MAPK1与NRAS基因多态性与云南汉族人群宫颈上皮内瘤变的相关性

目的探讨在云南汉族人群中NRAS基因与MAPK1基因rs14804和rs9340多态性位点与宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)易感性的相关性。方法随机选取2017年5月至2019年10月昆明医科大学第三附属医院416例CIN患者和983例健康对照个体,通过TaqMan探针法对NRAS基因与MAPK1基因的SNPs位点(rs14804和rs9340)进行基因分型,分析2个SNPs位点与云南汉族人群CIN发生风险的相关性。结果MAPK1基因的SNP位点rs9340等位基因(P=0.008)和基因型(P=0.002)在CIN组与对照组的分布频率差异具有统计学意义,等位基因A可能与更高的CIN发生风险相关(OR=1.28,95%CI 1.07~1.54),尤其是低年龄组(≤50岁)人群的CIN风险相关(OR=1.35,95%CI 1.09~1.67)。结论MAPK1基因的SNP位点rs9340可能与云南汉族人群CIN发生风险具有相关性。

结直肠癌微卫星不稳定状态与KRAS、NRAS、BRAF基因突变和临床病理特征及预后的关系

目的 探讨结直肠癌(CRC)的微卫星不稳定(MSI)状态与KRAS、NRAS、BRAF基因突变、临床病理特征及预后的相关性。方法 选取2015年3月至2020年12月于汕头市中心医院和中山大学肿瘤防治中心收治的经病理确诊为CRC的861例患者作为研究对象,检测其4种错配修复(MMR)蛋白表达、MSI状态,KRAS、NRAS、NRAS基因突变情况。分析MMR蛋白表达、KRAS、NRAS和BRAF基因突变与CRC患者临床病理特征的相关性,MMR蛋白表达与KRAS、NRAS和BRAF基因突变的相关性,并采用COX回归模型探讨CRC患者2年内死亡的独立影响因素。结果 CRC中的MMR蛋白表达总缺失率为12.08%,KRAS基因突变率为42.28%,NRAS基因突变率为2.21%,BRAF基因突变率为6.50%。不同年龄、肿瘤部位、组织学类型、肿瘤最大径、分化程度、TNM分期、淋巴结转移状态、CEA水平的患者MMR蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别、肿瘤部位、组织学类型、分化程度、TNM分期、淋巴结转移状态、CA199水平的患者KRAS基因突变比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同CEA水平的患者NRAS基因突变比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤部位、组织学类型、肿瘤最大径、分化程度、TNM分期、淋巴结转移状态的患者BRAF基因突变比较,差异有统计学意义(P<0.05)。MMR蛋白表达与KRAS基因突变呈负相关(r=-0.137,P<0.001)。MMR蛋白表达与NRAS基因突变不相关(r=-0.007,P=0.834)。MMR蛋白表达与BRAF基因突变呈正相关(r=0.162,P<0.001)。淋巴结转移、KRAS突变、BRAF突变、MSI-H是CRC患者2年内死亡的独立影响因素。结论 MSI状态、KRAS、NRAS、BRAF基因突变与CRC的临床病理特征具有相关性,上述指标的检测有助于CRC的生物学行为分析及预后判断。

急性髓系白血病NRAS基因突变患者临床特征及细胞遗传学分析

目的探讨NRAS基因突变的急性髓系白血病(AML)患者临床特点及细胞遗传学特征。方法选取2020年1月至2022年8月在遵义市第一人民医院初诊的162例AML患者,对其临床资料进行回顾性分析,根据NRAS基因突变情况分为NRAS突变组和NRAS野生组,比较2组临床特征和细胞遗传学差异。结果162例初诊为AML的患者中,NRAS突变28例,NRAS野生134例。其中NRAS突变组外周白细胞计数(53.10×109/L)高于NRAS野生组(24.78×109/L),差异有统计学意义(P<0.05),2组血红蛋白、血小板计数及骨髓原幼细胞数差异无统计学意义(P>0.05)。NRAS突变组中25例出现共存基因突变,突变率为89.3%,最常见的共存突变基因为KRAS,突变率为28.6%,与NRAS野生组比,NRAS突变组更易获得KRAS突变(P<0.05);其他共存突变基因差异无统计学意义(P>0.05)。染色体分型比较发现,NRAS突变组的预后不良核型比例更高,达到23.1%,差异有统计学意义(P<0.05);预后良好核型和预后中等核型占比分别为7.7%和69.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论AML患者NRAS基因突变发生率为17.3%,其更容易合并KRAS基因突变,在预后不良核型中占比较高。

结直肠癌患者BRAF,KRAS,NRAS和PIK3CA基因突变与其病理特征的临床研究

分析结直肠癌患者基因突变与其病理特征的关系。方法 选取2022年1月-2024年5月228例结直肠癌患者,采集样本基因突变检测,统计本组患者基因突变发生率,并分析结直肠癌患者基因突变与病理特征的相关性。结果 本组228例结直肠癌患者RAF,KRAS,NRAS、KRAS2/PIK3CA、PIK3CA /BRAF和PIK3CA基因突变率分别为3.1%(7/228)、43.0%(98/228)、3.5%(8/228)、1.3%(3/228)、0.4%(1/228)、0.9%(2/228);PIK3CA基因突变患者各指标差异无意义(P>0.05);BRAF基因突变患者在肿瘤浸润深度、分化程度相比,差异有意义(P<0.05);KRAS基因突变患者在肿瘤部位相比,差异有意义(P<0.05);NRAS基因突变患者在有无神经束侵犯相比,差异有意义(P<0.05)。结论 结直肠癌患者中以KRAS基因突变较为常见,BRAF基因突变与肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度有关,KRAS突变多发生与近端结肠癌,NRAS基因突变具有无神经束侵犯的特征。

KRAS、NRAS及BRAF基因突变与结直肠癌肝转移的关系

目的 探讨KRAS、NRAS和BRAF基因突变与结直肠癌肝转移的关系。方法 收集川北医学院附属医院2019年1月至2021年10月结直肠癌组织标本246例,基于ARMS法和荧光PCR技术进行KRAS、NRAS和BRAF基因突变检测,收集患者临床资料并分析KRAS、NRAS和BRAF基因突变与肝转移的关系。结果 在246例结直肠癌患者中,KRAS、NRAS和BRAF突变率分别为45.93%(113/246)、6.10%(15/246)和4.87%(12/246)。NRAS基因突变与同时性结直肠癌肝转移相关,在NRAS突变组结直肠癌确诊时出现肝转移的频率较高(P=0.005),但随着病程时间延长,1 a内发生肝转移的频率在NRAS突变组和野生组无统计学意义(P=0.155),多因素Logistic回归分析显示NRAS突变是同时性结直肠癌肝转移的独立危险因素(OR=9.974,P=0.008)。KRAS和BRAF突变与肝转移无明显相关性(P> 0.05)。结论 NRAS基因突变的结直肠癌患者早期较易出现肝转移,对其进行检测不仅在靶向治疗中具有重要的指导作用,在早期肝转移评估中也具有重要的临床指导价值。

Drop-off微滴式数字PCR检测急性髓系白血病NRAS基因突变及其临床应用

目的:建立检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)神经母细胞瘤RAS病毒癌基因同源物(NRAS)基因突变的drop-off微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法,并评价该方法的临床应用价值。方法:针对NRAS G12和G13突变位点设计特异性drop-off ddPCR引物和探针,建立最佳反应体系,并对该方法进行性能验证。应用该方法对140例临床样本进行初筛,其检测结果与Sanger测序进行比较,并用二代测序(next generation sequencing,NGS)进行验证。结果:建立drop-off ddPCR检测NRAS基因G12/G13突变的方法,灵敏度达0.158%,重复性、线性良好,其空白限为5.40拷贝数/μL,最低检测下限为15.84拷贝数/μL。在140例初诊AML患者中,drop-off ddPCR检出NRAS突变28例(20%),其突变负荷为0.26%~52.85%(中位2.14%);而Sanger测序仅检出7例(5%)阳性,为进一步验证,将21例Sanger测序结果阴性而drop-off ddPCR检测阳性的样本进行NRAS基因NGS,检出14例阳性,而另外7例NGS阴性的样本,其drop-off ddPCR检测突变频率为0.53%~1.50%(中位1.10%)。结论:建立了drop-off ddPCR技术检测AML患者中NRAS基因突变的方法,该方法灵敏度高,可用于对NRAS基因G12/G13突变进行定量检测,有望可用于AML患者预后判断和疾病监测。

结直肠腺癌中肿瘤出芽与KRAS、NRAS、BRAF基因突变、MSI状态的关系及临床意义

目的探讨结直肠腺癌中肿瘤出芽(BD)与KRAS、NRAS、BRAF基因突变、微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)的关系及临床意义。方法收集237例结直肠腺癌的临床资料,判读BD。采用RT-PCR法检测229例KRAS、NRAS、BRAF基因突变,分析BD与基因突变的相关性。应用PCR法检测MSI,分析其与BD的关系。结果237例患者中低-中级别BD者147例,高级别BD者90例,BD与肿瘤最大径、脉管神经侵犯、组织学分化、淋巴结侵犯、癌结节形成、肿瘤复发、TNM分期均有关(P<0.05),与患者年龄、性别、发病部位均无关。淋巴结转移单因素Logistic回归分析显示:BD与淋巴结转移风险相关(P<0.05),多因素Logistic回归分析显示:BD是影响结直肠腺癌淋巴结转移的独立预测因素(P<0.05)。229例患者中KRAS突变率为42.4%,NRAS突变率为2.6%,BRAF突变率为3.1%。在KRAS、NRAS、BRAF突变患者中,高级别BD率分别为56.7%、33.3%、14.3%。BD与Kras12、Kras13密码子突变和KRAS总突变均有关(P<0.05),与NRAS、BRAF均无关。高级别BD中KRAS突变主要为Kras12、Kras13密码子突变。KRAS突变患者出现高级别BD,其无进展生存时间、总生存时间短(P<0.05)。237例患者中,MSI高度不稳定率为6.8%,16例MSI高度不稳定中仅2例为高级别BD,其与MSI呈负相关(r=-0.143,P<0.05)。结论结直肠腺癌中BD与Kras12、Kras13密码子突变、KRAS总突变、MSI状态均有关;BD也与结直肠腺癌预后相关,可为预后判断提供参考。

KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK联合检测与结直肠癌预后的相关性分析

目的探究KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK联合检测与结直肠癌预后的相关性。方法回顾性纳入2017—2020年连续来本院就诊住院的结直肠癌患者100例作为研究对象,患者均进行了3年随访,以患者三年生存、病死情况等作为预后观察指标,将患者分为预后良好组与预后不良组,分析KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK联合检测对结直肠癌患者预后不良的预测价值,以及KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK联合检测与结直肠癌预后的相关性。结果预后不良组患者KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK突变比率高于预后良好组(P<0.05)。Cox比例风险回归模型分析结果显示KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK突变是结直肠癌患者预后不良的风险因素(P<0.05)。结论KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA、NTRK突变是结直肠癌患者预后不良的风险因素,在结直肠癌患者中对其进行检测具有重要意义,可为结直肠癌患者的早期诊断以及预后提供参考。

NRAS突变型晚期黑色素瘤的治疗进展

黑色素瘤的发生、发展与多种癌基因的激活密切相关。15%~20%的黑色素瘤患者存在NRAS基因的激活突变,携带该突变基因的黑色素瘤具有更强的侵袭性,治疗难度大。由于RAS蛋白突变位点属于弱药物靶标,目前尚缺乏有效的靶向抑制剂,因此临床上多以免疫检查点抑制剂作为NRAS突变型晚期黑色素瘤的一线治疗方案,然而治疗反应率较低。近年来,在NRAS突变亚型中靶向治疗方案的探索主要集中在NRAS下游丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路,但结果不一:新型MEK1/2抑制剂tunlametinib,在晚期NRAS突变患者中总体客观缓解率(objective response rate,ORR)达到34.7%,较既往的binimetinib显著提高;然而泛RAF抑制剂belvarafenib和ERK抑制剂ulixertinib的Ⅰ期临床试验却未能展示出该药明显的优势。此外,以MEK抑制剂为基础的联合治疗也取得一定进展,现有证据表明,分子抑制剂类药物较免疫检查点抑制剂显示出更多的优势:选择性BRAF/CRAF抑制剂naporafenib(LXH254)与MEK抑制剂trametinib联合治疗NRAS突变型黑色素瘤的Ⅰb期临床试验中ORR达到46.7%;细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclindependent kinase4/6,CDK4/6)抑制剂ribociclib和binimetinib联合治疗在携带NRAS突变同时合并细胞周期蛋白基因异常的人群中可达32.5%;黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)抑制剂IN10018联合cobimetinib的研究结果也表现出较好的ORR(38.5%);但免疫检查点抑制剂程序性死亡[蛋白]配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)单抗durvalumab联合trametinib方案仅使27.2%的患者达到部分缓解(3/11)。与此同时,部分临床前研究结果也显示出一些转化潜质:如热激蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)抑制剂XL888和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶19(serine/threonine protein kinase 19,STK19)抑制剂均在动物模型中表现出显著抑制NRAS突变型黑色素瘤细胞生长的能力。本文综述了NRAS突变型黑色素瘤的致癌机制及近年来治疗领域的研究进展,旨在展示该亚型患者的治疗现状,对多种新型治疗方法的临床研究结果进行总结和归纳,为当前临床实践和未来联合治疗方案提供依据。

KRAS、NRAS及BRAF基因突变状态对结直肠癌术后辅助化疗患者预后的影响

目的 研究KRAS、NRAS及BRAF基因突变状态对结直肠癌术后辅助化疗患者预后的影响。方法 收集驻马店市中心医院于2019年3月至2021年12月收治的65例结直肠癌患者病例资料进行回顾性研究,所有患者均接受外科手术治疗且完成4个周期的术后辅助化疗。通过查阅电子病历统计所有患者手术方式、性别、组织学类型、年龄、大体类型、体重、临床分期、肿瘤直径、原发部位、肿瘤分化程度;获取所有患者术后KRAS、NRAS及BRAF基因突变检测结果;通过查阅随访资料,统计所有患者化疗结束后1 a内是否复发或转移,将发生复发或转移的病例纳入预后不良组,其余病例纳入预后良好组。采用logistic回归分析检验KRAS、NRAS及BRAF基因突变状态对结直肠癌术后辅助化疗患者预后的影响。结果 术后1 a, 65例结直肠癌术后辅助化疗患者中预后良好55例(84.62%),预后不良10例(15.38%)。两组性别、原发部位、组织学类型、肿瘤分化程度等一般资料差异无统计学意义(P>0.05)。65例患者中KRAS基因突变24例(36.92%),NRAS基因突变5例(7.69%),BRAF基因突变4例(6.15%)。两组KRAS、NRAS及BRAF基因突变状态差异有统计学意义(P<0.05)。logistic回归分析结果显示,KRAS、NRAS及BRAF基因突变可对结直肠癌术后辅助化疗患者预后产生影响(P<0.05)。结论 KRAS、NRAS及BRAF基因突变型可对结直肠癌术后辅助化疗患者不良预后产生影响。

结直肠癌患者肿瘤组织中KRAS、NRAS和BRAF基因突变的分子病理检测分析

目的:探讨结直肠癌患者肿瘤组织中KRAS、NRAS和BRAF基因各亚型突变状况。方法:应用Taqman-ARMS方法检测101例结直肠癌患者石蜡组织中KRAS、NRAS、BRAF基因突变情况。结果:结直肠癌患者肿瘤组织中KRAS基因总突变率为42.57%,其中30例(29.70%)检测到外显子2第12密码子突变;其中13例(12.87%)检测到KRAS基因外显子2第13密码子突变,为G13D点突变,未检测到G13C点突变;NRAS基因总突变率为3.96%,其中外显子2第12密码子突变1例(0.99%),外显子2第13密码子突变1例(0.99%),外显子3第61密码子突变2例(1.98%);BRAF基因总突变率为3.96%。结论:结直肠癌患者组织中KRAS基因突变率较高,NRAS和BRAF基因突变率虽低但不容忽视。KRAS、NRAS和BRAF基因检测人群的筛选对结直肠癌患者治疗方案的选择意义重大,能够更有效的指导精准医学个体化治疗。

423例结直肠癌KRAS/NRAS/BRAF/PIK3CA基因突变与临床病理的关系分析

目的分析结直肠癌(colorectal cancer,CRC)肿瘤组织中KRAS/NRAS/BRAF/PIK3CA基因突变与临床病理的关系。方法选取2014年7月-2019年5月于解放军总医院第一医学中心行手术切除的423例原发性CRC患者肿瘤组织标本进行回顾性分析,采用扩增阻滞突变系统与Taqman探针相结合的方法检测KRAS/NRAS/BRAF/PIK3CA基因的体细胞突变热点,分析其与临床病理特征的关系。结果423例CRC中,4种基因(KRAS/NRAS/BRAF/PIK3CA)总突变率为58.87%(249/423),其中KRAS突变率为44.68%(189/423),NRAS突变率为4.73%(20/423),BRAF突变率为3.78%(16/423),PIK3CA突变率为5.67%(24/423)。此外还发现KRAS和PIK3CA共同突变率为3.07%(13/423);BRAF和PIK3CA共同突变率为0.95%(4/423)。KRAS基因在脉管内癌栓[OR:0.351,P=0.003]和淋巴结转移[OR:0.583,P=0.006]病例中突变率明显降低;NRAS基因在肿瘤高分化组(OR:5.984,P=0.026)中突变率明显升高。BRAF基因在右半结肠肿瘤中突变频率明显升高[OR:4.286,P=0.005]。KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因突变与性别、年龄、肿瘤大小、大体分型、神经侵犯、肝转移和临床分期等因素无关(P均>0.05)。结论本组结直肠癌患者中KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA这4个基因突变与大部分临床病理指标无关,但是KRAS突变较少出现在脉管内癌栓和淋巴结转移患者中,BRAF突变更多地出现在右半结肠。

Kras、Nras、Braf基因突变联合检测在转移性大肠癌中的意义

目的探讨大肠癌Kras、Nras、Braf基因突变与临床病理特征及预后的意义。方法应用实时荧光定量PCR Taq Man探针法检测90例大肠癌患者Kras、Nras、Braf基因突变。结果 90例大肠癌标本中33例(36.7%)检测到Kras12、13、61密码子基因突变,4例(4.4%)检测到Nras12、13、61密码子基因突变,6例(6.7%)检测到Braf V600E基因突变。在有无淋巴结转移及远处转移的患者,Kras基因突变差异有统计学意义(2=7.220、8.720,P<0.01)。在不同的性别、年龄、肿块大小、浸润深度、分化程度,Kras基因突变均差异无统计学意义(P>0.05)。Kras、Nras、Braf基因野生型患者的3年生存率均高于突变型(P<0.01),无淋巴结转移和远处转移组患者的3年生存率明显高于伴淋巴结转移和远处转移组(P<0.01)。Kras与Nras、Braf基因突变无明显负相关性。结论联合检测Kras、Kras、Braf基因突变对转移性大肠癌的治疗及预后评估具有重要的意义。

伴KRAS/NRAS突变型子宫颈中肾管腺癌2例临床病理分析

目的探讨子宫颈中肾管腺癌(mesonephric adenocarcinoma,MNA)的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法回顾性分析2例子宫颈MNA的临床资料、病理学形态及免疫表型,并复习相关文献。结果2例患者年龄分别为51、77岁,临床均表现为阴道不规则出血、子宫颈赘生物;术前活检诊断及会诊结果为子宫颈低分化癌、鳞状细胞癌、癌肉瘤、间质肉瘤、滑膜肉瘤等;镜下肿瘤组织以实性巢状、条索状结构为主,肿瘤细胞圆形或梭形,局灶可见少量腺样结构,腺腔内可见嗜酸性分泌物;免疫表型:肿瘤细胞vimentin、CK(AE1/AE3)和PAX8均弥漫强(+),梭形细胞CD10弥漫强(+),EMA、p16和p53灶(+),ER、PR、CEA均(-),Ki-67增殖指数20%~60%;基因检测结果显示:2例均存在KRAS基因2号外显子p.G12A突变,例2还同时存在NRAS基因3号外显子p.A59D突变。结论子宫颈MNA是来源于中肾管残件的罕见肿瘤,生物学行为与其他类型子宫颈腺癌及肉瘤相比更加惰性,但其病理学形态多样,尤以梭形细胞成分为主时,极易误诊。认识子宫颈MNA不同组织学形态,寻找特征性诊断线索,对该肿瘤的正确诊断有重要临床意义。KRAS/NRAS分子检测为临床尝试靶向治疗提供依据。

Nras、Braf、Kras、Pik3ca基因突变检测在大肠癌治疗和预后中的临床价值研究

目的研究Nras、Braf、Kras、Pik3ca基因突变与大肠癌临床病理特征之间的关系。方法随机选择我院2010年2月~2013年8月期间收治的240例大肠癌患者作为研究对象,取术后肿瘤组织标本,检测Nras、Braf、Kras、Pik3ca基因突变并分析其与大肠癌患者临床病理特征之间的关系。随访3年,分析Nras、Braf、Kras、Pik3ca基因突变与患者的3年生存率的关系。结果 240例患者Nras、Braf、Kras、Pik3ca基因突变分别占2.50%、7.92%、43.75%、4.17%。Kras突变合并Pik3ca突变占3.75%。Braf突变合并Pik3ca突变占0.42%。Kras突变合并Nras突变1例,占0.42%。Nras基因突变仅与患者的年龄有关(P<0.05)。Braf基因突变仅与患者的肿瘤原发部位、分化程度以及术后是否复发有关(P<0.05)。Kras基因突变仅与患者的年龄和病灶大小有关(P<0.05)。Pik3ca基因突变与患者的肿瘤原发部位、分化程度有关(P<0.05)。Nras、Braf、Kras和Pik3ca基因突变大肠癌患者的3年生存率均低于野生型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对大肠癌患者行Nras、Braf、Kras、Pik3ca基因突变检测可以为靶向治疗提供科学依据。

结直肠癌患者应用ARMS法检测KRAS、NRAS、PIK3CA、BRAF基因突变分析

目的探讨结直肠癌(CRC)患者应用扩增阻碍突变系统(Amplification Refractory Mutation System,ARMS)法检测KRAS、NRAS、PIK3CA及BRAF基因突变情况并分析其与临床病理特征的关系。方法收集中国医科大学附属盛京医院60例结直肠癌患者手术切除组织,采用ARMS法检测KRAS、NRAS、PIK3CA及BRAF基因突变情况。结果KRAS基因突变23例,突变率为38.3%;NRAS基因突变1例,突变率为1.7%;PIK3CA基因突变4例,突变率为6.7%;BRAF基因突变3例,突变率为5%。检出双突变2例,分别为PIK3CA与KRAS突变,PIK3CA与BRAF突变。有淋巴结转移患者KRAS基因突变率显著高于无淋巴结转移患者(P=0.031)。KRAS、NRAS、PIK3CA、BRAF基因突变之间无明显相关性。结论在结直肠癌患者中,KRAS基因突变率最高,且多发生于有淋巴结转移患者,NRAS、PIK3CA、BRAF基因突变率较低。对结直肠癌患者进行KRAS、NRAS、PIK3CA、BRAF基因联合检测,为临床个体化靶向治疗提供更准确的理论依据。

结直肠癌患者BRAF,KRAS,NRAS和PIK3CA基因突变与其病理特征的关系

目的:探讨265例结直肠癌患者BRAF,KRAS,NRAS和PIK3CA基因突变及其病理特征关系。方法:选取2014年12月至2016年12月的265例结直肠癌患者肿瘤组织标本进行回顾性分析,采用PCR扩增–直接测序法检测BR AF基因(15外显子600密码子),KR AS基因(12,13,61密码子突变),NRAS(2号与3号外显子的12密码子、13密码子与61密码子常见的12个突变位点)及PIK3C A(第9,20外显子)基因的突变状态,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果:265例患者中存在BRAF基因突变率为6.8%(18/265),KRAS基因突变率为32.1%(85/265),NRAS基因突变率为5.7%(15/265),PIK3CA基因突变率为11.3%(30/265)。NRAS基因和KRAS基因突变与年龄有关(P<0.05),与性别、原发部位、组织学类型、分化程度、TNM分期、区域淋巴结转移、远处转移、术后复发转移均无关(P>0.05);BRAF,PIK3CA基因在原发部位为右半结肠患者中的突变率明显升高(P<0.05),但与年龄、性别、组织学类型、分化程度、TNM分期、区域淋巴结转移、远处转移、术后复发转移均无关(P>0.05)。结论:NRAS,PIK3CA基因在中国结直肠癌患者中的突变率较低。KRAS,NRAS基因突变与年龄相关,BRAF,PIK3CA基因与肿瘤原发部位相关,联合检测这些基因的突变情况可以判断疾病的发生发展。

急性髓系白血病中Nras基因点突变的检测以及信号传导通路蛋白的表达

目的研究Nras基因在急性髓系白血病(AML)中的突变以及在AML和正常对照组中RAS蛋白下游信号传导通路上AKT、ERK1/2以及其活化形式P-AKT和P-ERK1/2的表达情况。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性法(PCR-SSCP)及直接测序法检测AML中Nras基因突变率,应用Western blot法检测AKT、ERK以及其活化形式P-AKT,P-ERK1/2的表达量。结果48例AML中检测到2例Nras 12突变,2例Nras 61突变,突变组P-AKT、P-ERK1/2的表达水平较正常对照组明显升高(P<0.05)。未有Nras基因突变的AML其P-AKT、P-ERK1/2的表达水平也增高,但表达不均一。结论Nras基因突变可能是AML发生发展的原因之一,其机制可能是由于突变导致编码的Ras蛋白构型改变,使其处于功能持续活化状态,从而激活了Raf/Mek/Erk和PI3K/Akt等下游信号传导通路,最终导致AML的发生。

结直肠癌中KRAS、NRAS基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨结直肠癌(CRC)中大鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)、大鼠肉瘤病毒转化基因(NRAS)基因的常见突变类型与临床病理参数的关系。方法从CRC石蜡包埋组织中提取基因组DNA,采取实时荧光定量PCR法进行KRAS、NRAS基因扩增,分析其突变状态与CRC临床病理参数的关系。结果检测到86例(36.1%)KRAS基因突变,总突变率为11例(4.6%)NRAS基因突变。不同淋巴结转移及Duke分期的组间KRAS突变差异有统计学意义(P<0.05),而在不同年龄、性别,肿瘤发生部位、组织学分型、分化程度、浸润深度的组间差异无统计学意义(P>0.05);NRAS突变在不同年龄、性别、肿瘤发生部位、组织学类型、分化程度、淋巴结转移、Duke分期及浸润深度的组间差异均无统计学意义(P>0.05);KRAS与NRAS二者之间突变无相关性。结论 CRC中KRAS突变较高,NRAS突变相对较低;KRAS突变与CRC的侵袭、转移有关,二者在CRC的进程中可能是独立发挥着促进作用。

结直肠癌患者KRAS,NRAS和BRAF基因突变检测分析

目的探讨结直肠癌患者KRAS、NRAS和BRAF基因突变特点及状况。方法收集哈尔滨医科大学附属第一医院144例结直肠癌患者的手术石蜡标本,采用突变阻滞扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS-PCR)检测KRAS、NRAS和BRAF基因突变情况。结果检出KRAS基因突变62例,突变率为43.06%;检出NRAS基因突变5例,突变率为3.47%;检出BRAF基因突变6例,突变率为4.17%。结论结直肠癌患者组中KRAS基因突变率较高,NRAS和BRAF基因突变率较低。随着肿瘤靶向治疗研究不断深入,检测肿瘤相关基因靶点能够更有效地指导精准医学个体化治疗。