NR4A3/NOR1对涎腺腺泡细胞癌诊断价值的Meta分析

目的:分析和评价NR4A3/NOR1对涎腺腺泡细胞癌(AciCC)的诊断价值。方法:对PubMed和Cochrane图书馆、EMbase数据库、中国知网、维普中文科技期刊数据库(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)及万方数据库进行了全面的文献检索(检索时间为建库至2024年2月1日),选择符合条件的纳入研究。纳入文献的质量评估由两名评审员使用Review Manager 5.3(Cochrane协作组)独立进行。采用Stata/SE15.1和Meta-Disc1.4软件进行Meta分析。计算合并敏感度、合并特异度、合并阳性似然比、合并阴性似然比和合并诊断比值比(DOR);绘制受试者操作特征汇总曲线(SROC),并计算曲线下面积(AUC)。此外,还进行了Meta回归分析,以确定异质性的来源。采用Deeks漏斗图检验评估发表偏倚。采用双变量混合效应模型对纳入的文献进行敏感性分析。通过似然比矩阵图及验前概率、验后概率评价其临床适用性。结果:共纳入AciCC患者488例,对照1220例。Meta分析结果显示,NR4A3/NOR1诊断AciCC的合并敏感度、特异度和DOR分别为0.95(95%CI 0.92~0.97),0.99(95%CI 0.98~1.00)和7.90(95%CI 6.65~9.15),SROC的AUC为0.99。在敏感度(I 2=42.26%)方面观测到轻微的异质性,亚组分析和Meta回归显示异质性与标本来源、病例数的多少有关。Fagan验前概率为29%,+LR=134,阳性验后概率为98%,-LR=0.05,阴性验后概率为2%。结论:NR4A3/NOR1是诊断AciCC的潜在生物标志物,具有高敏感度和特异度,但应用中还需要参考其他临床指标。

鼻咽癌下调新基因 NOR1相互作用蛋白的筛选和鉴定

NOR1基因是新的鼻咽癌相关基因,该基因在鼻咽癌细胞系HNE1和鼻咽癌组织中表达下调.在鼻咽癌细胞HNE1中恢复NOR1基因表达抑制了鼻咽癌细胞的生长和增殖能力.为了探讨NOR1基因的生物学功能,以NOR1基因为诱饵运用酵母双杂交技术在人胎脑文库中筛选其交互作用蛋白,挑选阳性克隆,进行DNA序列分析和同源检索,阳性克隆编码7个不同的蛋白质,其中一个阳性克隆编码线粒体ATP合成酶亚基OSCP蛋白.瞬时转染pCMV-myc-NOR1质粒进入鼻咽癌5-8F细胞,通过密度梯度离心法分离线粒体蛋白,Western blot检测表明myc-NOR1蛋白分布于线粒体与胞浆.免疫荧光检测表明在鼻咽正常上皮细胞NP69中内源性NOR1蛋白与线粒体存在明显共定位.随后采用特异性酵母双杂交、免疫荧光共定位、免疫共沉淀技术证实了NOR1与OSCP在线粒体内存在交互作用.提示,NOR1是一个新的线粒体蛋白,可能通过结合OSCP蛋白调控细胞能量代谢,为深入探讨其功能提供了重要线索.

稳定干扰NOR1基因对HeLa细胞的影响

目的:研究稳定干扰NOR1基因对宫颈癌HeLa细胞系的影响。方法:采用pSUPER.neo+GFP载体构建靶向NOR1基因的shRNA干扰载体pSUPER-shNOR1-1,pSUPER-shNOR1-2以及无关序列对照载体pSUPER-scramble,通过脂质体转染HeLa细胞,经G418筛选获得稳定干扰细胞系。采用RT-PCR和Western印迹检测NOR1 mRNA和蛋白表达水平。采用MTT法测定细胞生长曲线。采用H2O2处理HeLa细胞,采用Hoechst 33258染色和TUNEL法测定细胞凋亡。Western印迹检测干扰NOR1对HeLa细胞凋亡相关分子Bcl-2,caspase和聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)表达的影响。结果:稳定感染的shRNA干扰载体pSUPER-shNOR1-1和pSUPER-shNOR1-2抑制了HeLa细胞内源性NOR1的基因表达,成功构建了稳定干扰NOR1基因的HeLa细胞系。MTT生长曲线测定表明:与pSUPER-scramble质粒转染细胞相比,稳定转染pSUPER-shNOR1-1和pSUPER-shNOR1-2质粒促进了HeLa细胞的活力和增殖,并抑制了H2O2诱导的HeLa细胞凋亡。Western印迹检测发现稳定干扰NOR1抑制了H2O2诱导的HeLa细胞caspase 9和PARP的活化,上调了Bcl-2蛋白的表达。结论:稳定干扰NOR1基因促进了HeLa细胞的活力与生长,并抑制了H2O2诱导的细胞凋亡,其机制与干扰NOR1表达引起抗凋亡分子Bcl-2表达增加和抑制caspase 9活化有关。

抗癌蛋白NOR1基因工程重组蛋白表达条件的优化和纯化

目的:构建NOR1基因原核表达载体,并在大肠杆菌中原核表达NOR1重组蛋白,对其诱导条件进行优化,并纯化NOR1蛋白。方法:PCR扩增人NOR1基因全长开放阅读框,克隆入原核表达载体pET28b。重组质粒转化大肠杆菌,采用不同温度、不同抗生素浓度、不同IPTG浓度诱导NOR1蛋白表达。选择最佳条件大量诱导NOR1蛋白表达,采用Ni-IDE树脂纯化NOR1重组蛋白,并通过SDS-PAGE凝胶电泳检测重组蛋白的纯度。结果:成功构建了pET28b-NOR1基因原核表达载体,并转化E.coli Rosettablue(DE3)。利用IPTG诱导His-NOR1蛋白表达,结果发现IPTG浓度、温度、抗生素浓度均可影响NOR1重组蛋白的表达效率。0.25mmol/L IPTG即可诱导NOR1融合蛋白的表达,分子质量为43 kD;随着IPTG浓度提高,重组蛋白表达量增加。温度对NOR1蛋白原核表达有重要影响,低温条件(30℃)无法诱导NOR1蛋白表达。提高卡那霉素筛选浓度可以提高NOR1蛋白表达量。原核表达的NOR1重组蛋白绝大部分形成包涵体,采用6 mol/L盐酸胍溶解包涵体,通过Ni-IDE树脂纯化得到高纯度的His-NOR1重组蛋白。结论:构建了pET28b-NOR1原核表达载体。研究发现在37℃条件下,采用1 mmol/L IPTG,200μg/mL卡那霉素可以高效诱导NOR1蛋白表达。纯化得到高纯度的NOR1重组蛋白。

DNA甲基化对NOR1基因启动子活性和基因表达的影响

目的:研究DNA甲基化对NOR1基因启动子活性和表达的影响。方法:采用SssI甲基转移酶处理NOR1基因启动子报告载体,经重亚硫酸钠修饰后测序检测报告载体甲基化水平。未经SssI处理和经SssI处理的NOR1基因启动子报告载体分别转染细胞,检测荧光素酶活性或GFP表达。采用去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷处理白血病细胞系HL60细胞,抽提RNA,Real-time RT-PCR检测NOR1 mRNA表达水平。结果:重亚硫酸钠测序表明SssI甲基转移酶体外处理导致NOR1启动子CpG岛CG位点完全甲基化。体外甲基化的NOR1启动子活性完全丧失。去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷连续处理3 d后,白血病细胞系HL60细胞中内源性NOR1 mRNA表达水平显著增加。结论:SssI甲基转移酶可用于体外甲基化修饰NOR1基因启动子报告载体。甲基化修饰导致NOR1启动子活性丧失。去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷处理恢复NOR1 mRNA表达。

稳定转染NOR1抑制5-8F细胞片状伪足形成和Wnt信号通路

细胞骨架是真核细胞中的蛋白纤维网络结构,不仅与保持细胞形态结构有关,而且影响细胞黏附和细胞运动.NOR1是从鼻咽癌中克隆得到的新基因,在鼻咽癌组织和细胞系中表达下调.本研究建立了NOR1稳定表达的鼻咽癌5-8F细胞系.过表达NOR1引起高转移性鼻咽癌5-8F细胞形态改变,抑制片状伪足形成、细胞表面积缩小、细胞聚集性增强.扫描电镜检测发现,NOR1抑制了5-8F细胞膜微绒毛的数量,引起细胞膜表面改变.细胞骨架染色发现,NOR1过表达导致5-8F细胞actin骨架连续性破坏,应力纤维增加.Realtime RT-PCR检测发现,NOR1引起5-8F细胞Wnt/β-catenin信号通路分子Wnt5A受体FZD5、FZD7表达下调,抑制了β-catenin蛋白入核.提示NOR1抑制Wnt/β-catenin信号通路激活,破坏细胞骨架连续性,抑制细胞膜微绒毛与伪足形成.

敲除NOR1基因对人肝癌裸鼠移植瘤的影响及作用机制

目的 探究敲除NOR1基因后对人肝癌裸鼠移植瘤生长、存活率及器官损伤的影响。 方法 SPF级雄性BALB/C裸鼠30 只随机分为Control组(n=10)、Scramble组(n=10)、siNOR1组(n=10),构建阴性对照质粒 (Scramble)和 siNOR1质粒转染至HepG2细胞并接种至裸鼠构建移植瘤裸鼠模型。连续30 d每5 d检测裸鼠移植瘤组织体积;检测移植瘤重量;免疫组化检测Ki-67、Caspase-3、Notch、NOR1表达情况;Western Blot检测Survivin、Notch1、NICD、Hes1、Hey1蛋白表达量情况,HE染色观察肝、肾、肺、脑病理损伤程度。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验;生存分析采用Kaplan-Meier法,生存率的比较采用log-rank检验法。结果 从建模第20天开始,与Control组相比,siNOR1组第20、25、30 天移植瘤体积显著减小[(418.71±78.24)mm3 vs (149.6.16±60.05)mm3、(864.22±125.66)mm3 vs (239.83±100.51)mm3、(1468.45±199.78) mm3 vs (446.54±147.09) mm3,P值均<0.05];第30天时取出移植瘤,与Control组相比,siNOR1组移植瘤质量显著减小[(0.45±0.07)g vs (0.12±0.04)g,P<0.05];与Control组相比,siNOR1组移植瘤组织中Ki-67、Notch、NOR1阳性表达率显著降低[Ki-67:(48.98±9.75)% vs (11.51±5.09)%, Notch: (62.51±9.26)% vs (18.75±4.61)%,NOR1:(76.33±8.31)% vs (16.57±3.76)%, P值均<0.05],Caspase-3阳性表达率显著升高[(6.39±4.67)% vs (38.03±9.28)%, P<0.05];siNOR1组模型裸鼠30 d内生存率显著高于Control组[(77.66±6.75)% vs (25.32±4.63)%,χ^2=6.897,P<0.05];Western Blot检测结果显示,与Control组相比,siNOR1组Survivin、Notch1、NICD、Hes1、Hey1蛋白表达水平均显著降低(Survivin: 0.34±0.06 vs 0.02±0.01;Notch1:0.16±0.03 vs 0.03±0.01;NICD:0.26±0.05 vs 0.04±0.02;Hes1:0.35±0.04 vs 0.06±0.02;Hey: 0.29±0.06 vs 0.05±0.02,P值均<0.05),且siNOR1组裸鼠各组织器官损伤情况均得到有效缓解。结论 敲除NOR1基因抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,提高模型裸鼠生存率,并缓解模型裸鼠肝、肾、肺、脑损伤,其机制可能与抑制Notch信号通路活性有关。

鼻咽癌抑瘤基因NOR1第2外显子选择性剪切异构体在组织和细胞中的分布规律(英文)

目的:研究NOR1基因全长及第2外显子选择性剪切异构体在人细胞系和组织中的分布规律以及NOR1蛋白全长及剪切异构体的亚细胞定位模式。方法:以人胎脑cDNA文库质粒为模板,PCR扩增NOR1基因开放阅读框(open reading frame,ORF),酶切后连接pCMV/myc载体。以pCMV/myc-NOR1(isoform 1)质粒为标准品,采用Real-time RT-PCR方法检测NOR1 mRNA在人胚胎组织和成人睾丸组织中的表达。用RT-PCR方法扩增NOR1基因第2外显子两侧序列片段,测序分析NOR1 isoform 1和isoform 2 mRNA在细胞和组织中的分布;PCR方法扩增细胞系NOR1第2外显子基因组序列,测序检测第2外显子gDNA序列。将pCMV/myc-NOR1(isoform 1)和pCMV/myc-NOR1(isoform 2)质粒转染细胞,采用免疫荧光方法观察两种异构体在细胞内定位模式。结果:从人胎脑cDNA文库克隆得到NOR1基因全长ORF(isoform 1)和遗漏第2外显子的剪切异构体(isoform 2)。Real-time RT-PCR检测发现成人睾丸组织NOR1 mRNA表达水平最高,胚胎鼻咽、气管、脑、肾组织有中等水平表达,其他组织表达较低。RT-PCR结合测序检测发现表明睾丸、鼻咽、气管、肾等16种组织仅表达isoform 2;而脑组织同时检测到NOR1 isoform 1和isoform 2 mRNA,以isoform 2为主。NP69,HNE1等细胞系仅表达遗漏第2外显子的isoform 2,所有检测的细胞系基因组DNA无第2外显子缺失。免疫荧光检测发现NOR1 isoform 1和isoform 2编码蛋白在细胞内定位模式相似。结论:克隆得到NOR1基因全长和遗漏第2外显子的剪切本。Isoform 2是NOR1基因在组织和细胞系中的主要表达形式,NOR1 iso-form 1仅表达于脑组织。第2外显子对NOR1蛋白的细胞内定位模式没有影响。

NOR1基因对HepG2细胞E-选择素的影响

目的:探讨NOR1基因对HepG2细胞E-选择素的影响。方法:将NOR1基因通过脂质体转染HepG2细胞后,抽提细胞总RNA,采用RT-PCR法检测HepG2细胞中NOR1基因和E-选择素mRNA的表达水平;ELISA法检测细胞培养上清液中E-选择素的蛋白表达水平。结果:RT-PCR结果显示,转染NOR1基因组E-选择素mRNA的表达水平明显高于空白组和对照组的E-选择素mRNA的表达水平(P<0.01)。ELISA结果显示,转染NOR1基因组E-选择素蛋白水平明显高于空白组和对照组(P<0.01)。结论:NOR1基因可诱导HepG2细胞中E-选择素表达水平的增高。

NOR1 基因转染对肝癌细胞 HepG2 基因表达谱的影响

NOR1基因是一在正常组织中广泛表达且在肿瘤组织中表达下调的新基因.为进一步研究NOR1基因的功能和寻找其下游基因,利用脂质体技术将NOR1基因转染进HepG2细胞,采用cDNA微阵列技术分析其基因表达谱的改变.试验表明NOR1基因的转染能使Grb2,HBP17,TNFRSF11B等59个基因上调,同时也下调Bik,MAP2K6,ZFP95等103个基因.随后用实时荧光定量PCR对cDNA微阵列结果中上述3个上调表达基因进行验证,结果表明,基因表达差异具有统计学意义(P<0.05),荧光定量PCR结果与微阵列结果相符.这些结果提示,NOR1基因对肝癌HepG2细胞的生物学行为的影响可能与它对细胞信号转导,细胞周期调控,转录、翻译调控相关基因的表达影响有关.

新基因NOR1对肝癌细胞系HepG2蛋白质表达谱的影响

目的:研究NOR1基因对肝癌细胞系HepG2蛋白质表达谱的影响。方法:将pcDNA3.1(+)/NOR1的表达质粒经脂质体导入HepG2细胞,Northern blot筛选出阳性克隆,通过双向电泳分离过表达NOR1的HepG2细胞内蛋白质,筛选出差异表达的蛋白质点,并进行质谱分析鉴定。结果:鉴定出6种表达上调的蛋白质点,包括锌指蛋白、肿瘤坏死因子受体、酪氨酸蛋白磷酸化受体等,这些蛋白质涉及基因转录、信号转导等肿瘤发生相关事件。结论:NOR1基因可能通过上调这些蛋白参与多种途径影响肝癌的发生发展。

氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(H-UVEC)孤儿核受体NOR1表达的影响

目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)孤儿核受体NOR1表达的影响。方法:采用ox-LDL建立人脐静脉内皮细胞损伤模型,将细胞分为空白组、ox-LDL高、中、低剂量组(25μg/ml、50μml、100μg/ml、200μg/ml),采用CCK8法检测HUVEC活性,采用实时荧光定量PCR分析NOR1转录水平变化,采用Western-Blot分析NOR1蛋白表达的变化。结果:在HUVEC中加入不同浓度ox-LDL共同培养12h后,CCK8值与ox-LDL呈现明显的剂量反应关系,与空白对照组相比具有显著性差异(P<0.01)。Ox-LDL能够诱导NOR1 mRNA转录和蛋白表达,NOR1 mRNA峰值出现在ox-LDL共同培养后的3h,NOR1蛋白质最大值出现在ox-LDL共同培养后的6 h。结论:ox-LDL能够损伤HUVEC,并能诱导NOR1的表达上调,其在内皮细胞损伤和动脉粥样硬化炎性反应中的作用有待进一步研究。

一个新硝基还原酶基因NOR1编码区单核苷酸多态及与鼻咽癌的关联分析

NOR1基因是中南大学湘雅医学院肿瘤研究所克隆的一个鼻咽癌表达下调新基因 ,生物信息学预测NOR1基因含有硝基还原酶结构域 ,该基因可能参与亚硝胺类化学致癌物在体内的代谢过程 ,从而与鼻咽癌的发生密切相关 .通过采用病例 对照的研究方法 ,利用测序技术对 144名鼻咽癌患者和匹配的 144名正常人NOR1基因编码区单核苷酸多态 (codingregionsinglenucleotidepolymorphisms ,cSNPs)进行基因分型 ,关联分析结果显示所检测到的两个cSNPs之间存在连锁不平衡 ,且均与鼻咽癌发病相关 ,两个cSNPs及它们所组成的单倍型相对危险度分别为 1 3 6、 1 64和 1 3 7.两个cSNPs的多态性改变均使NOR1基因编码蛋白一级结构发生了变化 ,这种改变可能影响NOR1基因编码蛋白的结构和功能 .

NOR1在心肌肥大中的调控作用及机制探讨

孤核受体NOR1是核受体超家族中NR4A亚家族的一员,参与机体代谢调节.作为高产能、高耗能器官,代谢调节异常病理性心肌肥大的基本病理过程.目的探讨NOR1调节心肌肥大机制;方法建立异丙肾上腺素（isoproterenol,ISO）诱导的心肌肥大大鼠及细胞模型,采用干扰及过表达的方式证明NOR1在心肌肥大中的作用,以及与其相互作用的关键信号分子;结果发现心肌组织及心肌细胞NOR1表达增加;心肌细胞中过表达NOR1能介导其表面积增加和肥大基因表达上调,并与多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1（PARP-1）发生相互结合,介导PARP-1活性增加;机制研究及分析发现NOR1激活PARP-1可能与抑制SIRT1/PARP-1相互作用,增强PARP-1乙酰化水平有关.结论NOR1处于核蛋白调节的关键环节,可能成为心肌肥大的重要标志物及干预靶点.

NOR1基因在前列腺癌细胞和组织中的表达

目的:探究NOR1基因在前列腺癌细胞和组织中的表达及意义。方法:89例前列腺癌患者手术切除的配对癌组织、癌旁组织及正常组织标本,Real-time PCR检测NOR1 mRNA表达,记录患者的Gleason分值、肿瘤分期、淋巴结转移、远处转移及术前血清前列腺癌特异性标志物PSA资料;构建过表达NOR1质粒转染的前列腺癌细胞DU-145,CCK-8实验检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,Western blot试验检测细胞中Bcl2、Bax及cleaved-caspase-3蛋白表达。结果:NOR1 mRNA表达水平比较,前列腺癌组织<癌旁组织<正常组织(P<0.05);NOR1表达与前列腺癌病理分期及淋巴结转移明显有关(P<0.05);过表达NOR1的前列腺癌细胞增殖侵袭能力减弱(P<0.05),Bax和cleaved-caspase-3水平上调、Bcl2水平下调。结论:NOR1在前列腺癌组织中表达下调,恢复其表达可抑制前列腺癌细胞增殖侵袭能力,其机制可能与Bax和cleaved-caspase-3水平上调和Bcl-2水平下调、前列腺癌病理分级及淋巴结转移有关。

新克隆的基因NOR_1对鼻咽癌细胞株HNE_1细胞生长的影响

NOR1是与鼻咽癌密切相关的抑瘤/易感基因候选者之一,将NOR1基因的全长cDNA片段亚克隆至pcDNA3.1(+)的表达载体中,通过脂质体介导转染入鼻咽癌细胞系HNE1,RT-PCR、RNA印迹方法筛选高效表达NOR1的细胞株,并借助细胞生长曲线、软琼脂生长集落形成大小试验、流式细胞仪对转染细胞的生物学行为进行检测.结果发现转染了NOR1基因的HNE1细胞生长速度明显减慢,在软琼脂中的集落形成较对照组明显减小.流式细胞仪分析表明,NOR1可以延缓细胞由G0/G1期进入S期.结果表明NOR1基因可能在抑制鼻咽癌的发生发展中起重要作用,为进一步研究NOR1的功能研究打下基础.

新克隆的硝基还原酶基因NOR_1的表达及其产物的纯化

背景与目的:NOR1是与鼻咽癌密切相关的抑瘤/易感基因候选者之一,本实验旨在构建NOR1基因原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化NOR1基因所编码的蛋白。方法:抽提人鼻咽正常组织中总RNA,利用RT-PCR扩增NOR1基因全长,经BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后插入同样经BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后的pGEX-4T-2质粒,构建表达载体pGEX-4T-2/NOR1重组表达质粒;转化大肠杆菌Jm105,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(isopropyl-thiogalactoside,IPTG)诱导pGEX-4T-2/NOR1/Jm105表达GST融合蛋白后,采用Westernblot验证,并用GST琼脂糖亲和层析柱对目的蛋白进行纯化。结果:酶切鉴定和测序验证成功地构建了NOR1基因原核表达载体,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecylsulphatepolyacrylamidegelelectrophoresis,SDS-PAGE)分析在大肠杆菌Jm105中成功诱导表达了一分子质量约为74kDa的融合蛋白;该融合蛋白存在于细菌裂解液的上清和沉淀中,Westernblot证实表达获得了成功;并利用亲和层析法获得了纯化蛋白。结论:成功获得了高效表达NOR1基因的原核表达产物,通过对该融合蛋白的纯化为它的多抗制备奠定了基础。

NOR_1基因对HepG2细胞白介素-8水平的影响

目的探讨NOR1基因对HepG2细胞IL-8水平的影响。方法将NOR1基因通过脂质体转染入HepG2细胞后,抽提细胞总RNA,运用RT-PCR检测IL-8mRNA的水平,用ELISA检测细胞培养上清液IL-8的表达水平。结果细胞培养上清液IL-8蛋白水平,转染NOR1基因组明显高于空白组和对照组(P<0.01);而转染NOR1基因组与转染空质粒组IL-8mRNA的表达水平无显著差异(P>0.05);结论NOR1基因诱导HepG2细胞IL-8蛋白水平表达增高。

T_4 DNA连接酶介导的5’RACE法克隆大鼠Nor 1全长cDNA

目的:克隆75AEST全长cDNA序列。方法:抽提在25mmol/L KCl条件下培养7d的大鼠小脑颗粒神经元的总RNA后,用DNA连接酶介导的5’RACE法克隆75A表达序列标签(EST)cDNA5’端未知序列,其产物亚克隆到pGEM-Teasy后进行序列测定以及同源性分性。结果:首轮5’RACE扩增出2.5kb序列后,75A EST鉴定为神经来源孤儿受体1(Nor1)基因的部分序列;再经过二次轮5’RACE,我们首次克隆Nor-1的全长cDNA序列。结论:T_4DNA连接酶介导的5’RACE是一种效率较高的克隆mRNA5’端未知序列的好方法,为进一步研究Nor1在小脑颗粒神经元存活或分化过程中的作用奠定基础。

硝基还原酶结构域蛋白1在大鼠睾丸组织中特异性高表达在人类睾丸癌中表达下调(英文)

通过克隆分离鉴定得到大鼠硝基还原酶结构域蛋白1(rNOR1),发现rNOR1 cDNA含有1 418个碱基,编码含379个氨基酸残基的rNOR1蛋白.rNOR1与人类NOR1(hNOR1)和小鼠NOR1(mNOR1)的同源性分别为89%和93%,这三种同源蛋白都含有OSCP1家族的保守结构域.rNOR1基因在大鼠睾丸中选择性高表达,而且与之同源的人类hNOR1也选择性高表达于睾丸中.通过免疫组化检测人类不同睾丸癌中的hNOR1蛋白表达,发现hNOR1蛋白在非癌变睾丸组织和胚胎性癌组织中高表达,而在精原细胞癌和分化型非精原细胞癌(畸胎瘤,卵黄囊瘤)中低表达.这些数据表明,hNOR1可能是一种睾丸选择性表达基因,睾丸癌hNOR1表达的改变或许可以帮助我们阐明hNOR1蛋白在生殖细胞系肿瘤发生中的功能.