血清mutL同源基因1在晚期胃癌患者XELOX新辅助化疗中的监测意义

目的探讨与分析血清mutL同源基因1(MLH1)在晚期胃癌患者XELOX新辅助化疗中的监测意义。方法2018年12月到2020年10月选择在本院进行诊治的晚期胃癌患者80例作为胃癌组,所有患者都给予XELOX新辅助化疗,治疗观察4个周期。检测所有患者治疗前后的血清MLH1相对水平,调查患者的病理特征,随访患者的预后并进行影响因素分析。结果治疗后晚期胃癌患者的血清MLH1相对表达水平明显高于治疗前P<0.05)。在晚期胃癌患者中,不同临床分期、淋巴结转移患者的血清MLH1相对表达水平对比有明显差异(P<0.05)。80例患者治疗后CR 40例,PR 25例,SD 10例,SD 5例,总有效率为81.3%。在化疗期间发生不良反应18例,发生率为22.5%,其中8例胃肠反应,神经系统受损6例,肝肾损害2例,过敏反应1例,血液系统受损1例。所有患者随访1年,80年患者生存67例,死亡13例,死亡率为16.3%。以预后1年死亡率作为因变量,以调查的内容作为自变量,多元Logistic回归分析显示临床分期、淋巴结转移、血清MLH1相对表达水平都是影响胃癌患者预后1年死亡率的重要因素(P<0.05)。结论晚期胃癌患者多伴随有血清MLH1的高表达,而XELOX新辅助化疗的应用能促进降低血清MLH1表达水平,血清MLH1表达水平与患者的病理特征存在相关性,也是影响胃癌患者预后1年死亡率的重要因素。

胃癌患者病灶组织CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6的表达变化研究

目的:探究胃癌患者病灶组织角蛋白7(CK7)、人表皮生长因子受体-2(HER2)、错配修复蛋白MutL同源物1(MLH1)、错配修复蛋白MutS同源物2(MSH2)及错配修复蛋白MutS同源物6(MSH6)的表达变化情况。方法:选取2020年2月—2023年1月苏州市相城人民医院收治的120例胃癌患者为研究对象,比较病灶组织及癌旁组织的CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6的表达情况,并比较不同性别、年龄、TNM分期、分化程度、淋巴结转移情况及病灶位置者的病灶组织CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6表达情况。结果:胃癌患者病灶组织CK7、HER2阳性率及MLH1、MSH2、MSH6表达缺失率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、年龄及病灶位置病灶组织的CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ期、Ⅳ期病灶组织CK7、HER2阳性率高于Ⅰ期、Ⅱ期,MLH1、MSH2、MSH6表达缺失率均显著低于Ⅰ期、Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05)。分化程度较低者病灶组织的CK7、HER2阳性率显著高于分化程度较高者,MLH1、MSH2及MSH6表达缺失率显著低于于分化程度较高者,差异有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移者CK7、HER2阳性率显著高于无淋巴结转移者,MLH1、MSH2及MSH6表达缺失率显著低于无淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌患者病灶组织的CK7、HER2、MLH1、MSH2及MSH6的表达相对异常,且不同TNM分期、分化程度及淋巴结转移情况者的差异较大。

上皮型钙黏蛋白1及MutL同源基因1在甲状腺癌中的表达及意义

目的:探讨上皮型钙黏蛋白1(CDH1)及MutL同源基因1(MLH1)在甲状腺癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法:分析手术治疗且资料完整的61例甲状腺癌患者的临床资料,采用免疫组化法检测甲状腺癌组织及癌旁组织中CDH1及MLH1蛋白的表达情况,并与其临床病理学资料进行比较。结果:CDH1和MLH1在甲状腺癌组织、癌旁组织中的阳性率分别为40.98%(25/61),81.97(50/61)和54.10(33/61),86.89%(53/61),CDH1及MLH1在癌组织中的表达率均显著低于癌旁组织(P<0.05);甲状腺癌组织中CDH1的阳性表达与淋巴结转移及肿瘤分期有关(P<0.05),而MLH1的表达与淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:CDH1和MLH1蛋白可能与甲状腺癌的发生发展有关,并可作为甲状腺癌淋巴结转移的标志物。

GRHL2与MLH1的表达与非小细胞肺癌临床特征的相关性研究

目的探究粒状头样2(grainyhead like 2,GRHL2)表达、Mutl homolog 1(MLH1)甲基化与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床特征的相关性。方法回顾整理2016年1月至2021年4月在天津市滨海新区大港中医医院就诊,经手术并治疗确诊的NSCLC患者486例;整理所有患者临床资料,分析所有患者GRHL2、MLH1的表达情况、肿瘤分类、临床分期、预后等情况。结果486例NSCLC患者,在年龄>40、肿瘤大小>3cm、临床分期为Ⅱ~Ⅲ期、淋巴结发生转移、组织类型为鳞癌的患者较多,且差异较为明显(P均<0.01)。GRHL2在癌组织中379例呈现高表达,107例低表达,而在癌旁组织中187例呈现高表达,299例呈现低表达,GRHL2在癌组织中呈现高表达趋势,在癌旁组织中,呈低表达趋势;GRHL2在癌组织与癌旁组织的表达具有明显差异(P<0.01)。在NSCLC中MLH1基因甲基化占比为46.84%,其中部分甲基化为34.29%;完全甲基化为12.55%。在癌旁组织中甲基化占比为24.61%,其中部分甲基化为5.52%;完全甲基化为19.09%。NSCLC中MLH1基因甲基化程度明显高于癌旁组织(P<0.01)。Spearman分析显示,GRHL2的表达与肿瘤大小,临床分期,淋巴结转移均存在显著相关(P<0.01),与组织类型明显相关(P<0.05),但与年龄,性别无明显相关性(P>0.05)。MLH1甲基化、GRHL2高表达与NSCLC患者生存时间成反比(P<0.01)。结论MLH1甲基化、GRHL2差异表达与NSCLC患者肿瘤大小,临床分期,淋巴结转移情况密切相关,同时与患者预后具有明显相关性,在NSCLC的治疗过程中具有重要的参考价值。

健脾活血方对大鼠胃癌前病变模型CD44V6、MLH1、MSH2表达的影响

目的:通过观察健脾活血方对胃癌前病变大鼠胃黏膜组织中CD44V6、MLH1及MSH2表达的影响,探讨健脾活血方对其干预的作用机制.方法:除正常组外,其他大鼠采用以N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N-nitro N-nitrosoguanidine,MNNG)为主同时配合0.3g/L雷尼替丁、400 mL/L乙醇及饥饱失常的多因素造模法建立胃癌前病变动物模型.将造模成功的40只大鼠随机分为模型组(0.9%氯化钠溶液)、胃复春组(0.86 g/kg)、健脾活血方高、中、低剂量组(32、16、8 g/kg),每组8只,每组每天给予等量(10 mL/kg)的不同药物灌胃一次,连续10 wk.实验末处死大鼠,给予相应处理后,快速免疫组织化学检测CD44V6、MLH1及MSH2表达情况.结果:模型组CD44V6表达与正常组相比明显升高(5.12±1.96 vs 0.25±0.46,P<0.01);健脾活血方高、中剂量组CD44V6表达与模型组相比均明显降低(2.25±0.71,3.25±0.31vs 5.12±1.96,P<0.01或P<0.05),低剂量组C D44V6表达与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);健脾活血方高剂量组CD44V6表达与胃复春组相比明显降低(2.25±0.71 vs4.62±1.19,P<0.01),中、低剂量组CD44V6表达与胃复春组比较差异无统计学意义(P>0.05).模型组MLH1、MSH2表达与正常组相比均明显降低(3.75±1.04 vs 8.00±0.926;3.62±1.69 vs 7.25±2.12,P<0.01);健脾活血方高、中、低剂量组MLH1、MSH2表达与模型组相比均明显升高(6.50±0.93,5.25±1.49,5.12±1.25 vs 3.75±1.04;6.62±2.13,6.00±1.51,5.50±1.41 vs 3.62±1.69,P<0.01或P<0.05);健脾活血方高剂量组MLH1表达与胃复春组相比明显升高(6.50±0.93 vs 4.88±1.25,P<0.05),中、低剂量组MLH1及高、中、低剂量组MSH2表达与胃复春组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:健脾活血方可通过降低CD44V6表达,上调MLH1、MSH2表达,减少细胞的非正常侵袭和转移,增强基因的错配修复功能,减少细胞的异常增殖和分化,发挥对大鼠胃癌前病变的治疗作用.

卵巢癌组织中错配修复蛋白MLH1的表达及临床意义

目的:观察卵巢癌组织中错配修复蛋白Mut L同系物1(MLH1)表达水平,探讨其与卵巢癌患者临床病理特征的关系,并分析MLH1与细胞增殖相关核抗原Ki-67表达的相关性。方法:选择71例卵巢癌组织、28例卵巢交界性肿瘤组织及20例正常卵巢组织作为研究对象,用免疫组织化学染色评分标准评价分析MLH1缺失与卵巢癌组织学类型、淋巴结转移情况、临床分期以及与Ki-67表达的相关性。结果:在71例卵巢癌组织中MLH1缺失率为14.1%;在卵巢交界性肿瘤组织及正常卵巢组织中无MLH1缺失现象(P<0.05);随肿瘤临床分期的升高,MLH1的缺失率显著降低(P<0.05),但其与肿瘤组织学类型、淋巴结转移无明显关系。在Ki-67低表达组中MLH1缺失占28.00%,在Ki-67高表达组中占6.52%(P<0.05),MLH1缺失与Ki-67表达呈负相关(r=-0.295,P=0.013)。结论:与卵巢交界性肿瘤及正常卵巢组织相比,MLH1缺失率在卵巢癌中明显升高,且随着卵巢癌临床分期的升高而降低。同时与卵巢病理诊断指标Ki-67具有相关性。

MLH1表达对胃癌患者预后及术前新辅助化疗反应的预测价值

目的探讨mutL同源基因1(mutL homologous gene 1,MLH1)在胃癌患者中的表达及其对预后及术前新辅助化疗反应的预测价值。方法收集2010年1月至2016年12月期间在本院行胃癌根治术的323例胃癌患者为研究对象。采用免疫组化法检测MLH1的表达。根据存活癌细胞的比例评估术前化疗的组织学反应。在免疫组化结果MLH1阴性表达的肿瘤中评估MSI状态。采用Cox回归分析影响无复发生存期(recurrence-free survival,RFS)的独立危险因素。结果323例胃癌患者中,MLH1阴性表达32例(9.9%),阳性表达291例(90.1%)。32例MLH1阴性表达患者中,MSI-H27例(84.3%),MSS/MSI-L 5例(15.7%)。MLH1阴性组的化疗反应者比例低于MLH1阳性组(21.4%vs 60.4%,P<0.001)。未行术前新辅助化疗的患者(n=198)中,MLH1阴性组的RFS较MLH1阳性组长(P<0.001);在接受术前新辅助化疗的患者(n=125)中,两组RFS差异无统计学意义(P=0.352)。多因素Cox回归显示,MLH1阳性表达患者的复发风险较MLH1阴性表达患者高(HR=2.45,95%CI:1.06~5.67,P=0.037)。结论MLH1缺失与化疗耐药相关,不会延长新辅助化疗后的RFS,且MLH1与MSI状态高度相关,可能是MSI的替代指标。

鼻咽癌组织中错配修复基因hMLH1的表达及意义

目的探讨人类鼻咽癌(NPC)组织中错配修复基因hMLH1的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化两步法检测132例鼻咽癌组织、50例鼻咽部慢性炎症的黏膜组织中hMLH1的表达。结果鼻咽癌组织中hMLH1的阳性表达率为55.30%,明显低于鼻咽部慢性炎症的黏膜组织中hMLH1的阳性表达率(76.00%,P<0.05),鼻咽癌组织中hMLH1表达与鼻咽癌T、N分期,以及临床分期、远处转移有关(P<0.05);与年龄、性别无关(P>0.05)。结论鼻咽癌组织中hMLH1表达水平明显下调,hMLH1可能成为预测鼻咽癌预后的生物学指标之一。

MGMT和hMLH1在弥漫性大B细胞淋巴瘤免疫亚型中的表达及临床意义

目的:探讨MGMT和hMLH1在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)免疫亚型组织中的表达及临床病理特征的关系。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测100例初治DLBCL患者肿瘤组织中MGMT和hMLH1的表达情况,分析两者与DLBCL临床病理特征的关系。结果:MGMT及hMLH1的表达与临床分期、国际预后指数(IPI)、病理免疫亚型密切相关(均P<0.05)。MGMT在non-GCB亚型中的表达与生存率有关(P<0.05);hMLH1在GCB亚型及non-GCB亚型中的表达均与生存率有关(均P<0.05)。MGMT与hMLH1表达无明显相关关系(P>0.05)。结论:MGMT和hMLH1检测有助于判断DLBCL临床亚型和预后。

子宫内膜异位症中hMLH1、hMSH2基因启动子区的甲基化研究

目的:探讨错配修复基因1(hMLH1)、错配修复基因2(hMSH2)启动子区甲基化与子宫内膜异位症的关系。方法:采用甲基化特异性PCR方法检测23例子宫内膜异位症组织和20例正常子宫内膜中hMLH1、hMSH2基因启动子区的甲基化状态。结果:hMLH1基因在子宫内膜异位症中的甲基化率为39%(9/23),在正常子宫内膜组织中的甲基化率为5%(1/20),两者比较,差异有统计学意义(P<0.05);hMSH2基因在子宫内膜异位症中的甲基化率为8%(2/23),在正常子宫内膜组织中的甲基化率为5%(1/20),两者比较,无明显差异(P>0.05)。结论:hMLH1基因启动子区甲基化可能与子宫内膜异位症发病有关;hMSH2基因启动子区甲基化与子宫内膜异位症之间不存在显著联系。

hMLH1蛋白在食管鳞状细胞癌和不典型增生组织中的表达

目的:探讨同一食管癌患者食管的鳞状细胞癌组织、不典型增生组织、正常鳞状上皮组织中错配修复基因1(hu-man mutl homolog1,hMLH1)的蛋白表达情况,深入研究它与食管鳞状细胞癌发生发展的关系。方法:取92例食管鳞状细胞癌患者的病变组织,其病理切片中鳞状细胞癌组织、不典型增生组织和正常鳞状上皮组织均存在,采用免疫组织化学的方法,检测hMLH1蛋白在3种不同组织中的表达,并分析其与性别、年龄、分化程度、浸润深度、肿瘤分期、淋巴结转移等临床病理参数之间的关系。结果:hMLH1蛋白在食管鳞状细胞癌组织、不典型增生组织、正常鳞状上皮组织细胞核中的阳性表达率分别为36.96%、56.52%、84.78%,鳞状细胞癌组织和不典型增生组织均显著低于正常食管鳞状上皮组织(P<0.01)。鳞状细胞癌组织中hMLH1蛋白表达阴性者,年龄较阳性者大(P<0.05);hMLH1蛋白表达与肿瘤分期、淋巴结转移等有明显相关性(P<0.05)。结论:hMLH1基因缺失可能在早期就参与了食管鳞状细胞癌的发生过程,hMLH1蛋白可能抑制或延缓食管鳞状细胞癌的发生和发展。

hMLH1基因对脑胶质瘤替莫唑胺耐药的影响及机制研究

目的:观察h MLH1基因对脑胶质瘤替莫唑胺耐药的影响并探讨其机制。方法:检测脑胶质瘤患者组织、耐药细胞株(U251/TMZ)和亲本敏感细胞株(U251)的h MLH1表达水平;使用5氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)予耐药细胞株去甲基化干预后,采用MBP法检测其h MLH1基因启动子甲基化水平;检测干预前后耐药细胞株的h MLH1表达水平以及替莫唑胺IC50的变化。结果:脑胶质瘤复发患者组织h MLH1表达水平低于初治患者;耐药细胞株h MLH1表达水平低于敏感细胞株,去甲基化干预后耐药细胞株h MLH1表达水平及对替莫唑胺敏感性增加。结论:h MLH1沉默促进脑胶质瘤替莫唑胺耐药,其机制可能与该基因启动子甲基化增强有关。

Detection of hMSH2 and hMLH1 mutations in Chinese hereditary non-polyposis colorectal cancer kindreds

AIM： To establish and validate the mutation testing for identification and characterization of hereditary non-polyposis colorectal cancer （HNPCC） in suspected Chinese patients. METHODS： Five independent Chinese kindreds with HNPCC fulfilling the classical Amsterdam criteria were collected. Genomic DNA was extracted after informed consent was obtained. The coding region of hMSH2 and hMLH1 genes was detected by polymerase chain reaction （PCR） and denaturing high-performance liquid chromatography （DHPLC）. Mutations identified in the proband by DHPLC were directly sequenced using a 377 DNA sequencer, analyzed with a basic local alignment tool （BLAST）, and tested in the corresponding family members by direct DNA sequencing. RESULTS： Mutations were identified in two Chinese HNPCC kindreds. One was the missense mutation of hMSH2 c.1808A→G resulting in Asp 603 Gly identified in the proband of the fifth HNPCC （HNPCCS） kindred. In the HNP5 kindred, three family members were found to have this mutation and two of them had colorectal cancer. The other mutation of hMLH1 c.1882A→G was identified in the HNP2 kindred＇s proband, which might be the nonsense mutation analyzed by BLAST. CONCLUSION： Pedigree investigation and mutation testing of hMSH2 and hMLH1 are the practical methods to identify high-risk HNPCC patients in China.

子宫内膜异位症中错配修复基因1启动子区异常甲基化与甲基化转移酶的关系

为探讨错配修复基因1(human mutL homolog 1,hMLH1)启动子区异常甲基化与甲基化转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)的关系,揭示子宫内膜异位症(endometriosis,EM)的可能病因,留取43例卵巢子宫内膜异位症患者的异位内膜组织纳入EM组,留取30例其他妇科手术患者的正常子宫内膜纳入对照组.采用甲基特异性PCR(methylation specificity PCR,MSP)检测2组标本中hMLH1启动子区甲基化水平.同时采用免疫组化SP法,检测2组标本中DNMT1和DNMT3a、DNMT 3b的表达.结果显示,EM组甲基化率37%(16/43),对照组甲基化率3%(1/30),两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).EM组DNMT1表达阳性率为28%(12/43),对照组DNMT1表达阳性率为3%(1/30),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).甲基化的EM标本中,DNMT1表达阳性率为69%(11/16);未甲基化的EM标本中,DNMT1表达阳性率为4%(1/27),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).DNMT1高表达所致的hMLH1启动子区异常甲基化可能是子宫内膜异位症的病因之一.

鼻咽癌hMLH1基因甲基化及其与临床和病理特征的关系

目的通过检测hMLH1基因的表达及其启动子区甲基化呈现的状态,研究hMLH1基因同鼻咽癌临床和病理特征之间的关系,旨在找出可能作为鼻咽癌早期分子生物学诊断的标志物。方法(1)qRT-PCR检测hMLH1基因表达水平;(2)采用NCBI检测hMLH1基因组的序列,METH-PRIMER软件分析hMLH1启动子区有无经典的CpG岛。同时在线设计MSP及BSP特异性引物;(3)使用亚硫酸氢盐修饰后测序(BSP)检测鼻咽癌和正常鼻咽上皮细胞株中hMLH1基因的甲基化状态,每株细胞3个克隆,运用甲基化特异性PCR技术检测浙江省建德市第一人民医院20例正常鼻咽上皮组织和2012年5月-2016年5月初次确诊60例鼻咽癌组织hMLH1基因启动子区甲基化状态。结果(1)提示hMLH1在鼻咽癌细胞株和鼻咽癌组织中的相对表达量较正常鼻咽上皮细胞株和正常鼻咽上皮组织中的相对表达量明显降低。去甲基化药物5-Aza-dC处理后再次检测hMLH1的表达量,发现其在鼻咽癌细胞株中的表达量相对正常鼻咽上皮细胞株无明显降低。(2)在正常鼻咽上皮细胞株及20例正常鼻咽上皮组织中均未检测到hMLH1基因甲基化;而在5个鼻咽癌细胞株中hMLH1甲基化频率为80.0%(4/5),60例鼻咽癌组织中hMLH1甲基化频率为43.3%(26/60),两者与正常对照比较均有统计学差异(P<0.01),不同甲基化状态与临床病理特征差异无统计学意义(P>0.05)。结论hMLH1基因启动子区甲基化具有肿瘤特异性,而hMLH1基因甲基化同鼻咽癌患者病理特征无明显相关性,可作为鼻咽癌早期预测因子,有望成为鼻咽癌早期诊断的分子标志物,将来还可能作为去甲基化基因治疗的靶点。

MLH1蛋白与近端散发性结肠癌瘤内菌群特征关系的生物信息学分析

背景与目的:mutL同源物1(MLH1)基因的突变会导致DNA错配修复(MMR)系统失活,从而增加结直肠癌的发生风险。此外,越来越多的研究表明,肠道菌群的组成和功能异常与结直肠癌的发生和发展密切相关。然而,MLH1蛋白表达与肠道菌群是否有关联目前尚不十分明确。因此,本研究通过分析中国东北地区不同MLH1蛋白表型近端散发性结肠癌(SCC)患者的肿瘤组织中微生物组的差异,探讨两者之间的潜在关系。方法:收集黑龙江省哈尔滨市第一医院和黑龙江省医院2020—2021年407例近端SCC肿瘤组织样本与临床资料,用免疫组化法筛选出其中MLH1蛋白缺失病例(缺失组)与MLH1蛋白完整病例(对照组)。采用16S rRNA基因测序技术,对提取的肠道肿瘤组织内微生物DNA,进行生物信息学分析,并分析临床病理特征以及特定类群的物种与菌群多样性的关系。结果:共筛选出缺失组病例20例,对照组18例,初步临床数据分析显示,肿瘤越大,MLH1蛋白缺失的风险越高(P<0.05)。不同MLH1状态下肿瘤组织内菌群的α多样性除Shannon指数外(P=0.042),其他指数差异均无统计学意义(均P>0.05)。门类水平的微生物组β多样性分析显示两组之间的菌群组成无明显差异(P=0.076)。属类水平上β多样性分析结果显示,两组间差异大于两组内差异(P=0.04),通过菌属丰度之间的比较,发现粪球菌属的菌群丰度可能会促进MLH1蛋白缺失(校正后的P<0.01)。然而,无论各临床病理参数或是不同丰度的关键物种之间,Shannon指数均无明显差异(均P>0.05)。结论:近端SCC患者MLH1蛋白表型与肠道菌群的组成和多样性密切相关。此外,鉴定出粪球菌属可能成为该人群MLH1蛋白表达缺失的关键物种,并为今后该病的研究与防治提供新的切入点。

散发性结直肠癌DNA错配修复系统蛋白表达及其临床意义

目的·探讨DNA错配修复(mismatch repair,MMR)系统蛋白MLH1(mutL homolog1)、MSH2(mutS homolog2)、MSH6(mutS homolog6)和PMS2(postmeiotic segregation increased2)在散发性结直肠癌(sporadic colorectal carcinoma,SCRC)中的表达及与临床病理特征之间的关系。方法·收集2014年4月-2018年8月在上海交通大学医学院附属同仁医院行结直肠癌根治术的SCRC患者的癌组织样本。采用免疫组织化学法检测符合标准的209例患者的结直肠癌组织样本中的MLH1、MSH2、MSH6、PMS2和p53蛋白,并对其中67例癌组织行荧光定量PCR检测KRAS癌基因突变情况。结果·209例患者的癌组织中,MLH1、MSH2、MSH6及PMS2蛋白缺失率分别为17.2%(36/209)、2.4%(5/209)、12.9%(27/209)、16.7%(35/209)。MMR系统蛋白总的缺失率为30.1%(63/209),在55岁以下、肿瘤位于右半结肠、肿瘤直径>6cm及黏液腺癌的SCRC患者中较高(均P<0.05)。p53基因突变患者的MLH1缺失率显著高于未突变患者(P=0.012),KRAS基因突变患者的MLH1缺失率显著低于未突变患者(P=0.044)。这些SCRC患者中,MLH1和PMS2蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P=1.000)。结论·MMR系统蛋白缺失可能与SCRC患者年龄、肿瘤位置、肿瘤大小和病理组织分型相关,MLH1蛋白缺失可能与p53基因及KRAS基因的突变相关。

子宫内膜癌组织中MMR蛋白表达及MLH1基因甲基化的临床意义

目的探讨子宫内膜癌组织中错配修复(MMR)基因包括MLH1、MSH2、MSH6、PMS2基因的蛋白表达及MLH1甲基化的临床意义。方法收集2007—2016年10年间解放军总医院病理科确诊为子宫内膜癌的组织蜡块共420份,采用免疫组化EnVision二步法检测子宫内膜癌组织中MLH1、MSH2、MSH6、PMS2蛋白的表达并分析其临床意义,当出现MMR蛋白表达缺失(即MLH1、PMS2、MSH2及MSH6中的任何1个或多个蛋白表达缺失)则高度疑为Lynch综合征相关子宫内膜癌(LS-EC);进一步采用甲基化特异性多重连接探针扩增(MS-MLPA)技术检测其中MLH1蛋白表达缺失(72份)的子宫内膜癌组织中MLH1基因的甲基化状态,当出现MLH1基因甲基化阳性时,可判定该患者为散发性子宫内膜癌,而非LS-EC。结果(1)420份子宫内膜癌组织中,MMR蛋白总缺失率为34.5%(145/420),其中MLH1、MSH2、MSH6、PMS2蛋白缺失率分别为17.1%(72/420)、8.1%(34/420)、7.4%(31/420)、26.2%(110/420);MLH1和PMS2蛋白的联合缺失率为16.7%(70/420)、MSH2和MSH6蛋白的联合缺失率仅为6.2%(26/420)。(2)病理类型为子宫内膜样癌与非子宫内膜样癌组织中MMR蛋白总缺失率(分别为32.4%、58.8%)、PMS2蛋白缺失率(分别为23.6%、55.9%)分别比较均有明显差异(P<0.01)。不同病理分化程度的子宫内膜样癌组织中MMR蛋白总缺失率及MLH1、MSH2、MSH6、PMS2蛋白缺失率分别比较均有明显差异(P<0.05)。不同手术病理分期的子宫内膜癌组织中MSH2蛋白缺失率(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期分别为5.5%、10.6%、18.6%)比较有明显差异(P<0.01)。不同浸润深度的子宫内膜癌组织中MMR蛋白总缺失率(黏膜内、浅肌层、深肌层浸润分别为35.0%、30.8%、48.1%)比较有明显差异(P<0.05)。有、无淋巴结转移的子宫内膜癌组织中MMR蛋白总缺失率及MSH2、MSH6蛋白缺失率分别比较均有明显差异(P<0.05)。(3)72份MLH1蛋白表达缺失的子宫内膜癌组织中57份DNA质量检测合格,其中MLH1基因甲基化阳性27份,甲基化阳性率为47.4%(27/57)。结论子宫内膜癌组织中MMR蛋白表达缺失可能提示患者预后不良。免疫组化方法及进一步的MLH1基因甲基化检测可作为初步筛查LS-EC的方法。

子宫内膜异位症中hMLH1表达缺陷与其启动子区甲基化的关系

目的探讨错配修复基因(mismatch repair gene,MMR)hMLH1(human mutL homolog1)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)组织及正常子宫内膜组织中的表达,分析这种差异表达与hMLH1启动子区甲基化的关系。方法 选择2009年1月至10月本院收治的卵巢子宫内膜异位症患者23例的异位内膜标本纳入EMs组(所有患者术前未经激素治疗)。选择同期在本院行节育术和子宫脱垂手术患者20例的正常子宫内膜标本纳入对照组。采用免疫组织化学SP法检测两组标本中hMLH1的表达,并从标本中提取DNA,采用甲基化特异性PCR(methylation specificity PCR,MSP)检测hMLH1启动子区的甲基化状态,比较两组hMLH1的表达情况及甲基化状态(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准)。结果 EMs组hMLH1表达阳性率为65%(15/23),对照组为95%(19/20),两组比较,差异有显著意义(P<0.05)。EMs组中,hMLH1启动子区完全和部分甲基化率为39%(9/23),对照组仅1例为部分甲基化,占5%(1/20),两组比较,差异有显著意义(P<0.05)。结论 hMLH1无表达在子宫内膜异位症的发生中起重要作用。hMLH1启动子区甲基化是导致hMLH1表达缺陷的部分原因。

淋巴结转移性结直肠癌中MLH1与MSH2基因的表达水平及其临床意义

目的分析淋巴结转移性结直肠癌中DNA错配修复基因(mismatch repair,MMR)系统MLH1(Mut L homolog1)和MSH2(Mut S homolog 2)基因的表达水平及临床意义。方法选取2015年6月至2017年4月收治的120例淋巴结转移性结直肠癌患者为研究对象,同期选取120例无淋巴结转移的结直肠癌患者为对照;通过免疫组化法、实时荧光定量PCR法(q RT-PCR)、Western blot法,分别检测两组正常癌旁组织及病灶组织中MLH1、MSH2蛋白阳性表达缺失率,MLH1、MSH2 m RNA及蛋白表达水平。结果两组患者病灶组织MLH1、MSH2蛋白阳性表达缺失率均高于癌旁组织,而MLH1、MSH2 m RNA及蛋白相对表达水平均低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P均<0.05);淋巴结转移性结直肠癌组病灶组织MLH1、MSH2蛋白阳性表达缺失率均高于无淋巴结转移组,MLH1、MSH2 m RNA及蛋白相对表达水平均低于无淋巴结转移组,差异均有统计学意义(P均<0.05);两组癌旁组织MLH1、MSH2蛋白阳性表达缺失率、MLH1、MSH2 m RNA及蛋白相对表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05);MLH1、MSH阳性表达缺失率与淋巴结转移性结直肠癌患者的肿瘤直径、浸润深度、分化程度及淋巴结转移数有密切关系(P均<0.01),而与年龄无关(P>0.05)。结论淋巴结转移性结直肠癌中MLH1、MSH2表达水平显著降低,推测其在结直肠癌由无淋巴结转移进展为发生淋巴结转移中具有重要作用。