蛇床子素通过NF-kB信号通路调控退变髓核细胞的细胞外基质表达、炎症反应及凋亡

目的 研究蛇床子素对退变髓核细胞的细胞外基质表达、炎症反应和凋亡的作用及其潜在机制。方法 采用氧糖剥夺(Oxygen Glucose Deprivation, OGD)培养建立退变髓核细胞模型,将细胞分为:对照组(正常培养)、OGD组(OGD培养)、蛇床子素组(OGD培养+蛇床子素处理)、PDTC组(OGD培养+NF-κB通路抑制剂PDTC处理)和蛇床子素+PDTC组(OGD培养+蛇床子素+PDTC处理)。采用Western blot检测细胞中Ⅱ型胶原(Collagen typeⅡ,Col2al)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、P65和p-P65蛋白表达,ELISA法检测细胞培养液中炎性因子血清白细胞介素-1β(interleukin-1 β,IL-1β),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 与对照组比较,OGD组细胞中Col2al、Aggrecan蛋白相对表达水平明显降低,细胞培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高,细胞凋亡率明显升高,细胞中p-P65蛋白表达明显升高;与OGD组比较,蛇床子素组和PDTC组细胞中Col2al、Aggrecan蛋白相对表达水平明显升高,细胞培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低,细胞凋亡率明显降低,细胞中p-P65蛋白表达明显降低,而蛇床子素+PDTC组上述指标改变最为明显。结论 蛇床子素可能通过抑制核因子激活的B细胞的κ轻链增强(nuclear factorκB,NF-κB)信号通路的活性,促进退变髓核细胞的细胞外基质合成、抑制退变髓核细胞的炎症反应和凋亡。

大黄素通过NF-kB-iNOS/COX-2信号通路治疗急性胰腺炎的作用机制研究

目的石研究大黄素对急性胰腺炎的抗炎治疗作用及相关机制。方法半将24只SPF大鼠随机分为假手术组(Sham组)、蔗糖脂肪酸酯处理组(Z组)、模型组(AP组)和大黄素处理组(E组),每组6只。除Sham组外,每一个组中均须使用L-精氨酸制作急性胰腺炎模型,E组于造完模型后1h及6h分别给予大黄素(60mg/kg)腹腔注射治疗;Z组比照E组,腹腔注射等量的4%的蔗糖脂肪酸酯溶液进行处理;造模实验期间每间隔2h观察大鼠的一般情况,AP组造模12h后处死大鼠,E组及Z组末次给药后12h后处死大鼠,ELISA法检测大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS和COX-2,TBA法检测大鼠血清中SOD、MDA含量;WesternBlot检测大鼠胰腺组织NF-kB蛋白的表达情况;HE染色法检测胰腺及周围组织中的细胞炎症情况。结果与Sham组相比,AP组大鼠一般情况明显变差,血清TNF-α、IL-6及IL-1β指标升高(P<0.05),SOD活性升高,MDA活性降低(P<0.05)COX-2及iNOS显著升高(P<0.05);与AP组相比,大黄素处理组中TNF-α、IL-6及IL-1β指标明显降低(P<0.05),SOD活性升高,MDA活性降低(P<0.05);COX-2及iNOS明显降低(P<0.05);与Sham组比较,AP组大鼠胰腺组织中NF-kB蛋白表达水平显著增加(P<0.05);与AP组相比,E组NF-kB蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论大黄素可以通过NF-kB-iNOS/COX-2通路来控制胰腺炎症,从而达到治疗胰腺炎的效果。

Wnt/β-catenin通路与NF-kB通路的交叉调控对间充质干细胞分化的影响

Wnt/β-catenin信号通路与NF-kB信号通路都是高度保守的通路,调节多种生物学过程,二者之间的交叉影响已在多个生物和医学研究领域引起重视。该文将就Wnt/β-catenin信号通路与NF-kB信号通路的相互作用及对间充质干细胞多向分化的影响进行综述。

基于人脐静脉内皮细胞的OGD/R模型研究当归-川芎药对中7个活性成分对VEGF-PI3K-AKT/NF-κB信号通路的影响

目的探讨当归-川芎药对中7个活性成分(绿原酸、阿魏酸、咖啡酸、丁烯基苯酞、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A、藁本内酯)对VEGF-PI3K-AKT/NF-κB信号通路关键蛋白及其上下游血管活性物质、黏附因子和炎症因子的调控作用。方法构建人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型,采用细胞增殖试剂盒(CCK-8法)检测细胞活力,探索7个成分的最佳造模时间;通过检测乳酸脱氢酶(LDH)释放探索最佳给药浓度;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测7个成分对VEGF、VCAM-1、PAI-1、NF-κB、IL-1和IL-6表达的影响;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测7个成分对VEGF-PI3K-AKT/NF-κB信号通路关键蛋白mRNA表达的影响。结果HUVEC氧糖剥夺6 h再复氧为最佳造模时间。高剂量绿原酸组、阿魏酸组、洋川芎内酯H组,低、中剂量丁烯基苯酞组,中、高剂量洋川芎内酯A、藁本内酯组显著降低LDH漏出率(P<0.05,P<0.01);绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯H部分剂量组细胞中VEGF、ICAM-1、VCAM-1的表达显著降低,绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯H、藁本内酯部分剂量组细胞NF-κB的表达显著下降,绿原酸、咖啡酸、丁烯基苯酞、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A部分剂量组细胞中IL-6的表达显著增加,绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯A部分剂量组细胞IL-1表达显著减少,阿魏酸、洋川芎内酯H部分剂量组细胞中PAI-1的表达量显著下降(P<0.05,P<0.01);绿原酸、阿魏酸、咖啡酸、丁烯基苯酞和洋川芎内酯A部分剂量组细胞中ERK、VEGF、NF-κB、VEGFR2和MMP9的mRNA相对表达量显著下调,洋川芎内酯H和洋川芎内酯A部分剂量组细胞中AKT的mRNA相对表达量均显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论当归-川芎中的药效成分可能通过抑制黏附因子、炎症因子和VEGF-PI3K-AKT/NF-κB信号通路关键蛋白mRNA的表达,从而发挥抗缺血性中风的作用。

活血理肝汤通过LPS/TLR-4/NF-kB信号通路治疗NAFLD大鼠的机制探讨

目的 探讨活血理肝汤通过LPS/TLR-4/NF-kB信号通路防治NAFLD的机制。方法 30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和活血理肝汤组,每组10只。正常对照组给予普通饲料喂养;模型组和活血理肝汤组给予高脂饲料喂养。8周后经肝脏病理HE染色确认造模成功,活血理肝汤组按照8.5g/(kg·d)进行灌胃,正常对照组和模型组使用相同体积生理盐水灌胃,持续8周。全自动生化分析仪测定各组大鼠血清血脂、肝功水平,HE染色和油红O染色观察各组大鼠肝脏组织形态与脂质沉积情况;酶联免疫吸附法检测各组大鼠肝脏白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平以及血清、肝脏、盲肠内容物的脂多糖(LPS)水平。Western blot法和荧光定量PCR法分别检测各组大鼠肝脏组织NF-κB和TLR4的蛋白和mRNA表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)和天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)水平显著升高,高密度脂蛋白(HDL-C)水平显著降低(P<0.05);肝细胞内可见大量大小不等的脂肪空泡,肝窦狭窄或消失,脂质沉积明显;肝脏IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α水平以及血清、肝脏、盲肠内容物中LPS水平均显著升高(P<0.05);肝脏TLR4和NF-κB的蛋白和mRNA表达均增高(P<0.05)。与模型组比较,活血理肝汤组大鼠血清TC、TG、LDL-C和AST、ALT水平显著降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05);肝细胞内脂肪空泡明显减少,肝窦狭窄有所缓解,脂质沉积情况有所改善;肝脏IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α水平和盲肠内容物、血清、肝脏LPS水平均显著降低(P<0.05);肝脏TLR4和NF-κB的蛋白和mRNA的表达均降低(P<0.05)。结论 活血理肝汤能够改善NAFLD大鼠血脂水平、减轻肝脏脂质沉积,降低炎症指标IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的水平,改善肝脏的内环境,并可能是通过LPS/TLR-4/NF-kB信号通路发挥NAFLD的保护作用。

超分子水杨酸对兔耳痤疮模型p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的:探究超分子水杨酸对兔耳痤疮模型p38MAPK/NF-κB信号通路的影响机制。方法:将30只实验兔随机分成正常对照组、2%超分子水杨酸(Salicylic acid,SA)组、30%SA组、夫西地酸组、模型对照组,每组6只,并予以相应外用药物干预,连续4周,并分别于用药2周后、用药4周后检测p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8蛋白的表达。结果:结果显示,随着用药时间的延长,各组的p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8均呈下降趋势。用药前,各组间p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8蛋白表达均差异无统计学意义(P>0.05)。用药2周后,2%SA组、30%SA组、夫西地酸组p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8低于模型对照组(P<0.001);三个用药组之间p38MAPK、NF-κB、IL-1β两两比较差异无统计学意义(P>0.05);2%SA组IL-8低于30%SA组、夫西地酸组(均P<0.05);30%SA组与夫西地酸组IL-8差异无统计学意义(P>0.05)。用药4周后,三个用药组p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8低于模型对照组(P<0.05);2%SA组、30%SA组p38MAPK、NF-κB、IL-8低于夫西地酸组(P<0.05),2%SA组IL-8低于30%SA组(P<0.05);2%SA组与30%SA组p38MAPK差异无统计学意义(P>0.05);2%SA组、30%SA组与夫西地酸组IL-1β均差异无统计学意义(均P>0.05);2%SA组IL-1β低于30%SA组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:超分子水杨酸可通过抑制p38MAPK/NF-κB信号通路来发挥抗炎作用,且随着用药时间的延长疗效也在逐渐增加,并优于夫西地酸。

基于TLR4/MYD88/NF-κB通路研究降脂通脉饮对高脂血症模型大鼠的影响

目的:基于Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MYD88)/核转录因子-κB (nuclear transcription factor-κB,NF-κB)通路探讨降脂通脉饮对高脂血症模型大鼠的影响。方法:从15只SD大鼠中随机选取3只作为空白组,其余大鼠给予高脂饲料2周建立高脂血症模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、降脂通脉饮低剂量组(1.56 mg·kg^(-1))、降脂通脉饮中剂量组(3.125 mg·kg^(-1))、降脂通脉饮高剂量组(6.25 mg·kg^(-1)),每组各3只,给予相应剂量药物8周,每日1次,空白组和模型组给予生理盐水灌胃。全自动生化仪检测大鼠血清血脂水平,包括总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C);ELISA检测血清炎症因子含量,包括肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ);Western Blot和qPCR检测颈动脉组织TLR4、MYD88、NF-κB蛋白和基因表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平升高(P<0.01);与模型组比较,降脂通脉饮低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平降低(P<0.05);各组大鼠血清HDL-C水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,模型组大鼠血清MCP-1、TNF-α、IFN-γ含量升高(P<0.01);与模型组比较,降脂通脉饮中剂量、高剂量组大鼠血清MCP-1、TNF-α、IFN-γ含量降低(P<0.05),降脂通脉饮低剂量组大鼠血清TNF-α、IFN-γ含量降低(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠颈动脉组织TLR4 mRNA、MYD88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平升高(P<0.01);与模型组比较,降脂通脉饮低剂量、中剂量、高剂量组大鼠颈动脉组织TLR4 mRNA、MYD88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平降低(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠颈动脉组织TLR4、MYD88、NF-κB蛋白表达水平升高(P<0.01);与模型组比较,降脂通脉饮中剂量、高剂量组大鼠颈动脉组织TLR4、MYD88、NF-κB蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:降脂通脉饮可降低高脂血症大鼠血脂水平,其机制可能与抑制TLR4/MYD88/NF-κB通路,从而减轻炎症反应有关。

基于“TLR4/NF-kB”信号通路研究“加味四妙丸”治疗急性痛风性关节炎大鼠的作用机制

[目的]观察"加味四妙丸"治疗急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)大鼠的疗效,并基于"TLR4/NF-kB"信号通路探讨"加味四妙丸"作用机制。[方法]108只SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、"加味四妙丸"低、中、高剂量组,每组18只。除正常组外,其余大鼠参照Coderre造模方法膝关节腔注射尿酸钠悬浊液制作AGA模型,治疗4d后,计算各时间点受试关节肿胀指数,光学显微镜观察受试关节滑膜组织病理学变化,采用ELISA法检测关节腔冲洗液IL-1β、TNF-α的含量,免疫组化法检测关节滑膜组织TLR4、NF-kB、p-NF-kB蛋白表达,RT-PCR法检测滑膜组织TLR4m RNA表达。[结果]与正常组比较,模型组大鼠膝关节肿胀指数显著升高(P<0.01),关节滑膜组织炎性改变明显,滑膜组织中TLR4、NF-kB、p-NF-kB蛋白表达量和TLR4m RNA表达量显著上调(P<0.01),关节腔冲洗液中IL-1β、TNF-α含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,"加味四妙丸"中、高剂量组大鼠治疗后关节肿胀指数显著下降(P<0.01),关节滑膜组织炎性改变明显减轻,滑膜组织中TLR4、NF-kB、p-NFkB蛋白表达量和TLR4m RNA表达量均显著下调(P<0.01),关节腔冲洗液中IL-1β、TNF-α含量显著下降(P<0.01)。[结论]"加味四妙丸"可能通过抑制"TLR4/NF-kB"信号通路,从而抑制IL-1β、TNF-α的产生,起到治疗AGA的作用,且其疗效与药物剂量有一定相关性。

慢性萎缩性胃炎患者体内NF-KB和Bcl-2的表达及意义

目的:研究慢性萎缩性胃炎患者体内NF-KB(核因子KB)和Bcl-2(B细胞淋巴瘤/白血病-2基因)的表达及意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测胃癌患者、慢性非萎缩性胃炎患者、慢性萎缩性胃炎患者胃粘膜中NF-KB和Bcl-2的表达。结果:NF-KB和Bcl-2在各组不同患者中的阳性率呈明显递增趋势,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。NF-KB和Bcl-2的表达水平在不同肿瘤分化程度、浸润深度、远处转移及淋巴结转移患者中差异有统计学意义(P<0.05)。结论:NF-KB和Bcl-2表达水平的增加与胃癌的发生有重要关系,联合检测NF-KB和Bcl-2的表达,在临床上具有重要诊断意义,及时发现胃癌的早期病变。

牙周炎伴口腔扁平苔藓中IL-17激活NF-kB调控hPDLFs促进MMPs的分泌

目的:探讨IL-17在人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)中的表达对牙周炎伴口腔扁平苔藓患者中的作用及意义。方法:采用ELISA方法检测43例健康志愿者(对照组)和43例牙周炎伴口腔扁平苔藓患者(研究组)血清中IL-17蛋白表达水平及IL-17在研究组唾液中的表达水平;检测研究组牙周指标。CCK8法检测IL-17对hPDLFs细胞增殖能力的影响;qRT-PCR和ELISA方法分别检测IL-17对hPDLFs中MMP1,MMP2,MMP3和MMP9的mRNA及蛋白质表达水平影响。通过Western blot及ELISA检测IL-17对hPDLFs细胞中NF-kB P65蛋白磷酸化的影响及MMP1,MMP2,MMP3和MMP9的蛋白表达变化。结果:研究组血清IL-17水平明显高于对照组(P<0.05),唾液中IL-17水平与牙周破坏程度呈正相关。IL-17可促进hPDLFs中NF-kB P65蛋白磷酸化,并促进MMP-1,MMP-2,MMP-3和MMP-9 Mrna及蛋白的表达。结论:IL-17可通过激活NF-kB信号通路促进hPDLFs中MMP-1,MMP-2,MMP-3和MMP-9的分泌。

X射线全身照射对免疫器官内NF-kB的DNA结合活性的影响

采用凝胶电泳移动变化分析（ＥＭＳＡ）方法，观察了 Ｘ射线全身照射后小鼠胸腺细胞及脾细胞内 ＮＦ－ｋＢ ＤＮＡ结合活性的时程变化及其剂量效应关系。结果表明；胸腺细胞及脾细胞核蛋白提取物内存在两种与 ｋＢ位点特异结合的 ＮＦ－ｋＢ二聚体。 照射后两者的变化时程及剂量效应关系显然不同． ２Ｇｙ照射后胸腺细胞内 ｐ５０／ｐ６５的 ＤＮＡ结合活住在 ２４～４８ｈ稍有升高，而 ｐ５０／ｐ５０的 ＤＮＡ结合活性在照射后很快开始上升，于 ４ｈ达峰值，维持于高水平至 １２ｈ后逐渐下降。 照射后 １２ｈ电离辐射诱导 ｐ５０／ｐ６５复合物活性变化不明显，当剂量达 １Ｇｙ以上时ｐ５０／ｐ５０的ＤＮＡ结合活性呈剂量依赖性升高。提示，中等以上剂量的电离辐射主要诱导具有转导抑制作用的复合物．对脾细胞核蛋白提取物剂量效应关系及２Ｇｙ照射后的时程研究表明，较低剂量辐射对 ｐ５０／ｐ６５ 二聚体的表达有轻度刺激作用，较高剂量则显示抑制效应，而对 ｐ５０／ｐ５０二聚体的活住几乎无影响．提示，ＮＦ－ｋＢ在不同免疫器官内的构成及其对电离辐射的反应存在着差异。

NF-KB在CIA大鼠脊神经节的表达及针刺夹脊穴的治疗作用

目的探讨NF-KB在CIA大鼠C7—L4脊神经节中的表达及针刺夹脊穴(C7—L4)治疗类风湿关节炎(RA)的机制。方法建立CIA模型,用免疫组织化学法检测脊神经节中NF-KB蛋白的表达,用Western blotting法分析脊神经节细胞核蛋白中NF-KB的改变及CIA大鼠关节肿胀指数变化。结果对照组C7—L4脊神经NF-KB免疫阳性物在胞浆中分布较多,核内分布较少,其蛋白轻度表达,关节无肿胀;CIA组C5—L4脊神经节中NF-KB阳性反应物呈现由胞浆向细胞核移位现象,其蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.01),且关节肿胀程度明显高于对照组(P<0.01),针刺夹脊穴组C7—L4脊神经节细胞胞浆中NF-KB阳性反应物高于细胞核,细胞核蛋白表达水平低于CIA组(P<0.01),与对照组比较无显著性差异(P>0.05),关节肿胀指数与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论脊神经节中NF-KB活化参与RA发病机制。针刺夹脊穴通过抑制NF-KB信号转导通路以及通过神经内分泌免疫网络抑制NF-KB的表达及活性,可能是针刺治疗RA的机制之一。

缺血再灌注肝脏Kupffer细胞NF-kB激活及其意义

目的探讨Kupffer细胞(KCs)NF-kB激活在缺血再灌注肝损伤中的作用。方法 Wistar大鼠随机分为肝缺血再灌注(HIR)组、HIR IL-10治疗组、HIR生理盐水治疗组及对照组。HIR组大鼠肝左叶及中肝叶缺血90min后再灌注,治疗组分别于肝缺血前及再灌注前从阴茎背静脉注入重组鼠IL-10(10mg/kg)或生理盐水,对照组仅显露肝门部血管但不进行缺血再灌注与治疗。分别采用EMSA法及RT-PCR法检测再灌注后0h、1h、3h、6h及12h KCsNF-kB活性和KCs TNF-αmRNA、IL-6mRNA、IL-1βmRNA表达,检测HIR后0h与12h血清ALT及AST水平。结果 HIR后0h～12h KCs NF-kB明显激活并于HIR后3h达到高峰;HIR后0h～12h KCs TNFαmRNA、IL-6mRNA及IL-1βmRNA表达显著高于对照组,并于HIR后3h达到高峰;HIR后0h与12h血ALT及AST活性明显高于对照组.IL-10治疗能显著降低HIR后KCs NF-kB活性及减少KCs源性TNFαmRNA、IL-1βmRNA与IL-6mRNA表达,从而缓解HIR后肝损伤。结论 HIR后KCs NF-kB高水平激活并促进KCs源性肝细胞损害递质的表达从而促进肝损害。

清肺通络膏对Ⅳ性肺炎大鼠肺组织PI3K/AKT/NF-KBP65蛋白表达的影响

目的:探究清肺通络膏对流感病毒诱导的肺炎大鼠肺组织中PI3K/AKT/NF-KB信号传导通路的调控机制。方法:将40只Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,清肺通络膏高、中、低剂量组,除正常组外,采用鼻腔接种流感病毒FM1株诱导Wistar幼龄大鼠肺炎,在感染后各治疗组采用清肺通络膏贴敷于大鼠背部肺脏投影区治疗。观察各组大鼠的一般状态;肺组织形态学;采用免疫组化染色法检测各组大鼠肺组织PI3K,AKT,核因子NFB p65的表达水平。结果:与正常组相比,模型组大鼠肺组织中PI3K,AKT,NF-k B p65的表达显著增高(P<0.05),清肺通络膏高剂量组PI3K,AKT,NF-k B p65的表达较模型组明显降低(P<0.05)。结论:清肺通络膏通过抑制PI3K/AKT信号通路,使NF-k B p65表达降低,从而减轻了肺组织的病理损伤,达到治疗目的。

mm-LDL对內皮细胞转录因子NF-kB活性的影响

目的 研究轻微修饰低密度脂蛋白(mm-LDL)激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径以及NF-kB对血小板源性生长因子B链(PDGFb)表达的调控作用。方法 以FeSO4修饰法制备mm-LDL，以正常LDL(n-LDL)作对照，作用于培养内皮细胞后提取核蛋白，用凝胶阻滞实验检测转录因子NF-kB核转位及结合活性的变化。观察自由基清除剂probucol及PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB的影响。通过检测报告基因探讨核因子诱导激酶（NIK）和核因子-kB抑制亚基激酶(IKK)在激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径中的作用以及mm-LDL激活的NF-kB对PDGFb基因启动子的作用。结果 mm-LDL能激活培养内皮细胞转录因子NF-kB, 自由基清除剂probucol和PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB无明显抑制作用。变异型NIK及IKK能显著降低报告基因荧光素酶的活性，mm-LDL激活的NF-kB还能增加带有PDGFb基因上游调控序列（-189/＋43）的报告基因荧光素酶的活性。Slot blot结果显示变异型NIK能显著减少受mm-LDL刺激的内皮细胞 PDGFb mRNA含量。结论 mm-LDL可通过NIK-IKK途径激活内皮细胞转录因子NF-kB并促进PDGFb基因表达。

大鼠急性心肌缺血后心肌NF-kB的检测及其法医学意义

目的检测大鼠急性心肌缺血后核因子-kB(NF-kB)在心肌组织内的变化,探讨其在心肌早期缺血死后诊断中的法医学意义。方法30只大鼠随机分为正常对照,缺血0.5h,1h,2h,4h,8h共6组,每组5只建立大鼠急性心肌缺血模型,用免疫组化染色技术(S-P法),观察不同时间缺血心肌中NF-kB阳性着色,并应用图像分析系统进行定量分析。结果大鼠心肌缺血30m in,心肌细胞核出现散在NF-kB阳性染色;缺血60m in,心肌阳性染色细胞核增多;4h达高峰;8h组开始下降;免疫组化染色定量检则的阳性单位:缺血2h、4h、8h分别为20.042±1.084、22.028±3.452和20.524±1.595;正常对照组未见核阳性反应。结论大鼠心肌缺血8h内,心肌细胞核NF-kB阳性染色呈现一定规律性变化,对早期急性心肌缺血的死后诊断具有法医学意义。

Bcl-2和NF-kB在大鼠酒精性肝病中的表达及相关性

目的观察大鼠酒精性肝病组织病理形态学改变,探讨细胞凋亡与Bcl-2、NF-kB的表达及意义。方法采用灌胃法制备大鼠酒精性肝病(ALD)模型,模型组用40%酒精8g/(kg.d)分二次灌胃共12周,对照组灌等量的生理盐水,实验第8、12周末分批处死动物。用HE染色及天狼星红染色观察肝脏病理学改变,用TUNEL法检测肝细胞的凋亡,用免疫组化法检测Bcl-2、NF-kB的表达。结果①模型组与对照组比较,肝细胞明显肿胀,可见大小不等的脂肪空泡,部分处可见点状、灶壮坏死,肝组织内胶原纤维轻度增生,随造模时间延长模型组病变加重。②凋亡的肝细胞主要位于肝组织中点状、灶状和碎屑样坏死区及其周围,模型组肝细胞凋亡指数明显高于对照组(P<0.05)。③Bcl-2和NF-kB阳性细胞主要分布在中央静脉及肝细胞坏死灶周围,模型组Bcl-2、NF-kB表达强度明显高于对照组(P<0.05)。④Bcl-2和NF-kB表达间存在相关性,且两者之间存在正相关关系(r=0.576,P<0.01)。结论大鼠酒精性肝病发生与肝细胞凋亡密切相关。大鼠酒精性肝病的发生、发展过程中Bcl-2和NF-kB参与肝细胞凋亡。NF-kB基因活化后,上调Bcl-2基因的表达。

麻黄素对小鼠肺组织抗氧化物酶和Bax,NF-kB表达的影响

【目的】探讨麻黄素对肺组织抗氧化物酶活性和特异蛋白表达的影响.【方法】选48只小鼠随机分为麻黄素组和对照组,麻黄素组用递增剂量腹腔连续注射麻黄素溶液(2.0、4.0、6.0g/L)15d(每天两次,每次0.2mL),对照组注射等量生理盐水,分别于5、10、15d时,用比色法检测各组小鼠肺组织GSH-Px活性和MDA含量的变化,用免疫组织化学法检测肺组织Bax蛋白和NF-kB表达的变化.【结果】与对照组相比,麻黄素组小鼠肺组织GSH-Px活性降低,MDA含量升高,10、15d时差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01),肺组织Bax蛋白和NF-kB阳性表达的平均光密度值增多,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01).【结论】麻黄素影响小鼠肺组织抗氧化物酶活性,能诱导肺组织细胞凋亡基因的表达,影响器官组织的结构和功能.

脑溢安颗粒剂对出血性中风大鼠缺血皮质区细胞凋亡及HSP70与NF-kB表达的影响

目的 :研究脑溢安 (NYA)颗粒剂对出血性中风大鼠脑内HSP70与NF kB表达的影响。方法 :用Ⅶ型胶原酶立体定位法复制出血性中风动物模型 ,观察行为、TUNEL及HE染色 ,HSP70、NF kB免疫组化反应 ,取手术侧海马及皮质分别抽提总蛋白与核蛋白进行Westernblot反应 ,密度扫描测定HSP70与NF kB蛋白表达。结果 :NYA治疗组爬行计分明显低于模型对照组 ,3d时血肿明显缩小 ,7d基本吸收 ,凋亡细胞明显减小 ;免疫组化示 3d时可见 ,HSP70信号增强 ,NF kB信号相对减弱 ;Westernblot及密度扫描显示HSP70显著升高 ,NF kB显著降低。结论 :NYA能促进神经功能恢复 ,加快血肿吸收 ;增强HSP70表达 ,抑制NF kB表达 ,通过抑制炎症因子保护脑出血后继发脑缺血损伤可能是NYA的作用机理之一。

电针对佐剂性关节炎大鼠下丘脑中NF-KB表达的影响

目的:观察电针对佐剂性关节炎(AA)大鼠NF-KB在下丘脑表达的影响。探讨电针的镇痛及免疫调节作用。方法:将大鼠随机分为3组,即空白组、模型组及模型加电针组。用免疫组化方法检测各组下丘脑NF-KB(P65)的表达。结果:在模型组AA大鼠下丘脑中活化的NF-KB明显增多;与空白组比较有显著性差异。电针组较模型组NF-KB的表达减少,与模型组比较有显著性差异。结论:针刺可通过抑制活化的NF-KB在下丘脑的表达,调节NF-KB活性。针刺镇痛抗炎可通过NF-KB这一环节起到关键作用。