胃癌组织LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达与Wnt/β-catenin信号通路和预后的关系

目的研究胃癌组织长链非编码核糖核酸(LncRNA)NCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达水平与Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路和预后的关系。方法选取2019年2~10月行胃癌根治术的113例胃癌患者,术中取其胃癌组织与癌旁组织。采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌组织与癌旁组织LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达量及Wnt/β-catenin信号通路相关指标[Wnt3a、Wnt5a、β-catenin、细胞周期素D1(cyclin D1)、原癌基因(c-myc)]信使RNA(mRNA)表达量。采用Pearson相关性法分析LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达量与Wnt/β-catenin信号通路相关指标mRNA表达量的相关性。绘制Kaplan-Meier生存曲线分析胃癌患者术后3年生存情况。结果胃癌组织LncRNA NCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达量高于癌旁组织(P<0.05)。胃癌组织Wnt/β-catenin信号通路中Wnt3a mRNA、Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA、cyclin D1 mRNA、c-myc mRNA表达量均高于癌旁组织(P<0.05)。Pearson法分析显示,Wnt/β-catenin信号通路中Wnt3a mRNA、Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA、cyclin D1 mRNA、c-myc mRNA表达量与LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达量呈正相关(P<0.05)。LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1表达量与胃癌患者的TNM分期、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05)。患者随访3年,随访中位时间为27.90个月。Kaplan-Meier生存曲线显示,LncRNANCK1-AS1高表达组3年生存率52.31%(34/65)低于LncRNANCK1-AS1低表达组的77.08%(37/48)(P<0.05),LncRNA TP73-AS1高表达组3年生存率52.78%(38/72)低于LncRNATP73-AS1低表达组80.49%(33/41)(P<0.05)。结论LncRNANCK1-AS1、LncRNATP73-AS1在胃癌组织中表达上调,可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌发生、发展,还可导致不良预后,有望作为辅助评估胃癌患者预后的生物标志物。

猪NCK1基因多态性影响母猪产仔数性状研究

本研究旨在探究猪NCK1基因单核苷酸多态性(SNP)位点g.77886190 A>G对母猪繁殖性状的影响。基于前期GWAS数据筛选出与母猪产仔数性状相关的候选基因NCK1。选取468头大白猪作为研究对象,利用Sanger测序进行基因分型,并与母猪繁殖性状进行关联分析。结果表明:在研究群体中,NCK1基因g.77886190A>G位点,AA基因型为优势基因型,且AA基因型个体的总产仔数、产活仔数和健仔数都显著高于AG和GG基因型个体(P<0.05),且总产仔数、产活仔数和健仔数的加性效应达到显著水平(P<0.05)。此外,分别收集AA型、AG型和GG型个体的子宫内膜组织进行NCK1基因表达量检测,结果表明AA型个体NCK1基因表达量显著高于GG型。利用Ensembl数据库中NCK1基因的序列构建pcDNA3.1-NCK1超表达载体,转染PK细胞检测NCK1下游微血管形成标记基因MMP2的表达,结果发现MMP2表达水平上调。因此可以推测NCK1基因通过上调MMP2促进微血管形成,进而影响母猪繁殖性能,该基因可作为母猪繁殖性状的关键候选基因和分子标记。

长链非编码RNA NCK1-AS1作为海绵体与TCF4竞争结合miR-153-5p调节乳腺癌细胞侵袭、炎症和凋亡

目的:研究LncRNA NCK1-AS1与miR-153-5p调节转录因子4(TCF4)对乳腺癌细胞生长、运动和炎症因子的影响。方法:以乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7作为体外研究对象,将裸鼠作为体内研究对象。RT-qPCR检测组织和细胞中LncRNA NCK1-AS1、miR-153-5p和TCF4表达;TargetScan预测与双荧光素酶报告实验验证LncRNA NCK1-AS1与miR-153-5p的靶向关系;Transwell检测细胞侵袭;ELISA检测炎症因子水平;流式细胞术检测凋亡;Western blot检测TCF4、c-myc、c-jun蛋白水平;裸鼠皮下注射MDA-MB-231细胞建立移植瘤模型;免疫组化检测Caspase-3、VEGF阳性细胞百分比。结果:LncRNA NCK1及TCF4在癌组织和细胞中高表达,而miR-153-5p则低表达。与对照组比较,LncRNA NCK1-AS1干扰抑制乳腺癌细胞侵袭和炎症反应,并促进其凋亡。LncRNA NCK1-AS1与miR-153-5p存在靶向关系。与对照组相比,LncRNA NCK1-AS1干扰和miR-153-5p过表达降低了细胞TCF4、c-myc和c-jun表达,而TCF4转染上调TCF4、c-myc和c-jun表达。与sh-NC组比较,shNCK1-AS1组裸鼠肿瘤体积、重量降低,NCK1-AS1表达降低,miR-153-3p表达升高,Caspase-3阳性细胞百分比升高,VEGF阳性细胞百分比降低,TCF4、c-myc和c-jun蛋白表达降低。结论:LncRNA NCK1-AS1和miR-153-3p通过TCF4调节乳腺癌细胞侵袭、炎症和凋亡。

干扰NCK1-AS1抑制乳腺癌细胞发生发展

目的探索长链非编码RNA(lncRNA)NCK1-AS1在乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用和分子机制。方法定量逆转录PCR(RT-qPCR)和Western印迹检测25例乳腺癌组织和癌旁组织中NCK1-AS1、miR-361-5p与Rho相关蛋白激酶(ROCK)1蛋白的表达。将乳腺癌细胞分为si-NCK1-AS1组、si-NC组、miR-361-5p组、miR-NC组、si-NCK1-AS1+anti-miR-361-5p组和si-NCK1-AS1+anti-miR-NC组,应用细胞计数试剂盒(CCK)-8检测细胞抑制率,集落形成实验检测细胞集落形成数,划痕实验检测细胞迁移距离,Transwell实验检测细胞侵袭。荧光素酶活性检测分析NCK1-AS1与miR-361-5p、miR-361-5p与ROCK1的靶向关系。结果乳腺癌组织中NCK1-AS1、ROCK1蛋白的表达水平比癌旁组织高,miR-361-5p表达水平比癌旁组织低,差异有统计学意义(P<0.05)。si-NCK1-AS1组乳腺癌细胞miR-361-5p表达水平、抑制率比si-NC组升高,ROCK1蛋白的表达水平、集落形成数、迁移距离和侵袭细胞数依次比si-NC组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。NCK1-AS1靶向miR-361-5p,miR-361-5p靶向ROCK1。miR-361-5p组乳腺癌细胞的ROCK1蛋白表达水平、集落形成数、迁移距离和侵袭细胞数低于miR-NC组,抑制率高于miR-NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。si-NCK1-AS1+anti-miR-361-5p组乳腺癌细胞中miR-361-5p表达水平、抑制率比si-NCK1-AS1+anti-miR-NC组低,ROCK1蛋白的表达水平、集落形成数、迁移距离和侵袭细胞数均比si-NCK1-AS1+anti-miR-NC组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论干扰NCK1-AS1通过miR-361-5p靶向ROCK1,抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

Nck1与子宫颈鳞癌微血管生成的关系及分子机制

目的探讨Nck1表达与子宫颈鳞癌微血管生成的关系及其分子机制。方法采用免疫组化MaxVision法检测50例子宫颈鳞癌组织和15例慢性子宫颈炎组织中Nck1蛋白的表达。采用CD34内皮标记癌组织的微血管密度(microvascular density,MVD)并根据Weinner的标准计数。分别通过表达质粒p CMV2-Nck1和Nck1-shRNA转染子宫颈鳞癌细胞获得Nck1基因过表达和基因沉默;应用Western blot法检测细胞蛋白的表达;ELISA法检测细胞上清液中VEGF的蛋白含量。利用Matrige tube formation assay检测内皮细胞的管腔形成能力。结果 Nck1的表达水平在子宫颈炎组织(3 769. 84±2 236. 0)、子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅰ(13 703. 18±1 712. 36)、CINⅡ(35 033. 84±6 516. 05)和CINⅢ(55 966. 19±9 583. 82)以及浸润型子宫颈鳞癌组织(138 329. 1±97 391. 4)各组间比较呈显著升高(P <0. 05),且子宫颈鳞癌组织中NCK表达与MVD正相关(r=0. 586,P <0. 05)。Si Ha细胞Nck1基因转染和RNA干扰分别引起VEGF表达上调和下降(P均<0. 05),相应的癌细胞上清液刺激下的内皮细胞管腔形成能力也分别显著高于和低于对照组(P均<0. 05)。PAK1特异性抑制剂能显著抑制Nck1介导的VEGF表达上调。结论 Nck1促进子宫颈鳞癌的微血管诱生能力,其分子机制与Nck1激活子宫颈鳞癌PAK1信号从而上调VEGF的表达有关。

Nck1蛋白通过Rac1-PAK1-MMP2信号通路对宫颈鳞癌组织血管生成的调控机制研究

目的Nck1蛋白通过Rac1-PAK1-MMP2信号通路对宫颈鳞癌组织血管生成的调控机制研究。方法回顾性选择2018年10月至2019年10月福建中医药大学附属人民医院的宫颈鳞癌病理组织标本80例,根据癌变组织是否发生侵袭分为侵袭组(n=38)与未侵袭组(n=42),另选择子宫颈鳞状上皮正常组织作为对照组(n=30)。采用免疫组织化学法检测3组标本中Nck1蛋白表达水平,利用免疫组织化学法观察侵袭组与非侵袭组标本中微血管密度(MVD)。通过制备Nck1过表达、低表达的宫颈癌细胞siHa,人脐静脉内皮细胞ECV304,测定宫颈癌细胞中Rac1、PAK1、MMP2表达水平,经Nck1过表达、低表达的siHa上清液干扰后的ECV304细胞增殖能力、血管形成能力、迁移能力。结果侵袭组Nck1蛋白表达水平明显高于非侵袭组与对照组,非侵袭组Nck1蛋白表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。侵袭组MVD与肿瘤直径明显大于非侵袭组,差异均有统计学意义(P<0.05)。宫颈鳞癌患者Nck1蛋白表达水平与MVD呈正相关关系(P<0.05)。Nck1过表达的siHa细胞中Rac1、PAK1、MMP2表达水平均明显高于Nck1低表达的siHa细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Nck1过表达的siHa细胞上清液干扰后的ECV304增殖率、迁移率、管腔形成数均高于经Nck1低表达的siHa细胞上清液干扰后的ECV304细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈病理标本中Nck1蛋白处于高表达状态,其中已发生癌细胞侵袭、迁移的标本Nck1蛋白表达水平更高,过表达的Nck1能够促进血管内皮细胞增殖、迁移,这一作用机制与宫颈癌细胞中Rac1/PAK1/MMP2信号通路有关。

miR-223通过SEPT6抑制NCK-SOCS7信号通路促进前列腺癌细胞增殖及侵袭

目的探讨miR-223是否通过GTP结合蛋白基因SEPT6调控NCK-SOCS7信号通路并影响前列腺癌进展。方法通过miR-223模拟物(miR-MM)及其反义寡核苷酸(miR-AO)分别上调及抑制前列腺癌细胞系DU145中miR-223的表达,并与miR-223空载体组(miR-NC)进行比较。通过SEPT6抑制剂siR-1219及空白载体siR-NC分别与miR-NC共转染DU145细胞,同样再分别与miR-AO共转染DU145细胞。利用QPCR检测miR-223、SEPT6、NCK和SOCS7基因的表达,MTT法及Transwell小室法分别进行细胞增殖和侵袭实验。结果在miR-MM组,提高miR-223表达,能够显著抑制SEPT6、NCK及SOCS7表达水平,并且促进细胞增殖及侵袭力[细胞数为(103±37)个];反之在miR-AO组,则SEPT6、NCK及SOCS7基因表达显著增高,细胞增殖及侵袭力明显减弱[细胞数为(29±11)个]。进一步研究发现,在miR-NC+siR-1219组,miR-223及SEPT6表达分别较高和较低,NCK及SOCS7与SEPT6表达趋势一致,也较低,此时细胞增殖及侵袭能力较强[细胞数为(63±25)个];而在miR-AO+siR-NC组,miR-223及SEPT6表达分别较低和较高,NCK及SOCS7与SEPT6表达趋势也一致,也较高,而细胞增殖及侵袭能力较弱[细胞数为(21±6)个](P<0.05)。结论 miR-223能够抑制SEPT6基因表达,导致下游DNA损伤修复信号通路NCK-SOCS7被抑制,从而增加前列腺癌的恶性程度。本研究可能为前列腺癌的进展及潜在的治疗靶点提供基础研究依据。

Nckα基因沉默对上皮性卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨Nckα基因沉默对上皮性卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:选取正常卵巢组织切片、良性卵巢病变组织切片以及卵巢癌组织切片分析Nckα表达特点,通过免疫荧光、细胞侵袭、迁移实验、细胞增殖实验、构建皮下移植瘤动物模型以及Western blot检测等方式检测Nckα沉默对卵巢癌SKOV3细胞株、OVCAR-3细胞株的影响。结果:Nckα基因沉默可降低卵巢癌细胞侵袭、迁移能力;Nckα沉默卵巢癌SKOV3细胞、OVCAR3细胞吸光度值明显低于对照组,Nckα过表达卵巢癌SKOV3细胞、OVCAR3细胞吸光度值明显高于对照组(P<0.05);Nckα沉默组细胞瘤体体积小于对照组(P<0.05);Nckα沉默卵巢癌SKOV3细胞、OVCAR3细胞PI3K p110α、p70S6K、AKT、P-AKT蛋白表达明显低于对照组,Nckα过表达卵巢癌SKOV3细胞、OVCAR3细胞PI3K p110α、p70S6K、AKT、P-AKT蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。结论:Nckα基因沉默可导致上皮性卵巢癌细胞增殖、迁移能力降低,延缓皮下移植瘤生长速度,可能与Nckα基因沉默调控PI3K p110α、p70S6K、AKT、P-AKT蛋白表达有关。

840D数控系统NCK报警21612故障处理

简介西门子840D数控系统组成,列举几例NCK报警21612故障现象及处理方法。

猪NCK1,2基因克隆及性质分析

接头蛋白NCK家族包括两个成员NCK1(NCKα,NCK)和NCK2(NCKβ,Grb4),其共同结构都包括N末端的3个SH3结构域和C末端的1个SH2结构域。它们被认为在各种细胞活动中,连接酪氨酸受体和参与肌动蛋白骨架重排的信号途径,如细胞形态变化。本研究采用PCR的方法,通过猪的EST序列,克隆了猪这两个基因的CDS序列;采用辐射杂种细胞系(RH)

STAT3、NCK1和VEGF在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的研究STAT3、NCK1、VEGF在甲状腺乳头状癌中的表达情况及临床意义。方法收集2019年9月-2020年12月在唐山市工人医院头颈外科经病理诊断明确的甲状腺乳头状癌组织63例,甲状腺腺瘤组织32例,正常甲状腺组织20例。使用免疫组织化学法检测STAT3、NCK1、VEGF的表达水平,分析不同甲状腺组织中STAT3、NCK1、VEGF蛋白表达情况,以及甲状腺乳头状癌中STAT3、NCK1、VEGF蛋白与临床病理的关系。结果甲状腺乳头状癌中STAT3、NCK1、VEGF阳性表达率高于甲状腺腺瘤和正常甲状腺组织,差异有统计学意义(P<0.05);而甲状腺腺瘤和正常甲状腺组织中STAT3、NCK1、VEGF阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05);STAT3阳性表达与肿瘤直径、是否伴有颈部淋巴结转移相关(P<0.05),而与性别、年龄、病灶数、是否侵犯甲状腺外被膜、是否合并桥本甲状腺炎无关(P>0.05);NCK1阳性表达与是否伴有颈部淋巴结转移相关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤直径、病灶数、是否侵犯甲状腺外被膜、是否合并桥本甲状腺炎无关(P>0.05);VEGF阳性表达与肿瘤直径、是否侵犯甲状腺外被膜和是否伴有颈部淋巴结转移相关(P<0.05),而与性别、年龄、病灶数、是否合并桥本甲状腺炎无关(P>0.05)。Spearman秩相关性分析显示,甲状腺乳头状癌中STAT3与NCK1的表达呈正相关(r=0.483,P<0.05);STAT3与VEGF的表达呈正相关(r=0.584,P<0.05);NCK1与VEGF的表达呈正相关(r=0.477,P<0.05)。结论STAT3、NCK1、VEGF存在协同作用,共同促进了甲状腺乳头状癌的血管生成和颈部淋巴结转移过程。

西门子828D工件自动测量功能的应用

详细阐述了西门子828D工件测量功能的应用:硬件的连接、NCK参数的设置、PLC程序的编写、测头的校准、工件自动测量功能实现。

西门子802D数控系统PLC编程与应用

数控系统PLC程序的设计是机床数控系统安装调试中最重要和最关键的步骤,本文结合西门子802D系统在经济型数控铣床上的应用,简要介绍802D系统的基本配置和I/O地址的分配,重点介绍数控系统内部接口信息的传送和PLC的编程及应用。

840D快速I／O接口信号的研究与应用

介绍840D快速输入输出接VI信号的控制流程，CNC和PLC如何交换信息，总结了快速输入输出接口信号的详细对应表，以及快速输入输出接El信号的实际应用。

西门子Sinumerik 828D刀具管理功能

介绍了西门子828D刀具管理软件的结构,分析了它与西门子840D刀具管理功能的异同点,通过实例说明了该功能的应用方法,并就刀具管理程序的设计关键部分进行了详细的解析,提供了一种调试刀库的简单方法。

仔猪腹泻抗性相关特异表达ESTs的筛选(英文)

以久仰香猪、剑白香猪和长白猪 3个品种的脾脏为材料 ,以品种间同一组织不同的发病状态为对照 ,将DDRT PCR技术与银染法相结合进行差异显示研究 ,筛选与仔猪腹泻抗性相关的特异表达ESTs。在脾脏未发病RNA池中检测到 5条特异表达ESTs ,其中一条与Nck转导蛋白同源 ,一条与长散布元件反转录酶同源 ,一条为相似性较高的未知功能序列 。

甲状腺术前颈部体位训练的时间和频次研究

目的：探讨甲状腺术前颈部体位训练的最佳时间和频次。方法将入住我院普外科需要手术的280例甲状腺患者随机分为A、B、C、D四组，A组入院当日（约为手术前3天）对其宣教，每次体位训练到不能耐受停止，至达到术中所需的60～90 min；B组手术前1 d开始练习，每次训练30～60 min ，每天4次；C组手术前1 d开始练习，从5 min开始逐渐增加练习时间，直到手术中所需要的时间，每天数次；D组未进行体位训练。术后采用四点口述分级评分法观察病人术后体位性头痛的发生率。结果 A组、B组、C组术后体位性头痛的发生率均低于D组，B、D组比较差异有显著意义（P＜0．05），但A组与B组比较、B组与C组比较差异均无显著意义（P＞0．05）。结论甲状腺手术前一天采取每次30～60 min、每日4次的体位训练，病人易接受，也便于医护人员督导，有利于手术的顺利进行，减少了术后体位性头痛的发生率。

基于Xenomai的EtherCAT总线数控系统的设计

文章首先从数控系统总体设计方案、硬软件组成进行介绍,然后针对引入Ether CAT的数控系统的实现,提出了一种基于Xenomai实时操作系统的改造及基于PC控制的可行系统方案,构建了基于Linux+Xenomai+Ether CAT的总线数控系统,并详细分析了数控系统核心的插补与位置控制数据结构。

利用西门子840D系统实现龙门机床铣头自动交换的安全控制方法

本文介绍了使用西门子840D数控系统的龙门式机床实现铣头自动交换的安全控制方法。

数控蜗杆砂轮磨齿机修整器与刀架碰撞问题的处理

数控蜗杆砂轮磨齿机在客户使用中经常发生修整器与主轴之间的碰撞,导致机床加工精度丧失,需要反复对各轴进行精度校验。针对这一问题,通过分析用户加工程序与PLC之间通讯信号的处理、NCK数字输入信号IN的逻辑判断,找出了问题的根源在于PLC逻辑判断以及加工程序中接口信号应用不当,导致了该设备安全保护处理不到位。经过修改,问题得到了根本性的解决,提高了设备的可靠性。