三氧化二砷与维甲酸联合作用在NB4,MR2细胞系中的体外研究

目的 观察三氧化二砷 (As2 O3)和全反式维甲酸 (ATRA)联合作用对NB4 ,MR2不同亚型急性早幼粒白血病细胞株 ,诱导分化、增殖、凋亡的影响。方法 以NB4 ,MR2为体外模型 ,利用细胞生长曲线、台盼蓝拒染法、MTT法、NBT、细胞形态Wrigh’s Gimesa染色 ,观察细胞增殖、分化、凋亡的相互作用。结果 NB4细胞株 :0 .5 μmol LAs2 O3与 10 - 6 mol LATRA对细胞增殖、分化、凋亡呈现拮抗 ,而 0 .5 μmol LAs2 O3与 (10 - 7～ 10 - 8mol L)ATRA呈现协同 ;MR2细胞株 :0 .5 μmol LAs2 O3与 10 - 6 mol LATRA对细胞增殖、分化、凋亡呈现协同。结论 As2 O3与全反式维甲酸协同效应呈现不同细胞、剂量的特异性 ,MR2细胞株协同效应明显强于NB4细胞株。

蛋白磷酸酶2A在三氧化二砷诱导NB4、MR2细胞株凋亡过程中的变化

本研究探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中蛋白磷酸酶2A(PP2A)活性与表达的变化。不同浓度ATO单用或与冈田酸(OKA)联合作用于NB4、MR2细胞,然后采用MTT法测定药物对细胞增殖的影响,用瑞氏染色法观察细胞形态学变化,流式细胞术测定细胞凋亡率,丝/苏氨酸磷酸化酶检测试剂盒分析药物对细胞内PP2A活性的影响,Western blot检测细胞内PP2A各亚基表达。结果表明:蛋白磷酸酶抑制剂OKA能明显增强ATO对NB4、MR2细胞的增殖抑制;OKA能促进ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡;ATO诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中PP2A活性均下降,且随ATO浓度的增加PP2A活性下降越明显;与OKA连用后PP2A活性下降更加明显;在ATO诱导NB4、MR2细胞凋亡过程中,PP2A/A表达较对照组均明显减少,而B和C亚基表达与对照组比较变化不明显。结论:在ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡过程中,细胞内PP2A/A表达减少,PP2A活性降低,且随ATO浓度增加PP2A活性下降越明显,抑制PP2A活性有助于ATO诱导的NB4、MR2细胞凋亡。