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微小RNA-144-3p靶向调控TPD52表达及对喉癌细胞凋亡和侵袭的影响 被引量:2
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作者 杨森 陈红 夏兵华 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2018年第11期978-982,共5页
目的探讨微小RNA-144-3p(miR-144-3p)对喉癌细胞凋亡、侵袭的影响和肿瘤蛋白D52(TPD52)的靶向调控作用。方法采用荧光实时定量PCR(QPCR)法检测23对手术切除的喉癌组织和癌旁组织及人鼻咽永生化上皮细胞NP69和喉癌细胞株(Hep2、TU212和TU... 目的探讨微小RNA-144-3p(miR-144-3p)对喉癌细胞凋亡、侵袭的影响和肿瘤蛋白D52(TPD52)的靶向调控作用。方法采用荧光实时定量PCR(QPCR)法检测23对手术切除的喉癌组织和癌旁组织及人鼻咽永生化上皮细胞NP69和喉癌细胞株(Hep2、TU212和TU686)的miR-144-3p水平。选取miR-144-3p水平最低的喉癌细胞并向其转染miR-144-3p模拟物(过表达组)或阴性对照(对照组),转染48 h后采用QPCR检测两组的miR-144-3p和TPD52 m RNA水平,采用MTT法、流式细胞术和Transwell小室实验检测增殖率、凋亡率和穿膜细胞数;采用双荧光素酶报告实验评价miR-144-3p对TPD52的靶向调控作用。结果 QPCR检测结果显示,喉癌组织中miR-144-3p的水平为0. 241±0. 156,低于癌旁组织的1. 003±0. 229(P<0. 05);喉癌细胞Hep2、TU212和TU686的miR-144-3p水平依次为0. 123±0. 027、0. 356±0. 069和0. 541±0. 087,均低于NP69细胞(P<0. 05),选取表达水平最低的Hep2细胞用于后续实验。转染48 h,过表达组miR-144-3p的水平为3. 266±0. 820,高于对照组的1. 051±0. 144(P<0. 05)。过表达组转染24、48、72 h的细胞增殖率均低于对照组(P<0. 05)。转染48 h过表达组的细胞凋亡率为(16. 980±1. 983)%,高于对照组的(6. 732±0. 943)%,差异有统计学意义(P<0. 05)。过表达组的穿膜细胞数为(62. 7±8. 0)个,低于对照组的(87. 7±8. 9)个,差异有统计学意义(P<0. 05)。双荧光素酶活性检测结果显示,miR-144-3p可抑制野生型TPD52 3’UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型TPD52 3’UTR的荧光素酶活性无影响。结论miR-144-3p在喉癌组织和喉癌细胞株中均低表达。miR-144-3p可能通过抑制TPD52表达来抑制喉癌细胞的增殖、侵袭并诱导凋亡。 展开更多
关键词 喉癌 微小RNA-144-3p(miR-144-3p) 肿瘤蛋白D52(tpd52) 增殖 凋亡
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14-3-3σ与TPD52L1在低剂量中波紫外线诱导HaCaT细胞辐射损伤中作用研究 被引量:1
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作者 郑莉 黄海波 +1 位作者 王建宇 周美娟 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2016年第4期400-407,共8页
目的探讨14-3-3σ与TPD52L1在低剂量中波紫外线(UVB)诱导的HaCaT细胞凋亡、增殖和细胞周期中的作用。方法 1取对数生长期HaCaT细胞,予低剂量UVB(累计照射剂量为2.97×10^(-2)J/cm^2)照射后培养6~48h收获细胞,另设不予UVB照射(予假照... 目的探讨14-3-3σ与TPD52L1在低剂量中波紫外线(UVB)诱导的HaCaT细胞凋亡、增殖和细胞周期中的作用。方法 1取对数生长期HaCaT细胞,予低剂量UVB(累计照射剂量为2.97×10^(-2)J/cm^2)照射后培养6~48h收获细胞,另设不予UVB照射(予假照射)的对照,采用流式细胞分析法检测细胞凋亡率;将HaCaT细胞分为对照组和UVB组,于相应照射处理后0~72 h收获细胞,采用噻唑蓝法检测细胞增殖能力。2取HaCaT细胞随机分为对照组(予假照射)和UVB组,于相应照射处理后0~24 h收获细胞,采用流式细胞术检测G2/M期细胞比例。3予低剂量UVB照射HaCaT细胞后培养3~24 h或3~30 h,收获细胞,另设予假照射的对照,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测细胞中14-3-3σ与TPD52L1的mRNA的相对表达水平,采用蛋白质印迹法检测细胞中14-3-3σ与TPD52L1的蛋白相对水平表达。结果 1 UVB照射后24 h,HaCaT细胞凋亡率上升至最高值(P<0.05),增殖能力下降至最低值(P<0.05)。2对照组HaCaT细胞G2/M期比例呈现在假照射后6~12 h维持在最高值,至假照射后18 h下降至最低值的周期性改变特征;UVB组HaCaT细胞G2/M期比例在照射后6、12和18 h均较对照组上升(P<0.05),并持续在最高值,发生较明显的G2/M期阻滞。3UVB照射后HaCaT细胞中14-3-3σ的mRNA和蛋白相对表达水平均呈现先上升后下降现象。其中,14-3-3σmRNA相对表达水平于照射后3 h上升至峰值(P<0.05),于照射后3~12 h维持峰值水平(P<0.05),其后逐渐下降,于照射后24 h恢复正常水平;14-3-3σ蛋白相对表达水平于照射后6 h开始上升(P<0.05),于照射后18 h上升至峰值(P<0.05),其后逐渐下降,但于照射后30 h仍未恢复正常水平。TPD52L1 mRNA相对表达水平则呈现先下降后上升现象,于照射后12 h下降至最低水平(P<0.05),其后逐渐升高,于照射后24 h上升至峰值(P<0.05);TPD52L1蛋白相对表达水平呈先上升后下降现象,于照射后24 h上升至峰值(P<0.05),于照射后30 h下降至正常水平(P<0.05)。结论 14-3-3σ和TPD52L1在低剂量UVB诱导HaCaT细胞发生凋亡、增殖和G2/M期阻滞中可能共同发挥重要作用。 展开更多
关键词 14-3-3σ tpd52L1 中波紫外线 HACAT细胞 细胞凋亡 细胞增殖 细胞周期
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三唑磷水解酶基因的克隆及水解产物的确定 被引量:5
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作者 戴青华 张瑞福 +2 位作者 蒋建东 邱珊莲 李顺鹏 《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期777-780,共4页
利用鸟枪法从三唑磷降解菌株mp-4(Ochrobactrum sp.)中克隆了三唑磷水解酶基因tpd,序列分析发现,该基因与甲基对硫磷水解酶基因mpd的同源性为98%,其结构基因含有996个碱基,除终止密码子外编码331个氨基酸,但该基因编码的酶比mpd编码的... 利用鸟枪法从三唑磷降解菌株mp-4(Ochrobactrum sp.)中克隆了三唑磷水解酶基因tpd,序列分析发现,该基因与甲基对硫磷水解酶基因mpd的同源性为98%,其结构基因含有996个碱基,除终止密码子外编码331个氨基酸,但该基因编码的酶比mpd编码的酶底物范围更广,不仅能水解甲基对硫磷,而且能高效水解三唑磷.利用克隆到的tpd基因编码的水解酶水解三唑磷,将水解反应产物进行液相色谱-质谱联机分析,发现该水解产物分子量为161,经理论分析确定该水解产物为1-苯基-3-羟基-1,2,4-三唑. 展开更多
关键词 三唑磷 mp-4菌株 水解酶基因tpd 1-苯基-3-羟基-1 2 4-三唑
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酸性表征技术在绿色化学教学中的应用
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作者 宋颖 韩伟宁 +1 位作者 李芳 薛伟 《山东化工》 CAS 2017年第12期166-169,共4页
开发使用新型酸催化剂(固体酸和酸性离子液体)的环境友好酸催化反应是绿色化学的重要研究内容。本文介绍了利用程序升温热脱附(NH3-TPD)、探针分子红外光谱(Py-IR)和吸附指示剂紫外-可见光谱(UV-Vis)技术测定固体酸、酸性离子液体相关... 开发使用新型酸催化剂(固体酸和酸性离子液体)的环境友好酸催化反应是绿色化学的重要研究内容。本文介绍了利用程序升温热脱附(NH3-TPD)、探针分子红外光谱(Py-IR)和吸附指示剂紫外-可见光谱(UV-Vis)技术测定固体酸、酸性离子液体相关性质的基本原理和操作步骤,并用实例进行了演示。在绿色化学课程教学中,开展与课程内容相关的实验研究,目的是使学生通过深入了解新型酸催化剂酸性表征的常用技术,加深对绿色化学课程相关内容的理解。并且,通过实际操作,激发学生的科研兴趣,培养理论联系实际的科学态度,提高解决科研中具体问题的能力,同时让他们感受到科研的魅力和乐趣。 展开更多
关键词 绿色化学 固体酸 酸性离子液体 氨程序升温脱附 吡啶吸附红外光谱 吸附指示剂紫外-可见光谱
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Free fatty acids, glucose, and insulin in type 2 diabetes mellitus 被引量:1
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作者 Rob NM Weijers 《World Journal of Diabetes》 SCIE 2022年第3期275-277,共3页
Xu et al used the HOMA2 model to estimate theβ-cell function and insulin resistance levels in an individual from simultaneously measured fasting plasma glucose and fasting plasma insulin levels.This method is based o... Xu et al used the HOMA2 model to estimate theβ-cell function and insulin resistance levels in an individual from simultaneously measured fasting plasma glucose and fasting plasma insulin levels.This method is based on the assumption that the glucose-insulin axis is central for the metabolic activities,which led to type 2 diabetes.However,significant downregulation of both the NKX2-1 gene and the TPD52L3 gene force an increase in the release of free fatty acids(FFAs)into the blood circulation,which leads to a marked reduction in membrane flexibility.These data favor a FFA-glucose-insulin axis.The authors are invited to extend their study with the introduction of the saturation index(number of carbon-carbon double bonds per 100 fatty-acyl chains),as observed in erythrocytes. 展开更多
关键词 Free fatty acids Membrane flexibility NKX2-1 gene RNA sequencing Type 2 diabetes tpd52L-3 gene Unsaturation index
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