Fatty Acid Composition and Amino Acid Content in Beef of Dehong Buffalo and Its Cross Combinations

The Dehong buffalo( D),F1 hybrids of Dehong buffalo × Murrah buffalo( MD) and F1 hybrids of Dehong × Nili buffalo( ND) as the experimental animals to investigate their fatty acid composition and amino acid content. Five of each buffalos were bred by freely grazing and slaughtered at 35. 8-month old age to investigate the fatty acid composition and amino acid content in beef of Dehong buffalo,MD buffalo and ND buffalo. The results showed that,saturated fatty acid content of Dehong buffalo( 44. 33%) was significantly higher than that of ND buffalo( 41. 39%) and MD buffalo( 41. 48%)( P 【 0. 05),and the latter two were not significantly different( P 】 0. 05). The content of PUFA in Dehong buffalo( 53. 90%) was significantly lower than ND( 56. 83%) and MD( 56. 83%)( P 【0. 05),however,the n- 6∶ n- 3( 4. 25) of Dehong buffalo was significantly higher than ND( 3. 14) and MD( 3. 52)( P 【 0. 05). The content of amino acids in muscle was not significantly different between Dehong buffalo,MD buffalo and ND buffalo( P 】 0. 05),while the acidic amino acid content of Dehong buffalo was higher than that of MD buffalo and ND buffalo.

德宏水牛及其杂交组合肌肉脂肪酸组成和氨基酸含量研究

试验选择德宏水牛、摩拉水牛与德宏水牛杂交F1代(摩拉水牛♂×德宏水牛♀,简称摩德水牛)、尼里水牛与德宏水牛杂交F1代(尼里水牛♂×德宏水牛♀,简称尼德水牛)各5头,全放牧饲养,到平均月龄为35.8时进行屠宰,研究德宏水牛、摩德水牛、尼德水牛肌肉脂肪酸组成及氨基酸含量。结果显示:德宏水牛的饱和脂肪酸含量(44.33%)显著高于尼德水牛(41.39%)和摩德水牛(41.48%)(P<0.05),而尼德水牛和摩德水牛之间没有显著差异;尼德水牛和摩德水牛的多不饱和脂肪酸含量(分别为56.83%和56.83%)显著高于德宏水牛(53.90%)(P<0.05);德宏水牛的Σn-6∶Σn-3(4.25)显著高于尼德水牛(3.14)和摩德水牛(3.52)(P<0.05)。德宏水牛与摩德水牛、尼德水牛的肌肉氨基酸含量没有显著差异(P>0.05),但德宏水牛的酸性氨基酸含量均比其二者的高。

摩本杂F_1奶水牛泌乳性能研究

在昆明小哨开展摩本杂F1水牛的泌乳性能测定，结果表明该杂交牛的泌乳期相对较长，少数个体可长达370d以上，一般平均为292145．5d；一个泌乳期的正常泌乳量平均为2015.38kg（1761．25-2299.54kg），平均日产乳量6.39kg。

槟榔江水牛、摩拉水牛和荷斯坦奶牛血清中酶活性的测定

为了积累槟榔江水牛血清生化指标的基础数据,试验以10头槟榔江水牛为研究对象,对其血清中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(NAGase)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、二酰基甘油酰基转移酶1(DGAT1)活性进行测定,并与摩拉水牛及荷斯坦奶牛进行比较。结果表明:槟榔江水牛、摩拉水牛、荷斯坦奶牛血清中NAGase活性差异不显著(P>0.05);槟榔江水牛、摩拉水牛血清中γ-GT活性显著高于荷斯坦奶牛(P<0.05),其中槟榔江水牛高于摩拉水牛,且差异不显著(P>0.05);槟榔江水牛、摩拉水牛血清中DGAT1活性极显著高于荷斯坦奶牛(P<0.01),其中摩拉水牛高于槟榔江水牛,且差异不显著(P>0.05)。

促性腺激素释放激素在不同品种水牛卵巢中的免疫组化定位

【目的】了解促性腺激释放激素(GnRH)在广西沼泽型水牛与摩拉杂交水牛卵巢中定位表达的异同点,为深入阐明GnRH调节卵巢功能的机制提供理论依据。【方法】采用免疫组化SP染色法对广西沼泽型水牛和摩拉杂交水牛卵巢中GnRH及其受体的分布表达进行对比研究。【结果】两种不同品种水牛卵巢中均存在大量的GnRH阳性细胞,且主要位于颗粒层细胞和黄体粒细胞的胞质内;通过比较显示,两种不同品种水牛卵巢GnRH阳性细胞个数差异极显著(P<0.01),但GnRH阳性细胞大小及其平均光密度的差异均不显著(P>0.05)。【结论】不同品种水牛卵巢的GnRH分布差异可能与繁殖性能有关,但主要分布于巢卵颗粒层细胞和黄体粒细胞的胞质内。

摩拉水牛PRKAA2基因多态性与生长性状的关联分析

试验旨在探讨PRKAA 2基因在摩拉水牛群体中的遗传多态性及其与生长性状的关联性,进而得到显著相关的遗传标记,为摩拉水牛的分子标记辅助选择提供理论依据。利用DNA测序法等技术进行候选基因PRKAA 2外显子4及部分内含子3单核苷酸多态性(SNPs)检测,并采用生物信息学方法结合统计软件分析PRKAA 2基因与摩拉水牛生长性状的关联性。结果显示,摩拉水牛PRKAA 2基因中共检测到4个SNPs位点:c.462 G>A、IVS3.557 T>C、IVS3.560 C>T和IVS3.565 G>A,均包含3种基因型,且符合Hardy-Weinberg平衡。4个SNPs位点在水牛群体中均为中度多态,可以构建3种单倍型,T-C-G-G为优势单倍型,其中IVS3.560 C>T与c.462 G>A位点之间存在完全连锁不平衡,关联分析结果显示,单倍型H2与摩拉水牛体斜长和腰角宽呈显著相关(P<0.05)。c.462 G>A位点与摩拉水牛体高、十字部高、尻长、坐骨端宽和腰角宽呈显著相关,其中GG和AA基因型个体的体高和十字部高均显著高于GA基因型个体,GG基因型个体的尻长显著高于GA和AA基因型个体,AA基因型个体的坐骨端宽和腰角宽显著高于GA基因型个体(P<0.05);IVS3.557 T>C位点与摩拉水牛的生长性状指标未达到显著相关(P>0.05);IVS3.560 C>T位点与摩拉水牛体高、十字部高和尻长呈显著相关,其中CC和TT基因型个体的体高和十字部高均显著高于CT基因型个体,CC基因型个体的尻长显著高于CT基因型个体(P<0.05);IVS3.565 G>A位点与体斜长呈显著相关,其中GG和GA基因型个体的体斜长显著高于AA基因型个体(P<0.05)。综上,PRKAA 2基因的c.462 G>A、IVS3.560 C>T和IVS3.565 G>A位点对摩拉水牛部分生长性状均有显著影响,可作为摩拉水牛品种早期选育的候选基因和分子辅助标记。

德宏水牛和摩拉水牛及杂交后代的遗传差异分析

为了解德宏水牛、摩拉水牛及二者杂交后代之间的遗传差异,本研究采用随机扩增多态性DNA标记技术,从70个随机引物中筛选出11个多态性丰富的引物对德宏水牛、摩拉水牛及二者杂交后代共80个个体进行了遗传变异检测,结果11条引物共产生89种扩增片段,多态片段73条,多态率82.02%。两亲本群体相对遗传距离为0.2203,杂交后代群体与德宏水牛、摩拉水牛群体的相对遗传距离分别为0.1017和0.1353,表明杂交后代群体与两亲本群体间的遗传差异小于两亲本群体间的遗传差异,杂交后代群体与德宏水牛群体遗传关系更接近。

摩杂一代水牛与广西沼泽型水牛垂体组织结构的比较研究

对广西摩杂一代水牛的脑垂体进行组织学研究,并和广西沼泽型水牛(Bubalus bubalis)的脑垂体进行比较。将两种水牛的脑垂体做成切片,采用HE染色并通过图像分析仪进行分析。结果显示摩杂一代水牛脑垂体呈长卵圆形,其神经部细胞大小和细胞密度和广西沼泽型水牛差异不显著,中间部的嫌色细胞较广西沼泽型水牛的多,而远侧部的各种细胞出现率表现出差异显著,其中嗜酸性细胞与广西沼泽型水牛差异极显著。这些结果为培育广西奶水牛提供形态学依据。

摩拉水牛及德宏水牛瘤胃产甲烷菌多样性比较

本试验旨在比较分析摩拉水牛及德宏水牛瘤胃液中产甲烷菌的多样性。选取健康雌性摩拉水牛及德宏水牛各3头,采用口腔导管法收集瘤胃液,酚—氯仿—异戊醇抽提法提取瘤胃液总DNA,用产甲烷菌特异性引物Met86F/Met1340R扩增产甲烷菌16SrDNA,构建16SrDNA基因克隆文库。摩拉水牛及德宏水牛各获得96个16SrDNA基因序列,均归类于Methanobacteriales目,其中德宏水牛有82个序列(18个OTUs)与已知菌的16SrDNA序列相似性≥97%,占总序列的85.4%,有14个序列(9个OTUs)与已知菌16SrDNA序列相似性为89%~97%;摩拉水牛有94个序列(13个OTUs)与已知菌16SrDNA序列相似性≥97%,占总序列的97.9%,仅有2个序列(1个OTUs)与已知菌16SrDNA序列相似性为94%。系统进化树分析表明,所有序列分别聚集于两大分支上,其中德宏水牛有13个OTUs代表序列和摩拉水牛7个OTUs代表序列聚集在进化树顶端的同一分支上,且在系统发育距离上与Methanobacteriales目中任何已知相似序列都相隔较远。德宏水牛瘤胃中的SGMT簇序列和RO簇序列所占总序列比列分别为83.3%、9.4%,摩拉水牛瘤胃中的SGMT簇序列和RO簇序列所占总序列的比列分别为51.0%、9.4%。由此可见,摩拉水牛及德宏水牛瘤胃产甲烷菌序列以Methanobacteriales目为主,其中德宏水牛拥有更多未知的产甲烷菌序列;德宏水牛瘤胃中的SGMT簇产甲烷菌序列比例要高于摩拉水牛。

德宏水牛及其杂交品种分割肉的研究

试验对36￣39月龄全放牧饲养的15头德宏、摩本、尼本水牛进行了胴体分割肉测定研究,试验根据水牛品种不同分为3个处理组。试验结果显示尼本水牛与德宏水牛相比胴体重、净肉重、优质肉重均有显著提高,差异显著。尤其表现在嫩肩肉、腰肉、臀肉、膝圆、大米龙、小米龙、腱子肉这几块分割肉上。摩本水牛与德宏水牛相比胴体重、净肉重、优质肉重有显著提高,但分割肉块在重量上无显著差异。尼本水牛与摩本水牛的分割肉块重无显著差异。用尼里、摩拉与德宏水牛杂交后,提高了德宏水牛的产肉性能。

江汉水牛与摩拉水牛顶间骨形态比较研究

对摩拉水牛头骨形态特征进行研究,并对2例(1,4号)摩拉水牛头骨的顶间骨进行研究,与2例(2,3号)江汉水牛头骨的顶间骨进行形态特征比较,结果表明摩拉水牛顶间骨发达,是由完整的对骨组成。该研究进一步论证了摩拉水牛头骨的顶间骨形态结构与江汉水牛头骨的顶间骨之间存在很明显差异,摩拉水牛顶间骨比江汉水牛的顶间骨发达。

槟榔江水牛·摩拉水牛和荷斯坦奶牛血清中3种激素含量的测定

[目的]为槟榔江水牛的进一步研究和开发利用积累理论数据。[方法]采用化学发光法对槟榔江水牛血清中3种激素(PRL、INS和GH)的含量进行测定,并与摩拉水牛和荷斯坦奶牛进行比较。[结果]槟榔江水牛血清中GH含量为0.017 9 ng/m L,低于摩拉水牛(0.023 7 ng/m L),略高于荷斯坦奶牛(0.017 8 ng/m L),但差异均不显著(P>0.05)。槟榔江水牛血清中PRL含量为0.120 0 ng/m L,与荷斯坦奶牛差异不显著(P>0.05),但显著低于摩拉水牛(P<0.05)。槟榔江水牛血清中INS含量为0.740 0μU/m L,均低于荷斯坦奶牛和摩拉水牛,其中与荷斯坦奶牛差异显著(P<0.05)。[结论]在泌乳方面,槟榔江水牛与摩拉水牛和荷斯坦奶牛有相同的优越性。

水牛p21基因在卵母细胞体外成熟过程中的表达及其真核表达载体构建

旨在检测p21基因在水牛卵母细胞体外成熟过程中的表达变化,并克隆摩拉水牛p21基因CDs序列,构建真核表达载体。收集体外成熟培养不同时期(0、6、12、24h)和不同形态[有第1极体(first polar body,PB1)PB1和无PB1]的水牛卵母细胞,通过RT-qPCR检测其p21mRNA相对表达量。同时利用RTPCR技术从摩拉水牛卵巢颗粒细胞中扩增出p21基因编码序列,插入pEGFP-N1真核表达载体中,构建出重组质粒。将重组质粒pEGFP-N1-p21转染水牛颗粒细胞,并于培养24h和48h后观察转染细胞的荧光表达情况。收集转染48h后的颗粒细胞,通过RT-qPCR检测p21mRNA相对表达量。结果显示,成熟培养6h的卵母细胞p21mRNA表达量显著高于成熟培养0、12、24h的表达量(P<0.05),有PB1的卵母细胞中p21mRNA的表达量显著高于无PB1的卵母细胞(P<0.05);重组质粒pEGFP-N1-p21转染颗粒细胞后,有绿色荧光蛋白表达,且与转染pEGFP-N1和空白组相比,pEGFP-N1-p21转染组的p21mRNA表达量显著升高。结果表明,在体外成熟培养过程中均能检测到水牛卵母细胞p21mRNA表达量,成功构建了摩拉水牛p21基因真核表达载体,为下一步研究p21基因在水牛卵母细胞成熟和胚胎发育过程中的功能和调控奠定了基础。

摩杂一代水牛肌肉组织学特性与品质关系的对比

采用二因子多水平有重复的试验设计,通过石蜡切片法和透射电镜技术,利用DPS统计软件分析了摩杂一代水牛、广西本地水牛与广西本地黄牛的背最长肌和股四头肌的肌纤维直径、肌纤维密度和肌节长度。结果表明,摩杂一代水牛的肌肉品质比广西本地水牛的肌肉品质要好,同品种间股四头肌的肌肉品质比背最长肌要好。

摩杂一代水牛与广西沼泽型水牛肾上腺组织结构比较学研究

为探讨摩杂一代水牛与广西沼泽型水牛生产性能的差异，对其肾上腺组织结构进行比较研究。结果表明：水牛两侧肾上腺的形状大小不同，不同个体嗣倒的形状也不同，其被膜可清晰地分为外环层和内纵层，且广西沼泽型水牛被膜比摩杂一代水牛厚。广西沼泽型水牛比摩杂一代水牛的肾上腺球状带细胞长轴长2．00-4．00μm，网状带细胞长轴长4．00～5．00μm、短轴长2．00-3．00μm。由于广西沼泽型水牛肾上腺的被膜、球状带和束状带均比摩杂一代水牛厚，且网状带细胞显著大于摩杂一代水牛。因此可以推断，广西沼泽型水牛在调节心脏的活动和血管压力、抵御冷应激、对抗药物毒副作用等方面均优于摩杂一代水牛。

地中海水牛杂交后代生长性能测定初报

[目的]为了解地中海水牛引进我国后,在广西地区的气候适应性及其生长发育情况。[方法]本试验选取地中海杂交后代水牛32头,对其生长发育前期阶段(0～12月龄)的体重、体斜长、体高、胸围、腹围等参数进行连续跟踪测定,并对其的生理生化相关指标进行了测定。[结果]地中海水牛及其杂交后代水牛之间的体温、呼吸、脉搏等生理数值和各项血液生化指标没有差异(P>0.05),并与先前引进的摩拉、尼里及其杂交水牛数值相似;地中海水牛与摩拉、尼里和本地的杂交后代初生重是差异不显著的(P>0.05),随着月龄的增长,地中海水牛与摩拉、尼里杂交后代的各月龄体重增长速度比地中海—本地杂交水牛高,但差异不显著(P>0.05),而地×摩、地×尼杂交水牛在0～12月龄之间的生长速度基本相同;地×摩、地×尼和地×本的杂交水牛1～12月龄的体高、体斜长、胸围和腹围变化趋势大体一致。[结论]地中海水牛引进我国后,不仅能够完全适应我国南方地区尤其广西的环境气候条件,而且表现出良好的生长优势。

催乳素释放肽在青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的免疫组化定位

[目的]探索催乳素释放肽(PrRP)在青年摩杂一代水牛生殖调控和泌乳中的作用。[方法]应用石蜡切片、HE染色、Nissl染色、免疫组化染色,对5头雌性的青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴上PrRP的分布进行定位,并与LEICA图像分析系统和SPSS13.0统计分析软件相结合进行统计。[结果]在下丘脑内,PrRP免疫反应阳性神经元主要分布在视上核,在后核分布最少;PrRP免疫反应阳性纤维在室旁核高度密集,在弓状核、乳头体核密集,在视前核、前核、视交叉上核、腹内侧核、腹外侧核、背内侧核、背外侧核只有少量分布,在视上核无免疫反应阳性纤维。在垂体,在腺垂体部只观察到PrRP免疫反应阳性细胞,无免疫反应阳性纤维;在神经垂体部,有大量的免疫反应阳性纤维,无免疫反应阳性细胞。在卵巢的卵泡和间质中未见PrRP免疫反应阳性产物,仅在黄体的粒性细胞中发现PrRP免疫反应阳性产物。[结论]PrRP广泛分布在青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴上的各个环节。

GnRH在青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的免疫组化定位

[目的]研究促性腺激素释放激素(GnRH)在青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的免疫组化定位。[方法]采用免疫组织化学SuperPicTureTM二步法检测5头青年摩杂一代水牛下丘脑、垂体和卵巢中GnRH的分布情况,研究GnRH在下丘脑、垂体及卵巢的分布上的联系,进而了解GnRH在下丘脑、垂体及卵巢三者之间分泌释放的途径。[结果]GnRH存在于青年摩杂一代水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的各个环节。青年摩杂一代水牛下丘脑中各主要核团都有GnRH免疫阳性神经元的分布,尤其以视上核、视前核、室旁核分布较多。对于垂体,GnRH免疫阳性产物只存在于青年摩杂一代水牛的腺垂体中。青年摩杂一代水牛卵巢中生殖上皮细胞、颗粒细胞和黄体细胞发现有GnRH免疫阳性产物。[结论]为进一步研究GnRH在生殖中的生理和作用机制提供形态学依据,并对青年摩杂一代水牛的繁殖育种起到参考指导作用。

槟榔江水牛、摩拉水牛和荷斯坦奶牛血清中碱性磷酸酶以及钙、磷含量的测定

为了积累槟榔江水牛血清生化指标的基础数据,试验以10头槟榔江水牛为研究对象,对其血清中钙(Ca)、磷(P)含量以及碱性磷酸酶(ALP)活性进行测定,并与摩拉水牛及荷斯坦奶牛的同类指标进行比较。结果表明:槟榔江水牛、摩拉水牛血清中ALP活性均极显著高于荷斯坦奶牛(P<0.01),槟榔江水牛血清中ALP活性高于摩拉水牛,但差异不显著(P>0.05);槟榔江水牛Ca含量最高,荷斯坦奶牛Ca含量最低,且差异不显著(P>0.05);摩拉水牛P含量最高,荷斯坦奶牛P含量最低,且差异不显著(P>0.05)。

GnRH在广西摩拉杂交水牛乳腺中的免疫组化定位及其受体基因表达的研究

采用免疫组化及RT-PCR技术检测广西摩拉杂交水牛乳腺组织中的促性腺激素释放激素(GnRH)及其受体。结果表明,15份正常乳腺组织中有13份呈GnRH免疫阳性反应,免疫阳性产物主要集中在腺泡细胞的胞质和胞膜,胞核无特异性染色;同时扩增的目的条带大小为1 008 bp,与促性腺激素释放激素受体(GnRHR)基因片段大小一致。