:2F5)对T淋巴细胞瘤的抗肿瘤效应,为抗体介导肿瘤靶向治疗提供新的方法和思路。方法:流式细胞术检测鼠抗人CD28单克隆抗体2F5对人T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞表面膜型CD28分子的识别;MTT法检测2F5对Ju... 目的:研究鼠抗人CD28单克隆抗体(克隆号:2F5)对T淋巴细胞瘤的抗肿瘤效应,为抗体介导肿瘤靶向治疗提供新的方法和思路。方法:流式细胞术检测鼠抗人CD28单克隆抗体2F5对人T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞表面膜型CD28分子的识别;MTT法检测2F5对Jurkat细胞体外增殖的影响;将Jurkat细胞株接种于裸鼠腋下,建立Jurkat细胞荷瘤裸鼠模型;经瘤内多点注射2F5(注射剂量1μg/mm3),逐日观察肿瘤的大小和裸鼠的生存状态。结果:2F5能够识别Jurkat细胞表面CD28分子,阳性结合率可达93.37%;2F5与Jurkat细胞共培养后,显微镜下观察可见胞质中出现黑色颗粒,胞膜破裂,细胞的折光性和立体感减弱;MTT法分析结果显示,抗CD28单抗对Jurkat细胞的体外增殖具有明显的抑制作用;将Jurkat细胞接种35只裸鼠(成瘤率达70%);经瘤内多点注射2F5,35天后荷瘤小鼠体内肿瘤的生长速率明显降低;而生理盐水对照组肿瘤生长无明显改变。结论:鼠抗人CD28单克隆抗体2F5通过与Jurkat细胞表面膜型CD28分子结合对其增殖具有明显的抑制作用,提示CD28分子可作为治疗T淋巴瘤的一个潜在靶点,抗体对治疗CD28分子阳性的肿瘤具有潜在临床应用价值。 展开更多
关键词 CD28 鼠抗人CD28单克隆抗体 T淋巴细胞瘤
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单克隆抗体诱发乙肝转基因小鼠肝组织损伤 被引量:1
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作者 胡卫江 余宏宇 +4 位作者 姚玉成 李建秀 孙伟 郝光荣 胡以平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期164-167,共4页
目的 :诱导整合有乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组、无病理学反应的转基因小鼠产生病理学改变 ,建立研究急性肝炎发生机制及治疗药物筛选的转基因动物模型。方法 :采用尾静脉注射方法将 3种 HBV单克隆抗体 HBs Ab、HBe Ab、HBc Ab分别或混... 目的 :诱导整合有乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组、无病理学反应的转基因小鼠产生病理学改变 ,建立研究急性肝炎发生机制及治疗药物筛选的转基因动物模型。方法 :采用尾静脉注射方法将 3种 HBV单克隆抗体 HBs Ab、HBe Ab、HBc Ab分别或混合导入整合有 HBV全基因组的转基因小鼠体内 ,使之与体内的抗原结合产生免疫学反应 ,随后进行血清学及常规病理学的研究。结果 :3种单克隆抗体单独或混合处理均引起 HBV转基因小鼠肝细胞的病理学损伤 ,以 HBs Ab及 HBs Ab+HBc Ab混合处理组损伤较为严重 ;但小鼠血清转氨酶基本表现正常。 结论 :体液免疫反应可以诱导 HBV转基因小鼠组织细胞发生损伤 ,并产生与急性肝炎相似症状的病理学改变 ,HBs Ab及 HBs Ab+HBc Ab处理的 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 转基因小鼠 动物模型 单克隆抗体
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鼠源性单克隆抗体F(ab′)_(2)片段制备工艺 被引量:4
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作者 余晓玲 米力 +1 位作者 陈志南 边惠洁 《第四军医大学学报》 2000年第12期1533-1536,共4页
目的 制备符合临床应用质量标准的鼠源性 m Ab F(ab′) 2 片段 .方法 采用胃蛋白酶消化小鼠腹水抗体 ,疏水作用色谱法纯化 F(ab′) 2 片段的新工艺 ,替代原有的木瓜蛋白酶消化 Ig G,阴离子交换色谱法纯化的旧工艺 .结果 新工艺所制备... 目的 制备符合临床应用质量标准的鼠源性 m Ab F(ab′) 2 片段 .方法 采用胃蛋白酶消化小鼠腹水抗体 ,疏水作用色谱法纯化 F(ab′) 2 片段的新工艺 ,替代原有的木瓜蛋白酶消化 Ig G,阴离子交换色谱法纯化的旧工艺 .结果 新工艺所制备的 F(ab′) 2 片段经 SDS- PAGE检测纯度达 98%以上 ,ABC免疫组化法测定免疫活性为 1∶ 80 0 0 ,回收率大于 5 0 % ,核酸含量及热原均合格 ,整个工艺流程可在 48h内完成 .结论 新工艺制备人用鼠源性 m Ab F(ab′) 2 片段更简便高效、安全实用 。 展开更多
关键词 鼠源性单克隆抗体 F(ab′)_(2)片段 制备工艺
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白血病抑制因子对胚泡金属蛋白酶表达的影响 被引量:1
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作者 孔英 葛常辉 +1 位作者 燕秋 朱正美 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期278-282,共5页
为了探讨白血病抑制因子 (LIF)对胚泡着床作用的机理 ,胚泡经与LIF及其特异性抗体培养后 ,通过RT PCR及免疫印迹技术 ,分析了LIF与着床前小鼠胚泡的基质金属蛋白酶 9(MMP9)表达和分泌之间的关系 .结果显示 :LIF可明显诱导胚泡MMP9的分... 为了探讨白血病抑制因子 (LIF)对胚泡着床作用的机理 ,胚泡经与LIF及其特异性抗体培养后 ,通过RT PCR及免疫印迹技术 ,分析了LIF与着床前小鼠胚泡的基质金属蛋白酶 9(MMP9)表达和分泌之间的关系 .结果显示 :LIF可明显诱导胚泡MMP9的分泌和基因表达 ;经LIF特异性抗体封闭后 ,胚泡MMP9的分泌及基因表达下降 ,且下降趋势随着LIF被封闭时间延长而减弱 ,对MMPs组织抑制因子 1(TIMP1)的影响则不明显 .说明LIF可能通过诱导MMP9的分泌及基因表达来影响胚泡对子宫内膜细胞外基质的水解 ,促进着床 . 展开更多
关键词 小鼠 胚泡 白血病抑制因子 基质金属蛋白酶 单克隆抗体 基因表达
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日本血吸虫单克隆抗抗独特型抗体NP41的建株及初步鉴定 被引量:1
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作者 李芸茜 仇镇宁 +1 位作者 冯振卿 管晓虹 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2001年第3期157-159,F004,共4页
目的 制备日本血吸虫单克隆抗独特型抗体 (anti- id,Ab2 ) NP30的抗抗独特型抗体 (an-ti- anti- id,Ab3)。方法  IRS- NP30主动免疫 BAL B/ c小鼠 ,取其脾细胞与 SP2 / 0细胞融合 ,制备 an-ti- anti- id杂交瘤细胞株。结果 获得 1株... 目的 制备日本血吸虫单克隆抗独特型抗体 (anti- id,Ab2 ) NP30的抗抗独特型抗体 (an-ti- anti- id,Ab3)。方法  IRS- NP30主动免疫 BAL B/ c小鼠 ,取其脾细胞与 SP2 / 0细胞融合 ,制备 an-ti- anti- id杂交瘤细胞株。结果 获得 1株稳定分泌单克隆抗体的细胞株 ,定名为 NP41。 NP41的 Ig同型为 Ig M。免疫组化显示 NP41与成虫的体膜、消化管上皮、子宫内膜上皮及虫卵内的毛蚴头腺、毛蚴膜呈阳性反应。结论  NP41为 NP30的 anti- anti- id,其识别的抗原即 展开更多
关键词 日本血吸虫 单克隆抗体 模拟抗原 酶联免疫吸附试验 小鼠
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两步串联层析法纯化鼠抗人CD80单克隆抗体4E5 被引量:1
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作者 马泓冰 邱玉华 +3 位作者 陶然 李文香 徐颖 张学光 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期84-87,共4页
采用阴离子交换与凝胶过滤两步串联层析法,纯化了小鼠腹水来源的CD80阻断型单克隆抗体4E5。腹水样品经离心、过滤预处理后,在Tris-HCl缓冲溶液(pH8.0,50mmol/L)条件下,上阴离子交换柱对目的单抗进行捕集,采用0-0.5mol/L NaC... 采用阴离子交换与凝胶过滤两步串联层析法,纯化了小鼠腹水来源的CD80阻断型单克隆抗体4E5。腹水样品经离心、过滤预处理后,在Tris-HCl缓冲溶液(pH8.0,50mmol/L)条件下,上阴离子交换柱对目的单抗进行捕集,采用0-0.5mol/L NaCl浓度分步洗脱;含目的单抗的洗脱馏分再上凝胶过滤柱纯化,用PB缓冲溶液(pH7.2,20mmol/L)洗脱,获得目的单抗4E5,其生物学活性高、纯度大于95%,抗体总回收率达61%。 展开更多
关键词 阴离子交换层析法 凝胶过滤层析法 单克隆抗体 腹水 纯化
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