人宫颈癌中CPE△N的表达及对肿瘤细胞增殖迁移功能的影响

目的:探讨N端截短的羧肽酶E(N-terminal truncated carboxypeptidase E,CPE△N)在人宫颈癌中的表达情况及其对肿瘤细胞增殖迁移功能的影响。方法:采用qRT-PCR方法检测35例宫颈癌患者肿瘤组织中CPE△N的表达水平,同时检测CPEΔN高表达组肿瘤细胞增殖和迁移功能并进行相关分析。结果:宫颈癌患者肿瘤组织CPEΔN mRNA/18sRNA比值平均为2.01±0.65,显著高于对照组,其高表达情况与细胞迁移功能具有显著相关(P<0.05)。结论:宫颈癌组织中CPE△N过表达并促进肿瘤细胞的迁移,由此推断CPE△N极有可能作为宫颈癌患者病情发展和预后评价的生物标志物。

筛选高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株

背景与目的 N端截短的羧肽酶E(N-terminal truncated carboxypeptidase E,CPEΔN)是一个新的肿瘤转移相关蛋白。本研究旨在筛选高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株,为完成小鼠活体成像实验创造条件。方法构建CPEΔN的慢病毒表达载体。分别用CPEΔN慢病毒表达载体或对照慢病毒空载体转染H1299细胞,2μg/m L的嘌呤霉素加压筛选。Western blot分析CPEΔN蛋白的表达,荧光素酶报告基因实验分析荧光素酶对底物的分解作用。结果当感染倍数(multiple of infection,MOI)是20时,慢病毒对H1299细胞的转染效率可以达到80%。CPEΔN高表达H1299细胞株(H1299-CPEΔN)和对照慢病毒载体表达H1299细胞株(H1299-control)中CPEΔN蛋白的表达量为4:1。H1299-CPEΔN和H1299-control均能够有效分解荧光素酶底物,可以满足活体成像实验的需求。结论筛选出高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株,为活体成像实验的开展创造了条件,也为进一步解释CPEΔN促进肿瘤转移的分子机制奠定了基础。