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In vitro Recombination and Identification of Mutated Fragment Corresponding to Regulation Region of mtrR Gene of Neisseria Gonorrhoeae
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作者 黄长征 林能兴 +3 位作者 涂亚庭 连昕 康健 朱里 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2007年第5期608-610,共3页
A site-directed mutant DNA fragment Neisseria Gonorrhoeae (NG) stains to construct the was synthesized and transfected into clinical transformants that contained the corresponding mutagenesis of regulation region of... A site-directed mutant DNA fragment Neisseria Gonorrhoeae (NG) stains to construct the was synthesized and transfected into clinical transformants that contained the corresponding mutagenesis of regulation region of mtrR gene. According to the technique of gene splicing by overlap extension (SOEing), a DNA segment with specific mutagenesis was constructed by two-step polymerase chain reaction (PCR). The mutation fragments EF could be used for the next experiment in which the mutation NG strains were induced. By comparing the recombinant EF fragments to the corresponding DNA fragments of clinical NG strains, 2 of these were not compatible completely. The results of sequencing revealed that there was a 9 bp deletion between the 45 to 54 inverted repeat sequence localized within the mtrR promoter. It can be confirmed that the fragments EF are the specifically designed mutant fragments. 展开更多
关键词 Neisseria gonorrhoeae genes mutation mtr drug resistance
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母亲MTR基因多态性及其与围孕期叶酸补充的交互作用与子代室间隔缺损的关联研究
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作者 阮霄睿 孙梦婷 +5 位作者 魏剑晖 罗曼君 刘涵君 唐嘉鹏 李柳萱 秦家碧 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期899-906,共8页
目的探讨母亲MTR基因多态性及其与围孕期叶酸补充的交互作用与子代室间隔缺损(ventricular septal defect,VSD)的关联。方法采用病例对照研究,招募426例1岁以内VSD患儿母亲和740例同年龄段健康婴儿母亲。通过问卷调查收集母亲相关暴露信... 目的探讨母亲MTR基因多态性及其与围孕期叶酸补充的交互作用与子代室间隔缺损(ventricular septal defect,VSD)的关联。方法采用病例对照研究,招募426例1岁以内VSD患儿母亲和740例同年龄段健康婴儿母亲。通过问卷调查收集母亲相关暴露信息,并采集其血液标本进行基因多态性检测。采用多因素logistic回归和逆概率加权法处理后logistic回归分析位点与VSD的关联。使用叉生分析和logistic回归分析探讨位点与叶酸补充间的相加和相乘交互作用。结果母亲MTR基因rs6668344位点CT和TT型增加了子代对VSD的易感性(P<0.05)。rs3768139位点GC和CC型、rs1050993位点AG和GG型、rs4659743位点AT和TT型、rs3768142位点GG型、rs3820571位点GT和TT型与VSD发生风险降低有关(P<0.05)。rs6668344位点变异与叶酸补充对VSD存在拮抗相乘交互作用(P<0.05)。结论母亲MTR基因多态性与子代VSD发生显著相关。rs6668344位点变异者围孕期叶酸补充可降低其子代VSD易感性,提示遗传高风险人群更应补充叶酸以预防子代VSD的发生。 展开更多
关键词 室间隔缺损 mtr基因 单核苷酸多态性 逆概率处理加权 交互作用 子代
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淋球菌对阿奇霉素耐药性与mtrR/mtrC基因变异的关联分析 被引量:9
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作者 张铁军 周晓明 +1 位作者 张涛 姜庆五 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2008年第8期452-455,共4页
目的探讨mtr系统若干基因变异与淋球菌对阿奇霉素耐药性的相关性。方法对临床分离的淋球菌阿奇霉素耐药性代表株mtrR基因序列及mtrR启动子区域回文结构序列的突变进行分析,使用荧光定量PCR技术对结构基因mtrC的表达水平进行测定。结果... 目的探讨mtr系统若干基因变异与淋球菌对阿奇霉素耐药性的相关性。方法对临床分离的淋球菌阿奇霉素耐药性代表株mtrR基因序列及mtrR启动子区域回文结构序列的突变进行分析,使用荧光定量PCR技术对结构基因mtrC的表达水平进行测定。结果所有中等以上耐药菌株均发生mtrR基因H105Y的变异,伴随mtrR启动子区域回文结构的缺失突变;敏感株有一株出现G45D的突变,mtrR启动子区域回文结构未检测出突变;中等以上耐药菌株与敏感菌株相比mtrC基因表达有显著差异(P<0.05)。结论mtrR基因的H105Y变异和回文序列碱基缺失与mtrC表达有负向相关关系,与淋球菌阿奇霉素耐药性显著相关。 展开更多
关键词 淋球菌 mtr基因 耐药性 阿奇霉素
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霍奇金淋巴瘤转染mtrⅡ基因后ki67的表达及其意义 被引量:2
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作者 王星 林雨冬 +3 位作者 王明元 吴德柱 王煜 杜京丽 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第7期1020-1021,共2页
目的:探讨ki67在转染mtrⅡ基因后的霍奇金淋巴瘤中的表达情况及其意义。方法:将mtrⅡ转染人霍奇金淋巴瘤细胞系,采用免疫组化法检测转染前后ki67的表达情况。结果:未转染mtrⅡ基因的ki67阳性率为21.3%,转染mtrⅡ基因后ki67的阳性率为36.... 目的:探讨ki67在转染mtrⅡ基因后的霍奇金淋巴瘤中的表达情况及其意义。方法:将mtrⅡ转染人霍奇金淋巴瘤细胞系,采用免疫组化法检测转染前后ki67的表达情况。结果:未转染mtrⅡ基因的ki67阳性率为21.3%,转染mtrⅡ基因后ki67的阳性率为36.8%,两者之间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:mtrⅡ基因可能参与了霍奇金淋巴瘤恶性转化的过程。 展开更多
关键词 霍奇金病 mtrⅡ基因 KI67基因
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转染mtrⅡ基因后霍奇金病细胞增殖活性改变 被引量:2
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作者 王星 林雨冬 +4 位作者 王明元 师建国 吴德柱 王煜 杜京丽 《中国康复理论与实践》 CSCD 2007年第5期430-431,F0003,共3页
目的探讨转染mtrⅡ基因后的霍奇金病细胞增殖活性的改变及其意义。方法将mtrⅡ转染人霍奇金病细胞系,采用免疫组化法检测转染前后ki67基因、增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况。结果未转染mtrⅡ基因的ki67阳性率为21.3%,转染mtrⅡ基因后ki6... 目的探讨转染mtrⅡ基因后的霍奇金病细胞增殖活性的改变及其意义。方法将mtrⅡ转染人霍奇金病细胞系,采用免疫组化法检测转染前后ki67基因、增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况。结果未转染mtrⅡ基因的ki67阳性率为21.3%,转染mtrⅡ基因后ki67阳性率为36.8%,两者间有显著性差异(P<0.05);未转染mtrⅡ基因的PCNA阳性率为46.1%,转染mtrⅡ基因后PCNA的阳性率为78.6%,两者间有显著性差异(P<0.05)。结论转染mtrⅡ基因后的霍奇金病细胞增殖活性明显增加,提示mtrⅡ基因可能参与了霍奇金病恶性转化的过程。 展开更多
关键词 mtrⅡ基因 霍奇金病 KI67基因 增殖细胞核抗原(PCNA)
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反义核酸对大鼠A型精原细胞端粒酶活性及其mTR亚基表达的影响
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作者 叶哲伟 陈晓春 +3 位作者 杨述华 谷龙杰 陈江 鲁功成 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期421-424,428,共5页
目的 :探讨小鼠端粒酶RNA(mTR)基因的反义寡核苷酸 (ASODN)对体外培养的大鼠A型精原细胞端粒酶活性及其mTR亚基表达的影响。 方法 :以脂质体LipofectAMINE 2 0 0 0 (LF 2 0 0 0 )介导将硫代磷酸修饰的端粒酶mTR的ASODN、正义寡核苷酸 (... 目的 :探讨小鼠端粒酶RNA(mTR)基因的反义寡核苷酸 (ASODN)对体外培养的大鼠A型精原细胞端粒酶活性及其mTR亚基表达的影响。 方法 :以脂质体LipofectAMINE 2 0 0 0 (LF 2 0 0 0 )介导将硫代磷酸修饰的端粒酶mTR的ASODN、正义寡核苷酸 (SODN)、随机寡核苷酸 (RODN)及单纯脂质体组分别转染体外分离纯化的SD大鼠A型精原细胞 ,采用生物发光技术和TRAP SYBR Green染色法检测精原细胞中端粒酶活性的改变 ,原位杂交检测mTR基因mRNA的表达。 结果 :端粒酶mTR的ASODN明显抑制精原细胞端粒酶活性 (P <0 .0 1) ;mTR ASODN作用于精原细胞 2 4h后 ,mTR基因mRNA的表达水平显著下调。单纯脂质体组及SODN、RODN对照组均无此抑制作用 (P >0 .0 5 )。 结论 :硫代修饰的端粒酶mTR ASODN可使精原细胞端粒酶活性明显受到抑制 ,其机制可能是在mTR基因转录水平影响精原细胞端粒酶活性。 展开更多
关键词 端粒酶 精原细胞 mtr基因 反义寡核苷酸 大鼠
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淋球菌MtrR基因调控区删除突变与淋球菌耐药的关系 被引量:5
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作者 袁新亮 康健 +2 位作者 林能兴 黄长征 涂亚庭 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期348-352,共5页
目的分析淋球菌MtrR基因调控区删除突变与淋球菌耐药之间的关系。方法以临床收集的淋菌株为出发株,用制备的突变MtrR DNA片段进行转染试验,筛选并纯化MtrR基因调控区9bp片段删除的突变株,测定出发株和转染株对多种抗菌素的最小抑菌浓度(... 目的分析淋球菌MtrR基因调控区删除突变与淋球菌耐药之间的关系。方法以临床收集的淋菌株为出发株,用制备的突变MtrR DNA片段进行转染试验,筛选并纯化MtrR基因调控区9bp片段删除的突变株,测定出发株和转染株对多种抗菌素的最小抑菌浓度(MIC)值和MtrCDE基因转录量。结果在18株临床株中,有15株被转染为目的突变株,其余3株始终不能被转染。转染株与出发株相比,对Triton-100的MIC值平均提升28.64倍,对脂溶性抗生素红霉素和四环素的MIC值平均升高8.55倍和5.53倍,差异均有统计学意义(均P<0.01);对氯霉素和链霉素的平均MIC值,两者差异无统计学意义(均P>0.05)。RT-PCR产物的凝胶电泳分析显示,所有转染株MtrCDE基因转录水平均有不同程度的升高,且与淋球菌对脂溶性抗菌试剂的耐药水平呈正相关。结论转染株MtrR基因调控区9bp片段的删除可通过阻断MtrR基因表达而提高MtrCDE基因的转录水平,从而诱导淋球菌耐药。 展开更多
关键词 奈瑟氏淋球菌 基因突变 mtr耐药
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湖北地区育龄人群中叶酸代谢通路关键酶基因非编码区功能位点的多态性分析 被引量:1
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作者 辜秀丽 贾明珠 +1 位作者 李红钢 熊承良 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期980-985,共6页
目的:调查湖北地区育龄汉族人群中叶酸代谢通路关键酶基因非编码区功能位点的多态性分布情况。方法:选取2020年4月至2021年3月于本院进行孕前与孕期检查的790例受检者为研究对象,利用Sanger测序法对MTR基因(rs28372871和rs1131450)、MTR... 目的:调查湖北地区育龄汉族人群中叶酸代谢通路关键酶基因非编码区功能位点的多态性分布情况。方法:选取2020年4月至2021年3月于本院进行孕前与孕期检查的790例受检者为研究对象,利用Sanger测序法对MTR基因(rs28372871和rs1131450)、MTRR基因(rs326119)以及CBS基因(rs2850144)的多态性进行检测,并在不同地区人群中比较这四个位点的分布情况。结果:本研究中,rs28372871、rs1131450、rs326119和rs2850144的基因型分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡。rs28372871的多态性分布在湖北地区和江苏地区之间存在着显著差异(P<0.05),rs1131450的多态性分布在湖北地区和上海地区之间存在着显著差异(P<0.05),rs2850144位点的多态性分布在湖北地区和伊朗亚兹德地区之间存在着极显著差异(P<0.001)。结论:首次在湖北地区育龄人群中调研了MTR、MTRR和CBS基因非编码区功能位点的多态性分布情况。实施叶酸增补时应综合考虑叶酸代谢能力相关基因中功能性位点(编码区和非编码区)的影响,从而制订更适宜的增补方案。 展开更多
关键词 叶酸代谢 mtr基因 mtrR基因 CBS基因 基因多态性
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p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞对化疗药物敏感性的研究 被引量:1
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作者 曹岩 郑永洁 +1 位作者 郑永晨 黄颖 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1221-1223,共3页
目的探讨p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞(7721细胞)对化疗药物的敏感性,深入研究p21基因对肝癌细胞的治疗作用。方法应用磷酸钙介导p21基因转染人肝癌7721细胞;通过G418筛选稳定表达细胞株并扩大培养;采用MTT法检测肿瘤细胞增殖... 目的探讨p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞(7721细胞)对化疗药物的敏感性,深入研究p21基因对肝癌细胞的治疗作用。方法应用磷酸钙介导p21基因转染人肝癌7721细胞;通过G418筛选稳定表达细胞株并扩大培养;采用MTT法检测肿瘤细胞增殖速度;流式细胞术检测细胞周期变化。结果经过3~4w G418筛选得到稳定表达的细胞株,p21基因稳定转染并联合化疗药物应用可明显抑制7721细胞的体外增殖,细胞周期明显改变,细胞从G1期到G2期发生阻滞。结论提示转染外源p21基因联合化疗药物可使7721细胞周期阻滞于G1期,并可抑制肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 P21基因 肝癌细胞株 MTT法 基因转染
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新生儿出生缺陷与叶酸代谢产物及关键酶基因多态性的关系
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作者 高桂珍 戴亮 +2 位作者 李敏 赵婧 刘英 《临床误诊误治》 CAS 2023年第9期78-83,共6页
目的 探究新生儿出生缺陷与叶酸代谢产物及关键酶基因多态性的关系。方法 选择2018年3月—2022年9月产下出生缺陷新生儿的产妇174例及产下健康新生儿产妇150例,分别作为研究组及对照组。收集2组产妇一般资料,采用聚合酶链式反应-限制性... 目的 探究新生儿出生缺陷与叶酸代谢产物及关键酶基因多态性的关系。方法 选择2018年3月—2022年9月产下出生缺陷新生儿的产妇174例及产下健康新生儿产妇150例,分别作为研究组及对照组。收集2组产妇一般资料,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性检测亚甲基四氢叶酸脱氢酶1基因G1958A位点、5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T及A1298C位点、甲硫氨酸合成酶基因A2756G位点、甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因A66G位点、细胞膜还原叶酸转运载体(RFC)基因A80G位点基因多态性,分析产妇各基因多态性与新生儿出生缺陷的关系。结果 研究组MTRR基因A66G位点G等位基因、RFC基因A80G位点G等位基因比例高于对照组(P<0.05,P<0.01)。MTRR基因A66G位点基因型在显性、共显性模型下差异有统计学意义(P<0.01);RFC基因A80G位点在隐性、共显性模型下差异有统计学意义(P<0.05)。MTRR基因A66G位点、RFC基因A80G位点联合分析显示,AA/GG型、AG/AG型与纯合子AA/AA型比较差异有统计学意义(P<0.01)。多因素Logistic回归分析显示,孕期叶酸服用史、MTRR基因A66G位点多态性、RFC基因A80G位点多态性是出生缺陷的独立危险因素(P<0.05,P<0.01)。结论 叶酸代谢相关基因MTRR、RFC与新生儿出生缺陷相关,临床可通过检测母体相关基因多态性,评估叶酸利用能力,进而评估新生儿出生缺陷的发生风险。 展开更多
关键词 先天畸形 婴儿 新生 叶酸代谢 基因多态性 MTHFD1 MTHFR mtr mtrR RFC
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苜蓿源miR168b跨界调控奶牛体内乳脂相关靶基因的筛选
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作者 贾晶莹 刘宝宝 +2 位作者 马云 段红娟 蔡小艳 《草业学报》 CSCD 北大核心 2023年第10期173-186,共14页
筛选出高乳脂奶牛和低乳脂奶牛血液和牛奶中显著差异表达的苜蓿来源miRNAs及其在奶牛体内的潜在靶基因,可为进一步探究苜蓿源miRNAs(mtr-miRNAs)在基因水平调节牛奶乳脂率奠定基础。试验首先对生产4胎,日粮水平一致的荷斯坦奶牛牛奶进... 筛选出高乳脂奶牛和低乳脂奶牛血液和牛奶中显著差异表达的苜蓿来源miRNAs及其在奶牛体内的潜在靶基因,可为进一步探究苜蓿源miRNAs(mtr-miRNAs)在基因水平调节牛奶乳脂率奠定基础。试验首先对生产4胎,日粮水平一致的荷斯坦奶牛牛奶进行了奶牛生产性能(dairy herd improvement,DHI)检测,在高乳脂和低乳脂奶牛中各选3头作为重复。运用RT-qPCR对奶牛血液和牛奶中的苜蓿源miRNAs进行定量,筛选出差异表达miRNAs后对其进行靶基因预测和分析,并根据miRNA-mRNA结合位点和定量结果筛选出与乳脂代谢相关的靶基因。结果如下:1)DHI检测筛选出了3头高乳脂奶牛和3头低乳脂奶牛,高乳脂奶牛牛奶中脂肪含量>4.2%,低乳脂奶牛牛奶中脂肪含量<3.5%;2)苜蓿源novel-miR54、miR156f、miR166a、miR168b和miR168c-3p在奶牛血液和牛奶中均能检测到,其中mtr-miR168b在高乳脂奶牛血液中的表达量极显著低于在低乳脂奶牛中的表达量(P<0.01),在高乳脂奶牛牛奶中的表达量显著低于在低乳脂奶牛中的表达量(P<0.05);3)mtr-miR168b在乳腺上皮细胞中高表达抑制了其中脂代谢标志基因PPARγ,SCD1,CEBP/β和SREBP1的表达量;4)mtr-miR168b预测靶基因分别有1834和296个与GO和KEGG数据库比对成功,靶基因主要与N-聚糖生物合成(3.72%)、cGMP-PKG信号通路(2.37%)和血管平滑肌收缩(2.37%)密切相关,甘油磷脂代谢(1.69%)通路也被显著富集;5)筛选出CPT1A和STARD7两个与脂代谢密切相关的基因,并通过双荧光素酶报告确认了miR-168b和CPT1A与STARD7的靶向关系。由此可见,mtr-miR168b可抑制乳腺上皮细胞中的成脂标志基因的表达,试验为后续验证苜蓿源miRNAs调控奶牛乳脂率提供了可进一步验证的靶基因。 展开更多
关键词 荷斯坦奶牛 跨界调控 mtr-miR168b 乳脂 靶基因
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霍奇金淋巴瘤细胞转染mtrⅡ基因后CD30表达的意义
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作者 林雨冬 蔡绍环 +2 位作者 王明元 陈聪 杜京丽 《白血病.淋巴瘤》 CAS 2009年第3期129-130,133,共3页
目的探讨CD30在转染mtrⅡ基因后的霍奇金淋巴瘤(HL)细胞中的表达情况及其意义。方法将mtrⅡ转染人类HL细胞株,采用免疫组织化学方法检测转染前后CD30的表达情况。结果未转染mtrⅡ基因霍奇金淋巴瘤细胞中的CD30阳性率为(1.2%),转... 目的探讨CD30在转染mtrⅡ基因后的霍奇金淋巴瘤(HL)细胞中的表达情况及其意义。方法将mtrⅡ转染人类HL细胞株,采用免疫组织化学方法检测转染前后CD30的表达情况。结果未转染mtrⅡ基因霍奇金淋巴瘤细胞中的CD30阳性率为(1.2%),转染mtrⅡ基因后阳性率为(26.8%),二者之间差异有统计学意义(P〈0.01)。结论mtrⅡ基因可能参与了HL细胞恶性转化的过程。 展开更多
关键词 mtrⅡ基因 霍奇金淋巴瘤 抗原 CD30
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叶酸代谢相关酶基因多态性与消化系统肿瘤的关系 被引量:9
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作者 王芬芬 崔莲花 宋扬 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1074-1076,共3页
叶酸的主要生物学功能是作为甲基供体参与脱氧核糖核酸合成和细胞内甲基化反应。亚甲基四氢叶酸还原酶(methylene tetrahydrofolate reductase,MTHFR)、甲硫氨酸合成酶(methionine synthase,MTR)、甲硫氨酸合成酶还原酶(methio-nine syn... 叶酸的主要生物学功能是作为甲基供体参与脱氧核糖核酸合成和细胞内甲基化反应。亚甲基四氢叶酸还原酶(methylene tetrahydrofolate reductase,MTHFR)、甲硫氨酸合成酶(methionine synthase,MTR)、甲硫氨酸合成酶还原酶(methio-nine synthase reductase,MTRR)、胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)和亚甲基四氢叶酸脱氢酶(methylenetetrahydrofolatedehydrogenase,MTHFD)等是叶酸代谢通路中重要的酶。叶酸代谢相关酶基因变异、叶酸缺乏或代谢障碍与肿瘤的发生和发展有关。本文就叶酸代谢相关酶基因多态性与消化系统肿瘤间的关系进行简要综述。 展开更多
关键词 肿瘤 消化系统 多态性 单核苷酸 基因 MTHFR mtr mtrR TS MTHFD
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母亲叶酸代谢相关基因多态性与唐氏综合征发生的关系 被引量:4
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作者 王秀娣 宫剑 +4 位作者 吴颖 曹淑彦 杨少燕 李孟荣 蔡晓红 《中国优生与遗传杂志》 2012年第12期35-37,共3页
目的研究叶酸代谢相关基因多态性在浙南地区汉族妇女中的分布,探讨其与唐氏综合征(Down's Syn-drome,DS)发生的关系。方法对84例已生育DS患儿的母亲(观察组)和120例生育过正常儿童的母亲(对照组)采用PCR扩增及DNA测序法检测亚甲基... 目的研究叶酸代谢相关基因多态性在浙南地区汉族妇女中的分布,探讨其与唐氏综合征(Down's Syn-drome,DS)发生的关系。方法对84例已生育DS患儿的母亲(观察组)和120例生育过正常儿童的母亲(对照组)采用PCR扩增及DNA测序法检测亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T、A1298C位点;甲硫氨酸合成酶(MTR)基因A2756G位点单核苷酸多态性。结果 MTHFR 677 T基因及CT、TT基因型、MTHFR 1298 C基因及AC、CC基因型、MTR 2756 G基因及AG基因型频率观察组与对照组比较均无统计学意义(P>0.05)。三个位点基因型频率联合分析两组也不存在统计学意义(OR=0.692,P>0.05)。结论浙南地区汉族妇女MTHFR C677T、FTHFR A1298C、MTR A2756G基因型不是DS发生的风险因素;三个基因型的联合频率也未见增加DS发生的风险。 展开更多
关键词 唐氏综合征 基因多态性 亚甲基四氢叶酸还原酶 甲硫氨酸合成酶
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