前列腺素E_2对大鼠巨噬细胞株NR8383合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响

目的探究前列腺素E_2(PGE_2)对大鼠巨噬细胞株NR8383细胞合成血管内皮生长因子(VEGF)的调控作用以及对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)趋化成管的影响。方法分别采用0.1 nmol/L PGE_2、1 nmol/L PGE_2、1 nmol/L PGE_2+10 nmol/L EP2受体抑制剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑制剂AH23848处理的NR8383细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑制剂处理的NR8383细胞作为对照组,采用Western blot和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及m RNA的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激HUVECs,运用TRANSWELL小室、Matrigel胶细胞成管实验等实验方法,观察PGE_2调控巨噬细胞对HUVEC迁移效应和成管能力的影响。结果随着NR8383细胞培养液中加入PGE_2浓度增高,其VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高(P<0.05);0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE_2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE_2处理浓度的增加而增加(P<0.05);HUVECs的迁移运动也随着PGE_2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高(P<0.05);研究发现PGE_2特异性的EP2/EP4受体拮抗剂AH6809/AH23848,可以显著抑制PGE_2增强NR8383细胞内VEGF mRNAs表达的作用并且也显著抑制PGE2增强NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应(P<0.05)。结论 PGE2可以通过作用NR8383细胞表面对应的EP2/EP4受体调控VEGF的合成,促进HUVEC趋化和成管效应。

RNA 干扰抑制大鼠肺泡巨噬细胞 NR8383 TGR5受体表达的研究

应用RNA干扰技术建立大鼠肺泡巨噬细胞NR8383TGR5基因阻断模型。采用阳离子脂质体法,将TGR5siRNA(Santa Cruz Biotechnology)转染到NR8383细胞中,实时荧光定量PCR和Western blot分别检测NR8383细胞中TGR5mRNA和蛋白水平表达变化。结果显示,与对照组比,转染TGR5siRNA组可明显降低NR8383细胞TGR5mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。RNA干扰技术能够特异性的高效阻断NR8383细胞中TGR5基因的表达,为深入探讨TGR5的生物学功能提供了可靠方法和新途径。

SiO_2粉尘刺激对NR8383细胞分泌炎症因子的影响

目的:比较不同剂量Si O2粉尘刺激NR8383细胞后TNF-α,IL-1β,TGF-β基因表达水平变化。方法:细胞接受不同剂量粉尘刺激后,采用MTT法检测各组细胞活力的改变,筛选出细胞存活率比较高的剂量。细胞随机分为四组,即对照组,10μg/cm2组、20μg/cm2组和40μg/cm2组,接受粉尘刺激12 h后,采用荧光定量PCR法测定各组TNF-α,IL-1β,TGF-β基因表达水平。结果:随着染尘剂量的提高,细胞存活率逐渐降低,80μg/cm2组细胞存活率最低。实时荧光定量PCR显示10μg/cm2组、20μg/cm2组和40μg/cm2组TNF-α,IL-1β,TGF-β基因表达水平均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。随着染尘剂量的递增,TNF-α,IL-1β,TGF-β的mRNA相对表达水平逐渐增高。结论:粉尘刺激可以引起大鼠肺泡巨噬细胞分泌炎症因子增加,呈现一定的剂量效应关系。

纳米氧化铈对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的增殖影响

目的：研究纳米氧化铈对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的毒性作用和对细胞的增殖影响;考察纳米氧化铈作用于细胞的生物效应是否存在剂量和粒径效应。方法：不同终浓度200、100、50、20、10、5、2.5、1.25、0.625μg/m L的20.8 nm Ce O2-NPs体外作用于96孔板中NR8383细胞24 h,采用CCK-8试剂盒检测细胞活力;四种粒径20nm、50-100 nm、300-500 nm、1-5μm Ce O2分别以四种终浓度100、50、20、10μg/m L作用于NR8383细胞24 h,采用CCK-8试剂盒检测检测细胞活力。结果：不同浓度20.8 nm Ce O2-NPs作用于NR8383细胞,与对照组相比,除1.25、2.5、5μg/m L外,其他浓度下细胞存活率随浓度增大而升高,100、200μg/m L最明显;有剂量效应。四种粒径四种浓度的纳米氧化铈作用于NR8383细胞,50-100 nm的20μg/m L浓度和1-5μm的50、10μg/m L浓度Ce O2-NPs抑制细胞增殖,但不明显;其他各组均促进细胞增殖,其中20 nm的20μg/m L,50-100 nm的50μg/m L、100μg/m L最明显。剂量尺寸效应不明显。结论：小粒径纳米氧化铈对NR8383细胞增殖有促进作用,无明显毒性;微米级氧化铈有些浓度下细胞存活率降低,可能对细胞造成毒性。

牛磺胆酸对LPS诱导的NR8383细胞分泌IL-1β的调节作用

为研究牛磺胆酸(Taurocholic Acid,TCA)对NR8383细胞分泌的白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的影响,通过实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附法检测了TCA对脂多糖诱导的NR8383细胞分泌IL-1βmRNA和蛋白含量的影响。结果显示,脂多糖(LPS)极显著增加IL-1βmRNA和蛋白含量(P<0.01);1 000μmol/L TCA可降低LPS诱导的NR8383细胞分泌IL-1βmRNA和蛋白含量;500μmol/L、100μmol/L的TCA可极显著降低LPS诱导的NR8383细胞分泌IL-1βmRNA和蛋白含量(P<0.01)。结论:TCA可降低经LPS诱导的NR8383细胞分泌IL-1β基因、蛋白水平含量,随着剂量的降低呈现剂量依赖性的抑制作用,表明TCA具有抗炎免疫调节作用。

芪归银方对大鼠巨噬细胞NR8383免疫调节作用初探

目的初步探索芪归银方(Qiguiyin,QGY)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383免疫功能的调节作用,为揭示其抗炎分子机制提供实验基础。方法以LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞NR8383,构建体外炎性细胞模型;设置空白对照组(control组)、模型对照组(LPS组)和芪归银实验组(LPS+QGY组),以CCK-8法检测QGY干预24、48及72h时巨噬细胞活力;以ELISA法检测QGY干预24、48及72h时NR8383炎性细胞上清液中白介素(interleukin,IL)-1β、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、单核细胞趋化蛋白(monocyte chemoattractant protein,MCP)-1和大鼠精氨酸酶(arginase,Arg)-1等免疫因子的浓度。结果以1μg/ml的LPS成功构建了NR8383炎性细胞模型。0.125~2.000mg/ml的QGY在72h内对NR8383巨噬细胞无明显毒性不良反应;1~2mg/ml的QGY显著促进NR8383巨噬细胞的增殖(P<0.05)。与control组比较,LPS组中IL-1β、TNF-α和MCP-1的含量均显著增高(P均<0.05),Arg-1的含量差异无统计学意义(P>0.05)。与control组比较,1~2mg/ml的QGY可显著降低IL-1β和MCP-1的含量(P均<0.05),2mg/ml则可显著降低TNF-α的含量(P<0.05)。其中,2mg/ml的QGY作用48h,可显著降低TNF-α和MCP-1的含量(P均<0.01)。与control组比较,QGY对NR8383巨噬细胞Arg-1的含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论QGY对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383有明确的免疫调节作用。

山慈菇正丁醇提取物对NR8383细胞分泌的IL-1β和TNF-α水平的影响

为了探讨山慈菇正丁醇提取物对NR8383细胞(大鼠肺泡巨噬细胞)分泌的白介素-1β(interleukin-1,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的影响,通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法检测TNF-α和IL-1β的mRNA水平,利用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中TNF-α和IL-1β的蛋白含量。结果显示:与空白对照组相比,终浓度1.25 mg/mL的山慈菇正丁醇提取物可极显著降低R8383细胞分泌TNF-αmRNA水平和蛋白含量(P<0.01);与空白对照组相比,终浓度1.25 mg/mL山慈菇正丁醇提取物能极显著升高IL-1β的mRNA水平和蛋白含量(P<0.01),同时0.012 5 mg/mL山慈菇正丁醇提取物能极显著降低IL-1β的mRNA水平和蛋白含量(P<0.01)。说明终浓度为1.25 mg/mL的山慈菇正丁醇提取物可极显著调控NR8383细胞分泌的TNF-α和IL-1β的基因和蛋白含量。

实时荧光定量PCR检测脂多糖对NR8383细胞TNF-α mRNA的影响

目的实时荧光定量PCR检测脂多糖(LPS)诱导NR8383肺泡巨噬细胞前后TNF-αmRNA的表达情况。方法体外培养的肺泡巨噬细胞系NR8383分成LPS刺激组和PBS(磷酸盐缓冲液)对照组,LPS终浓度为1μg.mL-1,共培养2 h后,TRIzol法提取细胞总RNA,SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测细胞TNF-αmR-NA的表达,结合管家基因β-Actin进行相对定量分析。结果荧光定量PCR未发现非特异性扩增。与对照组比较,LPS刺激组细胞TNF-αmRNA上调了124.1倍,差异有统计学意义(P<0.01)。结论用于本研究TNF-αmRNA的荧光定量PCR检测体系特异性好,结果可靠,为进一步实验奠定了基础。

弓形虫Ⅱ型ROP16蛋白对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383炎性反应的影响

目的探讨弓形虫Ⅱ型ROP16蛋白对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383炎性反应的影响。方法实验设置空白对照组(正常NR8383细胞)、空载组(pHBLV-CMV)和ROP16过表达组(pHBLV-CMV ROP16),构建ROP16过表达慢病毒载体并转染至NR8383细胞中,经筛选得到稳转细胞系,利用RT-PCR和Western blot法验证慢病毒在ROP16过表达组是否转染成功;免疫荧光法确定ROP16蛋白在NR8383细胞中的定位;Western blot法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg-1)、核转录因子κB(NF-κB)、磷酸化核转录因子κB(P-NF-κB)、信号转导与转录激活因子1(STAT1)及磷酸化转录活化蛋白1(P-STAT1)蛋白的表达情况;RT-PCR检测iNOS、Arg-1及炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β、IL-10 mRNA水平的表达情况;ELISA检测培养上清中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β、IL-10的含量。结果ROP16过表达慢病毒成功稳转NR8383细胞,镜下可观察到明显绿色荧光;免疫荧光结果显示,ROP16蛋白定位于NR8383细胞核中;Western blot结果显示,ROP16过表达组中M1型巨噬细胞表面标志蛋白iNOS的表达高于空白对照组,其通路蛋白NF-κB、P-NF-κB、STAT1、P-STAT1的表达均高于空白对照组(P均<0.05),而M2型巨噬细胞表面标志蛋白Arg-1表达低于空白对照组(P<0.05);RT-PCR结果显示,ROP16过表达组iNOS及促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA均升高(P均<0.01),而Arg-1及抗炎因子TGF-β、IL-10 mRNA均下降(P均<0.05);ELISA结果显示,过表达组中促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-12含量均高于空白对照组(P均<0.05),而抗炎因子TGF-β和IL-10的表达均低于空白对照组(P均<0.05)。结论弓形虫Ⅱ型ROP16定位于NR8383巨噬细胞核中并稳定表达,同时向M1型巨噬细胞方向极化,引发促炎反应。

TCDCA对TGR5介导的NR8383细胞IL-1β的影响

研究牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对TGR5介导的经脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导后NR8383细胞IL-1β的影响。采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative,qPCR)法确定TGR5在NR8383细胞中mRNA水平及白介素-1β(Interleukin-1,IL-1β)mRNA表达的影响;采用Western blot法测定TGR5在NR8383细胞中蛋白表达量;采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immune-sorbent assay,ELISA)测定TCDCA对TGR5介导的NR8383细胞IL-1β蛋白活性的影响。结果表明,高表达TGR5的NR8383细胞中IL-1βmRNA表达量和蛋白活性均显著高于正常细胞组,TCDCA能极显著降低LPS诱导的IL-1β基因表达和蛋白活性(P<0.01)。TCDCA是通过TGR5受体进而影响LPS对IL-1β基因水平及蛋白活性的诱导作用。

牛磺胆酸对NR8383细胞ERK活性的影响

在采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)法确定牛磺胆酸(taurocholic acid,TCA)、脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)和PKC抑制剂(G6983)对细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)mRNA水平影响的基础上,采用Western-blot法测定TCA对LPS介导的NR8383细胞pERK、ERK蛋白水平相对表达量的影响。结果显示:TCA可显著降低LPS介导的pERK、ERK含量(P<0.05),G6983可显著减低pERK、ERK的表达量,G6983也可降低LPS对ERK的活化作用。TCA通过影响PKC通路,而降低LPS介导的NR8383细胞pERK、ERK含量。

牛磺胆酸对PD98059介导的NR8383细胞TNF-α的影响

研究牛磺胆酸(taurocholic acid,TCA)对NR8383细胞分泌的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative,qPCR)法测定TCA对细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK1/2)抑制剂(PD98059)介导的脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的TNF-αmRNA水平的影响,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immune-sorbent assay,ELISA)测定TCA对PD98059介导的NR8383细胞分泌的TNF-α蛋白水平相对表达量的影响。TCA可显著降低LPS诱导的TNF-α基因、蛋白水平含量(P<0.05),PD98059可显著降低TNF-α的表达量。TCA通过影响ERK1/2通路调节LPS诱导的NR8383细胞TNF-α基因、蛋白水平含量。

香烟烟气提取物对NR8383细胞吞噬功能的影响

目的 探讨不同浓度香烟烟气提取物（CSE）对大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383）吞噬功能的影响.方法 通过CCK-8法分析细胞比活力,Annexin-V FITC/PI双染法检测细胞凋亡以及CFSE荧光标记分析细胞的分裂增殖,来确定CSE对NR8383细胞的作用浓度和作用时间.收集经不同浓度CSE处理24 h的NR8383细胞,与FITC标记的大肠杆菌共同孵育2 h后,用流式细胞仪检测胞内荧光强度,分析CSE对细胞吞噬功能的影响.结果 NR8383细胞的吞噬功能随着CSE浓度的变化先增强后降低.单独用CSE处理NR8383细胞,在100μg/ml CSE作用下,巨噬细胞的吞噬功能与正常对照组相比提高0.5倍,此时的细胞比活力最高.在CSE和LPS共同作用下,CSE的浓度为100μg/ml时,NR8383细胞的吞噬功能提高到正常水平的3倍.而当CSE浓度达到200μg/ml时,NR8383细胞的吞噬功能受到损伤,细胞凋亡率为54.1%.结论 CSE可以影响NR8383细胞的吞噬功能,在较低浓度时可能激活巨噬细胞的吞噬功能,但较高浓度时可能对巨噬细胞的吞噬功能造成损伤,CSE可能具有激活巨噬细胞吞噬功能的潜能.

牛磺胆酸对TGR5介导的HEK-293T和NR8383细胞cAMP的影响

目的:研究牛磺胆酸(Taurocholic Acid,TCA)对瞬转TGR5受体的HEK-293T及NR8383细胞的c AMP含量的影响。方法:采用MTT法测定TCA对细胞毒性范围,采用ELISA法测定TCA对细胞内c AMP含量的影响。结果:TCA对瞬转TGR5受体的HEK-293T细胞产生的c AMP含量呈剂量依赖性增加(P<0.05),TCA对瞬转TGR5受体的NR8383细胞产生的c AMP含量显著增加(P<0.05)。结论:TCA对TGR5介导的两种细胞的c AMP的含量均有显著性提高。

短链脂肪酸对NR8383肺泡巨噬细胞炎性反应的影响

目的探讨短链脂肪酸(SCFAs)在大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383细胞中的抗炎作用。方法将3种短链脂肪酸(乙酸盐、丙酸盐及丁酸盐)与NR8383细胞共孵育,然后分别用LPS刺激及肺炎克雷伯杆菌感染NR8383细胞,采用Western blot检测炎性相关蛋白的表达,q-PCR检测炎性相关蛋白mRNA的表达。结果 LPS刺激组丁酸盐预孵育可显著增加NR8383细胞抗炎因子IL-10在3 h及6 h的表达量,以及12 h的TGF-β的表达量,丙酸盐可降低3 h、12 h的iNOS和NF-κB的表达,同时促炎因子TNF-的表达量在LPS刺激6 h后显著降低;q-PCR检测显示,丁酸盐和丙酸盐分别可增加3 h、6 h IL-10 mRNA的表达量(t=4.912,P<0.05),且丁酸盐组表达量>丙酸盐组。与其他两种短链脂肪酸相比丙酸盐降低TNF-mRNA表达的作用更显著(t=13.26,P<0.05)。Kpn刺激组中,与对照组相比丙酸盐可显著增加6 h时抗炎因子IL-10及TGF-β的表达量;丁酸盐可降低3 h和6 h时NF-κB蛋白表达;同时3种短链脂肪酸都可降低6 h的TNF-的表达,以丁酸盐的效应显著;q-PCR检测显示,丁酸盐可显著增加3 h和6 h时IL-10 mRNA的表达量(t=4.41,P<0.05),丙酸盐可显著增加6 h时IL-10 mRNA的表达量(t=5.616,P<0.05)。3种短链脂肪酸都可降低TNF-mRNA的表达,以丁酸盐的效果更显著(t=100.3,P<0.05)。结论短链脂肪酸在NR8383细胞中发挥一定的抗炎效应,尤以丙酸盐和丁酸盐的抗炎效应更显著。

牛磺鹅去氧胆酸对TGR5介导的NR8383细胞TNF-ɑ的影响

采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative,qPCR)法检测牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对TGR5介导的NR8383细胞中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因水平的影响,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immune-sorbent assay,ELISA)检测NR8383细胞中TNF-ɑ蛋白活性的变化情况。结果显示:高表达TGR5的NR8383细胞中TNF-α的mRNA表达量和蛋白活性均显著低于正常细胞组;另外,TCDCA能极显著降低LPS诱导的TNF-α基因表达量和蛋白活性(P<0.01)。结果表明:TCDCA通过TGR5受体调控LPS对TNF-α基因表达及蛋白活性的诱导作用。

PI3KC3/Beclin1复合物对染矽尘NR8383细胞自噬的调控作用

[目的]探讨PI3KC3/Beclin1复合物在染矽尘大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)自噬中的调控作用。[方法]常规培养NR8383细胞,随机分为4组:对照组,矽尘组,3-MA组和3-MA干预组,分别孵育1、3、6、12、20 h后收集样品。采用蛋白免疫印迹方法检测自噬标记蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、自噬底物蛋白p62以及自噬相关蛋白Beclin1、PI3KC3;采用激光扫描共聚焦显微镜观察孵育不同时间的自噬免疫荧光表达情况;采用免疫共沉淀检测Beclin1复合物表达。[结果]免疫荧光结果显示,矽尘组LC3点状聚集绿色荧光亮斑随时间先增强后减弱,在6 h时荧光最强,且各时间点较对照组和3-MA干预组荧光亮斑增强;3-MA干预组LC3荧光标记绿色亮斑先增强后减弱,弱于矽尘组,但强于对照组。加入溶酶体抑制剂二磷酸氯喹后,各组LC3绿色荧光信号随时间均呈现增强的趋势。Western blot结果显示,矽尘组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值呈先增加后减少趋势,且在各个时间点均高于对照组(P <0.05);在LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值达最高的6 h时间点,矽尘组的值是对照组的248%,是3-MA组的372%。3-MA干预组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值也呈先增加后减少趋势;除1 h时间点外,余各时间点均低于矽尘组,但高于对照组(P <0.05);在LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值达最高的6 h时间点,3-MA干预组的值是矽尘组的90%,是对照组的223%。Beclin1、PI3KC3蛋白表达趋势与LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值一致,p62蛋白表达趋势与LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值相反。免疫共沉淀显示,矽尘组Beclin1与PI3K结合增加,3-MA干预后两者结合减少。[结论]矽尘诱导NR8383细胞的自噬活动随时间发生不同程度的改变,3-MA可下调矽尘诱导的NR8383细胞自噬活动,推测PI3KC3/Beclin1信号通路参与矽尘诱导肺泡巨噬细胞的自噬过程。

长链非编码RNA AABR07008568.1在PM2.5致NR8383细胞炎症反应中的作用

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)AABR07008568.1在大气PM2.5诱导大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)炎症反应中的作用及其分子机制。方法采集广州地区现场实时PM2.5样品制成混悬液用于后续实验的染毒,用0、200μg/ml PM2.5染毒液暴露NR8383细胞24 h后,采用lncRNA高通量测序并结合生物信息学分析方法筛选出有差异表达的lncRNAs,使用实时荧光定量PCR分析法(RT-qPCR)验证测序结果。运用胞浆胞核亚细胞定位试剂盒检测AABR07008568.1在胞浆胞核的分布情况。采用RNA干扰(RNAi)技术敲低NR8383细胞中AABR07008568.1的表达水平,以RT-qPCR检测RNA干扰联合200μg/ml PM2.5染毒液暴露NR8383细胞后IL-6的表达水平。用NFκB特异性抑制剂(BAY11-7082,10μmol/L)处理细胞后检测AABR07008568.1的表达水平。结果高通量测序和RT-qPCR结果显示,随着PM2.5暴露浓度的增加,AABR07008568.1表达量增高(P<0.05)。通过干扰AABR07008568.1后发现siRNA1的转染效率最高,达到约60%(P<0.05)。敲低AABR07008568.1且联合PM2.5暴露后,与阴性对照(NC)组相比,siRNA1组中IL-6的表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05);NC+PM2.5组中的IL-6表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。当使用NFκB特异性抑制剂阻断NFκB通路后,AABR07008568.1表达量下降(P<0.05)。结论AABR07008568.1参与了NFκB通路的激活,但两者之间具体的调控机制尚需更深层次的探索。

艾拉莫德对脂多糖激活大鼠肺泡巨噬细胞系TNFα产生及NF-κB活性的抑制作用

目的研究非甾体抗炎药艾拉莫德(T-614)对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞系(NR8383)前炎症反应因子TNFα基因表达、蛋白合成的影响及其对核因子κB(NF-κB)的作用。方法体外培养NR8383经T-614(13.4,26.7及53.4μmol.L-1)处理,LPS刺激后应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中TNFα的水平,半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TNFαmRNA水平,ELISA法检测NF-κB的活性。结果T-614对LPS诱导的NR8383细胞TNFαmRNA水平和蛋白水平的上调有显著抑制作用,对NF-κB的转录活性也有抑制作用。结论T-614可能通过抑制LPS诱导的NR8383的NF-κB活性而降低TNFα的产生。

氯胺酮对脂多糖诱导的大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激的影响

目的研究氯胺酮对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激的影响。方法体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383经氯胺酮(10、100和1000μmol/L)预处理,LPS刺激24 h后,应用试剂盒检测细胞培养上清液中丙二醛(MDA)及超氧化物岐化酶(SOD)的水平。结果与PBS组比较,LPS组培养上清液中MDA水平均明显增加,而SOD水平显著下降,而氯胺酮预处理组(100和1000μmol/L)对此具有抑制作用。结论氯胺酮对LPS所致的NR8383细胞的氧化应激损伤具有一定的保护作用。