乌梅炭炮制过程中颜色与内在质量的相关性及其炮制终点研究

目的 研究乌梅炭炮制过程中颜色与内在质量的相关性,为乌梅炭炮制终点的确定提供参考。方法 利用色差仪对乌梅炭粉末进行色度值测定,选择水分、水溶性浸出物、枸橼酸和鞣质含量对乌梅炭进行内在质量测定,分析不同炮制时间下乌梅炭色度值、水分、水溶性浸出物、枸橼酸和鞣质含量的动态变化趋势,对颜色和上述指标含量进行相关性分析,建立内在质量-色度值回归方程。同时结合主成分分析(PCA)、层次聚类分析(HCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)法分析乌梅炭不同炮制时间的差异,以确定其炮制终点。结果 随着炮制时间的延长,样品颜色逐渐加深;样品色度值L*与E*先升高后下降,色度值a*与b*下降,最终均趋于稳定;样品中水溶性浸出物、枸橼酸与鞣质含量均呈先升高后下降的趋势,样品中水分含量随炮制时间的延长而下降,最后趋于稳定。相关性分析结果显示,水分、水溶性浸出物、枸橼酸、鞣质含量与L*、a*、b*、E*均呈显著正相关(P<0.001)。PCA及HCA结果显示,不同炮制时间的乌梅炭饮片可聚为2类:0~30 min炮制样品与40~60 min炮制样品。PLS-DA发现,水分和水溶性浸出物是乌梅炭炮制过程中的重要质量指标,b*是乌梅炭炮制过程中的重要色度指标。炮制50 min和60 min样品的色度值无明显差别,炮制60 min样品的水分、水溶性浸出物、枸橼酸与鞣质含量小于炮制50 min的样品。结论 乌梅炭颜色与内在质量具有一定相关性,乌梅炭的炒制应以40~50 min为宜。

乌梅炭吸附力的测定比较

目的 :确定乌梅“炒炭存性”质控指标范围。方法 :利用炭吸附色素法进行吸附力测定。结果 :吸附力范围 5 .5 90～5 .6 1 0mg·g-1 。结论 :可作为乌梅炭的质控指标。

乌梅炭品中有机酸含量的测定

目的通过测定不同炮制程度的乌梅炭品的柠檬酸、苹果酸、熊果酸和齐墩果酸等4种有机酸含量，确定比较具有专属性的标准炭有机酸含量与生品有机酸含量的比值。方法采用高效液相色谱法测定不同炮制程度的乌梅炭品的柠檬酸、苹果酸、熊果酸和齐墩果酸等4种有机酸含量，比较具有专属性的标准炭有机酸含量与生品有机酸含量的比值。结果乌梅标准炭的有机酸含量大约占该生品含量的34％～37％。结论随着乌梅炒制时间的增加，炭品的有机酸含量呈明显的递减趋势。

乌梅及乌梅炭的X射线衍射Fourier谱研究

目的建立乌梅生品、乌梅炒炭炮制品的X射线衍射Fourier谱。对不同炒炭程度的乌梅进行X射线衍射Fourier谱对比分析,研究炮制前后乌梅中可能存在的晶态物质及物相的变化。方法运用X射线衍射Fourier指纹图谱法对乌梅以及不同炒炭程度的乌梅轻炭、乌梅标炭、乌梅重炭粉末及上述4种样品的溶剂提取物进行分析。结果乌梅及乌梅炭粉末X射线衍射图谱有差异,4种样品溶剂提取部位可见明显锐峰,对比显著。结论炒炭会改变乌梅中晶态物质结构。乌梅、乌梅炭粉末XRD图谱重现性好,均具指纹特征,可作为鉴别指标。经图谱分析,难现传统文献记载草酸钙晶体特征峰,但主衍射峰显著,提示有复杂结晶物存在。

乌梅炭提取部位紫外吸收光谱研究

目的:建立乌梅炮制前后各提取部位的紫外吸收特征光谱,为乌梅炭凝血作用机制研究提供依据。方法:采用紫外分光光度法,研究净乌梅及乌梅炭的石油醚(60～90℃)、氯仿、乙酸乙酯等三个提取部位的紫外吸收谱线图。结果:乌梅在炮制前后各提取部位的紫外谱线图、最大吸收值有明显差异,具有独特吸收特征。结论:该方法简单、准确,可反映净乌梅与乌梅炭各提取部位紫外光谱上的差异。

乌梅炭品的微粒数和球形度评价

乌梅为一传统的收敛固涩药,其炒制成炭药具有收敛、止血、祛瘀等功效。在乌梅炭品的微粒数测定上采用非参比物显微定量分析方法,分别测定每毫克乌梅炭品所含显微特征微粒的个数,以及100个特征微粒的球形度。实验数据表明,乌梅随着炒制时间的增加,乌梅炭品显微特征微粒数呈现明显上升趋势,而标准炭的球形度明显优于轻炭和重炭。

乌梅炭品乙酸乙酯部位特征指纹图谱研究

目的建立乌梅炭乙酸乙酯部位特征指纹图谱。方法采用高效液相色谱法(HPLC)SinoChrom ODS-BP色谱柱(5μm,4.6mm×250mm);0.2%磷酸-甲醇等度洗脱;流速1mL/min;柱温30.0℃;检测波长225nm。结果 10批不同来源的乌梅炭品乙酸乙酯部位特征指纹图谱利用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"分析相似度较高,HPLC特征指纹图谱中乌梅炭品乙酸乙酯部位主要成分均得到很好分离共有24个特征峰。结论本方法重复性好,专属性强,更为全面地反映了乌梅炭品的内在品质。

乌梅炭中鞣质、有机酸与凝血作用的关系

目的:以鞣质含量、有机酸含量以及小鼠的凝血时间为指标,探讨生品乌梅与不同炒炭程度的乌梅轻炭、乌梅标准炭和乌梅重炭与凝血的关系。方法:采用干酪素法测定鞣质含量;用电位滴定法测定有机酸含量;用玻片法测定小鼠凝血时间。结果:乌梅生品中有机酸和鞣质的含量最高;乌梅炭随着制炭程度的加深,其含量逐渐降低。有机酸和鞣质的含量最高的乌梅生品无凝血作用,含量最低的乌梅重炭凝血效果不佳,乌梅标准炭凝血效果最好。结论:乌梅炒炭后鞣质和有机酸的含量随炮制程度的加深而逐渐降低,乌梅中鞣质与有机酸的含量高低与其凝血作用的强弱不成平行关系。

乌梅炭特征图谱研究

目的:建立乌梅炭的特征图谱。方法:采用高效液相色谱法以Hypersil ODS(250mm×4.6mm ID:5μm)色谱柱,甲醇-缓冲液(pH2.8)梯度洗脱,流速0.6mL.min-1,检测波长225nm,柱温30℃。结果:10批不同来源的乌梅炭特征图谱相似度较高,利用"中药色谱特征图谱相似度评价软件"生成了乌梅炭的对照特征图谱,共有17个特征峰。结论:采用HPLC特征图谱技术可以有效地控制乌梅炭的质量。

乌梅炭不同溶剂萃取部位凝血作用

目的:研究乌梅经炒炭炮制后不同溶剂(石油醚、氯仿、醋酸乙酯)萃取物的凝血作用,筛选最佳活性萃取物部位,为进一步分离活性成分做基础。方法:运用溶剂提取萃取法制备乌梅炭乙醇提取物3种不同溶剂的萃取部位浸膏。运用毛细管法测定小鼠凝血时间,断尾法测定小鼠出血时间。结果:乌梅炭水煎液与乌梅炭氯仿、醋酸乙酯等部位凝血时间及出血时间较阴性对照组短。乌梅炭石油醚部位与乌梅较对照组凝血时间及出血时间无明显差异。乌梅炭氯仿部位较其醋酸乙酯部位凝血时间及出血时间短。结论:乌梅与乌梅炭石油醚部位无明显凝血作用,乌梅炭与乌梅炭氯仿、醋酸乙酯等部位凝血作用显著,乌梅炭氯仿部位为最佳活性部位。