氟中毒大鼠脑组织中NMDA受体及内质网应激相关通路蛋白的表达

背景:前期研究发现N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDA)受体与氟相关,但其在氟诱导的内质网应激中的作用尚不明确。目的:观察实验性氟中毒大鼠脑组织中兴奋性神经递质NMDA受体及内质网应激IRE1α-ASK1-JNK通路蛋白表达变化,并应用NMDA受体抑制剂干预SH-SY5Y细胞,探讨氟中毒神经系统损伤的发病机制。方法:(1)动物模型:18只1月龄SD大鼠随机分为对照组(饮水含氟量<0.5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为10.0 mg/L)、高氟组(饮水含氟量为100.0 mg/L),每组6只,雌雄各半。饮水摄氟饲养6个月后,观察大鼠氟斑牙发生情况,测定24 h尿氟含量;大鼠麻醉处死后取脑组织观察组织病理变化,蛋白印迹法检测脑组织中NMDA受体及IRE1α、ASK1、JNK蛋白表达。(2)细胞模型:体外培养SH-SY5Y细胞,选择终浓度为0.3 mmol/L和3 mmol/L的氟化钠染氟处理,并用10μmol/L的NMDA受体拮抗剂Ifenprodil、MK-801对染氟细胞进行干预,观察相关蛋白改变。结果与结论:(1)高氟组大鼠氟斑牙发生率、尿氟水平显著高于对照组和低氟组(P<0.05);(2)与对照组相比,低氟组大鼠海马CA3区神经细胞胞质嗜碱性略增加,高氟组CA3区神经细胞排列紊乱,嗜碱性增加,部分细胞核固缩;(3)大鼠脑组织内,高氟组NR2A与低氟组NR2B的蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟组NR2B、IRE1、ASK1、p-JNK蛋白表达明显高于对照组和低氟组(P<0.05);(4)SH-SY5Y细胞内,高氟组NR1、NR2A、NR2B蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟+Ifenprodil组、高氟+MK-801组NR1、NR2A蛋白表达均明显低于高氟组(P<0.05),高氟+Ifenprodil组NR2B蛋白表达也明显低于高氟组(P<0.05);(5)SH-SY5Y细胞内,高氟组IRE1、ASK1、p-JNK蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟+Ifenprodil组、高氟+MK-801组ASK1、p-JNK蛋白表达均明显低于高氟组(P<0.05),高氟+Ifenprodil组IRE1蛋白水平也明显低于高氟组(P<0.05);(6)提示:过量氟摄入可激活中枢神经系统NMDA受体,引起内质网应激IRE1α、ASK1、p-JNK蛋白表达增加,使用NMDA受体抑制剂对氟中毒所致内质网应激具有一定缓解作用。

小儿抗NMDA受体脑炎的临床护理干预效果分析

此次对小儿抗NMDA受体脑炎的临床护理方面进行深度探究。方法 根据调研内容为依据,从科室进行病例的选入,参与调研对象各指标达标者为80例,均在入院后临床诊断确定病症,对此次患儿实施分组后展开护理工作(随机法),对照组40例主要给予优质护理服务,观察组在此基础上,评估患儿精神症状,增加心理护理干预,该组例数与对照组同步,在干预后对此次护理满意度方面进行综合评估,对出现并发症的患儿实施记录与组间对比,查看此次各小组患儿住院所用时间。结果 以指定的问卷表形式对患儿和家属开展满意度调查,回收份数100%,对比各小组满意度,其中观察组满意度更为突出;两组均有部分患儿在治疗期间发生并发症,经统计对照组出现例数居多;对比住院天数,对照组时间延长(P<0.05)。结论 此次主要针对NMDA受体脑炎患儿实施临床护理服务,经过研究表明优质护理服务配合心理护理能够帮助患儿更有效地改善症状,提升患儿和家属满意度。

2例儿童抗NMDA受体脑炎脑电图与临床特征关系及文献复习

探讨抗NMDA受体脑炎 (抗N-甲基-D天冬氨酸受体脑炎)特征性脑电图与临床表现关系。方法 回顾性分析2021年赤峰学院附属医院儿科治疗的2例儿童抗NMDA受体脑炎在不同的临床阶段期间的脑电图特征及文献复习。结果 抗NMDA受体脑炎临床表现程度及相应的脑电图波形变化不尽相同。结论 抗NMDA受体脑炎患儿在临床恢复和脑电图的正常转归时间是可以不一致的,但预后可以相同的。

NMDA受体和非NMDA受体在脊神经节损伤介导痛觉过敏中的作用

目的研究脊髓背角NMDA受体或/和non-NMDA受体在背根神经节(DRG)炎性损伤所介导的伤侧肢体痛觉过敏中的作用。方法健康家兔42只。实验分为:Ⅰ组(AP-5);Ⅱ组(CNQX);Ⅲ(0.9%生理盐水)。测定用药前后动物神经行为和脊髓背角Glu和Asp含量变化。结果NMDA受体拮抗剂AP-5蛛网膜下腔注射后,机械性刺激缩腿反应强度阈值(MT)值显著高于用药前(P<0.05)。非NM-DA受体拮抗剂CNQX推注后热辐射刺激缩腿反应潜伏期(TL)值显著增高(P<0.05)。脊髓背侧部分氨基酸的浓度有一定变化,如AP-5注射后,脊髓背侧Asp含量(4.48±0.47);CNQX注射后为(4.98±0.41),均明显高于术前水平(2.38±0.13)(P<0.05)。结论DRG炎性损伤后NMDA受体和non-NM-DA受体的激活,在伤侧肢体痛觉过敏的形成和维持中具有重要作用。

基于NMDA-NO通路探讨亚麻醉剂量氯胺酮对术后认知功能障碍大鼠的影响及作用机制

目的探讨亚麻醉剂量氯胺酮调控N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)-一氧化氮(NO)通路对术后认知功能障碍大鼠的影响及作用机制。方法选取30只健壮的SD大鼠,将其随机分为空白组、手术组、手术+麻醉组,每组10只。手术+麻醉组采用结扎双侧颈总动脉致其重度狭窄的方法建立模型并腹腔注射腔注射盐酸氯胺酮麻醉,手术组只分离双侧颈总动脉不结扎,空白组不做处理。对大鼠行水迷宫实验;测定各组组织一氧化氮合酶(NOS)活力、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、中枢特异性蛋白(S-100β)蛋白水平,NMDA受体(NMDAR)2B蛋白阳性表达,NMDA受体蛋白表达。结果手术组潜伏时间在术后第1、3天显著增加,象限百分比在术后第1、3天明显下降(P<0.05);与空白组和手术+麻醉组比较,手术组NOS活力、TNF-α、IL-6、S-100β蛋白水平、NMDAR2B蛋白阳性表达率和判定评分、受体蛋白表达水平均显著较高(P<0.05)。结论亚麻醉剂量氯胺酮可以调控NMDA-NO通路阻滞大鼠发生术后认知功能障碍。

急性症状性发作对抗NMDA受体脑炎患者预后的影响

目的探讨急性症状性发作(ASS)是否为抗N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体脑炎功能预后不良的危险因素。方法选择2013年2月至2020年8月在首都医科大学附属北京天坛医院神经内科就诊的68例抗NMDA受体脑炎患者进行研究。根据改良Rankin量表(mRS)将患者预后分为两组:预后良好组(mRS≤2)和预后不良组(mRS>2)。采用单因素和多因素Logistic回归分析评估ASS与抗NMDA受体脑炎功能预后的相关性。结果与预后良好组相比,预后不良组ASS(P=0.033)、精神行为异常(P=0.007)、脑脊液寡克隆区带阳性(P=0.032)比例均较高,男性(P=0.045)比例较低,年龄(P=0.010)较大,发病至首次免疫治疗时间(P=0.009)较长。多因素Logistic回归分析显示:经校正年龄、性别、发病至首次免疫治疗时间、精神行为异常、脑脊液寡克隆区带阳性后,ASS比例增加是抗NMDA受体脑炎患者预后不良的独立危险因素(OR=18.023,95%CI:1.594~203.771,P=0.019)。结论ASS是抗NMDA受体脑炎的主要表现,对免疫治疗疗效明确,也是脑炎功能预后不良的独立危险因素,临床工作中应注意该症状的早期诊断和治疗,对提高患者的预后有重要意义。

洛伐他汀调节NMDA受体功能减缓NMDA兴奋性毒性损害

目的:检测洛伐他汀(lovastatin,LOV)对N⁃甲基⁃D⁃天门冬氨酸(N⁃methyl⁃D⁃aspartate,NMDA)诱导的兴奋性毒性的神经保护作用并探讨LOV调节NMDA受体功能在神经保护中的潜在机制。方法:培养的大鼠原代神经元细胞分未处理组、LOV组、NMDA组、LOV+NMDA组、谷氨酸(glutamate,Glu)组及Glu+APV(一种特异性NMDA受体拮抗剂)组。免疫荧光染色检测神经元形态,TUNEL分析检测神经元凋亡,免疫印迹测定蛋白水平,生物素化法检测细胞表面受体。结果:①与NMDA组或Glu组少数幸存微管相关蛋白(microtubule⁃associated protein 2,MAP⁃2)阳性神经元相比,LOV+NMDA组和Glu+APV组MAP⁃2阳性神经元的数量明显增多,神经元树突的数目和长度均明显增加(P<0.001);②与NMDA组或Glu组TUNEL阳性细胞显著增多相比,LOV+NMDA组或Glu+APV组TUNEL阳性细胞显著减少(P<0.001);③与未处理组相比,NMDA组NMDA受体蛋白(N⁃methyl⁃D⁃aspartate receptor,NR2B)表达显著减少(P<0.001),而LOV预处理后增加NR2B蛋白表达(P<0.05);④生物素化法检测细胞表面受体显示,NMDA处理导致细胞表面大部分NR2B丢失(P<0.001),LOV预处理能显著减少NMDA诱导的细胞表面NR2B丢失(P<0.05)。进一步研究显示,NMDA处理后,NR2B在酪氨酸(tyrosine,Tyr)1472位点的磷酸化下降(P<0.05),LOV预处理显著恢复Tyr1472位点的磷酸化(P<0.05)。结论:LOV能减轻NMDA诱导的兴奋性毒性损害,这一作用可能与其影响NMDA受体亚单位NR2B的细胞内吞和/或胞内降解,进而调节NR2B表面分布有关。

p150glued缺失小鼠的脊髓运动神经元中NMDA受体增多

目的 探讨运动神经元病致病基因Dctn1编码蛋白p150glued对小鼠脊髓运动神经元中N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的影响。方法 利用蛋白印迹法检测p150glued缺失(cKO)小鼠及对照(Ctrl)小鼠脊髓中NMDA受体亚基NR1和NR2B的含量。利用免疫荧光染色法观察Ctrl和cKO小鼠脊髓运动神经元中NRI分布的变化。结果 与Ctrl小鼠相比,6月龄cKO小鼠脊髓组织中NR1和NR2B的蛋白水平明显增加,cKO小鼠脊髓运动神经元中NR1阳性斑点数也明显增多、增大。结论 神经元中p150glued缺失可以引起6月龄小鼠脊髓运动神经元中NMDA受体亚基NR1和NR2B增多。

针刺调节NMDA受体干预中枢神经系统疾病的研究进展

N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)是中枢神经系统兴奋性氨基酸——谷氨酸的离子型受体中的一种重要亚型,NMDA受体活性调节的失衡可能是血管性痴呆、阿尔兹海默症及缺血性脑卒中等许多中枢神经系统疾病发病的基础。该文重点就针刺调节NMDA受体与神经退行性疾病的关系进行综述,以期为临床针灸医师提供治疗依据。

儿童抗NMDA受体脑炎误诊1例

N-甲基-M-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体脑炎是一种自身免疫性脑炎,由Dalmau等于2007年首次报道并命名,近年来在儿童和青少年中的发生率逐年增加。患者常因严重的精神症状、行为异常、癫痫发作、记忆缺失等,最早被送往精神卫生中心诊治。现回顾1例以精神行为障碍为首发症状就诊于本精神卫生中心的病例,后经复旦大学附属儿童医院确诊。

安全集束化策略在抗NMDAR脑炎患者中的实践

目的结合循证护理依据,总结8例抗N-甲基-D天冬氨酸受体脑炎(以下简称“抗NMDAR脑炎”)患者的安全集束化策略,为临床护理提供指导。方法对8例抗NMDAR脑炎患者病程中各阶段存在的护理要点,予以实施安全集束化策略。结果8例患者均好转出院,住院8~79 d,平均(30.25±19.85)d。结论依据循证护理结合患者疾病的特殊性,早期应用安全集束化策略,是改善抗NMDAR脑炎患者预后的重要环节。

氯胺酮、丙泊酚和羟丁酸钠遗忘作用与NMDA受体的关系

目的观察氯胺酮、丙泊酚和羟丁酸钠的遗忘作用与NMDA受体的关系。方法小鼠分别腹腔注射(intraperito-neal injection,ip)氯胺酮(20 mg.kg-1)、丙泊酚(10 mg.kg-1)或羟丁酸钠(100 mg.kg-1)建立遗忘模型,在跳台实验和避暗实验中分别观察NMDA侧脑室注射(intracerebrov-entricular injection,icv)对遗忘小鼠错误次数(error times,ETs)、跳台潜伏期(step down latency,SDL)、步入潜伏期(step through latency,STL)的影响。结果侧脑室注射NM-DA可减少氯胺酮所致遗忘小鼠的ETs,延长SDL和STL;对丙泊酚或羟丁酸钠所致遗忘小鼠的ETs、SDL和STL无影响。结论 NMDA受体可能是氯胺酮所致遗忘作用的重要靶位,不是丙泊酚或羟丁酸钠所致遗忘作用的靶位。

抗NMDA受体脑炎儿童与成人临床特征和预后的对比分析

目的通过探究儿童与成人抗N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体脑炎的临床特点和预后的差异性,为儿童与成人抗NMDA受体脑炎患者的诊断和治疗提供指导依据。方法回顾性分析2017年1月至2019年1月广东三九脑科医院住院治疗后确诊的46例抗NMDA受体抗体阳性脑炎患者的临床资料,按年龄分为儿童组和成人组,年龄<14岁纳入儿童组,年龄≥14岁纳入成人组,其中儿童组有11例,年龄(7.6±3.7)岁;成人组有35例患者,年龄(27.4±13.0)岁。对比分析儿童组和成人组首发症状、主要临床症状、辅助检查及预后的差异。统计学方法采用χ^(2)检验。结果首发症状:儿童和成人两组首发症状均以精神症状为主,儿童组尤为显著,儿童组9例(81.8%),成人组18例(51.4%)。主要临床症状:儿童中枢性低通气的发生明显少于成人组[9.1%(1/11)比25.7%(9/35)],儿童较成人患者更容易出现锥体外系症状[36.4%(4/11)比11.4%(4/35)],差异均有统计学意义(χ^(2)=3.36、3.62,均P<0.05)。辅助检查:所有患者的脑脊液都存在异常;成人腹部B超或CT阳性率高于儿童[14.3%(5/35)比0],差异有统计学意义(χ^(2)=2.16,P<0.05)。结论抗NMDA受体脑炎临床症状多样,但儿童和成人都多以精神症状为首发症状,且儿童尤为显著。与成人相比,儿童较少发生中枢性低通气症状,但更易出现锥体外系症状。本研究提示儿童抗NMDA受体脑炎与成人的存在差异,对于临床医师在临床儿童脑炎的诊治时,需要敏锐和审慎鉴别,加强该病认识,以达到尽早诊断治疗,改善预后。

恩氟烷、异氟烷的遗忘作用与NMDA受体的关系

目的观察恩氟烷、异氟烷的遗忘作用与NMDA受体的关系。方法小鼠分别腹腔注射恩氟烷(0.4ml.kg-1)或异氟烷(0.3ml.kg-1)建立遗忘模型,在跳台实验和避暗实验中分别观察不同剂量NMDA(25、50、75ng)侧脑室注射(intracerebroventricular injection,icv)对遗忘小鼠错误次数(error times,ETs)、跳台潜伏期(step down latency,SDL)、步入潜伏期(step through latency,STL)的影响。结果侧脑室注射NMDA(50、75ng)可减少恩氟烷、异氟烷所致遗忘小鼠的ETs,延长SDL和STL。结论侧脑室注射NMDA可部分改善恩氟烷、异氟烷的遗忘作用,NMDA受体是二者所致遗忘作用的重要靶位。

突触内与突触外NMDA受体在β-淀粉样蛋白减少海马神经元突触后密度蛋白-95表达中的作用

目的研究可溶性Aβ寡聚体在海马神经元中对突触蛋白表达的影响。方法用免疫细胞化学方法检测在NMDA拮抗剂与激动剂作用下,Aβ25～35对突触后密度蛋白(PSD-95)表达的影响。结果Aβ25～35引起的PSD-95减少具有时间、剂量依赖性。PSD-95的减少可被非特异性NMDA受体拮抗剂(MK801)缓解;突触外NMDA受体被阻断时,也可显著缓解;而在突触内NMDA受体被阻断时,无显著性改变。结论Aβ引起的PSD-95减少依赖NMDA受体活性,突触外NMDA受体可能参与Aβ诱导突触蛋白降解。

D-Ser—NMDA受体的新调控因子

最近研究证实哺乳动物神经系统中存在内源性的D Ser。这种内源性D Ser在神经系统中的分布与NMDA受体的分布相平行。进一步的研究表明 ,D Ser由突触旁星形胶质细胞产生 ,而作用于突触后NMDA受体上的Gly结合位点 ,对NMDA受体的功能进行调控。本文将综述D Ser在神经系统中的分布、合成及其生理机能。

谷氨酸毒性损伤致PC12细胞NMDAR与CB表达的变化

目的 探讨谷氨酸毒性损伤后PC12细胞NMDAR与CB表达的变化及意义。方法 建立谷氨酸毒性损伤模型后 ,应用免疫组化及流式细胞仪的方法 ,定位、定量观测PC12细胞NMDAR与CB表达的变化。结果 NMDAR表达于胞膜上 ,谷氨酸致其表达增强 ;CB表达于胞浆中 ,谷氨酸致其表达减弱 ,在 4h时相较 1h略有恢复。

抗NMDA受体脑炎患者1例报道及文献学习

目的探讨抗N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体脑炎的临床特点、诊断及治疗,提高对该疾病的认识。方法报道1例抗NMDA受体脑炎患者的临床表现及诊治过程,并总结其临床特征。结果患者为青年女性,表现为精神行为异常及抽搐,意识障碍及通气不足。脑脊液中抗NMDA受体抗体阳性。联合静脉用免疫球蛋白、激素冲击及血浆置换等治疗,患者临床痊愈。结论抗NMDA受体脑炎是一种自身免疫性的、能用血清学方法诊断的疾病。早期明确诊断和给予及时治疗,预后良好。

男性抗NMDA受体脑炎1例并文献复习

抗N-甲基-D-天冬氨酸受体（N．methyl．D-asparatereceptor，NMDAR）脑炎是一种自身免疫性脑炎，自2007年被Dal—mau等一在一组表现为记忆力下降、精神症状、意识障碍及中心性通气障碍的患者体内发现抗NMDAR抗体以来倍受国内外学者关注。截止到目前为止，国内经临床确诊的抗NMDAR脑炎患者并不多。英国一项多中心前瞻陛脑炎病因的研究显示∞0，抗NMDA受体脑炎约占全部脑炎的4％，发病率仅次于急性播散性脑脊髓膜炎，而且该病主要发生在伴有卵巢畸胎瘤的年轻女性患者之中，男性及儿童较为少见。现将我院收治的1例抗NMDAR脑炎的男性患者病例报告如下，并结合文献进行进一步的分析讨论。

急性阿片耐受大鼠脊髓NMDA受体NR2A及NR2B亚基表达的改变

目的：了解大鼠短期多次应用芬太尼能否发生急性阿片耐受以及急性阿片耐受大鼠脊髓NMDA受体NR2A和NR2B亚基表达的改变。方法：24只体重为200-220g的雄性SD大鼠随机分为3组（n=8）：对照组（C）,生理盐水组（S）及芬太尼组（F）。F组大鼠给予皮下注射芬太尼30μg/kg,共4次,每两次注射之间间隔15min,S组大鼠以生理盐水代替芬太尼,C组大鼠未给药。给药前及给药结束后每30min以Von-Frey仪测定各组大鼠的机械刺激缩足阈值（paw withdrawal threshold,PWT）。当F组大鼠的PWT恢复到给药前基础水平时,各组大鼠均给予腹腔注射吗啡5mg/kg。随后仍每30min测定各组大鼠的PWT,直至F组大鼠的PWT再次回到基础水平。对各组大鼠不同时间点的PWT进行组内和组间比较。另24只体重为2000-220g的雄性SD大鼠分组及给药方法同前（分为C^＊、S^＊及F^＊组）,当F＊组大鼠的PWT首次恢复到基础值时,不给予吗啡,处死各组大鼠,取脊髓,以Western blotting方法测定NMDA受体NR2A及NR2B亚基的蛋白表达水平。结果：连续4次皮下注射芬太尼（F组）后大鼠首先表现为PWT较基础值显著升高,随后PWT降低到基础值以下,然后逐渐恢复至基础值水平,此时皮下注射吗啡后,吗啡的镇痛效果显著低于其他两组大鼠（S组,C组）。F^＊组大鼠脊髓的NR2B亚基表达水平显著高于C^＊组及S^＊组,各组大鼠脊髓的NR2A亚基表达水平的差异无统计学意义。结论：短期应用芬太尼可导致大鼠发生急性阿片耐受。急性阿片耐受大鼠的脊髓NMDA受体NR2B亚基表达水平显著升高,NR2A亚基表达水平无明显变化。