超高效液相色谱-质谱联用技术快速检测二甲基甲酰胺职业接触者血红蛋白中新型生物标志物

建立了二甲基甲酰胺（N,N-dimethyl formamide,DMF）职业接触者血红蛋白中N-甲基氨甲酰加合物超高效液相色谱-质谱联用（UPLC/MS/MS）快速检测方法。准确称取0.1 g血红蛋白样品置于15 mL离心管中,加入40μmol/L3-甲基-异丁基海因（3-methy-5-isobutylhydantion,MIH）内标溶液250μL,再加入HCl-醋酸（2∶1,V/V）溶液4.75 mL,振荡混匀3 min。将试管置于沸水浴中加热降解1 h,取出冷却。混匀后取200μL到96孔板,加入600μL1%甲酸乙腈溶液,混匀。控制真空泵压力,使样品在2~4 min流出。将净化后样品混匀转移到样品瓶,用UPLC/MS/MS检测N-甲基氨甲酰加合物的降解产物3-甲基-异丙基乙内酸脲（3-Methyl-5-isopropylhydantoin,MVH）。质谱采集方式为多反应监测模式,内标法定量。结果表明,MVH浓度在0.01~1.0μmol/L范围内线性关系良好,相关系数为0.999。空白人群血红蛋白MVH加标回收率为97.3%,相对标准偏差为1.7%,血红蛋白中MVH检出限为0.01μmol/g。本方法能很好地应用于二甲基甲酰胺职业接触者血红蛋白中新型生物标志物N-甲基氨甲酰加合物的快速、准确测定。

血液中N-甲基氨甲酰加合物作为二甲基甲酰胺职业接触标志物可行性探讨

目的探讨血液中N-甲基氨甲酰加合物作为二甲基甲酰胺(DMF)职业接触标志物可行性。方法选择不同生产部门、不同DMF接触水平的职业人群87人,不接触DMF等有机溶剂的人员22人作为对照。气相色谱-质谱法测定N-甲基氨甲酰加合物经过一系列降解后的产物3-甲基-异丙基乙内酸脲(MVH)浓度。结果各类DMF职业接触人员血红蛋白中均检出了不同含量的MVH,而对照人群均未检出。血液中N-甲基氨甲酰加合物水平与DMF接触情况呈正相关。结论血液中N-甲基氨甲酰加合物有望成为反映DMF长期接触的标志物。

二甲基甲酰胺职业接触者血中N-甲基氨甲酰加合物的测定

目的建立二甲基甲酰胺(DMF)职业接触者血中N-甲基氨甲酰加合物(NMHb)的测定方法。方法收集DMF职业接触人群血液,用分子生物技术提取法制备成血红蛋白粉末。经降解、提取等处理后,用GCMS测定血中NMHb的降解产物3-甲基-5-异丙基乙内酰脲(MVH)的水平。结果当MVH浓度在5~300μmol/L范围内,与峰面积呈线性相关,其相关系数为0.9992,平均加标回收率为92.13%~97.44%,相对标准偏差为3.78%~4.97%,检出限和定量下限分别为0.1和0.33μmol/L。结论该方法的各项性能指标都符合GBZ/T 201.5—2008,能很好地应用于二甲基甲酰胺职业接触者血中N-甲基氨甲酰加合物的测定。

二甲基甲酰胺职业接触对作业工人氧化或抗氧化状态的影响

目的 探讨职业接触二甲基甲酰胺（DMF）对作业工人氧化或抗氧化状态的影响.方法 2012年5月选取某DMF生产企业104名DMF接触工人和101名对照作为研究对象,调查职业史、年龄、性别、吸烟和饮酒等信息.测定车间空气中DMF浓度.采用血红蛋白N-甲基氨甲酰加合物（NMHb）水平作为内剂量标志物,结果以NMHb降解产物3-甲基-异丙基乙内酸脲（MVH）水平表示;测定血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平反映肝功能;测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）活力、谷胱甘肽-S转移酶（GST）活性、丙二醛（MDA）水平、3-硝基酪氨酸（3-NT）水平反映机体氧化或抗氧化状态.结果 工作岗位作业场所空气中DMF浓度在3.3～ 12.4 mg/m3范围内,并未超过国家标准.接触组MVH水平为（19.69±12.52） mg/kg,对照组未检出.接触组血清SOD活力为（125.30 ±21.23） U/ml,高于对照组[（118.35 ±18.48）U/ml,￡=-2.47,P=0.014].SOD活力随MVH水平的增加,表现出不同的变化趋势.当MVH≤24 mg/kg时,SOD活力随MVH水平的增加而增加（r =0.356,P=0.002）;而当MVH＞ 24 mg/kg时,SOD活力随MVH水平的增加反而出现了降低的趋势（r=-0.260,P =0.150）.两组人群MDA、GST、3-NT、ALT、AST的差异无统计学意义.结论 较低的DMF暴露浓度对机体的抗氧化系统存在一定程度的刺激作用,在机体能够代偿防御的范围内,并未造成明显的脂质/蛋白的过氧化损伤.

职业接触二甲基甲酰胺血液生物标志物研究

目的探讨二甲基甲酰胺(DMF)职业接触人群血液生物标志物。方法选择某皮革厂DMF职业接触人群99人为接触组,不接触DMF及其他有机溶剂的人员22人作为对照组。测定两组人群血液中N-甲基氨甲酰加合物、尿中甲基甲酰胺(NMF)、尿中巯基尿酸(AMCC)3个指标。对上述3个指标的相关性进行探讨。结果随着DMF职业接触浓度的增加,上述3个指标测定结果逐步升高。Spearman等级相关分析表明,3项指标间存在着明显的相关性(P<0.01)。结论血液中N-甲基氨甲酰加合物可作为反映DMF长期接触的标志物。