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33例非O型ABOi肾移植受者围术期血型抗体的变化
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作者 靳慧芳 孔永奎 +5 位作者 刘欣 王书亚 陈李影慧 杨昊 李金峰 杨乾坤 《中国输血杂志》 CAS 2024年第5期534-540,共7页
目的统计分析非O型ABO血型不相合肾移植(ABOi-KT)受者围手术期结果资料,旨在探寻ABOi-KT患者血浆中血型抗体的变化情况。方法回顾性分析本院2021年1月—2023年10月首次肾移植、血型仅为A型和B型的33对ABOi-KT供、受体的临床资料,供者血... 目的统计分析非O型ABO血型不相合肾移植(ABOi-KT)受者围手术期结果资料,旨在探寻ABOi-KT患者血浆中血型抗体的变化情况。方法回顾性分析本院2021年1月—2023年10月首次肾移植、血型仅为A型和B型的33对ABOi-KT供、受体的临床资料,供者血型均为AB型,依据受者血型的不同,分为AB供A组(n=18)和AB供B组(n=15)。分析比较术前血浆置换对2组患者抗体效价的影响,术后2组患者血型抗体反弹和肾功能指标(术后d 1、3、7、14的尿素氮、肌酐和肾小球滤过率)的差异。依据术后血型抗体反弹与否,分为抗体反弹组(n=7)和非反弹组(n=26),分析比较初始效价在血型抗体反弹和非反弹组的差异。结果术前血浆置换对患者IgM抗体的清除率在2组间的差异无统计学意义(Z=-0.260,P>0.05);术后d 1、3、7、14,2组患者肾功指标均无统计学差异;AB供B组术后更易出现血型抗体效价反弹(P<0.05);初始IgM抗体效价在血型抗体反弹组和非反弹组有统计学差异(Z=-2.127,P<0.05),但是初始IgG抗体效价(Z=-1.835,P>0.05)在2组间无统计学意义。结论与AB供A组相比,术后AB供B的患者更易发生血型抗体效价反弹。 展开更多
关键词 ABO血型不相合肾移植 血浆置换 抗体效价 围术期
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免疫鸡血清新城疫病毒抗体水平与攻毒保护效果的相关性研究
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作者 沈欣悦 刘梅 +3 位作者 李建梅 俞燕 范建华 戴亚斌 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第1期96-103,共8页
为了明确不同血清新城疫病毒(NDV)抗体水平对鸡的保护效果,本研究采用重组NDV灭活疫苗(A-Ⅶ株)对鸡进行免疫,通过交叉血凝抑制(HI)试验比较A-Ⅶ株与La Sota株间的血清学差异,并采用NDV标准强毒株F_(48)E_(8)和基因Ⅶ型强毒株JSC0804对... 为了明确不同血清新城疫病毒(NDV)抗体水平对鸡的保护效果,本研究采用重组NDV灭活疫苗(A-Ⅶ株)对鸡进行免疫,通过交叉血凝抑制(HI)试验比较A-Ⅶ株与La Sota株间的血清学差异,并采用NDV标准强毒株F_(48)E_(8)和基因Ⅶ型强毒株JSC0804对不同抗体水平免疫鸡进行了攻毒保护试验。结果显示:抗A-Ⅶ株血清用A-Ⅶ株抗原测得的平均HI抗体效价显著高于La Sota株抗原(P<0.01),约高1.5log2,而抗La Sota株血清用La Sota株抗原测得的平均HI抗体效价稍高于A-Ⅶ株抗原,但无显著差异(P>0.05),表明2种疫苗株存在一定的血清学差异。在试验条件下,所有免疫鸡经点眼滴鼻攻毒后均未表现明显临床症状,但存在不同程度的排毒现象,排毒率总体上随抗体效价升高呈逐渐下降趋势。A-Ⅶ株疫苗免疫鸡血清HI抗体效价分别达≥13log_(2)和≥14log_(2)时可完全阻止F_(48)E_8株和JSC0804株排毒。免疫鸡排毒一般仅限于攻毒后5 d内。本研究阐明了免疫鸡的抗体水平和免疫保护效果的相关性,为新城疫免疫控制提供了依据。 展开更多
关键词 新城疫 重组新城疫病毒灭活疫苗(A-Ⅶ株) 抗体效价 保护效果 排毒 相关性
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失血性休克复苏液体的演进——低效价抗体O型全血正重新成为首选的应急通用桥接复苏液体
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作者 王鸿捷 郭永建 《中国输血杂志》 CAS 2024年第8期953-964,共12页
血液复苏是严重失血患者的关键急救措施。血液复苏液体的选用,经历了从全血到晶体液/胶体液、晶体液联合红细胞、等比例血液成分的演进过程。近20年来,采用低效价抗体O型全血(low titer group O whole blood,LTOWB)作为血液复苏的首选... 血液复苏是严重失血患者的关键急救措施。血液复苏液体的选用,经历了从全血到晶体液/胶体液、晶体液联合红细胞、等比例血液成分的演进过程。近20年来,采用低效价抗体O型全血(low titer group O whole blood,LTOWB)作为血液复苏的首选应急通用桥接复苏液,已发展成为大趋势。我们对全血在严重失血患者的应用历史和现状做一介绍,并提出我国采用LTOWB作为首选应急通用血液的进一步论证和验证研究建议。 展开更多
关键词 低效价抗体O型全血 血液复苏 严重失血
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2018—2023年新疆乌鲁木齐市主城区鸽新城疫流行情况实验室调查
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作者 王涛 马佳妮 +2 位作者 李兆新 姜玉婷 郭亚军 《现代畜牧科技》 2024年第6期5-8,共4页
为了解主城区近年鸽散养户新城疫的免疫情况和养殖环境中的流行情况,2018—2023年分别采集4个主城区25个散养户的鸽血清样本1972份、鸽舍环境棉拭子150份、鸽双腔棉拭子750份,通过血凝及血凝抑制试验和荧光定量PCR的方法,进行新城疫抗... 为了解主城区近年鸽散养户新城疫的免疫情况和养殖环境中的流行情况,2018—2023年分别采集4个主城区25个散养户的鸽血清样本1972份、鸽舍环境棉拭子150份、鸽双腔棉拭子750份,通过血凝及血凝抑制试验和荧光定量PCR的方法,进行新城疫抗体水平监测和新城疫病毒核酸检测。结果表明,乌鲁木齐市4个主城区免疫合格率呈逐年上升的趋势,仅2022年鸽新城疫免疫抗体均低于农业农村部规定的70%,其它均高于该标准;4个主城区中环境棉拭子新城疫病毒核酸群体阳性率2018—2023年分别为28%、20%、16%、28%、36%和20%;鸽双腔棉拭子新城疫病毒核酸个体阳性率2018—2023年分别为12.8%、11.2%、8.8%、8%、9.6%和4%。 展开更多
关键词 新城疫 抗体 效价 核酸检测
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双重滤过血浆置换和血浆置换对ABO血型不容肾移植受者术前血型抗体去除效果单中心对比研究 被引量:1
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作者 杨昊 董树岭 +5 位作者 杨乾坤 韩月 王书亚 靳慧芳 郑露 唐悦 《临床输血与检验》 CAS 2024年第3期325-331,共7页
目的 对比研究双重滤过血浆置换(double filtration plasmapheresis,DFPP)和血浆置换(plasma exchange,PE)对ABO血型不相容肾移植(ABO incompatible kidney transplantation,ABOi-KT)术前血型抗体去除效果。方法 收集郑州大学第一附属医... 目的 对比研究双重滤过血浆置换(double filtration plasmapheresis,DFPP)和血浆置换(plasma exchange,PE)对ABO血型不相容肾移植(ABO incompatible kidney transplantation,ABOi-KT)术前血型抗体去除效果。方法 收集郑州大学第一附属医院2021年2月—2023年12月ABOi-KT术前36例单纯DFPP和27例单纯PE受者的临床资料以及每次治疗前后抗体效价,并对其进行差异化分析。结果 DFPP组和PE组分别进行了98次和82次治疗;DFPP和PE治疗后血型抗体效价均较治疗前显著降低(P<0.05);DFPP和PE均显示出对高效价抗体较好的去除效果,DFPP对效价≥32组IgG抗-A、IgG抗-B和IgM抗-B抗体去除效果优于效价≤16组(P<0.05),PE治疗对效价≥32组IgM抗-A和IgM抗-B抗体去除效果优于效价≤16组(P<0.05);整体上,DFPP和PE对不同类型抗体去除效果均无显著差异,但当效价≥32时,DFPP和PE均显示出对IgM类抗体较好的去除效果,PE更为明显;PE对抗-A抗体去除效果优于DFPP,这种优势主要表现为,当效价≤16时,PE较DFPP表现出对IgG抗-A抗体较好的去除效果(P<0.05),当效价≥32时,PE较DFPP表现出对IgM抗-A抗体较好的去除效果(P<0.05),两种方法对其他血型抗体的去除效果差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DFPP和PE均可显著降低血型抗体效价,两种方法均对高效价抗体去除效果较好。除PE对低效价IgG抗-A和高效价IgM抗-A抗体去除效果较DFPP好外,两种方法对其他血型抗体去除效果无显著差异。 展开更多
关键词 双重滤过血浆置换 血浆置换 ABO血型不相容 肾移植 抗体效价
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猪γ干扰素单克隆抗体的制备与特性研究
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作者 沈环环 韩顺子 +3 位作者 孟闯 潘志明 焦新安 康喜龙 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第5期80-85,共6页
为了制备高特异性的抗猪γ干扰素(IFN-γ)抗体,试验采用原核表达的携带His标签的重组猪IFN-γ(PoIFN-γ)蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备杂交瘤细胞;并以携带GST标签的重组蛋白PoIFN-γ(GST-PoIFN-γ)为包被抗原,通过间接ELISA方法筛... 为了制备高特异性的抗猪γ干扰素(IFN-γ)抗体,试验采用原核表达的携带His标签的重组猪IFN-γ(PoIFN-γ)蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术制备杂交瘤细胞;并以携带GST标签的重组蛋白PoIFN-γ(GST-PoIFN-γ)为包被抗原,通过间接ELISA方法筛选稳定分泌抗体的单克隆细胞株;而后通过间接ELISA方法、单克隆抗体亚型鉴定试剂盒、SDS-PAGE分析、Western-blot鉴定和间接免疫荧光方法对获得的单克隆抗体的腹水效价、亚型、反应特异性等生物学特性进行鉴定。结果表明:经筛选后共获得7株能稳定分泌PoIFN-γ的单克隆抗体细胞株;7株单克隆抗体的腹水效价在1∶2048000~1∶16384000之间,均为IgG1亚型,均能与原核表达及真核表达的PoIFN-γ蛋白发生特异性反应且反应性良好。说明试验成功制备了可特异性识别PoIFN-γ的单克隆抗体。 展开更多
关键词 猪Γ干扰素 原核表达 单克隆抗体 效价 特异性
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广东地区人群抗核抗体检测滴度及核型特征分析
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作者 闻向晖 杜凯伟 +4 位作者 周刘忠 魏秋静 姚纯 古洁若 张鹏 《广东医学》 CAS 2024年第1期63-67,共5页
目的通过分析广东地区抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)受试者滴度及核型阳性检出情况,探讨ANA阳性人群的临床特征,便于为广东地区人群的健康管理提供科学依据,为潜在的自身免疫性疾病(autoimmune diseases,AID)患者提供早期健康指... 目的通过分析广东地区抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)受试者滴度及核型阳性检出情况,探讨ANA阳性人群的临床特征,便于为广东地区人群的健康管理提供科学依据,为潜在的自身免疫性疾病(autoimmune diseases,AID)患者提供早期健康指导和参考。方法回顾性分析2021年4月至2023年7月广东地区22家医院通过间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,IIF)常规检测ANA的患者23771例,统计ANA滴度、核型阳性检出率及性别、年龄特征。结果23771例ANA检测患者阳性检出率为14.21%(3378/23771),随年龄增大ANA阳性患者数量呈递增趋势,60岁以上ANA阳性有1440例(42.63%)人数最多。不同年龄段ANA阳性检出率女性均高于男性。滴度以1∶80抗体低滴度为主,有2662例(78.81%),高滴度1∶1000与1∶1280阳性率均较低,其中颗粒型阳性检出2288例(67.73%)最高,60岁以上有879例(46.31%)人数最多,但男女颗粒型阳性率差距随着年龄增加逐渐缩短。结论广东地区女性ANA阳性检出率较高,其中1∶80颗粒型最多,提示患有系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病、干燥综合征或多发性肌炎等疾病有较大的风险,尤其是绝经后的中老年女性,同时60岁以上的男性也应多留意发生免疫疾病的风险。 展开更多
关键词 广东地区 抗核抗体 滴度 核型 临床特征
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杀菌剂对青枯菌噬菌体RPZH6株系存活及防效的影响
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作者 刘霜玉 顾钢 +1 位作者 周挺 蔡学清 《亚热带农业研究》 2024年第3期194-202,共9页
[目的]明确杀菌剂对青枯菌噬菌体RPZH6株系存活及其防治番茄青枯病效果的影响,为噬菌体的高效利用提供理论依据。[方法]以烟草青枯菌毒性菌株RSZ5和无毒菌株RSsw326-2以及青枯菌噬菌体RPZH6株系为试材,采用纸片扩散法比较7种常用杀菌剂... [目的]明确杀菌剂对青枯菌噬菌体RPZH6株系存活及其防治番茄青枯病效果的影响,为噬菌体的高效利用提供理论依据。[方法]以烟草青枯菌毒性菌株RSZ5和无毒菌株RSsw326-2以及青枯菌噬菌体RPZH6株系为试材,采用纸片扩散法比较7种常用杀菌剂对青枯菌的抑菌效果;采用双层平板法测定杀菌剂对噬菌体RPZH6株系存活的影响;通过盆栽法接种四叶期番茄苗,比较杀菌剂和噬菌体复配施用对番茄青枯病的防治效果。[结果]2720 mg·L^(-1)68%精甲霜·锰锌水分散粒剂对毒性菌株RSZ5的抑菌效果最好,抑菌圈半径为0.39 cm;228 mg·L^(-1)4%春雷霉素水剂对无毒菌株RSsw326-2的抑菌效果最好,抑菌圈半径为0.50 cm。噬菌体与46%氢氧化铜水分散粒剂混合培养7 d后已检测不到噬菌体;噬菌体与3%噻霉酮水乳剂、3%中生菌素可湿性粉剂混合培养11 d后,噬菌体效价仍达1010 PFU·mL-1,与无菌水(CK)在同一个数量级。盆栽防效结果显示,接种后12 d,3%噻霉酮水乳剂和噬菌体复配施用对番茄青枯病的相对防效最大,为56.6%,高于3%噻霉酮水乳剂单独施用的相对防效(42.0%)。[结论]3%噻霉酮水乳剂和3%中生菌素可湿性粉剂对青枯菌有抑菌作用且对噬菌体存活的影响较小;3%噻霉酮水乳剂对噬菌体防治番茄青枯病具有增效作用。 展开更多
关键词 青枯菌 噬菌体 杀菌剂 噬菌体效价 防治效果
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A型塞内卡病毒VP3蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
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作者 林铱婷 姬康 +8 位作者 谭姗姗 晋怡 宋若琪 马瑞一 王颖 牛胜 赵宇军 田文霞 任建乐 《中国动物检疫》 CAS 2024年第4期96-102,共7页
为制备A型塞内卡病毒(SVA)VP3蛋白多克隆抗体,采用同源重组技术将SVA VP3基因连接至原核表达载体pET-28a中,构建了重组表达质粒pET-SVA-VP3。将重组质粒转化至大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3),以1 mmol/L的IPTG进行诱导表达并纯化表达产物... 为制备A型塞内卡病毒(SVA)VP3蛋白多克隆抗体,采用同源重组技术将SVA VP3基因连接至原核表达载体pET-28a中,构建了重组表达质粒pET-SVA-VP3。将重组质粒转化至大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3),以1 mmol/L的IPTG进行诱导表达并纯化表达产物,随后将纯化的VP3重组蛋白皮下多点注射新西兰白兔制备多克隆抗体,利用间接ELISA、间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot分别对抗体效价、反应性和特异性进行鉴定。结果显示:重组VP3蛋白以包涵体形式表达,相对分子质量约36 kDa;制备的VP3蛋白多克隆抗体能与VP3重组蛋白和SVA发生特异性反应,其ELISA效价达1:10000以上,Western blot和IFA效价达1:5000。综上,本研究成功制备了SVA VP3多克隆抗体,其具有较高的效价和特异性,可为后续SVA致病机制及检测方法等研究奠定基础。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒 VP3蛋白 原核表达 多克隆抗体 效价 特异性
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哈蟆油抗衰老活力生物效价检测方法的研究
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作者 贾纪元 姜大成 +1 位作者 张震 孙云龙 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第4期1008-1016,共9页
目的基于哈蟆油补肾益精的功效,建立以抗衰老活性为指标的哈蟆油生物效价检测方法,并以此评价不同产地哈蟆油的质量,为完善其质量标准提供参考。方法以MRC-5细胞为研究对象,H_(2)O_(2)作为急性衰老模型诱导药物,通过细胞活力、β-半乳... 目的基于哈蟆油补肾益精的功效,建立以抗衰老活性为指标的哈蟆油生物效价检测方法,并以此评价不同产地哈蟆油的质量,为完善其质量标准提供参考。方法以MRC-5细胞为研究对象,H_(2)O_(2)作为急性衰老模型诱导药物,通过细胞活力、β-半乳糖苷酶染色率验证哈蟆油抗衰老作用。选择Vc作为参照物,CCK-8法作为哈蟆油生物效价测定方法,以相对增殖率为参数,计算供试品抗衰老效价。结果细胞活力检测中,与模型组相比,哈蟆油组能上调细胞活力,250.0μg·mL^(-1)效果达到最佳,上调20.01%。经哈蟆油预处理的细胞中,SA-β-gal阳性细胞的比例降低17.70%。抗衰老效价测定结果显示,不同产地哈蟆油药材抗衰老活力效价范围为218.03-1152.04 U·mg^(-1),极差为934.01 U·mg^(-1)。结论建立的哈蟆油生物效价检测方法可明显区分哈蟆油质量差异,为其质量评价和控制提供一定的参考。 展开更多
关键词 哈蟆油 质量标准 生物效价 抗衰老活性
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口服卵黄抗体对杂交鳢弹状病毒(HSHRV)感染的免疫保护效果
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作者 刘田 李硕 +4 位作者 汪铭书 赵立宁 黄锦炉 吴艺琳 贾爱卿 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期10-16,共7页
为了研究抗杂交鳢弹状病毒(hybrid snakehead rhabdovirus,HSHRV)卵黄抗体的制备方法并评价其免疫保护效果,将杂交鳢弹状病毒经白油乳化制备疫苗,免疫蛋鸡收集高免蛋,采用喷雾干燥方法制备成卵黄抗体粉,以细胞中和试验评估卵黄抗体中和... 为了研究抗杂交鳢弹状病毒(hybrid snakehead rhabdovirus,HSHRV)卵黄抗体的制备方法并评价其免疫保护效果,将杂交鳢弹状病毒经白油乳化制备疫苗,免疫蛋鸡收集高免蛋,采用喷雾干燥方法制备成卵黄抗体粉,以细胞中和试验评估卵黄抗体中和病毒的效果。按照每kg鱼投喂卵黄抗体0.25 g、0.40 g、0.60 g的比例制备低、中、高3种添加剂量的饲料,持续投喂杂交鳢10 d,在口服免疫第4天时以104 TCID50/0.1mL的杂交鳢弹状病毒江门I株(HSHRV-JMI)病毒经腹腔注射对杂交鳢进行攻毒,并记录6 d内各组死亡情况。结果显示,四次免疫后卵黄抗体中和效价达到高峰,为1∶46.8,抗体维持时间为60d。高中低剂量组的存活率分别为64.4%、70.6%、78.5%;相对保护率分别为61.1%、67.9%、76.5%,三者均显著高于非特异性卵黄抗体对照组(P<0.001)。表明杂交鳢弹状病毒能有效刺激卵黄抗体产生,高效价卵黄抗体经口服免疫后可以有效抑制杂交鳢弹状病毒的侵染,显著提高杂交鳢存活率和相对保护率。 展开更多
关键词 杂交鳢弹状病毒(HSHRV) 卵黄抗体 口服免疫 中和效价 免疫保护效果
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Th1/Th2免疫应答平衡与肺炎支原体肺炎患者支原体抗体滴度及预后的关系探讨
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作者 何金泽 冯小玲 +3 位作者 唐燕玉 李有军 任明针 王玉伟 《传染病信息》 2024年第3期249-254,共6页
目的探讨肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)肺炎患者的血清MP-IgM(immunoglobulin M,IgM)抗体滴度与T辅助细胞(helper Tcells,Th)1型/Th2免疫应答平衡的关系。方法选取2020年1月至2022年3月收治于岳池县人民医院的214例MP肺炎患者... 目的探讨肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)肺炎患者的血清MP-IgM(immunoglobulin M,IgM)抗体滴度与T辅助细胞(helper Tcells,Th)1型/Th2免疫应答平衡的关系。方法选取2020年1月至2022年3月收治于岳池县人民医院的214例MP肺炎患者作为研究对象,根据患者MP-IgM抗体滴度分为低滴度组(n=92)、中滴度组(n=75)、高滴度组(n=47),根据预后病情分为好转组(n=125)和恶化组(n=89)。用单因素分析不同MPIgM抗体滴度组以及不同预后组患者间的临床差异;用广义加性模型(generalizedadditivemodel,GAM)分析指标间的相关性;用多因素Logistic回归分析影响预后病情恶化的危险因素;用样条函数与Logistic回归结合的限制性立方样条法分析Th1/Th2与患者预后病情恶化风险的剂量反应关系。结果不同MP-IgM抗体滴度的3组患者间发热比例、发热消退时间、白细胞计数(white blood cell,WBC)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-5(interleukin-5,IL-5)、IFN-γ/IL-5差异具有统计学意义(P均<0.05),其中发热消退时间、WBC水平、CRP水平、IFN-γ水平、IL-5水平随着MP-IgM抗体滴度的升高而逐渐升高,IFN-γ/IL-5水平随着MP-IgM抗体滴度的升高而降低。MP-IgM抗体低滴度组和中滴度组患者的发热比例差异无统计学意义(P>0.05),但高滴度组患者中发热比例明显高于其余2组(P均<0.05)。IFN-γ、IL-5与MP-IgM抗体滴度均呈正相关,Th1/Th2免疫平衡指标IFN-γ/IL-5与MP-IgM抗体滴度呈负相关。多因素分析结果显示,IFN-γ>5.25 pg/mL、IL-5>4.05 pg/mL以及血清MP-IgM抗体滴度增加是病情恶化的最主要危险因素,IFN-γ/IL-5>1.40为保护因素。Th1/Th2的连续变化与预后病情恶化风险呈非线性剂量反应关系,Th1/Th2水平与患者预后病情恶化风险大致呈负相关,当Th1/Th2>1.20时,随着Th1/Th2水平的升高,预后病情恶化风险显著降低。结论MP肺炎患者血清MP-IgM抗体滴度与Th1/Th2免疫应答平衡指标IFN-γ/IL-5呈负相关,检测血清MP-IgM抗体滴度与Th1/Th2细胞因子指标有助于早期判断MP肺炎患者病情和预后。 展开更多
关键词 肺炎支原体肺炎 抗体滴度 TH1/TH2平衡 预后预测
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猴痘病毒B20R蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备
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作者 杨领弟 李小梅 +3 位作者 芦晓鸥 彭棋 孔令保 王宇 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期217-225,共9页
【目的】构建猴痘病毒B20R蛋白原核表达系统,并评价原核表达获得的融合蛋白免疫原性,为后续的猴痘病毒检测及新型治疗方法开发提供技术支撑。【方法】参照GenBank已公布的猴痘病毒基因组序列,按照大肠杆菌密码子偏好性对B20R基因DNA序... 【目的】构建猴痘病毒B20R蛋白原核表达系统,并评价原核表达获得的融合蛋白免疫原性,为后续的猴痘病毒检测及新型治疗方法开发提供技术支撑。【方法】参照GenBank已公布的猴痘病毒基因组序列,按照大肠杆菌密码子偏好性对B20R基因DNA序列进行优化,人工合成B20R基因并将其分别克隆至表达载体pET-28a和pET-32a以构建原核表达载体;以构建的2种原核表达载体分别转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达后使用SDSPAGE和Western blotting检测融合蛋白B20R的表达情况。通过控制变量法优化融合蛋白B20R的诱导表达条件,使用Ni柱亲和层析进行纯化;以纯化的融合蛋白B20R经腹腔注射免疫昆明小鼠,定期采集昆明小鼠血样,采用ELISA检测血清抗体效价。【结果】将B20R基因克隆至表达载体pET-32a能成功构建原核表达载体pET-32a-B20R,经IPTG诱导后,可在大肠杆菌BL21感受态细胞中表达出融合蛋白B20R,且主要以不可溶的包涵体形式进行表达。融合蛋白B20R最佳诱导表达条件为37℃下以0.6 mmol/L IPTG诱导12 h,Ni柱亲和层析纯化的最佳咪唑洗脱浓度为40 mmol/L。以纯化的融合蛋白B20R接种免疫昆明小鼠,可在短时间内引起昆明小鼠产生强烈的体液免疫,且至免疫第42 d仍然维持较高的抗体水平,抗体效价高达1∶409600。【结论】构建的猴痘病毒B20R蛋白原核表达载体可在大肠杆菌BL21细胞中以包涵体形式成功表达出融合蛋白B20R,且融合蛋白B20R具有良好的免疫原性,可在短时间内引起昆明小鼠产生强烈的体液免疫。 展开更多
关键词 猴痘病毒 B20R蛋白 原核表达 免疫原性 抗体效价
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鸡减蛋综合征病毒中和性单克隆抗体的制备、鉴定及在双抗体夹心ELISA中的应用
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作者 魏蔷 李青梅 +3 位作者 金前跃 宋亚鹏 白怡霖 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2024年第2期128-135,共8页
为了制备针对鸡减蛋综合征病毒(EDSV)的中和性单克隆抗体,首先纯化得到重组EDSV纤维蛋白,经血凝试验(HA)鉴定纤维蛋白的血凝活性,HA效价为1∶2~7。之后将纤维蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,免疫4次后,小鼠血清的间接酶联免疫吸附试验(iE... 为了制备针对鸡减蛋综合征病毒(EDSV)的中和性单克隆抗体,首先纯化得到重组EDSV纤维蛋白,经血凝试验(HA)鉴定纤维蛋白的血凝活性,HA效价为1∶2~7。之后将纤维蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,免疫4次后,小鼠血清的间接酶联免疫吸附试验(iELISA)效价最高达到1∶409 600,间接免疫荧光试验(IFA)效价最高达到1∶12 800。取效价最高免疫小鼠脾细胞进行细胞融合制备杂交瘤细胞,结合iELISA和IFA检测,经过多轮亚克隆,最终成功获得了2株稳定分泌中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株9G12和10E11。iELISA结果显示,单克隆抗体9G12和10E11的腹水效价分别为1∶128 000和1∶1 020 000;IFA效价分别为1∶2 000和1∶8 000。Western blot检测结果显示,单克隆抗体9G12和10E11均不能识别变性的EDSV纤维蛋白,表明二者识别纤维蛋白的构象型表位。病毒中和试验结果表明,单克隆抗体9G12和10E11均具有中和活性,中和效价分别为1∶2~7和1∶2~4。亚型鉴定表明,这2种单克隆抗体的轻链均为Kappa型,重链均为IgG1亚型。将基于单克隆抗体9G12和10E11建立的双抗体夹心ELISA方法应用于临床检测EDSV抗原,与荧光定量PCR检测结果的符合率为91.7%。综上,成功筛选出9G12和10E11杂交瘤细胞株,二者分泌抗EDSV特异性抗体,且这2种抗体具有中和EDSV感染活性,可应用于EDSV的临床检测。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 纤维蛋白 中和性单克隆抗体 抗体中和效价 双抗体夹心ELISA
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基于低效价O型全血及A型血浆建立战备血库的可行性分析 被引量:3
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作者 罗圆圆 马春娅 +3 位作者 刘丽 付丽辉 易萌 于洋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期541-545,共5页
目的:探索用低效价O型全血及A型血浆建立战备血库的可行性。方法:应用Galileo全自动血型分析仪检测O型献血者样本的IgM抗A、抗B抗体效价和A型献血者样本的IgM抗B效价,选取抗A、抗B效价同时低于128的O型献血者纳入战备流动血库,抗B效价低... 目的:探索用低效价O型全血及A型血浆建立战备血库的可行性。方法:应用Galileo全自动血型分析仪检测O型献血者样本的IgM抗A、抗B抗体效价和A型献血者样本的IgM抗B效价,选取抗A、抗B效价同时低于128的O型献血者纳入战备流动血库,抗B效价低于128的A型血浆和抗A、抗B效价同时低于128的O型全血纳入战备实体血库。结果:共选取1452个O型献血者,检测抗A/B抗体效价,两种抗体效价均分布于512以下,且样本分布峰值均处于效价4,两种抗体效价>128的样本比例均较低;两种抗体效价存在明显正相关(r=0.383),且IgM抗A效价高于IgM抗B效价的样本比例较高;同时满足IgM抗A和抗B抗体效价<128的献血者1335人(91.94%),可纳入流动血库。检测512例A型献血者抗B效价,结果显示,随着抗体效价的增高,样本比例逐渐降低;抗B抗体效价<128的献血者占99.8%,仅有1例不符合纳入条件。结论:O型献血者全血符合低效价标准的比例较高,A型献血者血浆几乎均符合低效价标准,提高了突发情况下的血液供应率。 展开更多
关键词 战备血库 流动血库 抗体效价 O型全血 A型血浆 IgM抗A/B
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蝮蛇特异性抗体的制备及其效价测定
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作者 朱俊蓉 陆雪玲 +6 位作者 黄周 黄东凌 王璠 韦晚霞 刘恋 黄永龙 王威 《蛇志》 2024年第1期24-26,41,共4页
目的制备蝮蛇特异性抗体,为进一步研发抗蛇毒血清提供理论依据。方法以蝮蛇蛇毒蛋白作为抗原,通过免疫新西兰兔制备蝮蛇特异性抗体,应用间接ELISA法检测其效价,Western blot检测其特异性。结果成功制备了蝮蛇特异性抗体血清,其效价可达1... 目的制备蝮蛇特异性抗体,为进一步研发抗蛇毒血清提供理论依据。方法以蝮蛇蛇毒蛋白作为抗原,通过免疫新西兰兔制备蝮蛇特异性抗体,应用间接ELISA法检测其效价,Western blot检测其特异性。结果成功制备了蝮蛇特异性抗体血清,其效价可达1∶100000,Western blot检测抗体对蝮蛇蛇毒具有专一性。结论本研究成功制备了蝮蛇特异性抗体,推进了抗蝮蛇毒血清的研发。 展开更多
关键词 蝮蛇蛇毒 抗体制备 效价测定
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莫匹罗星产生菌荧光假单胞菌株培养的关键影响因素分析
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作者 丁亚莲 石彦鹏 牛春 《发酵科技通讯》 CAS 2024年第3期150-155,共6页
为了显著提高莫匹罗星的产量以满足生产需求,针对莫匹罗星产生菌荧光假单胞菌株MF21-25的菌落特性、发酵工艺和发酵原材料等培养条件进行了优化研究,获得了最适的菌落培养条件和关键的发酵摇瓶培养影响因素。在优化后的实验条件下,莫匹... 为了显著提高莫匹罗星的产量以满足生产需求,针对莫匹罗星产生菌荧光假单胞菌株MF21-25的菌落特性、发酵工艺和发酵原材料等培养条件进行了优化研究,获得了最适的菌落培养条件和关键的发酵摇瓶培养影响因素。在优化后的实验条件下,莫匹罗星摇瓶效价达到6693μg/mL,比优化前的摇瓶效价4398μg/mL提高了52.2%。该研究结果可以为后续中试放大及工业化生产提供参考。 展开更多
关键词 莫匹罗星 荧光假单胞菌 葡萄糖 发酵单位
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O型血孕妇产前血清IgG抗A(B)抗体效价积分评估HDN发生价值
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作者 何烁晴 洪立闩 +1 位作者 吴永美 孙月娥 《中国计划生育学杂志》 2024年第7期1687-1691,共5页
目的:探究产前O型血孕妇血清中免疫球蛋白G(IgG)抗A(B)抗体效价积分对新生儿溶血(HDN)发生的预测价值。方法:回顾性选取2022年1月-2023年12月本院收治的101例O型血孕妇临床资料,根据新生儿是否发生HDN分为为HDN组(n=26)和非HDN组(n=75)... 目的:探究产前O型血孕妇血清中免疫球蛋白G(IgG)抗A(B)抗体效价积分对新生儿溶血(HDN)发生的预测价值。方法:回顾性选取2022年1月-2023年12月本院收治的101例O型血孕妇临床资料,根据新生儿是否发生HDN分为为HDN组(n=26)和非HDN组(n=75)。比较两组临床资料、产前血清中IgG抗A(B)抗体效价积分等。采用Spreaman相关分析分析孕妇血清中IgG抗A(B)抗体效价积分与HDN发生的相关性,受试者工作曲线(ROC)分析O型血孕妇血清中IgG抗A(B)抗体效价积分对HDN发生的预测价值。结果:HDN组孕妇产前血清IgG抗A(B)抗体效价均高于非HDN组,当产前血清的IgG抗A(B)抗体效价相同时,HDN组孕妇的血清IgG抗A(B)抗体效价积分明显于非HDN组(均P<0.05);Spearman相关分析,孕妇产前血清IgG抗A(B)抗体效价积分与HDN发生呈正相关(r=0.666,P<0.001);ROC曲线分析,O型血孕妇血清中IgG抗A(B)抗体效价积分预测HDN发生曲线下面积0.874,截断值54.88,灵敏度84.0%、特异度94.7%。结论:产前O型血孕妇血清中IgG抗A(B)抗体效价积分新生儿发生HDN概率呈正相关,且对HDN的发生有一定预测价值。 展开更多
关键词 O型血孕妇 血清IgG抗A(B)抗体效价 效价积分 新生儿溶血症 临床评估
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低效价O型全血在国外创伤救治中的应用进展 被引量:1
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作者 马维娟 任少敏 +1 位作者 杨忠思 张燕华 《中国输血杂志》 CAS 2024年第5期602-606,共5页
越来越多的证据表明,红细胞、新鲜冰冻血浆和血小板平衡配比的成分输血在创伤患者大量输血复苏中效果更好,这重新激发了在大量输血方案中使用全血的关注,多数欧美国家大型创伤中心已在院前急救中常规使用低效价O型全血。迄今为止越来越... 越来越多的证据表明,红细胞、新鲜冰冻血浆和血小板平衡配比的成分输血在创伤患者大量输血复苏中效果更好,这重新激发了在大量输血方案中使用全血的关注,多数欧美国家大型创伤中心已在院前急救中常规使用低效价O型全血。迄今为止越来越多证据支持危及生命大出血患者早期使用低效价O型全血可提高其生存率。鉴于我国全血的供应现状,多数创伤救治指南在复苏早期大量输血方案中仍推荐平衡配比成分输血。我们对国外低效价O型全血研究使用情况作一介绍。 展开更多
关键词 全血 低效价O型全血 成分输血 大量输血方案 损伤控制复苏
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溶血三项及孕妇血清IgG效价检测与新生儿溶血病发病率相关性研究
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作者 刘一霏 任伟娟 赵海卫 《川北医学院学报》 CAS 2024年第10期1399-1402,共4页
目的:研究溶血三项及孕妇血清IgG效价检测与新生儿溶血病(HDN)发病率的相关性。方法:纳入产检、分娩的90例O型血产妇及其分娩的新生儿作为研究对象,监测孕妇血清IgG抗体效价,采用溶血三项判定新生儿发生HDN与否。结果:溶血三项试验显示... 目的:研究溶血三项及孕妇血清IgG效价检测与新生儿溶血病(HDN)发病率的相关性。方法:纳入产检、分娩的90例O型血产妇及其分娩的新生儿作为研究对象,监测孕妇血清IgG抗体效价,采用溶血三项判定新生儿发生HDN与否。结果:溶血三项试验显示,判定ABO-HDN率为16.67%,释放、直抗、游离试验阳性率为100.0%、53.33%%、80.00%。溶血三项均阳性和两项阳性的患儿ABO-HDN发生率均高于单项阳性患儿(P<0.05),A型患儿溶血阳性率高于B型患儿(P<0.05)。随着孕妇血清IgG抗体效价依次增加,ABO-HDN发生率逐渐升高(P<0.05)。Spearman分析显示,孕妇IgG抗体效价与ABO-HDN发病率正相关(r_(s)=0.341,P<0.05)。结论:溶血三项及孕妇血清IgG抗体效价与HDN发病率具有相关性,孕期中应监测血清IgG抗体效价,同时新生儿应检测溶血三项,以早期诊断和治疗HDN。 展开更多
关键词 溶血三项 血清IgG抗体效价 新生儿溶血病 诊断
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