雷公藤红素下调P物质介导的肥大细胞NK-1R mRNA表达

目的研究雷公藤红素对P物质(susbstance p,SP)介导的肥大细胞活化的影响,方法应用CCK8检测雷公藤红素对小鼠P815肥大细胞的毒性作用,筛选出最佳的浓度和时间后将细胞分为细胞空白组,SP模型组,低、中、高浓度雷公藤红素组,雷公藤红素预处理细胞后,再采用SP刺激肥大细胞,致使其活化。采用ELISA检测组胺的释放量,RT-PCR检测NK-1R mRNA表达情况。结果雷公藤红素对细胞的毒性作用呈浓度时间依赖性,随着浓度和时间的增加毒性越大;与模型组相比,组胺的释放量随浓度的增加而减少,肥大细胞表面NK-1R mRNA表达下降(P<0.05),差异有统计学意义。结论雷公藤红素能抑制小鼠P815肥大细胞组胺的释放,可能跟NK-1R的表达有关。

SP/NK-1R系统在乳腺癌中的研究进展

近年来,尽管乳腺癌的治疗已取得诸多进展,但其发病率仍呈上升趋势,寻找新的药物靶点和生物标志物已成为研究热点。越来越多的临床研究开始关注肿瘤细胞与肿瘤微环境的相互作用,认为肿瘤微环境对恶性肿瘤的进展起着至关重要的作用。物质P(Substance P,SP)能够参与癌变过程,在维持肿瘤微环境中发挥着关键作用。NK-1受体(Neurokinin 1 receptor,NK-1R)在肿瘤细胞的细胞质中表达,与诸多肿瘤特征显著相关。SP通过其受体NK-1R诱导肿瘤细胞增殖、血管生成和迁移,并发挥抗凋亡作用。在未来的治疗方案中,能否应用NK-1R拮抗剂为乳腺癌的诊断与治疗提供更精准的靶点成为热点话题。本文就SP/NK-1R系统在乳腺癌中的研究状况进行综述。

补偿生长对异育银鲫IGF-1、IGFBP-1水平及IGF-1、IGF-1RmRNA表达的影响

该实验分析饥饿和恢复投喂对异育银鲫血液IGF-1和IGFBP-1水平和肝脏IGF-1、白肌IGF-1RmRNA表达量的影响。结果显示:饥饿期(14d)血液中IGF-1和IGFBP-1水平逐渐下降,在饥饿第14天均出现显著性降低(P<0.05);恢复投喂后第1天IGF-1迅速恢复到对照组水平,而IGFBP-1水平仍显著低于对照组(P<0.05),随后逐渐升高,直至于恢复投喂第14天后显著高于对照组水平(P<0.05);饥饿期肝脏IGF-1mRNA表达量呈下降趋势,但与对照组无显著性差异(P>0.05);恢复投喂初期(第1、3天),IGF-1mRNA表达量仍继续下降(P<0.05),对营养条件的变化反应滞后,至第7天,表达水平恢复到对照组水平。白肌IGF-1RmRNA表达水平在饥饿第3天出现显著性下降(P<0.05),继续饥饿其水平出现补偿性升高;恢复投喂后第14天IGF-1RmRNA表达量显著高于对照组水平(P<0.05)。该结果揭示恢复投喂期高水平的IGFBP-1含量和IGF-1RmRNA表达量可能通过提高IGF-1的促生长作用参与异育银鲫的补偿生长调节。

鸡生长发育早期骨骼肌IGF1R mRNA表达规律研究

以生长速度不同的花山麻鸡和清远麻鸡为试验素材,采用实时荧光定量PCR方法检测鸡9、12、16、21胚龄(E9 d、E12 d、E16 d、E21 d)和出雏后7日龄(7 d)时胸肌和腿肌中IGF1R mRNA表达变化情况,并与肌肉质量进行相关性研究。结果发现,21胚龄时,花山麻鸡和清远麻鸡胸肌质量都出现了显著降低,腿肌质量持续增长。花山麻鸡胸肌IGF1R mRNA表达呈前高后低趋势,9胚龄时表达量最高,之后显著降低并维持在较低的水平,出雏后7日龄时表达量再次下降;清远麻鸡在胸肌中的表达则呈“波浪形”,9胚龄和16胚龄表达量升高,其他日龄表达量显著降低。腿肌中,花山麻鸡IGF1R mRNA表达量在16胚龄之后显著降低;清远麻鸡腿肌IGF1R mRNA表达呈依次递减模式,各时间点之间差异显著(P<0.05)。品种间各个时间点胸肌和腿肌IGF1R mRNA表达量均呈显著差异(P<0.05)。两个品种骨骼肌IGF1R mRNA表达与胸肌、腿肌质量均呈极显著相关(P<0.01)。以上结果初步揭示了生长发育早期不同品种鸡胸肌和腿肌IGF1R基因表达发育变化趋势和品种差异,为深入研究IGF1R基因在鸡肌肉发育中的调控机理提供基础资料。

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TGF-β1及TβRⅠ/ⅡmRNA表达的影响

目的:研究中药壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TGF-β1及TβRⅠ/ⅡmRNA表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法:采用四氯化碳(CCl4)复合因素大鼠肝纤维化模型,给予壮肝逐瘀煎灌胃,取血清及肝组织做检测,双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清TGF-β1含量,实时荧光定量PCR技术对肝组织TβRⅠ/ⅡmRNA进行定量分析。结果:治疗6周后,与病理模型组大鼠比较,壮肝逐瘀煎治疗组肝小叶结构趋于正常,纤维间隔明显变薄,TGF-1β及TβRⅠ/ⅡmRNA明显降低(P<0.01)。结论:壮肝逐瘀煎能够显著改善肝纤维化大鼠肝组织的病理变化,具有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与壮肝逐瘀煎抑制TGF-β1及TβRⅠ/ⅡmRNA表达有关。

鸡形觉剥夺性近视眼后极部巩膜IGF-1R/IGF-2RmRNA的表达

目的:观察鸡形觉剥夺性近视眼后极部巩膜IGF-1R/IGF-2RmRNA表达水平的变化,探讨IGF-1R/IGF-2R在实验性近视眼发生机制中的信号转导作用。方法:孵化1d的白色来亨鸡36只,右眼为遮盖眼,左眼为自身对照眼;测量实验前、单眼遮盖1,2,3wk时遮盖眼和对照眼的屈光度和眼轴长度,并检测不同遮盖时间鸡眼后极部巩膜IGF-1R/IGF-2RmRNA的表达水平。结果:鸡眼后极部巩膜可检测到IGF-1R/IGF-2Rm-RNA的表达,随着眼球的生长发育其表达水平明显升高;随着遮盖时间的延长,IGF-1R/IGF-2RmR-NA在遮盖眼后极部巩膜的表达水平显著升高;遮盖眼后极部巩膜IGF-1RmRNA的表达水平自遮盖1wk起明显高于对照眼;IGF-2RmRNA表达水平则在对照眼与遮盖眼无显著差异。结论:形觉剥夺可能通过上调鸡眼后极部巩膜IGF-1RmRNA表达水平,IGF-1R通过结合IGF并启动下游信息转导途径,从而调控巩膜细胞的增殖和分化,导致近视的发生。

NK-1R和NK-2R在急性坏死性胰腺炎结肠组织中的表达

目的 :了解神经激肽 1受体 (NK 1R)和神经激肽 2受体 (NK 2R)在急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠结肠黏膜中的表达 ,探讨该受体的表达与ANP时肠黏膜损害的关系。方法 :健康成年Sprague Dawley大鼠分为对照组 30只和ANP组 60只。对照组开腹后只翻动胰腺 ;ANP组大鼠胰胆管恒速逆行注射 5 %牛磺胆酸钠 ,制成ANP大鼠模型。应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR )检测结肠黏膜NK 1R和NK 2RmRNA水平 ,应用免疫组织化学方法进行NK 1R的组织学定位。结果 :与对照组相比 ,ANP结肠组织中NK 1R和NK 2RmRNA水平过度表达 ,主要位于肠黏膜表面、黏膜固有层的单核细胞、黏膜下层的动静脉、纵形和环形肌层等处。结论 :ANP结肠组织中NK 1R和NK 2R的表达水平明显上调 ,扰乱了神经激肽的作用环节 。

球囊损伤血管内皮后血管紧张素ⅡAT_1受体mRNA的变化

目的 研究球囊损伤血管内皮后内膜增生的过程及血管紧张素ⅡAT1受体mRNA的变化。方法 建立球囊剥脱大鼠主动脉内皮模型 ,将大鼠随机分为对照组 (n =2 4)和手术组 (n =2 4) ,各组分别在内皮损伤后 3、7、14和 2 8d取主动脉组织 ,通过组织学方法及逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术检测主动脉内膜增生的过程及AT1受体mRNA的水平。结果 (1)AT1受体mRNA于术后 3d已明显增加 ,并于术后 14d达高峰 ,术后 2 8d恢复至对照组水平。 (2 )内皮损伤后 3d已有增殖的血管平滑肌细胞 (VSMC)移行至内膜层 ;损伤后 7d内膜开始增生 ;损伤后 14dVSMC的增殖及内膜的增生更加明显 ;损伤后2 8dVSMC的增殖明显减弱 ,但细胞外基质成份增加 ,内膜继续增生。结论 血管内皮损伤后内膜增生的过程中AT1受体mR NA表达增加。

增生性瘢痕组织中肿瘤坏死因子αR_1mRNA的表达及意义

目的:从基因水平探讨肿瘤坏死因子受体(TNF-αR1)在增生性瘢痕组织发生、发展过程中的作用,为增生性瘢痕的基因治疗探索一条有效途径。方法:以正常瘢痕为对照,利用RT-PCR技术检测1年以上增生性瘢痕组织成纤维细胞中TNF-αR1mRNA的表达情况。结果:1年以上增生性瘢痕组织中TNF-αR1mRNA的表达稳定,与正常瘢痕比较含量明显下降。结论:增生性瘢痕的形成与TNF-αR1的表达低下有一定关系。用基因治疗的方法提高早期增生性瘢痕中TNF-α的含量或者提高靶细胞膜上TNF-αR1的数目与活性可能为增生性瘢痕的康复治疗的有效途径。

鼠全脑缺血再灌注损伤时ICAM-1mRNA的表达及PMNL、Mφ的浸润情况

目的 :评估不同缺血再灌注时间鼠细胞间粘附分子 - 1 (ICAM- 1 ) m RNA的表达及多形核白细胞 (PMNL)、单核巨噬细胞 (Mφ)的浸润。 方法 :建立全脑四血管夹闭缺血再灌注 (I/ R)模型。40只 SD大鼠随机分五组 :第 组为非缺血非再灌注组 ;第 、 、 、 组缺血 30 m in后分别再灌注 2 h、4h、1 2 h、2 4h。处死大鼠取脑组织 ,逆转录PCR(RT- PCR)检测 ICAM- 1 m RNA表达 ,光镜下检查 PMNL、Mφ在损伤组织中的浸润情况。 结果 :PMNL在再灌注 2 h时开始聚集浸润 ,第 、 、 、 组与第 组比较 ,PMNL明显增加 (P<0 .0 1 )。而 Mφ在再灌注 4h才增加 ,与组 比较 ,Mφ的浸润数量也明显增多 (P<0 .0 1 )。RT- PCR表明 ,第 、 组与第 组比较 ,ICAM- 1 m RNA表达显著增加 (P<0 .0 1 ) ;其表达于 4h达高峰 ,1 2 h后逐渐下降 ,但仍高于正常对照组。 结论 :I/ R损伤后 ,在早期 PMNL 浸润较少 ,晚期逐渐增多 ,而且 PMNL 浸润时间较早 (2 h以后 ) ,Mφ聚集浸润较晚 (4h以后 )。ICAM- 1m RNA在正常大鼠脑组织有少量表达 ,I/ R损伤可明显诱导 ICAM- 1 m RNA表达 (P<0 .0 1 ) ,在再灌注 4h后达峰值。

NK-1R在胰腺癌中的表达、组织学定位和临床意义

目的探讨胰腺癌中P物质(SP)受体NK-1R的表达、组织学定位,并将结果结合临床资料分析,以期找出其中相关性。方法33个胰腺癌标本取自胰头癌根治术,男性19例,女性14例,正常胰腺组织取自20个器官捐献者,男性11例,女性9例。应用实时定量逆转录聚合酶链反应(RQ-RT-PCR)技术,检测正常胰腺、胰腺癌组织和7株胰腺癌细胞中NK-1R的mRNA水平,应用Western blot技术检测NK-1R的蛋白水平,应用免疫组织化学方法进行NK-1R的组织学定位。结果与正常胰腺相比,胰腺癌组织中NK-1R mRNA和蛋白都过度表达,免疫组织化学结果提示:正常胰腺的腺泡和导管中有微弱的NK-1R表达,胰腺癌组织中有较强的NK-1R表达,主要位于胰腺癌细胞、神经纤维和炎性细胞。结论胰腺癌组织中NK-1R mRNA和蛋白表达水平都明显上调,扰乱了神经激肽的作用环节,促进胰腺癌细胞的发生和发展。

检测血清sIL-2R和HBME-1 mRNA的表达在鉴别诊断甲状腺结节性质中的应用价值

目的:探讨检测血清中溶性白介素-2受体(SIL-2R)mRNA和人骨髓内皮细胞标记物-1(HBME-1)mRNA的表达在鉴别诊断甲状腺结节性质中的应用价值。方法:选取2019年6月至2021年1月期间广东省东莞市人民医院收治的136例甲状腺结节患者及同期在该医院接受体检的50例健康人作为研究对象。根据病理检查的结果,将136例甲状腺结节患者分为恶性组(50例)和良性组(86例)。将50例健康人作为对照组。使用qPT-PCR法检测三组研究对象血清中sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA的表达情况,然后使用荧光侧流免疫分析法检测136例甲状腺结节患者白细胞介素-35(IL-35)和白细胞介素-17(IL-17)的水平。比较三组研究对象血清中sIL-2R mRNA和HBME-1 mRNA的表达情况,采用Pearson法检验恶性甲状腺结节患者血清中sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA的表达与IL-17、IL-35等指标的相关性,采用logistics回归模型检测血清sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA等指标与恶性甲状腺结节患者病情严重程度的相关性。结果:恶性组患者血清中sIL-2R mRNA和HBME-1 mRNA的表达显著高于良性组患者和对照组健康人,P<0.05。良性组患者血清中sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA的表达显著高于对照组健康人,P<0.05。恶性甲状腺结节患者血清中sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA的表达与其血清中IL-17的水平、IL-35的水平、甲状腺结节病灶的个数、癌细胞发生淋巴结转移的情况和病情的分期呈正相关性。血清sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA呈高表达状态是导致恶性甲状腺结节患者病情加重的独立危险因素。结论:恶性甲状腺结节患者血清中HBME-1 mRNA和SIL-2R mRNA的表达可明显高于良性甲状腺结节患者和正常人,而且血清sIL-2R mRNA和HBME-1 mRNA呈高表达状态是导致恶性甲状腺结节患者病情加重的独立危险因素。因此,血清sIL-2R mRNA和HBME-1 mRNA可作为临床上鉴别诊断甲状腺结节性质的重要指标。

SP/NK-1R系统对溃疡性结肠炎的双重调节及中医药调控的研究进展

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种慢性炎症性肠病,近年来不少学者将其发病机制聚焦在SP/NK-1R系统,认为脑肠肽P物质(SP)与其主要受体(NK-1R)结合,通过抑制促炎基因表达和促进肠道上皮细胞的增殖与迁移而改善UC症状,阻断SP与NK-1R结合则会加剧肠道炎症而增加UC风险。对近10余年的相关文献研究发现,SP/NK-1R系统是一把双刃剑,一方面,该系统活化可加快肠道上皮细胞的增殖与迁移以保护肠屏障完整性;而另一方面,被激活的SP与NK-1R结合后,又会引起肠道病理性血管生成和肠动力紊乱等负向作用而加剧肠道炎症。探讨VC中SP与NK-1R的变化关系并结合中医药调控SP/NK-1R系统与UC发病机制之间关系的相关文献予以了综述,以期为从事药物干预UC机制的研究者提供文献依据和参考。

麻杏石甘汤对咳嗽变异性哮喘大鼠呼吸道中TRPV1、NK-1R表达的影响

目的:探究麻杏石甘汤对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠呼吸道中辣椒素受体(TRPV1)、速激肽受体(NK-1R)表达的影响。方法:大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,布地奈德组及麻杏石甘汤高、中、低剂量组,除正常对照组外,其余大鼠通过卵蛋白(OVA)致敏制备咳嗽变异性哮喘大鼠模型;灌胃给药15 d后,观察各组大鼠一般状态;采用辣椒素激发法比较各组大鼠的咳嗽次数,HE染色法观察大鼠肺、支气管病理变化,ELISA法检测大鼠肺组织中降钙素基因相关肽(CGRP)、速激肽(SP)的含量,Western blotting检测大鼠气管中TRPV1蛋白,肺组织中NK-1R的表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠咳嗽次数明显增多,肺组织中神经肽类物质CGRP、SP含量明显升高,气管中TRPV1蛋白及肺组织中NK-1R蛋白表达明显升高(P<0.01)。与模型对照组比较,麻杏石甘汤低、中、高剂量组大鼠肺及支气管组织病理变化明显减轻且咳嗽次数均明显减少(P<0.01);麻杏石甘汤中、高剂量组大鼠肺组织中CGRP、SP含量和气管中TRPV1蛋白表达明显降低(P<0.01或P<0.05);麻杏石甘汤高剂量组大鼠肺组织中NK-1R蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论:麻杏石甘汤可能是通过抑制TRPV1的表达,从而抑制感觉神经肽的释放,降低气道敏感性及改善气道炎症等途径来发挥对CVA模型大鼠的治疗作用。

TGF-β抑制T细胞NK-1R的内化而发挥促炎功能

P物质(SP)是炎症性肠炎(IBD)以及其它炎症性疾病中的促炎介质,其通过与T细胞及其它细胞表面的神经激肽-1受体(NK-1R)结合而使NK-1R激活,进而发生内化。NK-1R是G蛋白偶联受体家族(GPCR)的成员,Martin等研究者发现尽管TGF-β的受体为丝苏氨酸家族成员,TGF-β却可调节NK-1R。作者通过对C57鼠IBD模型粘膜T细胞和曼氏血吸虫感染后肝肉芽肿中的T细胞进行流式细胞仪共聚焦图像分析(flow confocal image analysis),发现经低浓度TGF-β(5ng/mL)过夜培养不会影响细胞NK-1R的表达,但可以明显抑制SP诱导的T细胞NK-1R的内化,

MC1R基因在不同毛色太行山羊皮肤组织中的表达

本研究旨在研究太行山羊MC1R基因在不同毛色皮肤组织中的表达规律。运用RT-PCR方法从纯黑色太行山羊皮肤组织中扩增了MC1R基因的编码区序列,运用生物信息学方法分析了其编码蛋白的结构特点,利用实时荧光定量PCR技术,对4种不同毛色(纯黑、纯白、黄褐、黑斑白)各4只太行山羊,共计16个个体的皮肤组织进行mRNA表达研究。结果表明:MC1R基因CDS区长954 bp,编码317个氨基酸,其编码蛋白是G蛋白偶联受体家族的成员;同源性比对和进化树结果显示,与绵羊、家牛和水牛同源性较高;荧光定量结果显示,MC1 RmRNA在纯黑色个体皮肤组织中表达量最高,黄褐色次之。本研究结果为进一步研究该基因在毛色形成中的作用以及对纯黑色太行山羊的纯繁选育奠定基础。

人参皂苷Rb1对慢性心力衰竭作用机制研究简况

人参皂苷Rb1是人参主要有效成分之一,对心脏作用广泛,可以调节心脏凋亡相关蛋白和mRNA,抑制心肌细胞凋亡,提高心肌细胞耐缺氧能力,减轻心肌细胞肥大,影响心肌细胞凋亡cTnI水平,调整蛋白激酶R样内质网激醇(PERK)通路,影响心肌细胞葡萄糖转运栽体-4,影响心肌细胞核因子-kB,通过多种途径提高心肌收缩力、抗心律失常、双向调节血管舒缩功能、维持缺氧心肌细胞存活等。未来仍需更有力、更确切的分子生物学机制证实人参皂苷Rb1对慢性心力衰竭的作用机制。

PPP1R3基因表达对直肠癌预后的判定价值的研究

目的探讨PPP1R3mRNA基因突变与直肠癌预后的关系。方法采用RT-PCR技术检测53例直肠癌癌肿组织、第一枚淋巴结和复发/转移灶中PPP1R3mRNA基因的表达。结果有62%(33/53)的直肠癌组织中出现PPP1R3mRNA基因的异常,而正常对照结肠壁组织无PPP1R3mRNA基因的异常。依据术后病理所确定的淋巴结有无转移状态,有淋巴结转移者PPP1R3mRNA基因突变率为66%(23/35),比无淋巴结转移者异常率高,差异有显著性(P<0.05);PPP1R3mRNA基因异常率与直肠癌患者的性别、年龄、癌肿的形态及部位无显著性差异(P>0.05),与癌细胞分化程度、TNM分期、癌肿的大小、浸润深度、有无局部及远处转移有显著性差异(P<0.05)。复发/转移组织中PPP1R3mRNA基因异常率更高。结论直肠癌PPP1R3mRNA基因异常与癌细胞的局部浸润和淋巴结转移的有无等生物学行为有一定相关,术前可用于判断直肠癌的局部浸润状况和淋巴结转移的有无、术后用于预测局部复发和淋巴结转移可能起到一定的判断作用,特别是对Ⅱ期者更有意义。

血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型基因AT1R在髓系白血病患者骨髓样本中的表达

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体1型基因AT1RR在髓系白血病患者样品中的altmRNA表达,为临床诊疗提供依据和参考。方法选择2017年5月~2019年6月髓系白血病患者61例作为对象,设为观察组;选择同期治疗的缺铁性贫血者52例,设为对照组。实时定量RT-PCR法检测骨髓中单个核细胞中AT1R mRNA的含量。结果观察组急性髓系白血病患者altmRNA表达水平显著高于对照组缺铁性贫血者(P<0.05)。结论血管紧张素Ⅱ受体1型基因AT1R在髓系白血病患者中呈高表达,有望成为髓系白血病治疗新的靶点。

盐酸埃他卡林对缺氧性肺动脉高压转化生长因子β1及其受体表达的影响

目的研究新型ATP敏感的钾通道开放剂(KATPCO)盐酸埃他卡林(IPT)对缺氧性肺动脉高压(HPH)肺组织转化生长因子β1(TGFβ1)及其受体表达的影响。方法SD大鼠随机分成IPT处理组1(对正常氧浓度饲养环境中的大鼠给予IPT1.5mg/kg灌胃)、IPT处理组2(对每日缺氧饲养的大鼠给予IPT1.5mg/kg灌胃)和正常对照组及HPH模型组(给予5ml/kg生理盐水灌胃)。测定各组大鼠肺组织TGFβ1及TGFβRⅠmRNA表达和肺血管平滑肌细胞TGFβ1及TGFβRⅠ阳性细胞数。结果HPH大鼠较正常大鼠肺组织TGFβ1转录水平mRNA的表达显著增加,而TGFβRⅠmRNA的表达减少。HPH大鼠肺血管平滑肌细胞TGFβ1蛋白质水平表达亦增加,而TGFβRⅠ阳性细胞数下降。IPT能显著抑制HPH组TGFβ1的表达。IPT显著上调HPH组TGFβRⅠ的表达。IPT处理组1与正常对照组大鼠比较,TGFβ1mRNA及TGFβ1阳性细胞数稍有下降;TGFβRⅠmRNA及TGFβRⅠ阳性细胞数稍有增加,但差异无显著性。结论HPH的增殖因素TGFβ增加。IPT可抑制HPH的这种增殖,可能的途径为TGFβ受体信号系统。