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Chinese herbal formulae defend against Mycoplasma gallisepticum infection 被引量:1
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作者 WANG Ying-jie LIANG Ya-xi +4 位作者 HU Fu-li SUN Ying-fei ZOU Meng-yun LUO Rong-long PENG Xiu-li 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2022年第10期3026-3036,共11页
Mycoplasma gallisepticum HS strain(MG-HS)is a pathogen that causes chronic respiratory disease(CRD)in chicken,which is characterized by host respiratory inflammatory damage,brings huge economic losses to the poultry i... Mycoplasma gallisepticum HS strain(MG-HS)is a pathogen that causes chronic respiratory disease(CRD)in chicken,which is characterized by host respiratory inflammatory damage,brings huge economic losses to the poultry industry.Recently,emerging Chinese herbal medicines(CHM)have been used to treat CRD.This study was aimed to investigate the preventive and therapeutic effects and their potential mechanisms of Chinese herbal medicinal formulae(CHMF),which consisted of 10 kinds of Chinese herbal medicine including Scutellaria,Houttuynia cordate and licorice,on MGinduced CRD in chickens.With respect to the preventive effect,the results showed that CHMF could effectively recover the MG-induced decrease on body weight and feed conversion ratio.Histopathological analysis showed that both prevention and treatment of CHMF could significantly alleviate the severe respiratory inflammation induced by MG infection.Moreover,compared with the MG infection group,both the prevention groups and the treatment groups of CHMF could effectively reduce the expression of MG adhesion protein(p MGA1.2)to inhibit the proliferation of MG,and thus effectively inhibit the expression of MG-induced inflammatory factors interleukin-1β(IL-1β)and tumour necrosis factor-α(TNF-α).In summary,these findings confirm that CHMF can protect chickens from various tissue damage caused by MG infection and has no adverse effects on the performance of chickens in the short term.And its efficacy against MG is equal to or better than that of tiamulin. 展开更多
关键词 mycoplasma gallisepticum HS strain(MG-HS) Chinese herbal medicine formulae production performance inflammatory lesions CHICKEN
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Inactivated Vaccine Trial of <i>Mycoplasma gallisepticum</i>in Ethiopia
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作者 Legesse Bekele Temesgen Assefa 《Open Journal of Veterinary Medicine》 2018年第6期75-85,共11页
The study and entire laboratory works were conducted from December 2014 to April 2015 in National Veterinary Institute, Bishoftu, Ethiopia. Formaldehyde inactivated Montanide ISA70 based Mycoplasma gallisepticum (MG) ... The study and entire laboratory works were conducted from December 2014 to April 2015 in National Veterinary Institute, Bishoftu, Ethiopia. Formaldehyde inactivated Montanide ISA70 based Mycoplasma gallisepticum (MG) trial vaccine strain was confirmed the identity with known primer using PCR from locally isolates of National Veterinary Institute of Ethiopia. This study was aimed to develop formaldehyde inactivated Montanide ISA70 based MG vaccine in Ethiopia. It can help to device strategies in controlling the disease mainly through developing more effective vaccine which will replace the currently being imported vaccines by some farms. After culturing procedure, oil based inactivated MG trial vaccine was produced in suitable clean and secure accommodation. In this study, among different isolates, local isolate of Samuel farm in NVI was prepared and evaluated in chickens. The amount of immune antigen per 0.5 ml of the dose was 107 Colony forming units (CFU) of the bacteria. The trail vaccine was prepared and evaluated at the age of 16 weeks of chickens;the chickens were randomly divided into three groups (A, B and C), each having twenty birds (10 male and 10 female). Each of group B was vaccinated group of imported-live vaccine with 30 μl intraocularly for comparing with inactivated trial vaccine, each bird of group C was inoculated with 0.5 ml indigenous or trial vaccine subcutaneously at mid neck region and group A was used as a control then challenge tests were performed. After challenge test, among non-vaccinated chickens (control or group A) 2 chickens were died (10%), thicken and cloudy appearance of the air sac showed 18 (90%), 2 chickens were not showed thickened and cloudy air sack (10%). Although among vaccinated group (inactivated vaccine or group C), all chickens did not show clinical signs or post mortem changes (100%). From attenuated imported live vaccine (group B), no clinical signs or post mortem changes were observed (100%). It was concluded that oil based MG vaccine induces protective level of anti MG antibodies in chickens. 展开更多
关键词 ADJUVANT CHICKENS INACTIVATED Vaccine mycoplasma gallisepticum PCR
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氟罗沙星对禽败血霉形体(Mycoplasma gallisepticum)病的药效研究 被引量:4
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作者 姜中其 方兰勇 +2 位作者 曾卫东 陈伟杰 徐建刚 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期262-264,共3页
体外抑菌试验测得氟罗沙星(Fleroxacin)对禽败血霉形体(Mycoplasmagalisepticum)的最小抑菌浓度(MIC)为0.015mg/L。体内药效试验表明,氟罗沙星以25、50、100mg/L饮水给... 体外抑菌试验测得氟罗沙星(Fleroxacin)对禽败血霉形体(Mycoplasmagalisepticum)的最小抑菌浓度(MIC)为0.015mg/L。体内药效试验表明,氟罗沙星以25、50、100mg/L饮水给药和以5、10、15mg/kg肌注给药(1次/d),连续用药5d,对人工气囊接种禽败血霉形体培养液(0.2mL,约含108cfu)的雏鸡,保护率均为100%(30/30),而感染不给药组雏鸡存活率为93.3%(28/30);相对增重率分别为90.8%、91.5%、92.3%和91.5%、91.8%、92.9%,显著高于感染不给药组(73.2%);气囊损伤分分别为2.93、2.62、0.93和1.8、1.1、1.0,而感染不给药组为6.57,差异显著(P<0.05);血清玻板凝集试验阳性率分别为20%(2/10)、10%(1/10)、0(0/10)和30%(3/10)、10%(1/10)、10%(1/10),均极显著低于感染不给药组100%(10/10)(P<0.01)。氟罗沙星不同给药途径及不同剂量间药效差异不显著。 展开更多
关键词 氟罗沙星 败血霉形体病 药效 禽病
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Construction of mini-Tn4001 transposon vector for Mycoplasma gallisepticum 被引量:1
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作者 CHEN HongJun, ZHAO ChunMei, SHEN XieYue, CHEN DanQing, YU ShengQing & DING Chan Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2010年第11期1340-1345,共6页
The detailed genetic analysis of mycoplasmas has long been hampered by the lack of appropriate tools for genetic manipulation. In this study, the transposon vector, mini-Tn4001tetM, was constructed containing the tnp ... The detailed genetic analysis of mycoplasmas has long been hampered by the lack of appropriate tools for genetic manipulation. In this study, the transposon vector, mini-Tn4001tetM, was constructed containing the tnp gene, encoding a transposase gene in Staphylococcus aureus, two copies of the IS256 inverted repeat sequence (inner and outer) and the tetM gene, from the Enterococcus faecalis Tn916 transposon, conferring resistance to tetracycline. This vector was electro-transformed into Mycoplasma gallisepticum (MG). The recombinant cells were screened by tetracycline selection. The results indicated that the transposon vector could replicate in MG strain R by successive passages, indicating that MG is a potential vector for expressing protective antigens of other pathogens. 展开更多
关键词 mycoplasma gallisepticum mini-Tn4001 TRANSPOSON VECTOR mycoplasma TRANSFORMATION
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安徽部分地区鸡场鸡毒支原体与鸡滑液囊支原体感染与垂直传播调查 被引量:1
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作者 沈学怀 侯宏艳 +8 位作者 赵瑞宏 尹磊 张丹俊 戴银 殷冬冬 王洁茹 胡晓苗 潘孝成 王红燕 《中国家禽》 北大核心 2024年第2期76-81,共6页
为了解安徽部分地区规模鸡场鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)流行感染情况,试验采集21家鸡场鸡血液样品进行血清学调查,并对3家种鸡场的种鸡群及其后代雏鸡进行MG和MS的病原检测,分... 为了解安徽部分地区规模鸡场鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)流行感染情况,试验采集21家鸡场鸡血液样品进行血清学调查,并对3家种鸡场的种鸡群及其后代雏鸡进行MG和MS的病原检测,分析种鸡及其后代雏鸡的感染情况。结果显示,MG和MS的鸡场血清阳性率分别为95.24%和90.48%,鸡群平均血清阳性率分别为75.08%和77.01%;商品蛋鸡和种鸡的MG和MS血清阳性率高于育雏育成鸡;鸡群日龄越大,MG和MS的血清阳性率越高,其中300日龄以上鸡群的血清阳性率均为100%。病原检测发现,种鸡场存在不同程度的MG和MS感染,其中MS感染率高于MG;种鸡感染率与其后代雏鸡的垂直感染存在显著正相关,并且在垂直感染的雏鸡关节组织检测出MS病原。结果表明,MG和MS在安徽鸡场中的感染较为严重,垂直传播是雏鸡早期感染的重要途径,并且MS在雏鸡垂直感染的早期即可侵入关节组织。 展开更多
关键词 安徽 规模鸡场 鸡毒支原体 鸡滑液囊支原体 血清学调查 垂直传播
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鸡毒支原体病诊断及疫苗研究进展 被引量:1
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作者 孙宇 李书光 +4 位作者 程立坤 赵家磊 赵修报 沈志强 余燕 《中国家禽》 北大核心 2024年第5期93-99,共7页
鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)可引起鸡慢性呼吸系统疾病(CRD)且传播途径广泛,易与其他病原合并继发感染导致死亡率升高,给养禽业带来了严重的经济损失,因此鸡毒支原体病的早期诊断和免疫显得尤为重要。文章对鸡毒支原体病... 鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)可引起鸡慢性呼吸系统疾病(CRD)且传播途径广泛,易与其他病原合并继发感染导致死亡率升高,给养禽业带来了严重的经济损失,因此鸡毒支原体病的早期诊断和免疫显得尤为重要。文章对鸡毒支原体病的临床症状、病原鉴定、血清学检测、分子生物学检测以及疫苗研发方面进行综述并分析其优缺点,为鸡毒支原体病的诊断及防控提供支持。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 诊断方法 疫苗
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鸡毒支原体 Taq Man实时荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 孙宇 苗立中 +6 位作者 程立坤 赵家磊 赵修报 沈志强 王敬茹 李书光 余燕 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期64-68,共5页
为快速检测鸡毒支原体,根据鸡毒支原体的保守基因设计特异性引物和Taq Man探针,建立鸡毒支原体Taq Man实时荧光定量PCR方法并分析鸡毒支原体培养过程中颜色单位改变法(color change unit,CCU)和荧光定量PCR检测的相关性。结果显示,标准... 为快速检测鸡毒支原体,根据鸡毒支原体的保守基因设计特异性引物和Taq Man探针,建立鸡毒支原体Taq Man实时荧光定量PCR方法并分析鸡毒支原体培养过程中颜色单位改变法(color change unit,CCU)和荧光定量PCR检测的相关性。结果显示,标准曲线y=-3.646x+44.208,相关系数R^(2)=0.998,最低检测限度为1 copy/μL;与其他菌株等均无交叉反应;组内和组间变异系数均小于3%,表明该方法具有良好的稳定性和可重复性。用建立的实时荧光定量PCR检测方法对26份临床样品进行检测,该方法较普通PCR方法检出率更高。建立的荧光定量PCR与CCU显示鸡毒支原体在对数生长期时,两者具有一定的对应关系。表明建立了鸡毒支原体Taq Man探针实时荧光定量PCR检测方法,可实现对鸡毒支原体的快速检测,为鸡毒支原体感染的防控提供技术基础。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 Taq Man探针 荧光定量PCR
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鸡毒支原体P31蛋白原核表达及膜定位鉴定
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作者 李梅 杨美 +6 位作者 岳筠 王柏林 宋春 朱二鹏 单春兰 文明 程振涛 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第4期85-90,共6页
为筛选鸡毒支原体(MG)膜蛋白,利用生物信息学软件对其进行序列分析后,选择不含跨膜区的714 bp基因片段作为靶标蛋白进行原核表达(因其分子量约31 kDa,故而命名为P31蛋白),表达P31蛋白并进行纯化后制备兔多克隆抗体,运用ELISA方法检测抗... 为筛选鸡毒支原体(MG)膜蛋白,利用生物信息学软件对其进行序列分析后,选择不含跨膜区的714 bp基因片段作为靶标蛋白进行原核表达(因其分子量约31 kDa,故而命名为P31蛋白),表达P31蛋白并进行纯化后制备兔多克隆抗体,运用ELISA方法检测抗体效价,提取MG液体培养物总蛋白、胞浆蛋白、膜蛋白,利用Western blot进行亚细胞定位。结果显示,P31蛋白具有跨膜结构和良好的B细胞抗原表位,原核表达后获取融合蛋白rP31,大小约为31 kDa,ELISA检测兔血清效价为1∶25600,Western blot分析显示,rP31蛋白分布在MG膜表面。本研究证实了P31蛋白确为MG膜蛋白且抗原性良好,可做为研发MG新型诊断方法、基因工程疫苗及治疗药物的候选蛋白。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 P31蛋白 原核表达 膜定位
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鸡毒支原体和滑液囊支原体双重LFD-RPA快速检测方法的建立
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作者 田兴苗 王健霖 +3 位作者 郭磊 司朵朵 龚振兴 李继东 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期117-124,共8页
【目的】鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是对家禽危害最大的两种支原体,MG、MS的早期诊断是预防和控制禽支原体的关键环节。通过将重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase ampli... 【目的】鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是对家禽危害最大的两种支原体,MG、MS的早期诊断是预防和控制禽支原体的关键环节。通过将重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)和测流层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)相结合,建立一种操作便捷、反应快速、结果可视化、可同时检测MG、MS两种病原的快速检测方法。【方法】基于MG的mgc2基因、MS的vlhA基因设计特异性引物和探针,优化反应时间、反应温度及引物配比建立双重LFD-RPA快速检测方法,评价其灵敏度、特异性、稳定性,同时对120份临床样品进行检测。【结果】双重LFD-RPA检测方法在37℃下反应5-10min即可完成扩增,其RPA-MG-F2/R2、RPA-MS-F1/R1最佳引物配比为0.6∶1.4。MG、MS的最低检出限分别为3.75 copies/μL、3.46 copies/μL。用该方法与OIE推荐的PCR方法对120份样品进行检测,二者符合率为93.3%。【结论】MG、MS双重LFD-RPA检测方法在恒温条件下即可完成扩增,其操作简单、反应快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好,无需使用任何仪器即可观察到结果,适用于基层MG、MS单独感染或混合感染的现场快速检测。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 滑液囊支原体 重组酶聚合酶扩增技术 测流层析试纸条
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福建省2018-2019年非免疫鸡群鸡毒支原体血清学调查
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作者 周峰 王晨燕 +1 位作者 郭锦玥 侯博 《福建畜牧兽医》 2024年第1期1-4,共4页
为了了解和掌握鸡毒支原体(Mycoplasma galliscepticum,MG)在福建省近年的感染情况,本研究采用商品化ELISA抗体检测试剂盒对2018-2019年福建地区的21个鸡群、916份非免疫鸡群血清样品进行MG抗体检测,并统计分析MG在福建省感染流行情况... 为了了解和掌握鸡毒支原体(Mycoplasma galliscepticum,MG)在福建省近年的感染情况,本研究采用商品化ELISA抗体检测试剂盒对2018-2019年福建地区的21个鸡群、916份非免疫鸡群血清样品进行MG抗体检测,并统计分析MG在福建省感染流行情况。调查结果发现,2018-2019年福建地区非免疫鸡群的MG抗体总阳性率为69.43%(636/916),而检测的21个鸡群中,群体MG抗体阳性率为90.48%,其中阳性率0%~20%的有4个,21%~50%的有4个,51%~100%的有13个。育雏阶段(1~42日龄)鸡群MG抗体阳性率就高达37.10%,并且发现产蛋开始至淘汰阶段MG抗体阳性率为77.61%,MG抗体阳性率是育雏阶段的2倍以上。福建省蛋鸡和种鸡群MG感染率分别为79.22%和75.22%,并无显著差异。通过福建地区未免疫鸡群的MG抗体调查,发现MG在福建省内感染普遍,表明病原在鸡群中存在水平传播,同时种鸡群也存在着严重的MG感染,这为垂直传播提供可能。本研究通过调查福建省内MG在鸡群中的感染情况,为掌握MG在鸡群中的感染情况并采取防控措施降低鸡群MG感染率提高防治效果奠定基础。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 血清学 流行病学调查 酶联免疫吸附试验
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口服太子参皂苷对鸡免疫功能和炎症反应的影响
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作者 廖丽华 郑娱 +3 位作者 许高琳 陈沛予 马玉芳 王全溪 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期980-990,共11页
【目的】旨在研究口服太子参皂苷(RP)对鸡免疫功能和炎症反应的影响,为使用RP作为免疫增强剂提供科学依据,对家禽养殖业的疾病预防和健康维护具有实际应用价值。【方法】试验以鸡毒支原体(MG)抗原、抗体均为阴性的30日龄健康河田鸡为研... 【目的】旨在研究口服太子参皂苷(RP)对鸡免疫功能和炎症反应的影响,为使用RP作为免疫增强剂提供科学依据,对家禽养殖业的疾病预防和健康维护具有实际应用价值。【方法】试验以鸡毒支原体(MG)抗原、抗体均为阴性的30日龄健康河田鸡为研究对象,根据初始体质量平均分为5组,空白组不给药及疫苗,疫苗对照组口服灭菌生理盐水7 d后免疫MG弱毒疫苗,100,20,5 mg/kg RP试验组分别连续口服RP 7 d后免疫MG弱毒疫苗,一免后28 d进行二免,试验期49 d。采用间接ELISA法检测血清中MG特异性抗体消长规律及抗体阳性率和细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-1α、CCL4、IL-17A、IL-6)含量。【结果】(1)RP组与疫苗对照组相比,口服RP能有效提高一免及二免后7 d的MG特异性抗体滴度及抗体阳性率(P<0.05),其中以RP高剂量(100 mg/kg)效果最佳。(2)细胞因子表达水平中,与疫苗对照组相比,RP高剂量(100 mg/kg)和中剂量(20 mg/kg)组血清中免疫因子(IFN-γ、IL-4、IL-5)的含量在一免后3 d呈现显著上升(P<0.05),一免后7 d无明显差异;(3)与疫苗对照组相比,RP组炎症细胞因子(IL-1α、CCL4、IL-17A、IL-6)血清中的含量显著降低(P<0.05),高剂量组(100 mg/kg)下降最为显著。【结论】首免前口服太子参皂苷(RP)能够提高河田鸡的免疫功能,并降低由MG弱毒疫苗引起的炎症反应,其中100 mg/kg RP效果最佳。 展开更多
关键词 太子参皂苷 鸡毒支原体弱毒疫苗 免疫功能 细胞因子
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1株鸡毒支原体的分离鉴定及致病性研究
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作者 张伯顺 卜德新 +5 位作者 吕虹雨 黄冬 王睿智 于春梅 王进江 丛雁方 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第3期50-56,共7页
为了对1株从鸡场分离到的鸡毒支原体(MG)进行遗传进化分析及致病性研究。用MG的16S rRNA引物对山东省莱西市某鸡场疑似MG感染的气囊病料进行了PCR鉴定,结果可扩增到特异性条带。通过病原分离培养、16S rRNA基因测序比对获得MG分离株,命... 为了对1株从鸡场分离到的鸡毒支原体(MG)进行遗传进化分析及致病性研究。用MG的16S rRNA引物对山东省莱西市某鸡场疑似MG感染的气囊病料进行了PCR鉴定,结果可扩增到特异性条带。通过病原分离培养、16S rRNA基因测序比对获得MG分离株,命名为SDMg01株;低倍显微镜观察到,菌落呈典型的“荷包蛋”状;生化鉴定结果表明,该分离株能发酵葡萄糖,不水解精氨酸,不利用尿素。对分离株16S rRNA序列进行MEGA分析和构建系统进化树发现SDMg01分离株与其他MG菌株在同一进化分支上,其中与MG参考菌株(PG31)相似性为99.8%。对分离株SDMg01进行动物试验,感染8周龄的SPF鸡14 d后进行解剖,观察临床症状及气囊病理学变化;结果表明,SDMg01分离株致病性较强,可引起典型的气囊炎。本研究为MG诊断试剂的研制和疫苗候选毒株的筛选奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 16S rRNA 系统进化树 致病性
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禽多病因气囊炎病原的分离鉴定及耐药性分析
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作者 韩倩 尤欣 +4 位作者 郭思桃 姜瑞丽 钱雪桥 王永强 刘佳旭 《安徽农业科学》 CAS 2024年第11期85-88,共4页
为了解广东省四会地区某鸡场多病因气囊炎的主要致病菌及其耐药情况。采用形态学鉴定、16S rRNA基因测序等方法对分离株进行鉴定,选取3种常用抗生素进行药物敏感性试验,进行耐药性研究。结果表明:第1株分离株菌落呈典型的“荷包蛋”状,... 为了解广东省四会地区某鸡场多病因气囊炎的主要致病菌及其耐药情况。采用形态学鉴定、16S rRNA基因测序等方法对分离株进行鉴定,选取3种常用抗生素进行药物敏感性试验,进行耐药性研究。结果表明:第1株分离株菌落呈典型的“荷包蛋”状,第2株分离株为革兰氏阴性杆菌,第3株分离株为革兰氏阳性球菌,经16S rRNA基因测序比对分析,3种病原的同源性均在99%以上,确定多病因气囊炎的主要致病菌为鸡毒支原体、大肠埃希氏杆菌和金黄色葡萄球菌,分别命名为SH-MG株、SH-E株和SH-S株。药物敏感性结果表明,SH-E株对阿莫西林、氟苯尼考和泰妙菌素产生了耐药性,SH-S株对阿莫西林产生了耐药性,SH-MG株对泰妙菌素敏感。说明禽多病因气囊炎很可能是金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和鸡毒支原体共同感染造成的,其中大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对一些常用的抗生素表现出耐药性,泰妙菌素是防治鸡毒支原体感染的首选药物。 展开更多
关键词 禽多病因气囊炎 分离鉴定 耐药性 鸡毒支原体 禽致病性大肠杆菌 金黄色葡萄球菌
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鸡毒支原体抗体间接ELISA检测技术的应用
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作者 果磊 关晓辉 《科技创新与应用》 2024年第13期64-67,共4页
该文主要探究ELISA检测试剂盒在鸡毒支原体检测中的应用。使用血清样品、鸡毒支原体菌株和SPF鸡等作为实验材料,分别进行灵敏性实验、重复性实验、抗体持续期检测、临床样品检测准确性检测和保存期实验。结果表明,ELISA试剂盒的灵敏性较... 该文主要探究ELISA检测试剂盒在鸡毒支原体检测中的应用。使用血清样品、鸡毒支原体菌株和SPF鸡等作为实验材料,分别进行灵敏性实验、重复性实验、抗体持续期检测、临床样品检测准确性检测和保存期实验。结果表明,ELISA试剂盒的灵敏性较好;重复性实验的稳定性达到预期;鸡在接种弱毒性疫苗后的35 d内,血清中抗体水平有明显上升;临床样品检测准确性较高;在保存期320 d内,ELISA试剂盒内试剂的敏感性和特异性良好。分析可得,使用ELISA试剂盒测试血清中的鸡毒支原体是可行的,并且具有操作简便、成本较低、效率较快的优势。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 ELISA检测 灵敏性试验 重复性实验 抗体持续期监测
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不同地区鸡毒支原体的分离鉴定及药物敏感性研究 被引量:2
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作者 魏津 王甲 +5 位作者 赵浩然 刘博 刘元杰 姚文生 刘燕 马欣 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期368-376,共9页
【目的】了解中国不同地区鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的流行和耐药情况,为禽支原体病的监测与防控提供科学依据。【方法】在广东、福建和安徽3个省份疑似MG感染的养殖场采集的43份气囊样品中分离培养和纯化MG流行菌株,并... 【目的】了解中国不同地区鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的流行和耐药情况,为禽支原体病的监测与防控提供科学依据。【方法】在广东、福建和安徽3个省份疑似MG感染的养殖场采集的43份气囊样品中分离培养和纯化MG流行菌株,并对其进行培养特性观察、生化及染色鉴定、血清学特异性鉴定、PCR测序分析、致病性试验和对常见抗菌药物敏感性试验。【结果】分离到3株疑似MG,均可使培养基颜色变黄,在固体培养基上呈典型“煎蛋”样菌落,可发酵葡萄糖,不水解精氨酸,不能利用尿素,符合MG培养特性。姬姆萨染色观察菌体形态、血清学特异性鉴定结果进一步证实分离株为MG。mgc2基因测序结果显示,3株分离株与强毒代表株亲缘关系更近。致病性试验结果显示,3株分离株与MG感染临床症状一致,发病率为70%~90%,致病力较强。药物敏感性试验结果显示,3株分离株均对恩诺沙星、替米考星、土霉素、氟苯尼考耐药,对泰万菌素和沃尼妙林均敏感,对大观霉素、金霉素、泰乐菌素和泰妙菌素的敏感性具有地域差异:福建株对大观霉素表现明显耐药,安徽株对泰妙菌素表现耐药,而广东株对大观霉素、金霉素和泰妙菌素均较敏感。【结论】本试验成功分离到3株MG,致病力较强,且均存在一定程度耐药,对药物的敏感程度有地区性差异,今后仍需加强各地区MG的药物敏感性监测,减少耐药性的产生与扩散。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 分离鉴定 药物敏感性试验
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检测鸡毒支原体抗体的间接ELISA方法和HI试验方法的建立及初步应用 被引量:3
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作者 陈杨 孟林春 +6 位作者 郭梦娇 张成成 薄宗义 楚电峰 曹永忠 吴艳涛 张小荣 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期2062-2072,共11页
本研究旨在建立一种检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)抗体的间接ELISA方法,结合HI试验,为MG感染的监测和净化提供一套有效的组合技术方案。以原核表达的VlhA 3.03重组蛋白(rVlhA)作为包被抗原,使用单一稀释法构建了关于血... 本研究旨在建立一种检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)抗体的间接ELISA方法,结合HI试验,为MG感染的监测和净化提供一套有效的组合技术方案。以原核表达的VlhA 3.03重组蛋白(rVlhA)作为包被抗原,使用单一稀释法构建了关于血清抗体滴度与1∶500血清稀释度处S/P值的回归方程lg(抗体滴度)=1.257×lg(1∶500处S/P值)+3.709,R^(2)=0.9176,S/P临界值为0.32,临界滴度是1200。经验证,rVlhA-ELISA方法具有良好的特异性、重复性,最低能检出1∶2000稀释的阳性血清。选择国内MG分离株SH/2020-1作为血凝抑制抗原建立HI试验方法。使用rVlhA-ELISA方法联合HI试验进行血清样品检测,IDEXX-MG方法作为对照,借助RT-qPCR方法监测MG感染情况。结果表明rVlhA-ELISA方法和IDEXX-MG监测的血清抗体趋势与HI复核结果均一致;rVlhA-ELISA与HI联合判定结果与IDEXX-MG符合率可达91.53%。上述结果显示,本研究建立的rVlhA-ELISA方法和HI试验具有较好的临床应用价值,可以初步应用于MG感染的临床大规模、快速筛查并对结果进行复核。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 VlhA蛋白 抗体检测 间接ELISA
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鸡毒支原体PstS蛋白的原核表达及其定位
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作者 宋春 杨美 +3 位作者 岳筠 单春兰 王开功 程振涛 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第3期344-350,共7页
通过SOE-PCR技术获得PstS基因全长并克隆到pColdⅠ,将重组表达载体pCold-PstS转化进BL21(DE3)后经IPTG诱导表达融合蛋白PstS,将其纯化后免疫新西兰兔制备多克隆兔抗血清,提取鸡毒支原体总蛋白、膜蛋白和胞浆蛋白,通过Western blot分析P... 通过SOE-PCR技术获得PstS基因全长并克隆到pColdⅠ,将重组表达载体pCold-PstS转化进BL21(DE3)后经IPTG诱导表达融合蛋白PstS,将其纯化后免疫新西兰兔制备多克隆兔抗血清,提取鸡毒支原体总蛋白、膜蛋白和胞浆蛋白,通过Western blot分析PstS蛋白的亚细胞定位.结果表明,PstS基因长度为1065 bp,其蛋白在氨基酸9~31之间存在跨膜区,pCold-PstS经诱导表达获得融合蛋白PstS(存在于细胞膜和胞浆中),其约43 ku并具有较好的抗原性.PstS蛋白是鸡毒支原体膜表面的免疫原性蛋白,可为进一步研究其生物学功能和基因工程疫苗提供依据. 展开更多
关键词 鸡毒支原体 PstS基因 原核表达 亚细胞定位
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麻杏石甘口服液治疗肉鸡感染鸡毒支原体的效果评价
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作者 雷亚萍 周世伟 +6 位作者 滕雨萌 农碧丹 庞晓敏 张诣 刘晓丽 王玉莲 胡薛英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5264-5274,共11页
旨在验证麻杏石甘口服液对人工感染鸡毒支原体治疗效果。将87只1日龄健康鸡按常规饲养至20日龄,随机分为感染对照组、空白对照组和治疗组。空白对照组正常饲喂,不感染。感染对照组和治疗组的试验鸡通过滴鼻、点眼、气囊注射鸡毒支原体M1... 旨在验证麻杏石甘口服液对人工感染鸡毒支原体治疗效果。将87只1日龄健康鸡按常规饲养至20日龄,随机分为感染对照组、空白对照组和治疗组。空白对照组正常饲喂,不感染。感染对照组和治疗组的试验鸡通过滴鼻、点眼、气囊注射鸡毒支原体M17菌液共1.5 mL(109 CCU·mL^(-1)),1次·d^(-1),连续感染4 d。在感染的第5天(D1),治疗组经每升水1.5 mL麻杏石甘口服液饲喂治疗,连用5 d,停药后观察6 d。观察给药前1 d(D0)~D11各组鸡的呼吸、咳嗽、流涕、甩鼻、采食和精神状态等临床症状并进行评分,计算临床症状总评分、痊愈率、有效率和无效率。于D0和D12称量试验鸡体重,计算平均增重。分别于D2、D6、D12,每组剖检试验鸡6只,观察肺和气囊病理变化,并采集肺进行组织病理学观察。结果显示:治疗组临床症状总评分在D3开始明显降低(P<0.05);治疗组在D2、D6、D12,肺和气囊病变评分均显著低于感染对照组(P<0.05),肺的组织病理学病变评分也显著低于感染对照组(P<0.05),空白对照组未见异常;治疗组的痊愈率为76.5%,有效率94.1%,无效率为5.9%。感染对照组和治疗组的平均增重显著低于空白对照组(P<0.05)。麻杏石甘口服液可明显改善肉鸡气囊和肺组织病理损伤,对人工感染鸡毒支原体的肉鸡有较好的治疗效果。 展开更多
关键词 麻杏石甘口服液 鸡毒支原体 治疗
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鸡传染性支气管炎·H9亚型禽流感病毒与鸡毒支原体混合感染的诊治 被引量:1
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作者 江晓阳 王艳 +5 位作者 刘俊镛 刘旭 高亚东 孙景煜 张越 尹建华 《安徽农业科学》 CAS 2023年第4期73-76,共4页
通过病理学解剖、细菌分离与培养、病毒分离鉴定、动物回归试验和分子生物学检测,对山东省日照市某发病鸡场5只病死鸡进行诊断。病理学剖检显示,病鸡支气管栓塞,气管喉头出血,肺出血水肿、颜色发黑,输尿管有尿酸盐沉积,气囊增厚、有干... 通过病理学解剖、细菌分离与培养、病毒分离鉴定、动物回归试验和分子生物学检测,对山东省日照市某发病鸡场5只病死鸡进行诊断。病理学剖检显示,病鸡支气管栓塞,气管喉头出血,肺出血水肿、颜色发黑,输尿管有尿酸盐沉积,气囊增厚、有干酪物渗出;从发病鸡组织中未分离出细菌;分子生物学检测结果发现,鸡传染性支气管炎病毒、鸡毒支原体和H9亚型禽流感病毒检测结果均呈阳性。经初步推断,发病鸡群存在鸡毒支原体隐性感染,又继发感染鸡传染性支气管炎和H9亚型禽流感病毒,多种病原混合感染造成鸡只死亡。建议该鸡场加强鸡传染性支气管炎和H9亚型禽流感防控措施,投喂抗病毒类药物。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎 H9亚型禽流感 鸡毒支原体
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基于鸡毒支原体黏附素蛋白的表位疫苗制备及免疫效果评价
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作者 钟乐苗 刘秉珲 +1 位作者 吴春琳 吴异健 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5171-5183,共13页
旨在使用鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的黏附蛋白设计一种更安全、有效的多表位候选疫苗。本研究运用生物信息学方法对鸡毒支原体的多个黏附素蛋白(CrmA、GapA、Mgc2、PvpA)的B、T细胞表位进行预测。将筛选的抗原表位合成... 旨在使用鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的黏附蛋白设计一种更安全、有效的多表位候选疫苗。本研究运用生物信息学方法对鸡毒支原体的多个黏附素蛋白(CrmA、GapA、Mgc2、PvpA)的B、T细胞表位进行预测。将筛选的抗原表位合成新的表位基因肽段(命名为mEA)。通过生物学在线软件分析了mEA的二级结构、亲水性、抗原性、三级结构。构建重组质粒pET32a-MG-mEA,经限制性内切酶(BamHⅠ和HindⅢ)酶切鉴定及DNA测序鉴定后导入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达和纯化。Western blot验证重组蛋白与鸡MG阴性/阳性血清的反应性。纯化的MG-mEA重组蛋白与佐剂1∶1混匀,制备为多表位疫苗,通过SPF鸡免疫试验分析融合蛋白免疫原性。结果显示,mEA序列二级结构较稳定,抗原性良好。重组质粒经PCR扩增获得1680 bp大小的目的条带,与预计相符。SDS-PAGE检测表达蛋白相对分子质量约48 ku,主要以可溶性形式存在。Western blot试验证明该蛋白反应原性良好。多表位疫苗免疫SPF鸡,经ELISA检测显示:二免后10 d各免疫组抗体水平达到最高,3个重组蛋白免疫组与PBS组相比差异均具有显著统计学意义(P<0.05)。攻菌结果表明,MG感染明显损伤了气管黏膜结构,而重组蛋白+佐剂制备的疫苗能够有效保护MG的损伤。综上,本研究结果为研制安全有效的候选MG疫苗提供了新的途径。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 黏附素蛋白 多表位疫苗 原核表达 免疫研究
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