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PolyI∶C不同途径诱导大菱鲆Mx蛋白基因的转录
被引量:
1
1
作者
王印庚
毛明光
+4 位作者
刘宗柱
张家松
陈贵平
廖梅杰
曲江波
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2009年第6期1-6,共6页
以PolyI∶C(又称聚肌胞)为诱导剂,分别通过腹腔注射、浸泡和投喂3种途径诱导大菱鲆Scophthalmus maximus体内抗病毒蛋白Mx基因的转录,利用半定量RT-PCR方法检测干扰素下游基因-Mx基因的转录水平来确定该诱导剂的诱导效果。结果显示,以上...
以PolyI∶C(又称聚肌胞)为诱导剂,分别通过腹腔注射、浸泡和投喂3种途径诱导大菱鲆Scophthalmus maximus体内抗病毒蛋白Mx基因的转录,利用半定量RT-PCR方法检测干扰素下游基因-Mx基因的转录水平来确定该诱导剂的诱导效果。结果显示,以上3种途径都能高效诱导Mx蛋白mRNA的转录,均在48h之后达到高峰,其中以浸泡的方式更容易诱导Mx基因转录,且在120h时仍保持较高水平。Mx基因转录的时相变化证明了国产PolyI∶C可以通过多种途径诱导抗病毒蛋白Mx的表达,为实际应用中确定用药途径提供了理论依据。另外,实验初步建立了半定量RT-PCR方法,为检测鱼体内干扰素的表达提供了技术方法。
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关键词
PolyI∶C
大菱鲆
mx
蛋白
干扰素诱导剂
基因转录
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职称材料
鸡Mx基因原核表达载体的构建及其表达分析
2
作者
田智泉
孙敏
+4 位作者
杨海燕
任丽伟
徐贵江
丁爱军
李碧春
《中国家禽》
北大核心
2009年第17期14-17,共4页
旨在大肠杆菌中表达鸡抗病毒Mx蛋白,为进一步研究该基因抗病活性奠定基础。本研究通过设计一对特异性引物,从已构建好的鸡Mx基因真核表达载体pcDNA3.0-MMx上扩增出Mx基因开放式阅读框(2118bp),并将其编码区重组于原核表达载体PGEX-6P-1...
旨在大肠杆菌中表达鸡抗病毒Mx蛋白,为进一步研究该基因抗病活性奠定基础。本研究通过设计一对特异性引物,从已构建好的鸡Mx基因真核表达载体pcDNA3.0-MMx上扩增出Mx基因开放式阅读框(2118bp),并将其编码区重组于原核表达载体PGEX-6P-1中,经酶切和序列鉴定分析后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)和Rossetta-gami(DE3),并比较其表达效率。结果显示,经不同浓度IPTG诱导后,该基因在Rossetta-gami(DE3)中获得表达。SDS-PAGE检测结果显示,蛋白大小与预期结果相符,说明重组质粒pGEX-Mx在大肠杆菌中成功诱导表达出鸡Mx蛋白,为下一步鸡Mx蛋白活性检测及抗体制备奠定基础。
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关键词
mx
基因
克隆
原核表达
蛋白
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职称材料
草鱼Mx蛋白基因的克隆与原核表达
被引量:
8
3
作者
王伟
白俊杰
+2 位作者
劳海华
叶星
罗建仁
《中国水产科学》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期365-369,共5页
根据已报道的Mx蛋白cDNA序列设计合成特异引物,应用逆转录 聚合酶链式反应(RT PCR)方法,从草鱼呼肠孤病毒(GCRV)诱导的草鱼(Ctenopharyngodonidellus)肝脏总RNA中扩增获得Mx蛋白cDNA,回收纯化后克隆到pGEM TEasyVector系统的T载体上。...
根据已报道的Mx蛋白cDNA序列设计合成特异引物,应用逆转录 聚合酶链式反应(RT PCR)方法,从草鱼呼肠孤病毒(GCRV)诱导的草鱼(Ctenopharyngodonidellus)肝脏总RNA中扩增获得Mx蛋白cDNA,回收纯化后克隆到pGEM TEasyVector系统的T载体上。重组子的序列分析表明:所克隆的Mx蛋白cDNA长722bp,编码240个氨基酸,包括1个三联GTP结合区域和1个发动蛋白(dynamin)族特征的序列。与已知鱼类Mx蛋白基因序列比较表明,草鱼Mx蛋白基因序列与其它鱼类Mx基因相应序列具有较高的同源性,其中与斑马鱼Mx蛋白E型基因碱基序列比较同源性最高,为87.1%。将此基因改造后定向克隆至原核表达质粒pBV220,构建成重组草鱼Mx蛋白基因表达质粒pBVgcMx,并在大肠杆菌中获得高效表达,重组草鱼Mx蛋白的表达量占菌体总蛋白的26.6%。Q sephroseFF层析柱分离纯化的重组草鱼Mx蛋白纯度达95.6%。
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关键词
草鱼
mx
蛋白基因
克隆
原核表达
测序分析
纯化
氨基酸
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职称材料
题名
PolyI∶C不同途径诱导大菱鲆Mx蛋白基因的转录
被引量:
1
1
作者
王印庚
毛明光
刘宗柱
张家松
陈贵平
廖梅杰
曲江波
机构
中国水产科学研究院黄海水产研究所
厦门大学海洋与环境学院
青岛农业大学生命科学学院
烟台开发区天源水产有限公司
出处
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2009年第6期1-6,共6页
基金
国家863计划(2003AA622070)
国家十一五科技支撑计划(2006BAD09A11)
行业专项(nyhyzx07-046)共同资助
文摘
以PolyI∶C(又称聚肌胞)为诱导剂,分别通过腹腔注射、浸泡和投喂3种途径诱导大菱鲆Scophthalmus maximus体内抗病毒蛋白Mx基因的转录,利用半定量RT-PCR方法检测干扰素下游基因-Mx基因的转录水平来确定该诱导剂的诱导效果。结果显示,以上3种途径都能高效诱导Mx蛋白mRNA的转录,均在48h之后达到高峰,其中以浸泡的方式更容易诱导Mx基因转录,且在120h时仍保持较高水平。Mx基因转录的时相变化证明了国产PolyI∶C可以通过多种途径诱导抗病毒蛋白Mx的表达,为实际应用中确定用药途径提供了理论依据。另外,实验初步建立了半定量RT-PCR方法,为检测鱼体内干扰素的表达提供了技术方法。
关键词
PolyI∶C
大菱鲆
mx
蛋白
干扰素诱导剂
基因转录
Keywords
Polyinosinic-polycytidylic acid (PolyI : C) Scophthalmus maximus
mx
protein
Interferon inducer
gene
transcription
分类号
S942.5 [农业科学—水产养殖]
下载PDF
职称材料
题名
鸡Mx基因原核表达载体的构建及其表达分析
2
作者
田智泉
孙敏
杨海燕
任丽伟
徐贵江
丁爱军
李碧春
机构
扬州大学动物科学与技术学院
出处
《中国家禽》
北大核心
2009年第17期14-17,共4页
基金
国家自然科学基金(30671509和30871791)
高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20061117004)
+1 种基金
江苏省自然科学基金(BK2007077)
江苏省高校自然科学重大基础研究项目资助(08KJA230001)
文摘
旨在大肠杆菌中表达鸡抗病毒Mx蛋白,为进一步研究该基因抗病活性奠定基础。本研究通过设计一对特异性引物,从已构建好的鸡Mx基因真核表达载体pcDNA3.0-MMx上扩增出Mx基因开放式阅读框(2118bp),并将其编码区重组于原核表达载体PGEX-6P-1中,经酶切和序列鉴定分析后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)和Rossetta-gami(DE3),并比较其表达效率。结果显示,经不同浓度IPTG诱导后,该基因在Rossetta-gami(DE3)中获得表达。SDS-PAGE检测结果显示,蛋白大小与预期结果相符,说明重组质粒pGEX-Mx在大肠杆菌中成功诱导表达出鸡Mx蛋白,为下一步鸡Mx蛋白活性检测及抗体制备奠定基础。
关键词
mx
基因
克隆
原核表达
蛋白
Keywords
mx
gene
cloning
prokaryotic expression
protein
分类号
S961.6 [农业科学—水产养殖]
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
草鱼Mx蛋白基因的克隆与原核表达
被引量:
8
3
作者
王伟
白俊杰
劳海华
叶星
罗建仁
机构
中国水产科学研究院珠江水产研究所中国水产科学研究院热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室
出处
《中国水产科学》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期365-369,共5页
基金
中国水产科学研究院基金项目 (99-0 8-0 3 )
文摘
根据已报道的Mx蛋白cDNA序列设计合成特异引物,应用逆转录 聚合酶链式反应(RT PCR)方法,从草鱼呼肠孤病毒(GCRV)诱导的草鱼(Ctenopharyngodonidellus)肝脏总RNA中扩增获得Mx蛋白cDNA,回收纯化后克隆到pGEM TEasyVector系统的T载体上。重组子的序列分析表明:所克隆的Mx蛋白cDNA长722bp,编码240个氨基酸,包括1个三联GTP结合区域和1个发动蛋白(dynamin)族特征的序列。与已知鱼类Mx蛋白基因序列比较表明,草鱼Mx蛋白基因序列与其它鱼类Mx基因相应序列具有较高的同源性,其中与斑马鱼Mx蛋白E型基因碱基序列比较同源性最高,为87.1%。将此基因改造后定向克隆至原核表达质粒pBV220,构建成重组草鱼Mx蛋白基因表达质粒pBVgcMx,并在大肠杆菌中获得高效表达,重组草鱼Mx蛋白的表达量占菌体总蛋白的26.6%。Q sephroseFF层析柱分离纯化的重组草鱼Mx蛋白纯度达95.6%。
关键词
草鱼
mx
蛋白基因
克隆
原核表达
测序分析
纯化
氨基酸
Keywords
grass carp
mx protein gene
gene
clone
prokaryotic expression
分类号
Q959.468 [生物学—动物学]
Q785 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PolyI∶C不同途径诱导大菱鲆Mx蛋白基因的转录
王印庚
毛明光
刘宗柱
张家松
陈贵平
廖梅杰
曲江波
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2009
1
下载PDF
职称材料
2
鸡Mx基因原核表达载体的构建及其表达分析
田智泉
孙敏
杨海燕
任丽伟
徐贵江
丁爱军
李碧春
《中国家禽》
北大核心
2009
0
下载PDF
职称材料
3
草鱼Mx蛋白基因的克隆与原核表达
王伟
白俊杰
劳海华
叶星
罗建仁
《中国水产科学》
CAS
CSCD
北大核心
2003
8
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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