抑癌基因NPRL2的研究进展

抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator-like 2)也称肿瘤抑制候选基因4(tumor suppressor candidate4,TUSC4),定位于人染色体3p21.3区域,广泛存在于人体各种组织中,在生物物种之间具有高度保守性;研究发现,在人类多种肿瘤组织(如肺癌、乳腺癌和肾癌等)中的表达明显降低。NPRL2基因具有参与DNA错配修饰、调控细胞周期信号转导以及诱导细胞凋亡的生物学功能。NPRL2基因失活与多种肿瘤的发生和发展有关。但其具体的抑瘤机制尚不清楚,有待于进一步研究。

NPRL2基因与奥沙利铂治疗结直肠癌的研究进展

结直肠癌(CRC)是全球三大恶性肿瘤之一,具有高发病率和高死亡率。研究发现,NPRL2基因与CRC发生、发展关系密切,CRC患者NPRL2基因表达显著降低。奥沙利铂是第三代铂类抗肿瘤药物,已广泛应用于胃肠道肿瘤化疗,可提高CRC患者生存率,但部分患者存在耐药。NPRL2基因可增加奥沙利铂治疗CRC的敏感性,是CRC潜在的治疗靶点。本文就NPRL2基因与奥沙利铂治疗CRC的研究进展作一综述。

结肠癌组织NPRL2表达及其临床意义研究

目的观察结肠癌组织中抑癌基因NPRL2的表达情况,并探讨其临床意义。方法收集2012-07-05-2012-12-21郑州大学第二附属医院普外科经手术治疗40例患者的结肠癌组织及其正常组织。应用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测NPRL2mRNA的表达水平,蛋白质印迹法和免疫组织化学技术检测NPRL2的蛋白表达情况。结果RT-PCR结果显示,NPRL2mRNA在结肠癌组织的表达水平为0.459±0.045,显著低于正常组织的0.656±0.041,t=15.124,P<0.001。蛋白质印迹结果显示,结肠癌组织和正常组织的蛋白表达量分别为0.271±0.015和0.588±0.051,t=27.357,P<0.001。免疫组化结果显示,正常组织及肿瘤组织中NPRL2蛋白阳性率分别为87.50%(35/40)和32.50%(13/40),组间差异有统计学意义,χ2=17.802,P<0.001。NPRL2的表达与患者的性别(χ2=0.631)、年龄(χ2=0.684)和Dukes分期(χ2=0.743)无明显相关关系,P值均>0.05;而与肿瘤组织分化级别相关,高、中分化组NPRL2阳性表达率高于低分化组,χ2=4.862,P<0.05。结论 NPRL2在结肠癌组织中表达降低,而且其表达与结肠癌的分化程度有关,提示其可能对结肠癌的发生或发展有重要的作用。

上调NPRL2表达对神经胶质瘤SHG44和U251细胞增殖的抑制作用

目的:探讨抑癌基因NPRL2(nitrogen permease regulator like-2)过表达对人神经胶质瘤SHG44和U251细胞增殖的影响及其可能的作用机制。方法:将NPRL2过表达的重组慢病毒LV-NPRL2感染SHG44和U251细胞后,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞中NPRL2m RNA和蛋白的表达水平,CCK-8和FCM法检测细胞增殖和细胞周期,蛋白质印迹法检测磷酸化3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(phospho-3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1,p-PDK1)、磷酸化蛋白激酶B1(phospho-protein kinase B1,p-PKB1,又称p-Akt1)、p27和p21蛋白的表达水平,应用酶联免疫检测仪检测细胞中PDK1、Akt1、细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)和CDK4的活性。裸鼠皮下成瘤实验观察NPRL2过表达对SHG44和U251细胞致瘤性的影响,免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和Ki-67增殖指数的变化。结果:LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞中NPRL2 m RNA和蛋白的表达水平均显著高于阴性对照组[SHG44和U251细胞感染阴性对照慢病毒(lentivirus-negative control,LV-NC)]和空白对照组(SHG44和U251细胞未感染任何慢病毒)(P值均<0.01)。LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞的增殖受到抑制(P值均<0.05),G0/G1期细胞所占百分比显著上升(P值均<0.01),S期细胞所占百分比显著下降(P值均<0.01),p-PDK1和p-Akt1蛋白的表达水平下调(P值均<0.01),p21和p27蛋白的表达水平上调(P值均<0.01),PDK1、Akt1、CDK2和CDK4的活性水平显著下降(P值均<0.01)。LV-NPRL2感染组SHG44和U251细胞在裸鼠皮下的成瘤能力(P<0.05)以及移植瘤组织中PCNA和Ki-67的增殖指数显著低于阴性对照组(P值均<0.01)。结论:NPRL2过表达可以抑制人神经胶质瘤SHG44和U251细胞的增殖,其机制可能与抑制PDK1/Akt1信号转导通路有关。