玉竹及其多糖对2型糖尿病大鼠血糖血脂及坐骨神经NGF mRNA表达的影响

目的:探索玉竹及其多糖对2型糖尿病大鼠血糖血脂及坐骨神经NGF mRNA表达的影响。方法:用高脂饲料联合链脲佐菌素构建2型糖尿病大鼠模型,建模后,空白组和模型组以生理盐水灌胃,玉竹多糖组予玉竹多糖0.5g/(kg·d)腹腔注射,玉竹中高剂量组分别予1.35、2.7 g/(kg·d)的剂量灌胃,二甲双胍组予0.5g/(kg·d)灌胃。治疗4周后,测定餐后0、2 h血糖,取胰脏做病理切片,测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平和坐骨神经NGF mRNA的相对表达量。结果:玉竹及其多糖干预后,大鼠胰岛细胞排列较为紧密,坏死细胞减少,餐后2h血糖除了玉竹中剂量组外均明显降低(P<0.05),餐后0 h血糖、TG水平均降低(P<0.05),坐骨神经NGF mRNA相对表达量增高(P<0.01)。结论:玉竹及其多糖通过改善胰脏功能,提高降糖降脂作用,其防治糖尿病局部神经病变的机制可能与上调坐骨神经NGF mRNA表达水平有关。

胰岛素致低血糖对糖尿病大鼠脑组织NGF mRNA表达的影响

目的观察胰岛素致低血糖对糖尿病大鼠脑组织NGFmRNA表达变化的影响作用。方法48只Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组(16只)、糖尿病模型组(32只),采用高脂高糖饮食+腹腔注射链脲佐菌素方法制备2型糖尿病大鼠模型,糖尿病模型组随机分为糖尿病非干预组(16只)和胰岛素低血糖组(16只)。胰岛素低血糖组大鼠予胰岛素皮下注射,每日1次,3组大鼠分别于第3、6、9、12天取4只大鼠的脑组织用RT-PCR法检测NGFmRNA。结果与对照组比较,糖尿病非干预组和胰岛素低血糖组大鼠脑组织NGF mRNA表达均不同程度下降,胰岛素低血糖组降低最为显著(P<0.01)。结论糖尿病降低了脑组织NGF mRNA表达,而胰岛素致低血糖能使脑组织NGFmRNA表达进一步下降,不利于糖尿病神经病变的再生修复。

大鼠创伤性脑损伤后NGF mRNA表达变化及外源性IL-1β对其影响

目的 观测大鼠脑损伤后NGFmRNA表达变化及IL 1β对其的影响 ,探讨NGF及IL 1β在脑创伤中的作用机制。方法 在建立流体脑创伤模型的基础上 ,采用RT PCR、分子杂交及免疫细胞化学等技术 ,观测脑创伤后NGFmRNA的表达变化以及外源性IL 1β对其的影响。 结果 NGFmRNA在伤后 12h脑伤灶及其周围即出现表达的增加 ,在脑致伤后2 4h及 3dNGFmRNA的表达明显增加 ,达到峰值 ,其后逐渐降低但表达仍然高于对照组。IL 1β处理组致伤后 3h即出现NGFmRNA表达的增加 ,NGFmRNA的含量明显高于单纯致伤组及对照组 (P <0 .0 1) ,并在伤后 2 4h达到峰值。结论 脑创伤后NGFmRNA表达的增加可能和创伤早期对神经细胞的保护作用和修复机制有关。IL 1βmRNA的表达增加早于脑创伤后NGFmRNA的表达增高。外源性IL 1β能提高脑创伤后NGFmRNA的表达水平。

加味黄芪桂枝五物汤对DPN大鼠坐骨神经NGF mRNA表达的影响

目的研究加味黄芪桂枝五物汤对DPN大鼠坐骨神经神经生成因子NGF mRNA表达的影响。方法链脲佐菌素诱导制备糖尿病大鼠模型,加味黄芪桂枝五物汤连续灌胃8周,采用RT-PCR分析坐骨神经组织中NGF mRNA的表达。结果加味黄芪桂枝五物汤能明显增强NGF mRNA的表达,与模型组比较有显著性差异。结论提高大鼠坐骨神经组织中神经生长因子的含量,可能是该方治疗DPN的作用机制之一。

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺NGF mRNA、EGF mRNA表达的影响

目的探讨何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)、表皮生长因子(EGF)基因表达的影响。方法选用8周龄SD雌性大鼠90只,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,何首乌饮的干预作用分治疗和预防两部分,用原位杂交法检测各组大鼠下颌下腺NGF mRNA、EGFmRNA表达的情况。结果预防性实验部分的组间NGF mRNA、EGF mRNA表达比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以正常组最高,模型组最低,各预防组处于中间水平,其中预防中剂量组最高。治疗性实验部分的组间NGF mRNA、EGF mRNA表达比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以阴性对照组最高,自然恢复组最低,各治疗组处于中间水平,其中中剂量组最高。结论何首乌饮可在基因转录水平提高NGF、EGF的表达。

黄芪多糖对2型糖尿病大鼠NGFmRNA表达的影响

目的:研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)对2型糖尿病(2-Diabetes;2-DM)大鼠脑神经生长因子(nerve growth factor,NGF)mRNA表达的影响。方法:随机选取以不同剂量的APS灌胃的2型糖尿病大鼠,以生理盐水灌胃的2型糖尿病大鼠及正常对照组大鼠各10只,用RT-PCR法测定脑神经生长因子mRNA的表达。结果:2型糖尿病大鼠脑神经生长因子mRNA表达下降,服用黄芪多糖的2型糖尿病大鼠脑神经生长因mRNA表达上调。结论:黄芪多糖能增加2型糖尿病大鼠脑神经生长因子基因的表达。

新生鼠大脑皮质和中脑多巴胺神经元原代培养中NGF诱导c-jun mRNA表达的研究

用神经生长因子（nervegrowthfactor，NGF）分别处理原代培养的新生大鼠大脑皮质和中脑腹侧部神经元，应用免疫组织化学和原位杂交双重标记方法，观察不同时间NGF处理的神经元表达原癌基因c－junmRNA的情况。结果发现，神经特异性烯醇化酶（neuronspecificenolase，NSE）阳性的大脑皮层神经细胞在NGF处理15分钟即可表达c－junmRNA，2小时达高峰，4小时后开始下降，到8小时后基本消失．未经NGF处理的大鼠大脑皮层神经细胞不表达c－junmRNA；酪氨酸羟化酶（tyrosinehydroxylase，TH）阳性的中脑多巴胺能（Dopaminergic，DA）神经元经NGF处理也不表达c－jun基因。提示NGF与其受体结合可以激活神经细胞快速，短暂的一过性表达c-jun基因，作为第三信使，调节从细胞质膜到核的信号传递，同时也间接证明了新生大鼠大脑皮层神经细胞膜上存在神经生长因子受体（nervegrowthfactorreceptor，NGFR），而中脑DA神经细胞对NGF无应答反应。

生后不同时期大鼠坐骨神经NGF基因的表达

采用 RT-PCR方法半定量分析生后 1、15、3 0、60、12 0和 3 60 d大鼠坐骨神经中 NGF m RNA表达的变化。结果表明 ,大鼠生后 1d坐骨神经中即有 NGF m RNA的表达 ;随着生后发育过程 ,NGF m RNA的表达量逐步增加 ,并呈严格单调上升的趋势。开始时增加速度较慢 ,但随鼠龄的增加而逐渐加快 ,至 49d时达到最快 ,然后逐渐减慢 ,到 12 0 d时已接近生后稳定表达水平。

闭合性脑损伤后NGF基因表达时间性变化的实验研究

目的:探讨大鼠闭合性脑损伤后 NGF基因表达的时间性变化。方法:采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)法 ,半定量分析闭合性脑损伤后 0、3、6、12 h和 1、3、5、7、9、11d脑组织中神经生长因子 (NGF ) m RNA表达的时间性变化。 结果:大鼠正常脑组织中存在 NGF m RNA,但表达量较低。当发生闭合性脑损伤后 ,其脑组织NGF基因的表达量明显增加 ,3d后达到高峰 ,7d后开始下降 ,11d后则降至一般水平。结论:闭合性脑损伤后脑组织中 NGF m RNA表达量显著升高 ,并呈现一定的规律性 ,这对于重构犯罪过程、探索脑损伤时间的推断方法具有重要的实验研究意义。

铅中毒对小鼠颌小腺神经生长因子mRNA的影响

为观察铅对小鼠颌小腺NGF基因表达的影响，以地高辛素标记人β-NGFcDNA为探针，采用原位杂交的方法，定量分析铅中毒小鼠颌下腺NGFmRNA的变化。给小鼠以0．5％醋酸铅经口染毒，造成小鼠实验性铅中毒模型。铅中毒后小鼠发育迟缓，体重下降。病理切片的结果表明，铅中毒后颌下腺腺导管上皮变薄，腺体萎缩，原位杂交的结果显示：铅中毒后颌下腺颗粒曲管和纹状管的杂交信号减弱，即颌下腺中NGFmRNA减少。

D-半乳糖致衰老大鼠下颌下腺神经生长因子及其mRNA的表达

目的观察D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)及NGF mRNA的表达。方法选用SD雌性大鼠18只,随机分为正常组、模型组,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,用免疫组化及原位杂交法检测衰老大鼠下颌下腺NGF、NGF mRNA的阳性表达。结果下颌下腺NGF阳性反应颗粒及NGF mRNA杂交反应产物为浅棕色或深褐色颗粒,NGF阳性反应颗粒主要分布于GCT细胞及纹状管细胞顶部胞质中,腺泡细胞为阴性;NGFmRNA杂交信号主要分布于纹状管和颗粒曲管上皮细胞中,其上皮细胞胞质呈阳性,腺泡细胞为阴性,正常组NGF、NGF mRNA表达明显高于模型组(P<0.01)。结论 D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺NGF、NGF mRNA表达较正常大鼠明显减少。

大鼠坐骨神经损伤后NGF基因表达的变化

目的 探讨大鼠坐骨神经损伤后ＮＧＦ基因表达的变化。方法 采用ＲＴ－ＰＣＲ法，半定量分析坐骨神经横断后１ｄ、１周、２周、４周远侧端组织中 ＮＧＦ ｍＲＮＡ含量的变化。结果 大鼠正常坐骨神经中存在 ＮＧＦ ｍＲＮＡ．但表达量较低。坐骨神经横断后．其远侧端组织中 ＮＧＦ ｍＲＮＡ表达量显著升高，而且呈现一种特殊的“双相增高”现象。结论 坐骨神经损伤后，ＮＧＦ基因的表达呈现出双相增高现象。

实验性铅中毒对睾丸神经生长因子基因表达的影响

目的 探讨实验性铅中毒对睾丸组织神经生长因子 (NGF)基因表达的影响。 方法 小鼠以 0 .5 %醋酸铅自由饮服 8周 ,测定血铅和睾丸铅含量。采用原位杂交法 (以地高辛标记 NGF DNA为探针 )和 RT- PCR方法 ,观察睾丸组织 NGF m RNA含量的变化。 结果 铅染毒小鼠血铅和睾丸组织铅含量明显升高 ;原位杂交结果显示 ,铅染毒小鼠睾丸杂交信号明显减少 ;RT- PCR结果表明 ,铅染毒小鼠睾丸组织 NGF m RNA表达量明显下降。 结论 铅中毒可使睾丸组织

生后发育期铅接触对大鼠海马组织的影响

目的 观察铅对生后发育期大鼠海马神经生长因子 (NGF)基因表达的影响。方法 仔鼠出生后 ,即给母鼠饲以 0 2 %醋酸铅 ,仔鼠通过母乳摄入铅。采用RT -PCR方法 ,半定量分析生后发育期铅接触仔鼠海马组织NGFmR NA含量的变化。结果 与对照组相比 ,铅染毒仔鼠血铅和海马组织铅含量明显升高 (P均 <0 0 0 1) ,而海马组织NGFmRNA含量却显著下降 (P <0 0 0 1)。结论 铅染毒可使生后发育期仔鼠海马组织NGFmRNA表达量下降。

神经生长因子基因在大鼠心肌组织中的表达

目的 :观察神经生长因子 (NGF)基因在生后不同时期大鼠心肌组织中的表达。方法 :采用 RT- PCR方法 ,半定量分析生后 1天、15天、30天、6 0天、12 0天、36 0天大鼠心肌组织中 NGF m RNA含量。结果 :大鼠生后 1天 ,心肌组织即有 NGF m RNA的表达 ;随着生后发育过程 ,表达量逐步增加 ,30天时达峰值 ;此后随鼠龄的增加 ,表达量呈缓慢下降趋势。结论 :大鼠心肌组织中 NGF m RNA的表达量 ,随鼠龄的增加 。

老年大鼠海马组织中神经生长因子及其受体基因表达的变化

目的 :观察老年大鼠海马组织中 NGF及其受体基因表达的变化。方法 :采用 RT- PCR法 ,半定量分析 2年龄大鼠海马组织中 NGF及其受体 p75 m RNA含量的变化。结果 :与正常成年 (3月龄 )大鼠相比 ,2年龄大鼠海马组织NGF m RNA含量显著下降 ,而 NGF受体 p75 m RNA的表达无明显改变。结论 :老年鼠海马 NGF基因表达明显下降 ,而其受体 p75的表达变化不明显。提示衰老可能与

周围神经损伤后急性期NGF、BDNF基因表达变化的实验研究

目的观察大鼠坐骨神经损伤急性期神经生长因子（NGF）、脑源性神经生长因子（BDNF）mRNA含量的变化。方法取SD大鼠48只，随机均分为8组。其中7组切断右侧坐骨神经并原位缝合，另1组为健康对照组。分别于术后1，2，3，4，5，6，7d以吻合口为中心，取上下各5mm共1cm坐骨神经提取总RNA，采取反转录-多聚酶链反应（RT-PCR）技术检测组织中NGF、BDNFmRNA含量变化。结果大鼠周围神经中NGFmRNA含量在正常组织有低水平表达。在损伤后1d即明显升高，在损伤后5d降低，随即恢复较高水平。BDNF在正常组织亦低水平表达，在损伤后4d明显增高，5、6d低至正常组织水平，7d恢复较高水平。结论大鼠坐骨神经损伤急性期NGF、BDNF基因表达变化不同步，提示不同因素在损伤后急性期NGF、BDNF含量变化中起作用。