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PTPMeg2抑制NIH3T3/STAT3CA细胞模型STAT3转录活性的研究
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作者 苏富琴 王玉春 +2 位作者 齐占鹏 孙超 侯金才 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期843-847,共5页
目的探讨磷酸酶PTPMeg2对NIH3T3/STAT3CA细胞模型的增殖及STAT3转录活性的影响。方法构建STAT3异常突变的细胞模型NIH3T3/STAT3CA,MTT法和裸鼠异体移植瘤实验分别用于观察PTPMeg2对NIH3T3/STAT3CA细胞体外和体内增殖的影响,免疫共沉淀... 目的探讨磷酸酶PTPMeg2对NIH3T3/STAT3CA细胞模型的增殖及STAT3转录活性的影响。方法构建STAT3异常突变的细胞模型NIH3T3/STAT3CA,MTT法和裸鼠异体移植瘤实验分别用于观察PTPMeg2对NIH3T3/STAT3CA细胞体外和体内增殖的影响,免疫共沉淀实验用于PTPMeg2与STAT3CA相互作用的研究,双荧光素酶报告基因法用于转录活性的研究。结果 PTPMeg2对NIH3T3/STAT3CA细胞在体外和体内都具有增殖抑制作用,与对照组比较均具有明显的统计学意义。PTPMeg2对NIH3T3/STAT3CA细胞的转录活性具有抑制作用,而PTPMeg2的突变体(PTPMeg2C515S)和ShPTPMeg2则无效。结论 PTPMeg2对NIH3T3/STAT3CA细胞具有增殖抑制作用,其作用机制可能与抑制STAT3的转录活性有关。 展开更多
关键词 PtPMeg2 nih3t3 stat3ca 细胞模型 持续激活的 stat3 增殖 转录活性
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苦参碱调节IL-6/STAT3/NF-κB信号通路对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的影响 被引量:2
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作者 吴茸 王栋 +2 位作者 王晶敏 张玮宇 陶庆松 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期809-816,共8页
目的探讨苦参碱(MT)调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)/核转录因子κB(NF-κB)通路对炎症性肠病大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法按照随机数字表法将SD大鼠分为空白对照组(CK组)、Model... 目的探讨苦参碱(MT)调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)/核转录因子κB(NF-κB)通路对炎症性肠病大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法按照随机数字表法将SD大鼠分为空白对照组(CK组)、Model组,低、中、高剂量MT组(MT-L组,50 mg/kg;MT-M组,100 mg/kg;MT-H组,200 mg/kg),美沙拉嗪组(MSLM组,0.42 g/kg)、MT-H+rIL-6(IL-6激活剂)组(200 mg/kg+0.05 mg/kg),每组18只。除CK组外,其余组大鼠均采用50 g/L三硝基苯磺酸(20 mg/kg)缓冲液与500 mL/L乙醇按照1∶1比例混匀后灌肠以构建炎症性肠病大鼠模型,建模成功后,分别进行给药处理,每天1次,持续7周。分别在给药1、3、5、7周时对大鼠进行体质量的测量;比较各组大鼠结肠长度的变化;HE染色检测大鼠结肠组织病理损伤;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-17(IL-17)、IL-10水平;流式细胞术检测大鼠外周血中Th17、Treg细胞比例;Western blotting检测大鼠结肠组织中维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(Foxp3)、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达。结果与CK组比较,Model组大鼠结肠组织病理损伤严重,体质量(3、5、7周时)、IL-10水平、Treg细胞比例、Foxp3蛋白表达降低,结肠变短,TNF-α、IL-17水平、Th17细胞比例、Th17/Treg比值、RORγt、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达增高(P<0.05);与Model组比较,MT-L组、MT-M组、MT-H组、MSLM组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);rIL-6减弱了高剂量MT对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的促进作用。结论MT可能通过抑制IL-6/STAT3/NF-κB信号通路,促进炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡。 展开更多
关键词 苦参碱 炎症性肠病 白细胞介素-6/信号转导和转录激活因子3/核转录因子κB(IL-6/stat3/NF-κB)通路 辅助性t细胞17/调节性t细胞(th17/treg)
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LINC00284通过miR-3127/STAT3轴促进急性T淋巴细胞白血病细胞增殖、迁移和侵袭
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作者 张欢 王月娇 吴斌 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第17期3159-3165,共7页
目的:探讨LINC00284在急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)进展中的调节作用和潜在机制。方法:通过RT-qPCR检测T-ALL细胞系中LINC00284、miR-3127和STAT3的表达。将干预LINC00284、miR-3127或STAT3表达的... 目的:探讨LINC00284在急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)进展中的调节作用和潜在机制。方法:通过RT-qPCR检测T-ALL细胞系中LINC00284、miR-3127和STAT3的表达。将干预LINC00284、miR-3127或STAT3表达的质粒载体转染至MOLT-4细胞,通过MTT和流式细胞术测定细胞增殖和凋亡,通过Transwell测定细胞迁移和侵袭。通过生物信息网站分析和双荧光素酶报告基因检测验证miR-3127和LINC00284或STAT3之间的靶向关系。结果:T-ALL细胞系中LINC00284和STAT3表达上调,miR-3127表达下调。下调LINC00284或上调miR-3127显著抑制T-ALL细胞的增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡。LINC00284充当miR-3127的分子海绵抑制其表达,miR-3127靶向负调控STAT3表达。上调STAT3可以逆转下调LINC00284对T-ALL细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用和对细胞凋亡的促进作用。结论:这些发现表明LINC00284通过调控miR-3127/STAT3轴促进T-ALL细胞增殖、迁移、侵袭,抑制细胞凋亡,这可能为T-ALL治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 LINC00284 miR-3127 stat3 急性t淋巴细胞白血病 生物学行为
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高基线肿瘤负荷相关的巨噬细胞通过IGFBP2-STAT3-PD-L1通路促进免疫抑制微环境的形成从而降低免疫检查点抑制剂的疗效
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作者 温照伟 孙慧颖 +7 位作者 张志华 郑燕喃 郑思婷 宾建平 廖禹林 石敏 周锐 廖旺军 《癌症》 CAS 2023年第8期409-428,共20页
背景与目的多项临床研究表明,基线肿瘤负荷与免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor,ICI)的疗效负相关。本研究旨在探讨高肿瘤负荷(high tumor burden,HTB)和低肿瘤负荷(low tumor burden,LTB)肿瘤对ICI治疗敏感性不同的具体机... 背景与目的多项临床研究表明,基线肿瘤负荷与免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor,ICI)的疗效负相关。本研究旨在探讨高肿瘤负荷(high tumor burden,HTB)和低肿瘤负荷(low tumor burden,LTB)肿瘤对ICI治疗敏感性不同的具体机制。方法为了进行体内实验,我们通过皮下成瘤的方式建立了多种小鼠模型,并利用转录组测序、免疫组化和流式细胞术检测各组皮下瘤的免疫微环境。为了探讨潜在的分子机制,我们使用了细胞共培养、细胞因子抗体芯片、蛋白质印迹、流式细胞术和酶联免疫吸附测定等方法进行体外实验。结果我们发现抗程序性死亡受体-1(programmed cell death protein-1,PD-1)治疗对HTB组的MC38或B16皮下瘤均无效。通过流式细胞术我们发现,与LTB组相比,HTB组的皮下瘤中的CD8+T细胞浸润数量显著减少,而M2型巨噬细胞数量增加。这种变化既不受注射肿瘤细胞的初始数量或肿瘤年龄的影响,也不能通过减瘤手术来逆转。在皮下瘤生长的不同时间点,我们对小鼠进行腹腔注射集落刺激因子1受体(colony-stimulating factor 1 receptor,CSF-1R)抑制剂,发现只有在肿瘤早期阶段给药,才能使长到高肿瘤负荷时的肿瘤对抗PD-1治疗有反应,这是因为早期阶段给药可以让生长中的肿瘤保持“热”的肿瘤微环境。在机制方面,我们发现HTB肿瘤组织中胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulinlike growth factor binding protein 2,IGFBP2)的表达水平显著升高。IGFBP2通过激活信号转导子和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3),促进M2型巨噬细胞中程序性死亡配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)的表达,而PD-L1+M2型巨噬细胞通过依赖PD-L1的方式抑制了CD8+T细胞的增殖和活化,从而发挥免疫抑制功能。结论本研究表明,ICI治疗在HTB肿瘤中疗效差的原因是HTB肿瘤通过IGFBP2-STAT3-PD-L1通路促进了PD-L1+M2型巨噬细胞的积聚,并对T细胞增殖和激活产生显著的抑制作用。 展开更多
关键词 CD8+t细胞 IGFBP2 免疫检查点抑制剂 巨噬细胞 PD-L1 stat3 肿瘤负荷 肿瘤免疫微环境
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JAK2/STAT3信号通路调控急性肺损伤过程中Th17/Treg失衡机制的研究 被引量:2
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作者 周斌 万少兵 +4 位作者 王瑛 余平 典万康 周莹 周琴 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第6期75-80,共6页
目的探讨JAK2/STAT3信号通路在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)过程中对Th17/Treg失衡的影响及其机制。方法将24只C57BL/6小鼠随机分为4组:对照组、模型组、JAK2抑制剂组和STAT3抑制剂组,每组6只。对照组气道内滴注生理盐水,8 h后腹... 目的探讨JAK2/STAT3信号通路在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)过程中对Th17/Treg失衡的影响及其机制。方法将24只C57BL/6小鼠随机分为4组:对照组、模型组、JAK2抑制剂组和STAT3抑制剂组,每组6只。对照组气道内滴注生理盐水,8 h后腹腔注射等量生理盐水,模型组、JAK2抑制剂组和STAT3抑制剂组气道滴注脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)构建ALI模型,8 h后分别腹腔注射等量生理盐水、Fedratinib和NSC74859。LPS滴注24 h后测定小鼠肺湿重/干重(W/D),HE染色观察肺组织病理变化,流式检测肺组织中Treg细胞和Thl7细胞的比例,ELISA检测肺组织匀浆中IL-6、lL-10、IL-17A和TGF-β1水平,Western blot检测肺组织中JAK2、STAT3、p-JAK2和p-STAT3蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组W/D升高(P<0.01),肺组织损伤严重,有大量炎性细胞浸润,肺组织中Th17/Treg比值、炎症因子IL-6、IL-17A、TGF-β1水平、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),IL-10水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,JAK2抑制剂组和STAT3抑制剂组W/D降低(P<0.05),肺组织损伤有所减轻,炎性细胞浸润减少,肺组织中Th17/Treg比值、炎症因子IL-6、IL-17A、TGF-β1水平、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),IL-10水平显著升高(P<0.01)。结论抑制JAK2/STAT3信号通路的激活能够调节LPS诱导的ALI小鼠肺组织中Th17/Treg细胞的失衡,抑制炎症反应,减轻肺损伤。 展开更多
关键词 急性肺损伤 JAK2/stat3信号通路 辅助性t细胞17 调节性t细胞
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水凝胶递送碱性成纤维细胞生长因子对氧糖剥夺后NIH3T3细胞功能的影响
6
作者 惠文婷 宋潼潼 +1 位作者 黄敏 陈霞 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1484-1490,共7页
目的:探讨水凝胶递送碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对氧糖剥夺(OGD)后小鼠成纤维NIH3T3细胞功能的影响,并阐明负载bFGF的水凝胶对OGD条件下成纤维细胞氧化应激反应的改善作用。方法:制备bFGF明胶水凝胶,将对数生长期NIH3T3细胞分为空白... 目的:探讨水凝胶递送碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对氧糖剥夺(OGD)后小鼠成纤维NIH3T3细胞功能的影响,并阐明负载bFGF的水凝胶对OGD条件下成纤维细胞氧化应激反应的改善作用。方法:制备bFGF明胶水凝胶,将对数生长期NIH3T3细胞分为空白组、20%明胶组和20%明胶+戊二醛组,采用CCK-8法检测6、12和24 h水凝胶浸出液共培养的NIH3T3细胞活性。将NIH3T3细胞分为对照组、OGD组和OGD+不同质量bFGF负载组(OGD+1 ng bFGF组、OGD+10 ng bFGF组和OGD+100 ng bFGF组)。采用Western blotting法检测各组细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白表达水平。检测各组细胞中丙二醛(MDA)水平和乳酸脱氢酶(LDH)及超氧化物歧化酶(SOD)活性。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测bFGF体外释放率。结果:CCK-8法检测,与空白组比较,不同浸出时间20%明胶组和20%明胶+戊二醛组NIH3T3细胞活性差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,OGD组NIH3T3细胞中α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与OGD组比较,OGD+1 ng bFGF组、OGD+10 ng bFGF组和OGD+100 ng bFGF组NIH3T3细胞中α-SMA蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),Ⅰ型胶原蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性。与对照组比较,OGD组NIH3T3细胞中MDA水平和LDH活性升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05)。与OGD组比较,OGD+1 ng bFGF组NIH3T3细胞中MDA水平和LDH活性降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05)。ELISA法检测,在4 h内约10%bFGF由水凝胶中释放,在12 h内约15%bFGF由水凝胶中释放,在24 h内约21%bFGF由水凝胶中释放。结论:负载bFGF的水凝胶可以调控OGD条件下成纤维细胞的转化,抑制成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白表达,并改善细胞氧化应激反应,且该系统具有一定的持续释药能力。 展开更多
关键词 水凝胶 碱性成纤维细胞生长因子 nih3t3细胞 胶原蛋白 氧化应激
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核基质结合区提高稳定整合的CAT报告基因在NIH3T3细胞中的表达 被引量:7
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作者 王天云 田芳 +3 位作者 张胜力 侯卫红 王建民 薛乐勋 《细胞生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期183-186,共4页
通过PCR从人基因组扩增β珠蛋白核基质结合区(matrix attachment region,MAR)及β干扰素MAR,正向及反向克隆至pCAT3载体SV40启动子的上游,分别检测瞬时及稳定表达的情况下MAR在NIH3T3细胞内对CAT报告基因的影响情况。结果显示:瞬时表达... 通过PCR从人基因组扩增β珠蛋白核基质结合区(matrix attachment region,MAR)及β干扰素MAR,正向及反向克隆至pCAT3载体SV40启动子的上游,分别检测瞬时及稳定表达的情况下MAR在NIH3T3细胞内对CAT报告基因的影响情况。结果显示:瞬时表达情况下,反向及正向插入的MAR均不能提高CAT基因的表达;稳定整合的情况下,插入的β珠蛋白MAR可使CAT报告基因表达水平提高8倍,β干扰素MAR提高3倍,反向及正向插入的MAR没有明显的差别。这表明MAR能在一定程度上提高外源基因的表达水平,并且不同的MAR对外源基因表达的影响存在差异,MAR的插入方向对外源基因的表达水平没有明显的作用。 展开更多
关键词 核基质结合区 cat报告基因 nih3t3细胞 基因表达 基因沉默 转基因 调控机制
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细菌脂多糖对NIH3T3细胞增生、胞内游离钙及cAMP浓度的影响 被引量:3
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作者 闻平 戴赓孙 叶庆林 《医学研究生学报》 CAS 2000年第5期295-297,共3页
目的 :探讨细菌脂多糖 (lipopolysaccharide,L PS)对 NIH 3T3细胞增生、胞内游离钙及 c AMP浓度的影响。 方法 :以中性红比色法检测细胞生长 ,酚试剂法检测细胞蛋白质合成 ,并动态检测 L PS对胞内游离钙和 c AMP浓度的影响。 结果 :1... 目的 :探讨细菌脂多糖 (lipopolysaccharide,L PS)对 NIH 3T3细胞增生、胞内游离钙及 c AMP浓度的影响。 方法 :以中性红比色法检测细胞生长 ,酚试剂法检测细胞蛋白质合成 ,并动态检测 L PS对胞内游离钙和 c AMP浓度的影响。 结果 :1微量 L PS可促进细胞生长及蛋白质合成 ;2 L PS作用后 3~ 5 min可使胞内游离钙浓度升高 ,作用 1 m in后使 c AMP浓度升高 ,并保持较高水平。 结论 :胞内游离钙 ([Ca2 + ]i)及 c AMP是 L PS对 展开更多
关键词 细菌脂多糖 胞内游离钙 环磷酸腺苷 nih3t3细胞 增生
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不同浓度的互隔交链孢霉素对NIH/3T3细胞cAMP水平的影响
9
作者 王瑾瑾 江亚南 +4 位作者 马艳英 黄幼田 郑智敏 赵继敏 董子明 《肿瘤基础与临床》 2009年第1期8-10,共3页
目的观察不同浓度的互隔交链孢霉素(altenuene,ALT)对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3)中cAMP水平的影响。方法以NIH/3T3为研究对象,观察以0、2.5、5、10、15和20μmol/L ALT作用30min,并设0.4mmol/L烷化剂甲璜酸甲酯(methyl methane-sulfon... 目的观察不同浓度的互隔交链孢霉素(altenuene,ALT)对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3)中cAMP水平的影响。方法以NIH/3T3为研究对象,观察以0、2.5、5、10、15和20μmol/L ALT作用30min,并设0.4mmol/L烷化剂甲璜酸甲酯(methyl methane-sulfonate,MMS)为阳性参照物,使用超声法破碎细胞,以125I标记的放射免疫分析(RIA)检测细胞内cAMP水平。结果与对照组相比,5、10、15和20μmol/L ALT能升高细胞内cAMP水平(P<0.05);而以0.4mmol/L MMS处理细胞,cAMP水平同样升高。结论ALT对细胞具有明显的影响,可能与经由第二信使cAMP所介导的相关信号通路有关。 展开更多
关键词 互隔交链孢霉素 环腺苷酸 nih/3t3细胞
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STAT3、CA125在人肺腺癌细胞A549中的表达及意义
10
作者 蓝秀 王超 +2 位作者 辛彩霞 宋本艳 王鸿程 《泸州医学院学报》 2011年第6期650-652,共3页
目的:探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)对肺腺癌的诊断价值。方法:采用免疫组织化学PV二步法检测人肺腺癌细胞A549和正常人胚肺细胞MRC-5中STAT3、CA125蛋白表达,分析在人肺腺癌细胞A549中STAT3与CA125表达的相关性。结果:STAT3、CA... 目的:探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)对肺腺癌的诊断价值。方法:采用免疫组织化学PV二步法检测人肺腺癌细胞A549和正常人胚肺细胞MRC-5中STAT3、CA125蛋白表达,分析在人肺腺癌细胞A549中STAT3与CA125表达的相关性。结果:STAT3、CA125在人肺腺癌细胞A549中的阳性表达水平均明显高于正常人胚肺细胞MRC-5(P<0.01),且在人肺腺癌细胞A549中STAT3与临床上常用的肺肿瘤标志物CA125的表达均呈正相关。结论:STAT3有望成为一种新的肺肿瘤标志物推荐临床使用。 展开更多
关键词 肺腺癌 stat3 ca125 肺肿瘤标志物
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Tim-3/galectin-9调控脂多糖诱导的人淋巴细胞中Th1/Th2细胞平衡
11
作者 孙晓丽 张进进 +3 位作者 宋凤英 黄永莉 陈立力 邢颜超 《基础医学与临床》 2023年第10期1542-1548,共7页
目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)/半乳糖凝集素-9(galectin-9)在脂多糖(LPS)诱导淋巴细胞炎性过程中对辅助性T细胞(Th)Th1/Th2细胞失衡中的作用。方法收集脓毒症患者的外周血。分离外周血单个核细胞(PBMC),RT-qPCR检测Tim-3... 目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)/半乳糖凝集素-9(galectin-9)在脂多糖(LPS)诱导淋巴细胞炎性过程中对辅助性T细胞(Th)Th1/Th2细胞失衡中的作用。方法收集脓毒症患者的外周血。分离外周血单个核细胞(PBMC),RT-qPCR检测Tim-3、galectin-9、T-bet和GATA3的表达;ELISA检测血清sTim-3、galectin-9、IFN-γ和IL-4的水平;分离的外周血单个核细胞体外培养,LPS刺激建立体外炎性模型;ELISA法检测细胞培养上清中Th1和Th2细胞相关细胞因子的水平;Western blot检测JAK2/STAT3相关因子的表达;Pearson相关系数分析Tim-3、galectin-9、IFN-γ和IL-4的相关性。结果脓毒症患者外周血中Tim-3和galectin-9的mRNA表达增多,sTim-3、galectin-9、IL-4和GATA-3升高,IFN-γ和T-bet水平下降,磷酸化JAK2和STAT3升高(P<0.05)。阻断Tim-3表达后,IFN-γ水平升高,而IL-4的水平明显下降,磷酸化JAK2和STAT3下降(P<0.05)。Tim-3、IL-4与galectin-9呈正相关,而Tim-3与IFN-γ呈负相关,IFN-γ与galectin-9呈负相关,Tim-3与IL-4呈正相关。结论在LPS诱导的炎性细胞中,Tim-3/galectin-9可能调控JAK2/STAT3通路,导致Th1/Th2细胞的失衡。 展开更多
关键词 t细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3 半乳糖凝集素-9 辅助性t细胞 JAK2/stat3通路 脓毒症
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人endostatin基因重组逆转录病毒载体的构建及其在NIH3T3细胞中表达
12
作者 王轩 李希 +2 位作者 刘福坤 黎介寿 徐根兴 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期693-697,共5页
 为探讨转人血管内皮抑制基因(endostatin)在转染细胞中的表达,利用逆转录病毒载体构建人endostatin基因的重组质粒,通过脂质体(lipofectamine)将重组质粒导入包装细胞PA317,制备重组病毒液.用重组病毒液感染NIH3T3细胞,经G418筛选获...  为探讨转人血管内皮抑制基因(endostatin)在转染细胞中的表达,利用逆转录病毒载体构建人endostatin基因的重组质粒,通过脂质体(lipofectamine)将重组质粒导入包装细胞PA317,制备重组病毒液.用重组病毒液感染NIH3T3细胞,经G418筛选获得转人endostatin基因细胞株NIH3T3_endo.同法制备对照细胞株NIH3T3_pLncx.PCR检测NIH3T3_endo细胞基因组,在扩增产物中有一550bp人endostatin基因特异性片段,对照组为阴性.免疫组化测定示仅NIH3T3_endo细胞中有外源性endostatin蛋白的表达.说明人endostatin基因已被成功导入NIH3T3细胞,并获得稳定表达. 展开更多
关键词 人endostatin基因组 血管内皮抑制素 重组逆转录病毒 nih3t3细胞 基因重组 基因表达 载体构建 抗肿瘤血管疗法
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桂皮醛对NIH3T3细胞c-Fos、c-Myc表达的影响 被引量:9
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作者 赵京霞 李萍 +3 位作者 黄启福 刘欣 盛巡 梁代英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期2448-2450,共3页
目的:研究肉桂主要成分桂皮醛刺激NIH3T3细胞后c-Fos、c-Myc蛋白在不同时点表达的规律,探讨桂皮醛促进NIH3T3细胞增殖的机制。方法:采用MTT法观察不同浓度桂皮醛对NIH3T3细胞增殖的影响;并采用免疫细胞化学法检测桂皮醛对NIH3T3细胞c-Fo... 目的:研究肉桂主要成分桂皮醛刺激NIH3T3细胞后c-Fos、c-Myc蛋白在不同时点表达的规律,探讨桂皮醛促进NIH3T3细胞增殖的机制。方法:采用MTT法观察不同浓度桂皮醛对NIH3T3细胞增殖的影响;并采用免疫细胞化学法检测桂皮醛对NIH3T3细胞c-Fos、c-Myc蛋白表达的影响。结果:桂皮醛浓度在(8.8×10-2)-(8.8×10)μg/L浓度范围内对NIH3T3细胞具有促增殖作用。当其浓度为5.5μg/L时,促增殖作用最显著。在此浓度下,经桂皮醛刺激后,c-Fos和c-Myc蛋白均在2h开始表达,3h时表达明显增加。结论:桂皮醛可以上调c-Fos、c-Myc蛋白的表达,提示桂皮醛促进细胞增殖可能与其能促进c-Fos、c-Myc快速表达有关。 展开更多
关键词 桂皮醛 细胞增殖 蛋白质c-Fos 蛋白质c-Myc nih3t3细胞
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白藜芦醇调节STAT3与miR-21表达抗肝癌作用的初步研究 被引量:10
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作者 李覃 王伟 +2 位作者 张实 邢杰 王增田 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期186-191,共6页
目的初步探讨白藜芦醇(Resveratrol,Res)的抗肝癌作用及其分子机制。方法建立移植性肝癌小鼠模型,口服给予Res进行干预,分析肿瘤生长状况。然后采用Real-time PCR、RT-PCR等方法检测转录因子Foxp3及微小核糖核酸-21(miR-21)的基因表达,W... 目的初步探讨白藜芦醇(Resveratrol,Res)的抗肝癌作用及其分子机制。方法建立移植性肝癌小鼠模型,口服给予Res进行干预,分析肿瘤生长状况。然后采用Real-time PCR、RT-PCR等方法检测转录因子Foxp3及微小核糖核酸-21(miR-21)的基因表达,Western blot分析信号转导子与转录激活子3(STAT3)的活性表达,流式细胞术观察CD4+CD25+T细胞数量的变化。结果与荷瘤对照组相比,Res给药组CD4+CD25+T细胞数量和Foxp3表达均明显降低,同时miR-21表达减少,该效应或许与其下调STAT3磷酸化活性水平密切相关。结论 Res可能通过调控STAT3信号分子及miR-21表达,抑制调节性T细胞产生,改变肿瘤微环境,从而发挥抗肝癌作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 肝癌 调节性t细胞 信号转导 miR一21 stat3
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大蒜素对NIH3T3细胞增殖及胶原合成的影响 被引量:6
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作者 张海啸 史载祥 +4 位作者 贾海忠 李格 程文立 谷万里 杨仲义 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期431-434,共4页
目的研究大蒜素对NIH3T3细胞生长增殖和Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗纤维化作用机理。方法大蒜素加入NIH3T3细胞培养液,以丹参为对照药物,测定H3-thymidine DNA掺入量;碱消化法检测细胞培养液中羟脯氨酸含量,荧光免疫染色方法检测NIH3T... 目的研究大蒜素对NIH3T3细胞生长增殖和Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗纤维化作用机理。方法大蒜素加入NIH3T3细胞培养液,以丹参为对照药物,测定H3-thymidine DNA掺入量;碱消化法检测细胞培养液中羟脯氨酸含量,荧光免疫染色方法检测NIH3T3细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果大蒜素在0·2-5μg/mL剂量范围内剂量依赖的抑制NIH3T3细胞生长和增殖;药物作用后,细胞培养液中的羟脯氨酸含量减少,Ⅰ型胶原蛋白的表达减少。结论大蒜素对NIH3T3细胞生长增殖有抑制作用,减少细胞胶原的合成,减少Ⅰ型胶原的表达,可能具有抗纤维化作用。 展开更多
关键词 大蒜素 nih3t3细胞 Ⅰ型胶原 细胞增殖 羟脯氨酸
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人重组骨形成蛋白-2诱导NIH3T3细胞向成骨细胞表型转化 被引量:6
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作者 王军琳 刘源 +2 位作者 金岩 王新文 李媛 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期420-422,共3页
目的 探讨人重组骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对NIH3T3成纤维细胞生物学行为的影响。方法 培养NIH3T3细胞,加入外源性rhBMP-2,用生长曲线、噻唑蓝(MTT)比色、流式细胞仪(FCM)分析、BrdU检测观察细胞的增殖和DNA合成,并检测碱性磷酸酶(AIP)活... 目的 探讨人重组骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对NIH3T3成纤维细胞生物学行为的影响。方法 培养NIH3T3细胞,加入外源性rhBMP-2,用生长曲线、噻唑蓝(MTT)比色、流式细胞仪(FCM)分析、BrdU检测观察细胞的增殖和DNA合成,并检测碱性磷酸酶(AIP)活性和骨钙素(OC)含量观察细胞是否有成骨趋向。结果 加药组细胞的增殖活性下降、DNA合成变慢,ALP活性和OC含量均增高。结论 rhBMP-2使NIH3T3细胞增殖活性变弱,表现成骨细胞表型。 展开更多
关键词 人重组骨形成蛋白-2 RHBMP-2 nih3t3细胞增殖 成骨细胞 表型转化 OC DNA合成 生长曲线 碱性磷酸酶 成纤维细胞
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N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对血小板洐生生长因子介导的NIH3T3细胞增殖的抑制调节作用 被引量:13
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作者 杨方 赵丹 +5 位作者 马文东 罗玲 户万秘 王丽萍 朱曦玲 孙树勋 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期618-620,681,共4页
目的:探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对血小板洐生生长因子(PDGF)介导的NIH3T3细胞增殖的抑制调节作用。方法:采用MTT法和免疫组化法检测NIH3T3细胞增殖和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:在 10-10~10-8mol/L... 目的:探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对血小板洐生生长因子(PDGF)介导的NIH3T3细胞增殖的抑制调节作用。方法:采用MTT法和免疫组化法检测NIH3T3细胞增殖和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:在 10-10~10-8mol/L浓度范围内,AcSDKP对PDGF介导的NIH3T3细胞增殖均有抑制作用,并在10-9 mol/L浓度时其抑制作用最佳。PDGF对NIH3T3细胞PCNA的表达具有增强作用,而AcSDKP对PDGF介导的NIH3T3细胞PCNA的表达有显著抑制作用。结论:AcSDKP对PDGF介导的NIH3T3细胞增殖有明显抑制作用。 展开更多
关键词 N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸 血小板洐生生长因子 增殖细胞核抗原 nih3t3细胞 细胞增殖
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乙醇对NIH3T3成纤维细胞成脂分化的影响 被引量:6
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作者 李月白 殷力 +1 位作者 王义生 崔全军 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第5期758-760,共3页
目的 :观察乙醇对NIH 3T3成纤维细胞分化为脂肪细胞的作用 ,及其对成脂转录因子PPARγ表达的影响。方法 :以不同浓度乙醇作为诱导剂处理NIH 3T3成纤维细胞 14d ,苏丹Ⅳ染色 ,采用电子计算机图像分析软件ImageProPlus 4 .1,确定脂肪细胞... 目的 :观察乙醇对NIH 3T3成纤维细胞分化为脂肪细胞的作用 ,及其对成脂转录因子PPARγ表达的影响。方法 :以不同浓度乙醇作为诱导剂处理NIH 3T3成纤维细胞 14d ,苏丹Ⅳ染色 ,采用电子计算机图像分析软件ImageProPlus 4 .1,确定脂肪细胞百分比。采用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)技术 ,检测细胞PPARγmRNA的表达。结果 :以递增浓度 (0 .0 3mol/L、0 .0 6mol/L、0 .0 9mol/L、0 .15mol/L、0 .2 1mol/L)乙醇处理NIH 3T3成纤维细胞 14d ,在 0 .0 6mol/L、0 .0 9mol/L、0 .15mol/L、0 .2 1mol/L乙醇组中 ,脂肪细胞百分比和PPARγmRNA表达均比对照组明显增高 ,差异均有统计学意义 (P <0 .0 0 1)。 0 .0 3mol/L乙醇组与对照组间的脂肪细胞百分比和PPARγmRNA表达差异均无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :乙醇能够直接诱导NIH 3T3成纤维细胞大量分化为脂肪细胞 。 展开更多
关键词 乙醇 nih3t3成纤维细胞 细胞分化 脂肪细胞 乙醇性骨坏死
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蚯蚓蛋白对NIH3T3细胞的促进增殖作用研究 被引量:5
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作者 周莹 宋淑亮 +3 位作者 梁浩 王允山 王伟莉 吉爱国 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期192-194,共3页
目的探讨蚯蚓蛋白(EFP)对NIH3T3细胞的促进增殖作用。方法 MTT法测定EFP对大鼠成纤维细胞(NIH3T3)的促进增殖作用;细胞划痕法测定EFP促进NIH3T3细胞划痕创面愈合作用;测定NIH3T3细胞培养液中胶原降解产物羟脯氨酸的含量。结果 EFP具有促... 目的探讨蚯蚓蛋白(EFP)对NIH3T3细胞的促进增殖作用。方法 MTT法测定EFP对大鼠成纤维细胞(NIH3T3)的促进增殖作用;细胞划痕法测定EFP促进NIH3T3细胞划痕创面愈合作用;测定NIH3T3细胞培养液中胶原降解产物羟脯氨酸的含量。结果 EFP具有促进NIH3T3细胞的增殖作用,促进划痕创面愈合作用,增加了NIH3T3细胞培养液中羟脯氨酸的含量。结论 EFP具有促进NIH3T3细胞增殖和划痕创面愈合作用。 展开更多
关键词 蚯蚓蛋白 nih3t3 羟脯氨酸
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带状疱疹患者血液中细胞因子、T淋巴细胞亚群、STAT3功能评估及鼠神经生长因子的干预效果 被引量:14
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作者 许芸 谭凌玲 +2 位作者 汪凯 张娟娟 张黎静 《海南医学院学报》 CAS 2016年第13期1350-1353,共4页
目的:评估带状疱疹患者血液中细胞因子、T淋巴细胞亚群、信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)水平及鼠神经生长因子的干预效果。方法:102例带状疱疹患者作为观察组,接受鼠神经生长因... 目的:评估带状疱疹患者血液中细胞因子、T淋巴细胞亚群、信号传导及转录激活因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)水平及鼠神经生长因子的干预效果。方法:102例带状疱疹患者作为观察组,接受鼠神经生长因子干预,另取同期在本院接受体检的正常人群100例作为健康对照组,检测观察组治疗前后和健康对照组血清Th1/Th2因子水平、IgG亚类及补体水平、T淋巴细胞亚群水平和STAT3功能。结果:观察组治疗后血清白介素(IL)-2、γ干扰素(γ-IFN)水平高于治疗前,IL-4、IL-5、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平低于治疗前(P<0.05);观察组治疗后血清IgG1、IgG3、IgG4、C3、C4值高于治疗前,IgG2值低于治疗前(P<0.05);观察组治疗后CD3、CD4、CD4/CD8水平高于治疗前,CD8水平低于治疗前(P<0.05);观察组治疗后STAT3、p-STAT3、JAK2表达量低于治疗前(P<0.05)。结论:带状疱疹患者存在免疫系统及STAT3信号通路功能异常,鼠神经生长因子干预可以恢复机体多系统平衡,加速病情康复,具有积极的临床意义。 展开更多
关键词 带状疱疹 鼠神经生长因子 t淋巴细胞亚群 stat3功能
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