大麦籽粒中4种主要黄酮类化合物的HPLC测定方法研究

为给大麦主要黄酮类化合物含量的快速测定及开发利用提供依据,对利用高效液相色谱技术（HPLC）分离和同时测定大麦中黄酮类化合物儿茶素、杨梅素、槲皮素、山奈酚含量的方法进行了研究。结果表明,采用HPLC同时测定4种大麦黄酮类化合物的优化色谱条件为：YMC-Pack ODS AM-303（5μm,250 mm-4.6mmi.d.）色谱柱;流动相A-0.1%冰乙酸水溶液,B-乙睛,梯度洗脱;流速0.8 mL/min,进样量10μL。儿茶素、杨梅素、槲皮素、山奈酚分别在0.063-2.000μg（R^2=0.9999）、0.034-1.100μg（R^2=0.9998）、0.025-0.800μg（R^2=0.9993）、0.018-0.560μg（R^2=0.9995）成良好的线性关系,加样回收率分别为96.88%（RSD=1.30%）、98.30%（RSD=0.57%）、96.29%（RSD=1.20%）、101.59%（RSD=0.73%）。测定方法简便、快捷,结果准确、重复性好,可用于大麦4种主要黄酮类化合物的同时测定。

杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡诱导作用

目的:观察杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,按杨梅素给药浓度将细胞分为对照组和低、中、高浓度杨梅素组,杨梅素给药浓度分别为0、20、40和60mg·L-1。MTT法检测各组SKOV3细胞存活率;激光共聚焦显微镜观察各组SKOV3细胞核形态变化并计算异常细胞核比率;免疫荧光法检测各组SKOV3细胞中凋亡相关蛋白-活化半胱氨酸蛋白酶3(active Caspase-3)的表达;Western blotting法检测各组SKOV3细胞中DNA损伤相关蛋白γ-H2AX的表达水平。结果:与对照组比较,低、中和高浓度杨梅素组SKOV3细胞存活率明显下降(t=-12.35,t=-11.42,t=-10.21,P<0.05);激光共聚焦显微镜下各浓度杨梅素组细胞出现核皱缩等凋亡形态学改变,且细胞中异常细胞核比率高于对照组(t=6.87,t=9.35,t=7.22,P<0.05),高浓度杨梅素组异常细胞核比率高于低、中浓度杨梅素组(t=9.55,t=7.25,P<0.05);随着杨梅素给药浓度的增加,SKOV3细胞中active Caspase-3的表达水平有升高趋势,各浓度杨梅素组SKOV3细胞中γ-H2AX的表达水平高于对照组(t=5.41,t=3.21,t=6.58,P<0.05)。结论:杨梅素可抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导其凋亡,DNA双链断裂可能是其促凋亡的机制之一。

杨梅素分散片的制备及性能考查

目的：优化杨梅素分散片的处方，并对其相关性能进行考察。方法：首先以片剂外观和崩解时间为指标，初步筛选片剂基本处方，然后采用L9（3^4）正交试验设计法，以分散片的外观、体外溶出度及混悬性为指标，以综合评分法对处方进行优化，并采用紫外分光光度法分别对杨梅素分散片和普通片在不同时间内的溶出度进行了比较。结果：优化后的处方制得的分散片外观光洁。溶出度测定显示杨梅素分散片在15min和45min的溶出度分别达82．36％和93．14％，而杨梅素普通片在15min的累积溶出度仅为67．68％。结论：本制备工艺简单可行；杨梅素分散片与普通片相比，分散片起始溶出快，可较快地发挥药效作用。

杨梅素对小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞增殖的影响

目的:研究杨梅素体外对小鼠脾脏淋巴细胞增殖及腹腔巨噬细胞活化的影响。方法:取健康小鼠,MTT法检测杨梅素对小鼠脾淋巴细胞增殖的作用;中性红法测腹腔巨噬细胞吞噬活性;Griess试剂法测NO释放量;Elisa法测TNF-α、IL-1β和IL-4的含量。结果:杨梅素对未活化及丝裂原(Con A、LPS)活化的淋巴细胞增殖均有明显促进作用;可剂量依赖性地增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力和促进NO释放;促进RAW264.7细胞TNF-α、IL-1β产生,抑制IL-4的释放。结论:杨梅素可能通过促进小鼠脾淋巴细胞增殖和提高巨噬细胞吞噬及分泌功能,提高机体免疫功能。

含哌嗪酰胺类杨梅素衍生物的合成及生物活性

以杨梅苷、哌嗪和各种芳香酸为原料,通过甲基化保护羟基和脱苷形成选择性单一的杨梅素中间体,然后以三步取代反应连接哌嗪和芳香酸,合成了13个新型含哌嗪酰胺类杨梅素衍生物.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测试了化合物对人类乳腺癌细胞(MDA-MB-231)体外增殖的抑制活性.结果表明,大多数含哌嗪酰胺的杨梅素衍生物对MDA-MB-231细胞表现出较好的抑制活性.当浓度为1μmol/L时,化合物4a和4i的抑制活性均高于阳性对照药盐酸表阿霉素;当浓度为10μmol/L时,化合物4h和4i的抑制活性高达86.7%和83.6%.

HPLC法同时测定龙眼叶提取物中杨梅苷、紫云英苷和杨梅素的含量

[目的]建立同时测定龙眼叶提取物中杨梅苷、紫云英苷和杨梅素含量的HPLC法。[方法]Hypersil ODS-C_(18)(5μm,250 mm×4.6 mm),乙腈-0.15%甲酸水(29∶71)等度洗脱,检测波长355 nm,流速1 mL/min,柱温35℃。[结果]杨梅苷、紫云英苷和杨梅素分别在6.74~269.6 mg/L、7.183~287.3 mg/L和3.07~122.8 mg/L范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.43%、98.38%和97.33%。[结论]该方法准确、可靠,重复性好,可用于龙眼叶提取物的质量评价与控制标准。

雪松松针中总黄酮及4种指标成分的含量测定方法研究

目的：建立测定雪松松针中总黄酮及杨梅素、槲皮素、山柰酚和异鼠李素含量的方法。方法：采用紫外分光光度法,以芦丁为对照品,以硝酸铝[Al（NO3）3]显色,在510 nm处测定雪松松针中总黄酮的含量。采用高效液相色谱法同时测定雪松松针中杨梅素、槲皮素、山柰酚和异鼠李素的含量。色谱柱为Agilert TC-C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（梯度洗脱）,流速为1.0 ml/min,检测波长为360 nm,柱温为30℃,进样量为20μl。结果：芦丁的含量在45.8~549μg范围内与吸光度呈良好线性关系（r=0.999 3）;平均加样回收率为97.65%,RSD=1.37%（n=6）。杨梅素、槲皮素、异鼠李素的质量浓度在1~10μg/ml、山柰酚的质量浓度在4~40μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系（r≥0.999 2）,平均加样回收率分别为100.11%、97.63%、100.46%、102.11%,RSD分别为1.35%、1.49%、1.56%、1.51%（n=6）。雪松松针样品中总黄酮、杨梅素、槲皮素、山柰酚和异鼠李素的平均含量分别为81.9、0.229、0.503、0.843、0.297 mg/g。结论：本方法简便、准确、重复性好,可作为雪松松针中黄酮类物质的含量测定方法。

杨梅黄酮减弱MPP^+诱导的MES23.5细胞的细胞毒性(英文)

目的:探讨杨梅黄酮对MPP+处理的MES23.5细胞的保护作用。方法:实验分为空白对照组,MPP+处理组,MPP+和杨梅黄酮共处理组,分别处理MES23.5细胞24h后,应用Hoechst 33258染色观察各组细胞细胞核形态的改变,应用RT-PCR技术观察Bcl-2和Bax mRNA表达的改变。结果:杨梅黄酮能明显抑制MPP+引起的MES23.5细胞核固缩,核碎裂等形态学的改变,杨梅黄酮还可以对抗MPP+处理造成的MES23.5细胞的Bcl-2/Bax比率的降低。结论:杨梅黄酮对MPP+处理的MES23.5细胞具有保护作用。