NFκB p65 siRNA对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的探讨NFκB信号通路对ox-LDL诱导的HUVEC的作用。方法将传代好的HUVEC随机分为ox-LDL培养组、si-control组及si-NFκB组,转染48 h后进行敲除效率鉴定,测定不同组别细胞的存活率、胞内MDA和SOD含量。结果与其他两组比较,si-NFκB组NFκB p65的表达量、MDA含量显著降低(P<0.01),细胞的存活率、SOD含量明显升高(P<0.01);其他两组间各指标均无统计学意义(P>0.05)。结论靶向干扰NFκB p65对ox-LDL诱导的HUVEC起到保护作用。

NF-κB p65通过miR-150/TRPC6信号通路改善肾缺血再灌注损伤

目的 探究NF-κB(nuclear transcription factor-κB, NF-κB)p65通过miR-150/瞬时受体电位阳离子通道6(transient receptor potential cation channel 6, TRPC6)信号通路促进肾缺血再灌注损伤的作用。方法 选取2022年8月—2023年8月由齐齐哈尔医学院医药科学研究院购买的60只雄性大鼠作为研究对象,将体质量相似的大鼠按照随机数字表法随机分为3组:假手术实验组(Sham组,n=10)、缺血/再灌注(ischemic/reperfusion, I/R)I/R实验组(n=10)、慢病毒实验组(n=40),其中慢病毒实验组分为miR-150-mimic组(n=10)、I/R+miR-150-mimic组(n=10)、NF-κB p65-si组(n=10)、I/R+NF-κB p65-si组(n=10)。评估各组大鼠肾组织中血清肌酐(creatinine, Cr)和血尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、炎性因子、miR-150、NF-κB p65、TRPC6的水平。结果 I/R实验组与Sham组比较,NF-κB p65、miR-150蛋白水平降低(0.26±0.02 vs 0.79±0.03、0.34±0.08vs 1.46±0.12),TRPC6蛋白水平下降(0.35±0.04 vs. 1.08±0.15),差异有统计学意义(t=46.484、24.558、8.603,P均<0.05)。与I/R实验组相比,I/R+miR-150-mimic组TRPC6水平升高,而炎症因子水平更低,I/R+NF-κB p65-si组miR-150水平更高,炎症因子水平升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 NF-κB p65通过调节miR-150/TRPC6信号通路影响肾功能及炎症,改善肾缺血再灌注损伤。

藏药青鹏骨伤灵复方乙醇提取物通过抑制TLR4/p65-NFκB通路活化治疗大鼠关节炎

目的探究藏药青鹏骨伤灵复方乙醇提取物(QPEE)对大鼠关节炎的治疗作用及潜在机制。方法首先通过酊剂浸渍法获得QPEE,qRT-PCR检测其对IL-1β、TNF-α、IL-6和iNOS的mRNA表达的作用。免疫印迹法(WB)检测TLR4/p65-NFκB炎症通路相关蛋白的表达水平。通过构建胶原诱导关节炎(CIA)大鼠模型,评估QPEE对CIA大鼠的治疗作用。采用Micro-CT检测CIA大鼠股骨骨密度。结果在细胞水平上,QPEE对炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6和iNOS的mRNA表达具有显著抑制作用。在动物水平上,QPEE对CIA大鼠股骨骨密度具有显著改善的作用,并且对CIA大鼠脚踝肿胀具有显著的抑制作用。结论QPEE可能是通过抑制TLR4/p65-NFκB炎症通路活化,达到治疗CIA大鼠的作用。本研究为藏药青鹏骨伤灵复方在临床上治疗关节炎的应用提供了理论支持。

NF-κB/p65 siRNA对小鼠Lewis肺癌移植瘤细胞凋亡和Bax表达的影响

目的研究p65siRNA抑制NF-κB/p65信号通路对小鼠Lewis肺癌移植瘤细胞凋亡和Bax表达的影响。方法采用Lewis肺癌细胞C57BL/6雄性小鼠移植瘤组织悬液,建立C57BL/6雄性小鼠移植瘤模型。将NF-κB/p65 siRNA接种于荷瘤小鼠,观察下调NF-κB/p65表达后荷瘤小鼠瘤细胞凋亡情况。进一步应用实时定量PCR和Western blotting检测肿瘤组织中Bax mRNA及蛋白表达变化。结果经p65 siRNA治疗后,小鼠肿瘤细胞发生明显凋亡,肿瘤组织Bax m RNA及蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 NF-κB/p65通路可能在Lewis肺癌细胞凋亡中发挥重要作用。

喉鳞癌中NFκ B p65和PTEN的表达及临床意义

目的:探讨核因子κBp65(Nuclear factor-κBp65,NFκB p65)和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosometen,PTEN)在喉鳞癌组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化法检测52例喉鳞癌组织及30例癌旁正常组织中NFκB p65和PTEN的表达。结果:喉鳞癌中NFκBp65表达明显高于癌旁正常组织(P<0.01),NFκBp65的表达水平与喉鳞癌的T分期、淋巴结转移及临床分期密切相关(P<0.05)。喉鳞癌中PTEN表达明显低于癌旁正常组织(P<0.01),PTEN的表达水平与喉鳞癌的T分期、淋巴结转移及临床分期密切相关(P<0.05)。NFκB p65和PTEN蛋白在不同年龄、不同性别、不同临床分型及不同病理分级的喉鳞癌组织中表达差异无统计学意义(P>0.05)。NFκB p65和PTEN在喉鳞癌中的表达呈负相关(rs=-0.580,P<0.01)。结论:NFκB p65的高表达及PTEN的缺失表达与喉鳞癌的发生、发展有关,二者有可能成为判断喉鳞癌侵袭能力及预后评估的参考指标。

激活PPARα表达对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大及NFATc4与p65-NFκB相互作用的影响

目的:研究PPARα激动剂非诺贝特(fenofibrate)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大的影响及机制。方法:在AngⅡ诱导的心肌细胞肥大模型中加入非诺贝特(10μmol/L)预处理1 h后,采用real-time PCR检测肥大标志物ANF、BNP和β-MHC mRNA水平变化,Western blotting检测NFATc4和p65-NFκB核转位的变化,免疫共沉淀检测心肌细胞核内p65-NFκB与NFATc4之间的相互作用,EMSA检测NFATc4在BNP启动子上DNA结合活性的变化。结果:非诺贝特可显著抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大。非诺贝特可抑制AngⅡ诱导的NFATc4和p65-NFκB的入核,以及两者在核内的相互作用。非诺贝特可抑制AngⅡ诱导的NFATc4在BNP启动子上DNA结合活性的增加。结论:非诺贝特可增强心肌细胞核内PPARα与NFATc4之间的相互作用,并减弱p65-NFκB与NFATc4之间的相互结合,进而降低NFATc4在BNP启动子上的DNA结合活性,这可能是其抑制AngⅡ诱导的心肌肥大的重要机制。

原花青素对CIA大鼠足爪组织中NF-κB/p65蛋白和血清中某些促炎性细胞因子表达的影响

目的研究原花青素对Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎(CIA)大鼠足爪组织中核转录因子NF-κB/p65蛋白表达的抑制作用和血清中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α等水平的影响。方法建立Ⅱ型胶原诱导的CIA大鼠模型,免疫组化法检测足爪组织中NF-κB/p65蛋白的表达,ELISA法检测CIA大鼠血清中IL-1β和TNF-α的含量。结果原花青素能剂量依赖性地下调NF-κB/p65蛋白的表达,降低CIA大鼠血清中TNF-α和IL-1β的水平。结论原花青素对CIA大鼠炎症的抑制作用可能与其下调NF-κB/p65蛋白表达、降低促炎性细胞因子TNF-α、IL-1β的水平有关。

rBTI联合紫杉醇通过激活NFκB/p65促进MCF-7细胞凋亡

rBTI、紫杉醇均有抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡等作用,但两者联合用药对肿瘤细胞的影响尚不明确.本文通过MTT比色法检测rBTI与紫杉醇联合作用对MCF-7细胞增殖的影响;采用流式细胞术分析,对MCF-7细胞凋亡以及ROS水平进行检测;利用qRT-PCR和Western印迹方法,检测rBTI与紫杉醇联合作用后凋亡因子表达情况.结果表明,rBTI（2.5μmol/L）与紫杉醇（0.05~0.5μmol/L）联合作用于MCF-7细胞后,能显著抑制其增殖.将rBTI与紫杉醇进行联合协同用药,诱导了MCF-7细胞凋亡及ROS的产生;同时与rBTI单独作用时相比,联合作用明显上调了p53、Bax的表达,促进了IκBα蛋白的磷酸化以及NFκB/p65的核转位;与rBTI组和紫杉醇单独作用组相比,两者联合用药明显下调了Bcl-2和CyclinD1的表达.本研究证实,rBTI联合紫杉醇通过诱导ROS的产生,激活NFκB/p65信号转导途径,协同促进MCF-7细胞的凋亡.

HER-2蛋白和NFκB/p65蛋白在人卵巢上皮性肿瘤中的表达分析

目的研究HER-2蛋白和NFκB/p65蛋白在人卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法(SABC法)检测63例卵巢组织中HER-2蛋白和NFκB/p65蛋白的表达情况,其中正常卵巢组织7例、卵巢良性肿瘤10例、卵巢交界性肿瘤10例、卵巢上皮性恶性肿瘤36例。结果HER-2蛋白在卵巢上皮性良性肿瘤、交界性肿瘤和恶性肿瘤中的表达阳性率分别为10.0%、30.0%、36.1%(P>0.05)。NFκB/p65蛋白在卵巢上皮性良性肿瘤、交界性肿瘤和恶性肿瘤中的表达阳性率分别为20.0%、50.0%、75.0%(P<0.05)。正常卵巢组织中两者均无表达。HER-2蛋白的表达与病理组织分级有关,组织细胞分化越差其表达阳性率越高,差异有显著性(P<0.05)。HER-2蛋白的表达与卵巢上皮性恶性肿瘤的组织分型、临床分期、腹水、年龄无关(P>0.05)。NFκB/p65蛋白的表达与卵巢上皮性恶性肿瘤组织分型、病理组织分级、临床分期、腹水、年龄均无关。HER-2蛋白和NFκB/p65蛋白在卵巢上皮性恶性肿瘤中的表达无相关性。结论HER-2可作为判断卵巢上皮性恶性肿瘤预后的指标之一。NFκB/p65在卵巢上皮性肿瘤的发生、发展中起一定作用。HER-2在NFκB/p65基因活化与表达过程中可能不起作用,或只是众多影响因素之一,而非独立影响因素。

血红素氧合酶-1对大鼠肝脏缺血再灌注NF-κBp65和细胞凋亡的影响

目的探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对大鼠肝脏缺血再灌注NF-κB P65、细胞凋亡的影响。方法SD大鼠采用随机数字表法分成5组:正常组(N),假手术组(S),手术组(I/R建立肝脏缺血再灌注损伤模型),手术给药Ⅰ组(I/R+hemin),手术给药Ⅱ组(I/R+Zn PP),手术后6 h、12 h下腔静脉取血分离血清检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)。Western blot方法测定肝脏NF-κB p65的表达,免疫组化方法测定肝脏Fas蛋白的表达。结果 1hemin组ALT、AST较I/R组及Zn PP组明显降低(P<0.01);2肝组织NF-κB p65的表达:hemin组NF-κB p65表达比同期I/R组减少(P<0.01);Zn PP组NF-κB p65表达比同期I/R组增多(P<0.01);3肝组织Fas:hemin组Fas表达减少(P<0.05),Zn PP组Fas表达明显增多(P<0.01)。结论 HO-1对肝脏缺血/再灌注损伤的保护作用与NF-κBP65密切相关,可能通过抑制NF-κB p65的活性来减少细胞凋亡。

APR3、NFκB/p65和NFAT3在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义

分析APR3、NFκB/p65和NFAT3蛋白从卵巢上皮性良性肿瘤到恶性肿瘤的表达趋势及其临床病理因素的关系。方法:采用免疫组化的方法(Elivision)检测各种卵巢肿瘤组织中的APR3、NFκB/p65及NFAT3蛋白,用于检测的卵巢癌组织、卵巢上皮性交界性肿瘤组织和卵巢良性上皮性肿瘤组织的例数依次为60、18和37。结果:APR3和NFκB/p65蛋白在良性浆液性卵巢肿瘤、交界性浆液性卵巢肿瘤和浆液性卵巢癌中的阳性表达率均依次降低(均为P<0.05)。分别比较APR3、NFκB/p65及NFAT3这三种蛋白在粘液性各种恶性程度不同的肿瘤组织中的阳性表达率,差异均没有统计学意义(均为P﹥0.05)。APR3、NFκB/p65及NFAT3蛋白的阳性情况均和卵巢癌各种特征相关(P<0.05),如组织分化程度、病理临床分期、淋巴结及腹腔脏器是否转移、腹水是否形成等;APR3与NFκB/p65在卵巢癌中的表达呈正相关(r=0.382,P<0.05)。结论: APR3及NFκB/p65与浆液性卵巢肿瘤发生发展有关,NFκB/p65可能通过增强APR3的表达促进浆液性卵巢肿瘤的发生。

丹白颗粒对盆腔炎性疾病后遗症大鼠子宫组织TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路的影响

目的探讨丹白颗粒对盆腔炎性疾病后遗症模型大鼠炎症因子、子宫组织Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子8(myeloid differentiation factor 88,MyD88)/核转录因子κB p65(nuclear factor kappa-B p65,NF-κB p65)信号通路相关蛋白表达水平的影响,及其治疗盆腔炎性疾病后遗症的作用机制。方法将42只SD大鼠按照随机数字表法分为6个组,分别为空白对照组、模型组、丹白颗粒低剂量组、丹白颗粒中剂量组、丹白颗粒高剂量组、康妇炎胶囊组(阳性药对照组),以苯酚胶浆注射联合机械损伤法复制大鼠盆腔炎性疾病后遗症模型,造模成功后,空白组和模型组采用10 ml/(kg·d)生理盐水灌胃;丹白颗粒低、中、高剂量组分别用丹白颗粒药物混悬液1.25、2.5、5.0 g/(kg·d)灌胃;阳性药对照组用康妇炎胶囊混悬液0.25 g/(kg·d)灌胃。干预14 d后进行取材,通过苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)对各组大鼠进行子宫组织学观察,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠外周血白介素-6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-4(interleukin 4,IL-4)、白介素-10(interleukin 10,IL10)等炎症因子水平,蛋白印迹试验(western-blot,WB)法检测TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路相关蛋白表达。结果HE染色结果显示,与空白组比较,模型组子宫内膜腔壁结构改变,子宫内膜充血水肿,有大量或层状性炎性细胞浸润,纤维组织增生,上皮细胞变性坏死,腺体萎缩变形;各治疗组在宫腔粘连、子宫内膜充血水肿、炎细胞浸润等方面均较模型组有不同程度的缓解,其中以丹白颗粒高、中剂量组较为显著(P<0.05)。ELISA结果显示,与空白组比较,模型组大鼠血清IL-6、TNF-α表达显著升高(P<0.05),IL-4、IL-10表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,各治疗组IL-6、TNF-α表达均显著降低(P<0.05),IL-4、IL-10表达均显著升高(P<0.05)。WB结果显示,与空白组比较,大鼠子宫组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达显著升高(P<0.05),与模型组相比,各治疗组大鼠子宫组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论丹白颗粒可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路相关蛋白的表达,下调炎症因子水平,有效治疗盆腔炎性疾病后遗症。

NF—κB／P65、FHIT在结直肠癌的表达及临床病理意义

目的研究生物标志物NF—κB／P65及FHIT在结直肠癌的表达及肿瘤生物学特点，探讨其与患者无瘤生存时间和总体生存时间的关系。方法采用PV6000二步法检测359例结直肠癌（其中198例有完整的随访资料）及35例癌旁正常组织NF-κB／P65及FHIT表达的异同。结果结直肠癌NF-κB／P65的阳性率为67．7％（243／359），FHIT的阳性率为46．0％（165／359）。NF-κB／P65和FHIT均与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移及远处转移相关（P均〈0．05）。FHIT还与肿瘤的肠壁浸润深度及组织学分级呈负相关（r值分别为-0．29和-0．25，均P〈0．05）。NF-κB／P65阳性表达组患者的5年生存率显著低于阴性组，而FHIT阳性组患者的5年生存率则显著高于阴性组（x^2值分别为23．25和51．13，均P〈0．05）。NF—κB／P65与FHIT在结直肠癌的表达呈负相关（r=-0．167，P=0．019）。NF—κB／P65在结直肠癌组织中的表达明显高于在癌旁正常组织中的表达，而FHIT在结直肠癌组织中的表达则明显低于在癌旁正常组织中的表达（x^2值分别为40．78和15．93，均P〈0．05）。COX多因素分析的结果显示，NF-κB／P65是患者无瘤生存时间及总体生存时间的独立预后因子。结论NF—κB／P65及FHIT在结直肠癌的发生、发展及转移中发挥重要作用，可以作为结直肠癌临床评价肿瘤生物学行为及判断预后的有效指标。

加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞NF-κB(p65)活性和表达的影响

目的:研究加味四君子汤含药血清对转录因子核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65的活性和表达的影响。方法:应用血清药理学方法给药,37℃、5%CO2的恒温培养箱中培养B16恶性黑色素瘤细胞,收集对数期细胞,小鼠含药血清终浓度为10%,作用24h。实验分为空白对照组、血清对照组、4.61 g/kg、9.22 g/kg、18.44 g/kg加味四君子汤含药血清组和5 mg/L顺铂组,每组含5个样本数。分别应用Real-Time PCR法、EMSA法、Western blot法检测加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞活性和表达的影响。结果:加味四君子汤含药血清作用24 h后,呈剂量依赖式降低NF-κB(p65)的活性和基因蛋白表达,与空白对照组和血清对照组相比,9.22 g/kg中药组、18.44 g/kg中药组和5 mg/L顺铂组分别显著降低NF-κB(p65)活性、mRNA及蛋白表达(P<0.05),但5 mg/L顺铂组活性、mRNA及蛋白表达低于9.22 g/kg中药组,高于18.44 g/kg中药组。结论:加味四君子汤含药血清能够降低恶性黑色素瘤细胞NF-κB(p65)的活性和表达水平,NF-κB(p65)可能是加味四君子汤含药血清抗恶性黑色素瘤的机制之一。

灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠睾丸细胞凋亡及核转录因子NF—κB／P65表达的影响

目的观察灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠睾丸细胞凋亡及核转录因子NF-κB／P65表达的影响。方法Wistar雄性大鼠50只，随机分成3组（对照组、模型组、灵芝组）。TUNEL法检测睾丸细胞凋亡率，免疫组化法检测核因子-κB转录（NF—κB／P65）蛋白的表达。结果模型组细胞凋亡率和NF-κB／P65的表达均明显高于对照组和灵芝组（P〈0．05）。结论灵芝孢子粉对糖尿病大鼠睾丸组织具有保护作用，可抑制睾丸细胞凋亡，可能与其减轻氧化应激、减少糖尿病睾丸过度表达NF-κB／P65有关。

bcl-2与NF—κB／p65在弥漫性大B细胞淋巴瘤不同亚型中表达的意义

目的探讨bcl-2与NF—κB／p65蛋白在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）不同亚型中的表达及其意义。方法用免疫组织化学方法检测DLBCL患者CD10、bcl-6、MUM-1蛋白的表达，以Hans等的分型原则将其划分为GCB和非GCB／ABC亚型，同时标记bcl-2与NF—κB／p65抗体，比较bcl-2与NF—κB／p65蛋白在GCB和ABC亚型中的表达情况并分析二者与DLBCL两种主要亚型生存率的相关性。结果bcl-2与NF—κB／p65蛋白在DLBCL中的表达率为67．1％和77．1％，二者表达呈正相关；GCB亚型中bcl-2与NF—κB／p65的表达率分别为52．0％和56．0％，ABC亚型中bcl-2与NF—κB／p65蛋白的表达率分别为75．6％和88．9％，ABC亚型中bcl-2与NF—κB／p65的表达率高于GCB亚型；在GCB亚型中，bcl-2与NF—κB／p65蛋白的表达与总生存率无显著的相关性，而在ABC亚型DLBCL中，bcl-2与NF—κB／p65蛋白的表达与生存率密切相关。结论仅在ABC亚型DLBCL中，bcl-2与NF—κB／p65蛋白的表达是影响预后的重要不利因素，因此，需在DLBCL亚分型的基础上评估bcl-2与NF—κB／p65蛋白表达的预后意义。

核因子κB p65及靶基因在CagAHp胃癌及癌前病变中的表达研究

目的 检测核因子κappaBp6 5 (NFκBp6 5 )及靶基因在幽门螺杆菌 (Hp)感染的肠上皮化生 (IM)、不典型增生 (Dys)、胃癌 (GC)组织中的表达 ,探讨表达细胞毒素相关抗原A的幽门螺杆菌(CagA+ Hp)致胃癌的分子生物学机制。方法 采用ELISA方法检测患者血液中的CagA抗体 ;以快速尿素酶试验和Warthinstarry法检测组织中的Hp ;以免疫组织化学方法检测 12 2例肠上皮化生、10 4例不典型增生及 6 3例胃癌组织中的NFκBp6 5及其靶基因c myc、CyclinD1和bcl xl的表达。结果 IMⅠ和IMⅡ、IMⅢ、DysⅠ、DysⅡ和DysⅢ以及GC组织中 ,NFκBp6 5阳性表达率在CagA阳性组较CagA阴性组高 ,差异有显著性。IMⅢ、DysⅡ和DysⅢ组织中 ,c myc、CyclinD1和bcl xl在CagA阳性组表达率较CagA阴性组高 ,差异有显著性。NFκBp6 5在IMⅢ、DysⅡ和DysⅢ组织中 ,阳性表达率与靶基因阳性表达相一致。CagA+ Hp感染的胃癌组织中 ,NFκBp6 5、c myc、CyclinD1和bcl xl阳性表达率在肠型胃癌中高于弥漫型胃癌 ,差异有显著性。结论 弥漫型胃癌与肠型胃癌的发生机制不同。CagA+ Hp感染与肠型胃癌发生有关 ;CagA+ Hp感染后 ,NFκBp6 5上调c myc、CyclinD1和bcl xl在肠上皮化生及不典型增生组织中的表达 ,促进肠型胃癌发生。通过抑制NFκBp6 5的活?

β1受体阻滞剂对脓毒症大鼠心肌损伤的影响

目的探讨β1受体阻滞剂对脓毒症大鼠心肌损伤的影响和机制。方法将健康雄性大鼠72只随机分为对照组、脓毒症组、治疗组，每组24只。脓毒症组采用盲肠结扎穿孔法（CLP）建立脓毒症模型，对照组仅剖腹而不进行CLP。脓毒症组和对照组在关腹后皮下注射生理盐水3mL／100g；治疗组除皮下补液外，经尾静脉注射艾司洛尔15mg／（kg·h）持续静脉泵入，分别于3、6、12、24h采集标本，在每个时间点每组大鼠均为6只，观察三组血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、心肌组织核转录因子-κBp65（NF—κBp65）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）的变化。结果与对照组比较，脓毒症组在各时间点血清TNF-α浓度、cTnI浓度及心肌组织NF—κBp65表达均显著升高（P〈0．05）；与脓毒症组比较，治疗组在各时间点血清TNF—α浓度、cTnI浓度及心肌组织NF—κBp65表达均降低（P〈0．05）。结论β1受体阻滞剂艾司洛尔可减轻脓毒症大鼠心肌损伤，其机制可能与抑制心肌NF—κBp65的表达，降低血清促炎介质的产生有关。β1受体阻滞剂能改善脓毒症失控的炎症反应以及保护心肌功能。

维生素D_3和他莫西芬对乳腺癌细胞凋亡影响

目的研究受1,25二羟维生素D3调控的雌激素受体α表达载体联合他莫西芬对雌激素受体阴性乳腺癌细胞凋亡的影响及其机制。方法将本室构建的含有4个拷贝维生素D反应元件(VDRE)和胸苷激酶启动子(Tk)的VDRE-Tk-ERα表达载体转染到MDA-MB-231细胞中,利用免疫荧光法检测1,25二羟维生素D3对雌激素受体α(ERα)的诱导表达并通过末端原位法检测1,25二羟维生素D3联合他莫西芬诱导转染该表达质粒的MDA-MB-231凋亡诱导效应。用免疫印迹(Western blot)法检测细胞核因子κB(NFκB)P65活性亚单位表达以及核转位情况的变化。结果1,25二羟维生素D3能够有效诱导MDA-M-231VDRE-ERα细胞内ERα的表达,在此基础上与他莫西芬联合作用较对照和单独作用组能够有效诱导该乳腺癌细胞发生凋亡。与此同时,NFκB P65活性亚单位的表达以及核转位均受到不同程度的抑制。结论利用1,25二羟维生素D3可通过靶控外源性雌激素受体α的表达进而调控NFκB P65活性亚单位的表达及活性,从而诱导细胞发生凋亡并最终恢复乳腺癌细胞对他莫西芬的化疗敏感性。

NFκB-Orai1参与NEFA诱导的内质网应激

为探究NFκB-Orai1是否参与游离脂肪酸(NEFA)诱导的内质网应激,首先通过体外添加一定浓度的非酯化脂肪酸(nonestesterifiedfatty acid,NEFAs)(1.2 mmol/L)处理大鼠肝细胞不同时间,运用Western blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,测定NEFAs对内质网应激(ER stress)标志分子GRP78表达量以及钙通道相关蛋白Orai1表达水平的影响。结果显示NEFAs处理12 h时GRP78、Orai1表达量极显著高于对照组(P<0.01),证明12 h NEFAs刺激诱导产生内质网应激效果最佳。而后又通过分别添加NFκB抑制剂wogonin与Orai1抑制剂2APB,结果显示抑制NFκB和Orai1后NEFAs刺激可明显降低GRP78、NFκB p65、Orai1的表达水平。结果表明NFκB-Orai1参与NEFA诱导的内质网应激。