实验性哮喘豚鼠初级传入系统和中枢内NKB的变化(英文)

本文应用放射免疫分析方法，测定了16只哮喘豚鼠初级传入系统和中枢内神经激肽β（NKB）的水平。结果表明，与正常对照组（结状神经书3228±11．89，C7～C8段脊神经节23．63±13．26，T1～T2段脊神经节24．25±1819，T3～T5段脊神经节25．53±12．34，C7～T5段脊髓后角28．65±16．59，孤束核26．34±18．36Pg／gwettissue）相比较，哮喘豚鼠初级传入系统和中枢内（结状神经节43．26±12．35，C7～C段脊神经节32．53±17．63，T1～T2段神经书32.25±20．65，T3～T5段脊神经节34．36±15．33，C7～T5段脊髓后角39．53±2028，孤束核3662±17．85Pg／gwettissue）NKB的含量明显高于对照组（P＜0．05）。结合NKB在呼吸道的作用，这些结果提示，初级传入系统和中枢内的NKB可能参与哮喘发病的病理生理机制。

吗啡依赖性大鼠海马CA_1区NKB细胞的改变

目的 :观察吗啡依赖性大鼠海马CA1区NKB细胞的变化。方法 :用皮下注射吗啡法建立雄性大鼠吗啡依赖模型。用免疫组织化学和图像分析方法观察大鼠CA1区NKB细胞的变化。结果 :吗啡依赖性大鼠海马CA1区NKB细胞免疫反应减弱 ,与对照组相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :NKB细胞减少与吗啡依赖性的发生、发展有关。

3种去势疫苗的构建及稳定性研究

【目的】试验旨在构建不同种类的新型免疫去势DNA疫苗,分别为KISS1、神经激肽B(NKB)单表达基因疫苗和促性腺激素释放激素(GnRH)、KISS1和NKB 3个基因共表达的三表达基因疫苗,注射到动物体内后能激发免疫反应,产生相应的抗体,从而达到通过调控生殖轴来降低雄激素的目的。【方法】选取下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic pituitary gonadal axis)上的GnRH及其上游调控基因KISS1和NKB作为靶标,并引入平衡致死系统代替抗生素筛选构建重组质粒,其中三表达重组质粒借助2A肽的自剪切功能使目的基因共表达。将重组质粒转染293T细胞后提取细胞RNA,验证其能否在机体内正常表达,随后将构建成功的质粒电转到减毒猪霍乱沙门菌(Salmonella Choleraesuis)C500感受态细胞中,获得重组活菌疫苗,构建的工程菌在体外连续传代50次,选取第0、2、5、10、20、30、40、50代的菌株进行稳定性研究。【结果】重组质粒pVAX-2A/KISS1-asd、pVAX-2A/S-NKB-asd和pVAX-S/GnRH-2A/S-NKB-2A/KISS1-asd酶切分别获得大小为498、1 146和2 622 bp的条带,与目的基因一致;测序结果与目的序列比对后显示大小、方向一致,目的基因的插入方向和序列完全正确。将上述重组质粒转染293T细胞后进行RT-PCR,获得大小分别为498、1 146、1 349 bp的目的条带,表明目的基因在真核细胞内能正常转录。上述重组质粒电转到减毒猪霍乱沙门菌C500感受态细胞后,提取质粒酶切后获得大小分别为498、1 146和2 622 bp的条带,测序结果与目的序列比对后显示大小、方向一致,表明重组质粒成功导入减毒猪霍乱沙门菌C500中。每2 h检测的工程菌和减毒猪霍乱沙门菌C500对照菌D600 nm值接近,差异不显著;生长曲线检测结果显示,工程菌在体外连续传代50次的过程中,工程菌和减毒猪霍乱沙门菌对照菌C500对数生长期均在0~10 h, 10~14 h为生长平缓期,约16 h以后进入平台期,工程菌生长特性与减毒猪霍乱沙门菌C500的生长特性一致,未因携带质粒而改变。同时,各代菌液沙门菌种属标志基因invA和毒力基因crp的扩增条带大小均分别为580和599 bp,表明工程菌多次传代后仍具有沙门菌的特性,其减毒特性也无变化。各代质粒酶切片段大小均分别为498、1 146和2 622 bp,表明多次传代并不影响质粒的稳定性,且重组质粒能在沙门菌C500中维持正常拷贝功能。【结论】本研究构建的重组质粒和工程菌疫苗均具有良好的稳定性,且在导入机体后能正常表达,可用于动物免疫去势的研究。

神经激肽B

ＮＫＢ为含１０个氨基酸的多肽，广泛分布在中枢神经系统和周围神经组织内。其生物学活性主要表现在使空腔脏器平滑肌收缩、松弛血管使平均动脉压降低、使心跳缓慢、离体大鼠脊髓神经元兴奋、以及收缩瞳孔括约肌缩小瞳孔，这些活性是通过激活ＮＫ－３受体实现的。其生物合成机制尚不清楚，前体为ＰＰＴ－Ｂ。其受体含４５２个氨基酸，广泛分布于中枢神经和周围神经组织，并克隆出ＮＫＢ受体ｃＤＮＡ，表达部位亦很广泛，受体拮抗剂表现为很强的拮抗ＮＫＢ的作用。ＮＫＢｍＲＮＡ广泛分布在中枢神经系统，内肽酶和血管紧张素转换酶可使ＮＫＢ降解。

子痫前期患者血清神经激肽B含量测定及其临床意义

目的：通过检测子痫前期患者外周血及脐血中的NKB含量，探讨其在子痫前期发病中的作用。方法：对2005年3月～2006年6月在我院产科住院分娩的44例子痫前期孕妇采用酶联免疫法检测外周血和脐血中NKB含量，同期正常妊娠（无产科合并症）40例为对照组。结果：子痫前期孕妇外周血和脐血中NKB含量明显高于对照组（P〈0．05）；外周血和脐血含量无显著性差异（P〉0．05）。结论：子痫前期患者外周血及脐血中NKB含量随着病情的加重而增高，在子痫前期的发生发展中具有重要作用。

子痫前期患者血清神经激肽B含量测定及其临床意义

目的检测子痫前期患者外周血及脐血中的神经激肽B(NKB)含量,探讨其在子痫前期发病中的作用。方法对2005年3月至2006年6月在我院产科住院分娩的44例子痫前期孕妇试验组采用酶联免疫法检测外周血和脐血中NKB含量,同期正常妊娠(无产科合并症)40例为对照组。结果试验组外周血和脐血中NKB含量明显高于对照组(P<0.05),但外周血和脐血含量差异无显著性(P>0.05)。结论子痫前期患者外周血及脐血中NKB含量随着病情的加重而增高,其在子痫前期的发生发展中具有重要作用。

神经激肽B在大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴上的表达

【目的】探究初情期启动前、启动中、启动后大鼠下丘脑、垂体和卵巢中神经激肽B(Neurokinin B,NKB)的表达变化。【方法】以SD雌性大鼠为研究对象,分别取大鼠的下丘脑、垂体和卵巢组织制作冰冻切片,运用免疫荧光染色法检测SD大鼠下丘脑、垂体和卵巢上NKB的分布。【结果】NKB主要分布于各时期大鼠下丘脑的弓状核、腹内侧核、室旁核、腺垂体以及卵巢的黄体细胞、间质细胞。但NKB在不同时期表达水平不同,在初情期启动前(出生后25d)和启动后(出生后60d)表达最强,在初情期启动中最弱(P<0.05)。同一时期不同核团之间NKB表达水平也不同,初情期启动前和启动中室旁核最强,弓状核次之,腹内侧核最弱(P<0.05);在初情期启动后,弓状核和腹内侧核中NKB的表达显著高于室旁核(P<0.05)。腺垂体中NKB在初情期启动时表达最强,初情期启动前次之,初情期启动后最弱(P<0.05)。卵巢间质细胞中NKB在初情期启动中的表达显著低于初情期启动前、后(P<0.05)。卵巢黄体细胞中NKB在初情期启动后表达最强,初情期启动时最弱。【结论】NKB可能与初情期启动的调控密切相关。

急性心肌梗死和稳定型冠心病患者血清尾加压素Ⅱ和神经激肽 B 的变化

目的：观察急性心肌梗死（ AMI）和稳定型冠心病（ CAD）患者血清尾加压素Ⅱ（ urotensin－Ⅱ， U－Ⅱ）和神经激肽B（ neurokinin B， NKB）变化情况，评价这些变化与相关疾病发生机制的联系。方法本试验是前瞻性病例对照研究，入院患者随机分成三组：AMI组（ n＝64）、CAD组（n＝64）和对照组（n＝62）。检测相关生化参数、U－Ⅱ及NKB。采用K－S方法评价数据正态性分布，采用单因素方差分析比较三组间数据。结果与对照组和稳定型CAD组比较， AMI组患者血清U－Ⅱ、NKB水平显著降低（P＜0．005），且具有相关性（r＝0．720，P＝0．000）。血清U－Ⅱ、NKB与左心室射血分数（ LVEF）相关性较差，与C－反应蛋白（ CRP）没有相关性。结论 AMI组患者U－Ⅱ和NKB水平降低与动脉粥样硬化具有相关性。

Kisspeptin调控鱼类生殖内分泌的研究进展

Kisspeptin是近10年新发现的调控动物生殖内分泌的关键因子,是kiss基因所编码的多肽产物,属神经内分泌肽类激素,为G蛋白偶联受体54(GPR54)的内源性配体。Kisspeptin具多个功能性的分子结构形态,在鱼类中,主要结构形式为Kisspeptin-10肽。Kisspeptin/GPR54系统在生殖中具重要功能。该文综合现有研究资料,就Kisspeptin在鱼类生殖内分泌调控中的概况、Kisspeptin神经元在鱼脑中的分布和定位、鱼类Kisspeptin分子的多态性、Kisspeptin调控鱼生殖内分泌的功能多样性、Kisspeptin调控鱼类生殖内分泌的机制、Kisspeptin的分子进化以及Kisspeptin和其他功能分子对鱼类生殖内分泌的协同调控进行了初步阐述,同时对Kisspeptin在鱼类生殖内分泌调控中的研究进行了展望。

神经激肽B及其生殖内分泌作用

神经激肽B(neurokinkin B,NKB)是速激肽家族的一员,主要通过其受体NK3R发挥作用。NKB及NK3R在神经系统分布广泛。NKB具有使空腔脏器平滑肌收缩、松弛血管、降低平均动脉压、减慢心率、兴奋离体大鼠脊髓神经元及收缩瞳孔括约肌缩小瞳孔等生物学作用。近年来NKB在生殖内分泌中的调控作用越来越受到关注,关于其调节下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)的作用的研究也越来越深入。本文综述了NKB及其受体的分布范围、生理功能、NKB在生殖内分泌调控过程中的作用,其具体的作用机制还有待于进一步研究。

神经激肽B对哺乳动物GnRH脉冲发生器的调节

哺乳动物的生殖功能受体内状态和外部环境综合作用的影响,这种综合作用通过错综复杂的神经内分泌系统最终汇集于促性腺激素释放激素(GnRH)系统从而影响下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴的状态。神经激肽B(NKB)目前被认为是除kisspeptin外,调控GnRH脉冲分泌的又一关键因子。大量研究证实,NKB能够影响GnRH和促黄体激素(LH)的分泌,进而影响青春期的启动和生殖功能。然而,NKB对LH分泌的影响是刺激作用还是抑制作用尚存在争论。此外,NKB如何作用于GnRH神经元的信号通路尚不清楚,性激素是否参与这一生理过程,是目前的研究热点问题之一。本文就NKB及其受体的分布、神经网络结构、NKB对GnRH脉冲发生器的作用进行了系统的阐述,并针对目前尚待解决的一些问题进行了探讨。

雌二醇对大鼠下丘脑神经激肽B表达的影响

为研究雌二醇(Estradiol,E2)对大鼠下丘脑神经激肽B(Neurokinin B,NKB)表达的影响,采用免疫组化PV-9003二步法以及DAB显色技术,对外源性E2处理组(E2组)、花生油处理组(C组)、卵巢摘除+E2组(OVX+E2组)和卵巢摘除组(OVX组)大鼠下丘脑的NKB进行检测。结果表明:大鼠阴门开启时间E2组(29.00±0.707)与OVX+E2组(30.20±0.084)早于对照组(43.60±2.074)(P<0.01)。NKB主要分布于所有大鼠下丘脑的弓状核、腹内侧核和室旁核,且OVX组和C组室周核上也有少量表达(P<0.05),但各组间NKB的平均光密度值有差异,OVX组大鼠下丘脑弓状核(0.33±0.49)、腹内侧核(0.31±0.54)和室旁核(0.30±0.55)均显著高于OVX+E2、C和E2组(P<0.05)。雌激素抑制大鼠下丘脑NKB的表达,NKB可能通过雌激素调节生殖作用。