鞘内注射MrgC抗体对电针干预CFA大鼠慢性炎性痛及脊髓背角NR1表达的影响

[目的]观察鞘内注射Mas-related G Protein-coupled C(MrgC)抗体对电针(Electroacupuncture,EA)干预完全福氏佐剂(Complete?Freund's?Adjuvant,CFA)所致大鼠慢性炎性痛及脊髓背角(Spinal dorsal horn,SDH)N-甲基-D-天门冬氨酸受体亚基1(N-methyl-d-aspartate receptors1,NR1)表达的影响。[方法]SD雄性大鼠28只,脊髓鞘内插管成功后建立CFA模型,造模后随机分为生理盐水(Saline)组、MrgC抗体(MrgC Ab)组、MrgC Ab+EA组和Saline+EA组,每组7只。两EA干预组从造模24h后在患侧"足三里"和"昆仑"穴开始电针刺激,参数为2/100Hz、30min,1次/d,连续7d,其余各组均做相应固定处理。造模后7d,各组大鼠鞘内注射相应试剂。在造模前和造模后24h、6d、7d检测大鼠患足热缩退潜伏期(Thermal Paw Withdrawal Latency,T-PWL)。免疫组织化学法检测各组大鼠患侧SDH NR1的表达。[结果](1)各组大鼠在CFA造模前和造模后24h时,T-PWL均无明显差异。第6d时,与Saline组相比,MrgC Ab+EA组和Saline+EA组大鼠患足T-PWL显著延长(P<0.01),MrgC Ab组大鼠患足T-PWL无统计学差异。第7d时,与Saline组相比,MrgC Ab组大鼠T-PWL明显缩短(P<0.05),而Saline+EA组显著延长(P<0.01);与Saline+EA组比较,MrgC Ab+EA组大鼠T-PWL显著缩短(P<0.05)。(2)与Saline组比较,MrgC Ab组SDH NR1表达量显著提高(P<0.01);EA干预后大鼠SDH NR1表达量显著降低(P<0.01),MrgC Ab+EA组大鼠SDHNR1表达量也显著高于Saline+EA组大鼠(P<0.05)。[结论]鞘内注射MrgC抗体能显著拮抗电针对CFA诱导性慢性炎性痛的镇痛作用,电针镇痛效应可能与下调大鼠患侧脊髓背角NR1受体表达有关。

SiRNA干扰慢性炎性痛大鼠患侧背根神经节MrgC表达及PKCε磷酸化的研究

目的观察鞘内注射小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)诱导的慢性炎性痛大鼠患侧背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中Mrg C(Mas-related G protein-coupled receptor C,Mrg C)mRNA与蛋白表达的干扰作用,并观察该作用对大鼠患足痛阈及患侧DRG PKCε丝氨酸729点位磷酸化(phosphorylation of PKCεSer729,p-PKCεSer729)水平的影响。方法健康雄性SD(Sprague-Dawley,SD)大鼠16只,随机分为对照siRNA组,Mrg C siRNA组,每组8只。大鼠脊髓鞘内插管成功后,两组大鼠给予相应药物鞘内注射4 d,1次/d,5μg/d/只。给药第4 d,大鼠右后足底注射CFA 0.1 m L建立慢性炎性痛模型,此后隔日注射药物,直至给药第11 d处死。分别于鞘内置管前、给药前、给药4 d(CFA造模0 h)、给药5 d(CFA造模24 h)、给药11 d(CFA造模7 d)5个时点检测大鼠患足机械缩腿阈(Paw withdrawal thresholds,PWTs)的变化。荧光定量PCR法检测患侧DRG Mrg C的mRNA的表达,免疫荧光法检测患侧DRG Mrg C表达量及p-PKCεSer729的含量。结果与给药4 d比较,给药5 d两组大鼠的PWTs均有显著的下降(P<0.01);给药前后各时点,两组大鼠之间PWTs没有明显差异。观察给药11d时大鼠患侧L4-L6 DRG Mrg C mRNA的表达,与对照siRNA组比较,Mrg C siRNA组各神经节Mrg C mRNA的表达均明显下降(P<0.01);观察大鼠给药11d时大鼠患侧L4-L6 DRG Mrg C与p-PKCεSer729的表达,与对照siRNA组比较,Mrg C siRNA组患侧DRG的Mrg C阳性细胞率明显减少(P<0.01),而p-PKCεSer729的阳性细胞率显著上升(P<0.05)。结论 Mrg C siRNA片段可有效干扰CFA慢性炎性痛大鼠患侧L4-L6 DRG Mrg C mRNA与Mrg C的表达,对Mrg C的干扰作用能显著上调PKCεSer729磷酸化的水平,但不影响大鼠患足机械缩腿阈。

基于MRGC聚类方法的测井相分析和岩性识别--以Z油田潜山地层为例

为了解决常规岩性识别方法对于较为精细岩性识别和复杂岩性识别困难的问题,通过论述MRGC聚类方法和KNN算法传播器的基本原理,提出基于MRGC聚类方法的测井相分析和岩性识别方法及其流程。即优选能反映岩性特征的测井曲线,利用MRGC聚类方法进行测井相自动划分,并用录井及岩心等地质资料建立的岩相数据库对所划分的测井相进行标定,建立岩性识别模型;通过KNN算法传播器将模型推广应用于未取心井,实现岩性识别。该方法在Z油田潜山地层应用,有效地识别出潜山地层中的风化壳角砾岩、硅质砂岩、硅质粉砂岩、硅质泥岩、灰岩、泥质灰岩、灰质泥岩、生物灰岩共8种主要岩性,其结果与录井、取心资料符合率达80%以上,表明其在潜山等地层岩性识别中具有很好的适用性。

MRGC方法在储层分类及渗透率精细评价中的应用

常规储层渗透率评价方法,忽视了砂层内部不同流动单元渗流特征的差异,导致渗透率评价精度误差较大。此文依据渗流力学原理,从修正的Kozeny-Carman方程入手,利用三个能综合反映不同孔喉特征的储集物性参数将储层分为六类,建立了以流动单元指数FZI值的分类标准,通过公式推导提出了以FZI值为斜率划分流动单元的新思路。并基于图像多分辨率聚类分析方法(MRGC)建立测井曲线数据与岩心FZI值的外推使用模型。通过分析不同类型储层孔隙度与渗透率的相关性,分别建立了不同流动单元的渗透率精细评价模型。研究表明,与传统的回归方法相比,计算精度明显提高,从方法理论和可操作方面具有较强实用性和区域推广应用性。

MrgC受体激活翻转慢性应用吗啡诱发的谷氨酸转运体和nNOS改变

本研究旨在探讨激活MrgC受体(Mas-related gene C receptors)调制吗啡耐受的细胞学机制。对大鼠连续6天鞘内注射10μL生理盐水、吗啡(20μg)、吗啡+牛肾上腺髓质8-22(bovine adrenal medulla 8-22,BAM8-22,1 nmol,隔天注射)或(Tyr6)-2-MSH-6-12(MSH,5 nmol,隔天注射);用Western blot、免疫组织化学和实时荧光定量PCR的方法检测脊髓和背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中与吗啡耐受相关分子的表达。结果显示:鞘内给予选择性MrgC受体激动剂BAM8-22或MSH,能抑制慢性应用吗啡所诱发的脊髓背角和/或DRG中谷氨酸转运体(GLAST、GLT-1、EAAC1)的减少和神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)的增加。此外,检测到MrgC受体样免疫活性表达于脊髓背角浅层;慢性应用吗啡使脊髓背角MrgC受体样免疫活性和DRG中MrgC受体mRNA水平都增加。这些结果提示,MrgC受体通过抑制慢性应用吗啡所诱发的脊髓和DRG中的痛介质增加,而抑制吗啡耐受。

激活脊髓MrgC受体抑制大鼠痛觉过敏

研究旨在探讨激活脊髓MrgC （Mas-related gene C）受体对痛觉过敏的作用及细胞学机制。在大鼠足底皮下注射（Tyr6）-γ2-MSH-6–12 （MSH）或完全弗氏佐剂（complete Freund’s adjuvant, CFA）形成痛觉过敏或炎性痛模型，通过缩足反射和免疫组织化学等方法观察鞘内给予MrgC受体特异性激动剂MSH或牛肾上腺髓质8-22肽（bovine adrenal medulla 8-22, BAM8-22）对痛觉过敏的影响。结果显示，鞘内给予MSH不影响正常大鼠对热伤害性刺激引起的缩足潜伏期变化，但能抑制足底注射MSH引起的急性痛觉敏感反应，还能降低CFA引起的痛觉过敏，鞘内给予μ阿片受体（μ-opioid receptor, MOR）拮抗剂CTAP （D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Arg-Thr-Pen-Thr-NH2）能阻止鞘内给予MSH的延迟抗痛觉过敏作用。鞘内给予BAM8-22能显著降低CFA引起的脊髓背角L3～L5节段一氧化氮合酶（nitric oxide synthase, NOS）阳性神经元数量和降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide, CGRP）样免疫活性物质的表达。以上结果提示，鞘内激活MrgC受体通过抑制NOS阳性神经元活性和下调CGRP阳性产物表达来降低痛觉过敏，并能通过间接机制调制MOR起到延时持续抗痛觉过敏作用。因此，MrgC受体激动剂有望成为一类新型抗炎症痛觉过敏的药物。

干扰大鼠背根神经节MrgC受体mRNA的实验研究

大鼠MrgC受体与人的MrgX1受体有相似特性,但至今尚无MrgC受体的拮抗剂,阻碍了对其功能的研究.将大鼠的背根神经节(DRG)进行体外培养,加入小分子片段RNA(siRNA)对MrgC受体进行干扰.干扰时间为4 h,24 h之后再重复干扰1次.结果显示干扰后DRG中MrgC受体的mRNA表达减少84%,表明该分子片段RNA能有效使MrgC受体基因"沉默".

Gi蛋白介导MrgC受体对CFA炎症痛的抗痛觉过敏作用

通过观察完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)炎症痛大鼠对伤害性热刺激的缩足反射潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)变化,探讨Gi蛋白是否介导MrgC受体(Mas-related gene C receptors,MrgC)对炎症痛的抗痛觉过敏作用.结果显示,椎管内给予MrgC受体激动剂BAM8-22(bovine adrenal medulla 8-22,BAM8-22)能明显延长CFA炎症鼠在24 h和48 h时的缩足反射潜伏期基础值,并显著增强24h时的抗伤害作用.椎管内预先给予百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)能抑制Gi蛋白的功能.在给予PTX7 d后,初次给予BAM8-22并不能延长CFA炎症鼠24 h时的缩足潜伏期基础值,但在24 h时再次注射BAM8-22时,能显著增强其抗伤害作用和48 h时的缩足潜伏期基础值.以上结果说明在CFA炎症痛模型中,预先给予PTX能抑制BAM8-22的抗痛觉过敏作用,但重复再次给予BAM8-22能恢复Gi蛋白的功能.表明Gi蛋白及其相关信号通路介导MrgC受体在炎症痛中的抗痛觉过敏作用.

慢性激活MrgC受体上调CGRP表达的nNOS机制

目的:检查持续应用BAM8-22对体外组织培养感觉神经节合成钙调素基因相关肽(CGRP)的影响。方法:将体外培养的大鼠三叉神经节和背根神经节经BAM8-22和L-NAME处理后,用酶联免疫法测定CGRP的表达含量变化。结果:与对照组相比,连续4天给予SNSR的选择性激动剂BAM8-22,CGRP的合成会增加。联合给予BAM8-22和NOS的非选择性抑制剂L-NAME,CGRP的表达随不同剂量的L-NAME引起不同程度的上调。结论:持续激活SNSR能使感觉神经节合成CGRP增多,是在体动物慢性激活SNSR后吗啡镇痛作用降低的细胞学机制。

西湖凹陷N构造花港组厚层砂泥岩地层测井岩性识别方法

西湖凹陷位于东海,钻井取心比较困难,取心资料比较少,岩屑录井资料比较粗略,为了得到比较精细的地层岩性,在无监督机器学习的基础上,采用有监督机器学习的方法进行岩性识别。结果表明:该方法对研究区地层的岩性识别率可达95%以上,能够快速准确地对目的层的岩性进行识别。

鞘内激活MrgC受体在病理性疼痛和吗啡耐受中的作用

啮齿类动物的MrgC受体(Mas-related G-protein-coupled receptor subtype C)与人类Mas相关基因X受体1 (human Masrelated gene X receptor 1, hMrgX1)享有65%的同源序列和相似的表达模式以及结合谱,因此学者一般通过研究MrgC受体的功能来探索hMrgX1的作用。MrgC受体属于G蛋白耦联受体家族的一员,特异性地表达在背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)和三叉神经节(trigeminal ganglion, TG)的小直径神经元上,与痛觉的传递过程密切相关。本文综述了鞘内激活MrgC受体在病理性疼痛和吗啡耐受中的镇痛作用。

一种自适应多分辨率图聚类测井相分析方法

测井相分析是通过自动聚类方法对多维测井曲线进行分析,进而进行相聚类与预测。基于图的多分辨率聚类(MultiResolution Graph-based Clustering,MRGC)方法是一种常用的测井相分析方法,然而MRGC算法非常耗时,并且在传播过程中高度依赖初始参数,实际应用效益差。本文提出了一种自适应多分辨率图聚类(Adaptive Multi Resolution Graph based Clustering,AMRGC)分析方法。该方法不仅能提高测井相计算效率,而且能获得稳定的测井相传播结果。本文方法的两个核心算法是:1)轻核代表指数(L-KRI)算法只需计算少量"自由吸引"点,有效提高了计算效率;2)采用了反向传播算法(BP)与多层感知器(MLP)神经网络,有效避免了传统K近邻算法因随机初始化参数导致的不稳定结果。实验结果表明,本文方法在聚类和传播预测任务上优于传统的MRGC方法,具有更高的运行效率和稳定性;同时,在没有数据先验知识的条件下效果明显优于自组织映射(SOM)、动态聚类(DYN)和自底向上的层次聚类(AHC)等其它常用聚类方法。

气体泄漏红外成像检测系统的性能测试方法研究

气体泄漏红外成像检测技术以其高效率遥测成像等显著优势成为气体泄漏检测的有效手段之一,针对此类系统探测能力的评价方法不全面的问题,通过改造MRTD测量靶标及方式,提出了适用于被动式气体红外成像检测系统性能的最小可分辨气体浓度MRGC(minimum resolvable gas concentration)评价方法,设计并搭建了MRGC性能测试系统,并以乙烯气体为检测目标进行了测试,测试结果与系统MRTD曲线的变化趋势具有较好的一致性.

富县地区碳酸盐岩测井岩性识别方法

为了解决鄂尔多斯盆地下古生界奥陶系马家沟组碳酸盐岩储层岩性类型复杂、变化快、难识别以及部分老井无测井解释剖面,地质研究人员无法快速有效判别岩性等问题,以富县地区马家沟组马五段为研究对象,分析了目前常用的岩性识别方法,通过取心资料确定了主要的岩石类型,结合碳酸盐岩中主要矿物的测井响应数值,得出了可采用光电吸收截面指数曲线与补偿密度曲线、补偿密度与补偿中子曲线两两包络的包络法与聚类分析—最小临近算法实现岩性解读的认识。研究结果表明:(1)包络法操作简便,能快速识别白云岩、石灰岩、石膏,尤其在含膏地层中优势明显,适用于生产中对岩性的预判,其操作关键点在于曲线左右刻度值的调整,其判别准确与否的关键在于曲线质量是否可靠;(2)聚类分析—最小临近算法结果更精确,其预测符合率高达92.31%,更适用于后期科研所需,但是该方法需要一定量的取心数据作为支撑;(3)目前上述两种方法在坍塌角砾岩的识别中都还存在着局限性,对于坍塌角砾岩的识别还需要借助成像测井以及地质认识来实现。

多排石墨芯基体NiHCF膜电极的制备与电控离子分离性能

以多排石墨芯(MRGC)为基体材料,采用阴极沉积法制备了具有电化学控制离子分离(ECIS)性能的电活性NiHCF膜电极。采用SEM和XPS分析考察了NiHCF薄膜的形貌与组成;在1 mol/L的NaNO3溶液中通过循环伏安法可逆地置入与释放Na+,考察NiHCF膜电极的离子交换容量、再生性能;在1 mol/L(NaNO3+CsNO3)混合溶液中比较不同混合浓度下膜电极的伏安特性曲线,分析了膜电极对Cs+/Na+的选择性。同时采用离子色谱测定了氧化态NiHCF膜电极在初始[Cs+]为10 mg/L模拟液中进行ECIS过程的Cs+浓度变化。实验结果表明,MRGC基体NiHCF膜电极离子交换容量大、再生能力好,对Cs+有较强的选择性,可用于Cs+的电控离子分离过程。

青光眼小鼠Thy1-CFP-DBA／2J表达melanopsin蛋白的视网膜节细胞的丢失及小鼠行为学分析

为了研究表达melanopsin蛋白的视网膜神经节细胞在青光眼小鼠的抑郁性行为中所起的作用,本文使用不同年龄的青光眼小鼠Thy1-CFP-DBA/2J(CFP-D2)2,5,8,11,14个月龄各5只,对照组为C57BL/6小鼠2,8,14个月龄各5只.对视网膜平铺片进行免疫组织化学染色、细胞计数及形态学分析;旷场实验分析小鼠的行为学特征.实验结果显示,CFP-D2小鼠其眼内压随着年龄的增加逐渐升高,视网膜也发生了相应改变,包括表达CFP细胞数量的减少(细胞/mm2;2mo(月龄):1309±26,14mo:878±30,P<0.01),视网膜神经节细胞的减少(2mo:48±3,14mo:19±4,P<0.001),表达Brn-3b的视网膜神经节细胞数量的减少(2mo:1283±80,14mo:950±31,P<0.001),以及视网膜神经节细胞中Brn-3b阳性细胞所占比例的下降(5mo:50.17%±5.5%,14mo:12.61%±3.8%,P<0.001),形态学定量分析表明视网膜神经节细胞的树突野面积也逐渐减小(mm2;2mo:0.077±0.015,14mo:0.065±0.015,P<0.05).旷场实验指标分析(包括总的运动距离,进入中央区域的次数,在中央的时间占总的时间的比例)表明不同月龄的CFP-D2小鼠始终处于一种高活动度的状态.综合上述实验结果,本文证实,CFP-D2小鼠青光眼所致的高活动度状态与视网膜神经节细胞相关,尤其是与Brn-3b阳性的视网膜神经节细胞的功能异常有关.

乍得B盆地密度和声波时差曲线异常自动识别与重构

密度和声波时差测井曲线是地震解释和储层反演中的两条关键曲线,它们的质量直接影响到合成地震记录的好坏,进而影响地震解释和储层反演的结果.目前测井曲线的异常分析建立在人工识别的基础上,工作量繁重且识别误差较大.本文为有效开展乍得B盆地地震储层反演工作,通过对目的层段测井资料质量分析,划分出密度和声波时差曲线的三种异常类型——Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型,并建立对应的测井响应标准,在此基础上编写测井曲线异常自动识别模块,实现了曲线异常井段及类型的快速识别.针对异常井段提出了利用改进的聚类分析方法(MMRGC)实现异常井段、异常曲线的重构.通过对该地区异常曲线重构前后地震合成记录标定以及测井约束反演质量分析,认为该套方法是可靠的,有效提高了工作效率,为地震反演工作奠定良好基础.