期刊文献+
共找到10篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
小反刍兽疫N5蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立 被引量:4
1
作者 刘斌 陈晓宇 +5 位作者 牟筱 黄银君 牟克斌 祁光宇 许涛 胡永浩 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期1-6,共6页
【目的】建立一种适用于PPRVN蛋白抗体的间接ELISA检测方法,应用于PPR防疫.【方法】根据GenBank中登录小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列进行人工合成,设计1对特异引物对N5基因扩增,经测序分析后将N5基因片段和原核表达载体p... 【目的】建立一种适用于PPRVN蛋白抗体的间接ELISA检测方法,应用于PPR防疫.【方法】根据GenBank中登录小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列进行人工合成,设计1对特异引物对N5基因扩增,经测序分析后将N5基因片段和原核表达载体pET-32a(+)相连接,成功构建pET-32a-N5质粒.将pET-32a-N5转化于TransB(DE3)原核表达感受态细胞后用IPTG诱导表达获得重组蛋白,经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定,重组蛋白分析具有良好的反应原性.【结果】利用原核表达纯化的PPRV N重组蛋白作为包被抗原,初步建立了一种能够检测针对PPRV N蛋白抗体的间接ELISA方法.用建立的方法对112山羊份血清进行了抗体检测,该方法与竞争ELISA试剂盒对比,临床符合率94.8%.【结论】该方法具有较好的敏感性、重复性和特异性. 展开更多
关键词 小反刍兽疫 n5基因 间接酶联免疫吸附试验
下载PDF
内皮型一氧化氮合酶和N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与苏皖地区汉族人群早发冠心病易感性的相关关系 被引量:1
2
作者 蒋健刚 刘俊 陈金国 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期463-468,共6页
目的探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因第7外显子G894T突变和N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T突变与苏皖地区汉族人群早发冠心病(PCAD)发病的关系。方法采用病例对照研究的方法,应用聚合酶链反应-限制性片长多态性(PCR-RF... 目的探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因第7外显子G894T突变和N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T突变与苏皖地区汉族人群早发冠心病(PCAD)发病的关系。方法采用病例对照研究的方法,应用聚合酶链反应-限制性片长多态性(PCR-RFLP)技术,分别检测131例PCAD患者(PCAD组)和131例年龄、性别相匹配的无冠心病者(对照组)的eNOS和MTHFR基因的单核苷酸多态性,判定其基因型并统计各基因型及等位基因的频率。结果 eNOS基因G894T多态性在PCAD组和对照组中的基因型分布(χ2=2.072,P=0.355)和T等位基因频率(χ2=0.727,P=0.394)差异均无统计学意义。MTHFR基因C677T基因型在PCAD组CT和TT型分布均高于对照组(χ2=14.290,P=0.001),T等位基因频率亦高于对照组(χ2=16.339,P=0.000),差异有显著性(P<0.05)。Logistic回归分析显示,携带MTHFR基因C677T TT基因型是PCAD发病的独立危险因素。结论eNOS基因G894T多态性可能与苏皖地区汉族人群PCAD发病无关;MTHFR基因677C/T多态性的TT基因型可能增加苏皖地区汉族人群PCAD的患病风险,T等位基因可能是PCAD的遗传易感基因。 展开更多
关键词 内皮型一氧化氮合酶 n5 N10-亚甲基四氢叶酸还原酶 基因多态性 早发冠心病
下载PDF
N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与冠心病合并2型糖尿病的相关性研究 被引量:1
3
作者 何伟喜 刘鹃锋 +1 位作者 刘志辉 王平 《中国当代医药》 2018年第31期41-43,共3页
目的探讨N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与冠心病合并2型糖尿病的相关性。方法选取2017年1月~2018年9月我院收治的90例冠状动脉造影患者作为研究对象,其中正常者30例作为对照组,冠心病患者33例作为A组,冠心病合并2型糖尿病患... 目的探讨N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与冠心病合并2型糖尿病的相关性。方法选取2017年1月~2018年9月我院收治的90例冠状动脉造影患者作为研究对象,其中正常者30例作为对照组,冠心病患者33例作为A组,冠心病合并2型糖尿病患者27例作为B组,均行N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与生化指标(总胆固醇、三酰甘油、空腹血糖、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇)检测。结果 A组患者总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇高于对照组(P<0.05);A组患者高密度脂蛋白胆固醇低于对照组(P<0.05);B组患者总胆固醇、三酰甘油、空腹血糖、低密度脂蛋白胆固醇高于A组和对照组(P<0.05);B组患者高密度脂蛋白胆固醇低于A组和对照组(P<0.05);对照组患者基因型为CC(95.0%)、CT(5.0%)、TT(0.0%),A组患者基因型为CC(68.8%)、CT(25.0%)、TT(6.2%),B组患者基因型为CC(27.8%)、CT(38.9%)、TT(33.3%),三组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);对照组患者C等位基因频次>A组患者C等位基因频次>B组患者C等位基因频次(P<0.05)。结论 N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与冠心病合并2型糖尿病的关系密切。TT基因型越多,冠心病合并2型糖尿病的患病风险越高。 展开更多
关键词 n5 N10-亚甲基四氢叶酸还原酶 基因多态性 冠心病 2型糖尿病 相关性
下载PDF
Variation and evolution of NP genes of human avian H_5N_1 virus strains
4
作者 PING HUANG CHANG WEN KE HUI LI LI RONG ZOU LING FANG QIU XIA CHEN YAN LING MO FENG DENG 《Journal of Microbiology and Immunology》 2007年第1期40-45,共6页
In order to reveal variation and revolution of NP genes of human avian H5 N1 influenza virus strains, the NP gene of a human avian H5 N1 influenza virus strain in Guangdong was sequenced and the global NP genes of str... In order to reveal variation and revolution of NP genes of human avian H5 N1 influenza virus strains, the NP gene of a human avian H5 N1 influenza virus strain in Guangdong was sequenced and the global NP genes of strains were retrieved. The sequences were analyzed by DNAStar 5.0, and the evolutionary speed was studied with reference to the epidemiological data. It was found that NP genes of 45 strains during 1997-2006 were homologically classified into three groups: strains in 1997-1998, strains in 2004-2005 and strains from 2003 to 2006. There were 35 substitutions in NPs in all strains accounting for a ratio of 7.03% (35/498). An additional glycoprotein domain (NGT430-432) was found in NP genes in the strains of 2003-2006, the mutation of N370S in GD-01-06 resulted in occurrence of one more glycoprotein domain (NES368-370). In the synonymous variation, Ks values in NP were 2.03 × 10^-5-2.55 × 10^-5 Nt/d and K. values in NP were 1.58 × 10^-6-3.10 × 10^-6 Nt/d. There didn't exist obviously selective pressure. An additional glycoprotein domain in every strain of 2003-2006 and one more in strain GD-01-06 might change the antigenicity of human avian H5 N1 influenza virus. The variation on human avian H5 N1 influenza strains occurred frequently in the natural world, which would result in high probability of human-human transmission along with the natural evolution of the virus. 展开更多
关键词 Human avian influenza H5 N1 virus NP gene Evolution
下载PDF
纤维蛋白原β基因148C/T及亚甲基四氢叶酸还原酶基因677C/T多态性与脑梗死的关系研究 被引量:7
5
作者 李永杰 霍阳 +3 位作者 高旭光 滕智平 任正洪 潘凯枫 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2005年第6期363-367,372,共6页
目的探讨纤维蛋白原(Fg)β基因148(β148)C/T及亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)677C/T多态性与脑梗死易感性的关系。方法按年龄、性别、有无高血压病史及糖尿病史选取相匹配的病例组及对照组各100例,利用聚合酶链反应-变性高效液相色谱... 目的探讨纤维蛋白原(Fg)β基因148(β148)C/T及亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)677C/T多态性与脑梗死易感性的关系。方法按年龄、性别、有无高血压病史及糖尿病史选取相匹配的病例组及对照组各100例,利用聚合酶链反应-变性高效液相色谱法(PCR-DHPLC)确定Fgβ148及MTHFR 677基因型。结果大动脉粥样硬化组(TOAST分型)及相应对照组Fgβ148 CC、CT/TT基因型分布差异有显著性(P=0.035),余各组两个多态位点的基因型分布差异无显著性。吸烟或饮酒的FgβCT/TT基因型携带者在病例组和对照组的分布差异有显著性(均P<0.05)。结论Fgβ148 CT/TT基因型可能是大动脉粥样硬化性脑梗死的危险因素,携带FgβCT/TT基因型同时吸烟或饮酒可能是脑梗死的危险因素。 展开更多
关键词 脑梗死 纤维蛋白原β基因 亚甲基四氢叶酸还原酶基因 多态性
下载PDF
MTHFR C677T和CBS G919A基因突变与青年缺血性脑卒中的相关性研究 被引量:5
6
作者 张健 卜淑霞 +1 位作者 张静 南光贤 《吉林医学》 CAS 2007年第6期727-729,共3页
目的:探讨同型半胱氨酸血症、同型半胱氨酸(Hcy)代谢关键酶N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)及胱硫醚β合成酶(CBS)基因突变与青年缺血性脑卒中的关系。方法:采用病例对照分析方法,以高效液相色谱法测定受试者空腹及负荷后血浆Hcy水... 目的:探讨同型半胱氨酸血症、同型半胱氨酸(Hcy)代谢关键酶N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)及胱硫醚β合成酶(CBS)基因突变与青年缺血性脑卒中的关系。方法:采用病例对照分析方法,以高效液相色谱法测定受试者空腹及负荷后血浆Hcy水平,采用聚合酶链-限制性内切酶片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和扩增阻滞突变体系法,对100例青年缺血性脑卒中患者和100例对照者的MTHFR基因C677T位点和CBS基因G919A位点进行检测。结果:MTHFR C677T基因检测病例组和对照组基因型分布、纯合子频率和等位基因频率差异均有统计学意义(P<0.05)。CBS G919A基因检测病例组和对照组基因型分布、纯合子频率和等位基因频率差异均无统计学意义(P(0.05)。结论:MTHFR C677T和CBS G919A突变均导致血浆Hcy浓度明显增高。MTHFR C677T多态性位点是青年缺血性脑卒中的独立危险因子。CBS G919A基因突变与青年缺血性脑卒中发病无相关性。 展开更多
关键词 n5 N10-亚甲基四氢叶酸还原酶 胱硫醚Β合成酶 基因突变 青年 缺血性脑卒中
下载PDF
小反刍兽疫病毒N基因部分片段克隆表达及鉴定 被引量:2
7
作者 祁光宇 刘斌 +5 位作者 陈晓宇 王赛错 苟慧天 黄银君 穆克斌 刘学荣 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期86-90,共5页
根据GenBank中登录小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列进行人工合成,在此基础上设计2对特异引物分别对N1、N5基因扩增和对N1和N5基因进行搭桥PCR连接,经测序分析后将N1-N5基因片段和原核表达载体pET-32a(+)相连接,构建pET-32a... 根据GenBank中登录小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列进行人工合成,在此基础上设计2对特异引物分别对N1、N5基因扩增和对N1和N5基因进行搭桥PCR连接,经测序分析后将N1-N5基因片段和原核表达载体pET-32a(+)相连接,构建pET-32a-N1-N5质粒。将pET-32a-N1-N5转化于TransB(DE3)原核表达感受态细胞后用IPTG诱导表达,将纯化重组蛋白进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。结果表明,所表达蛋白以可溶性形式表达并具有能与PPRV阳性标准血清发生特异性反应,为建立快速检测小反当兽疫病毒抗体水平诊断方法奠定基础。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 N1-n5基因 搭桥PCR 原核表达 可溶性 SDS-PAGE WESTERN-BLOT
下载PDF
MTHFR基因C677T多态性与汉族人群抑郁症的关联性 被引量:5
8
作者 李则警 禹顺英 +8 位作者 张晨 苑成梅 洪武 王勇 陈俊 黄佳 汪栋祥 方贻儒 李则挚 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期624-627,共4页
目的探讨N5,N10_亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性与汉族人群抑郁症发生的关系。方法纳入符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-IV)诊断标准的抑郁症患者402例和正常对照者600名,均为汉族。入组时对抑郁症患者进行汉密... 目的探讨N5,N10_亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性与汉族人群抑郁症发生的关系。方法纳入符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-IV)诊断标准的抑郁症患者402例和正常对照者600名,均为汉族。入组时对抑郁症患者进行汉密尔顿抑郁量表(HAMD)-17评定,采用PCR-RFLP技术检测MTHFR基因C677T的多态性。结果抑郁症组与对照组基因型(CC、CT、TT)分布频率差异均有统计学意义(P<0.05);其中抑郁症组TT基因型频率显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。抑郁症组CT和TT基因型患者的HAMD-17评分均显著高于CC型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MTHFR基因C677T多态性与抑郁症关联,且TT基因型与抑郁症的严重程度相关。 展开更多
关键词 抑郁症 n5 N10-亚甲基四氢叶酸还原酶 基因多态性
下载PDF
帕金森病患者血清中Aβ1-42含量与MTHFRC677T基因多态性的关联性研究 被引量:2
9
作者 吴奇 韩东阳 +2 位作者 周莎莎 张江宽 李昕 《中国临床新医学》 2019年第5期533-536,共4页
目的探讨帕金森病(PD)患者血清β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)水平与N5,N10-亚甲四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性的关系。方法采用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分别检测PD患者50例和正常对照组50名MTHFR基因C6... 目的探讨帕金森病(PD)患者血清β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)水平与N5,N10-亚甲四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性的关系。方法采用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分别检测PD患者50例和正常对照组50名MTHFR基因C677T位点多态性,同时测定血清Aβ1-42水平。结果PD组MTHFR基因TT型频率为32.0%,CT型频率为52.0%,CC型频率为16.0%;对照组分别为12.0%、56.0%和32.0%。PD组T等位基因频率为60.0%,C等位基因频率为40.0%;对照组分别为42.0%和58.0%。PD组MTHFR基因TT型患者血清Aβ1-42水平显著低于其他两型(F=4.831,P=0.012),CT型血清Aβ1-42水平显著低于CC型(P <0.05)。结论 PD患者MTHFR基因C677T突变与Aβ1-42水平显著相关,MTHFR基因突变可能是引起低Aβ1-42的一个重要遗传因素。 展开更多
关键词 帕金森病 n5 N10-亚甲四氢叶酸还原酶 基因多态性 β-淀粉样蛋白1-42
下载PDF
戊型肝炎病毒诊断抗原的克隆表达及抗原性初步鉴定 被引量:2
10
作者 万李 苏秋东 +2 位作者 伊瑶 毕胜利 管茶香 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期275-279,共5页
目的 克隆、表达与纯化硫氧还原蛋白-戊型肝炎病毒(HEV)诊断抗原(命名为N5),并对其抗原性和血清学检测效果初步评价。方法 根据GenBank上HEV-ORF2以及ORF3羧基端的基因序列,按照大肠埃希菌密码子偏好表进行密码子优化,全基因合成后... 目的 克隆、表达与纯化硫氧还原蛋白-戊型肝炎病毒(HEV)诊断抗原(命名为N5),并对其抗原性和血清学检测效果初步评价。方法 根据GenBank上HEV-ORF2以及ORF3羧基端的基因序列,按照大肠埃希菌密码子偏好表进行密码子优化,全基因合成后插入M48原核表达载体中,在大肠埃希菌中表达融合硫氧还蛋白的融合蛋白N5。并利用亲和层析技术对融合蛋白进行纯化,用Western blot技术评价其抗原性,并利用实验室和临床检测确定的HEV感染阴、阳性血清评价其血清学检测效果。结果 成功构建表达N5诊断抗原的重组质粒;高水平表达并纯化获取纯度高、浓度大的可溶性诊断抗原;Western blot结果显示融合蛋白N5可与HEV IgM抗体阳性血清特异性结合,具有良好的抗原性;以融合蛋白N5作为捕获抗原,建立间接ELISA,对病原检测和临床诊断确诊的40份戊型肝炎病例血清和40份健康人血清进行检测,其灵敏度和特异度分别为95%(38/40)和90%(36/40)。结论 成功构建了可表达融合硫氧还蛋白的HEV诊断抗原的重组质粒,并获得表达量高、抗原性强的可溶性融合蛋白N5,可应用于HEV血清学诊断,且有良好的应用前景。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 融合蛋白n5 基因克隆 血清学检测
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部