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NRT1.7基因突变对拟南芥硝酸盐再分配及氮效率的影响 被引量:3
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作者 余音 廖琼 +3 位作者 吴智敏 宋海星 官春云 张振华 《湖南农业科学》 2017年第3期1-4,共4页
以NRT1.7突变体(nrt1.7-3)和哥伦比亚野生型植株(col.0)为材料,研究NRT1.7基因对植株产量和氮素利用效率(NUE)的影响。结果表明:在花期、角果期nrt1.7-3突变体叶片SPAD值显著升高,出现滞绿现象;与幼嫩叶片相比,硝酸盐更多地累积在老叶中... 以NRT1.7突变体(nrt1.7-3)和哥伦比亚野生型植株(col.0)为材料,研究NRT1.7基因对植株产量和氮素利用效率(NUE)的影响。结果表明:在花期、角果期nrt1.7-3突变体叶片SPAD值显著升高,出现滞绿现象;与幼嫩叶片相比,硝酸盐更多地累积在老叶中;nrt1.7-3植株在花期、收获期的生物量、产量和氮效率均显著下降。 展开更多
关键词 拟南芥 nrt1.7基因 硝酸盐 氮效率
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2015—2017年东北地区PKV流行情况调查及其VP1基因的遗传变异分析 被引量:2
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作者 齐珊珊 苏明俊 +3 位作者 李春秋 翟军军 孔凡志 孙东波 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第10期69-73,共5页
为了解我国东北地区猪嵴病毒(PKV)的流行情况及其VP1基因的遗传进化特征,试验通过巢式RT-PCR法对2015—2017年采集自中国东北地区(黑龙江省、吉林省、辽宁省)的122份样品进行PKV检测,分析PKV感染与腹泻的相关性,并针对PKV VP1基因进行... 为了解我国东北地区猪嵴病毒(PKV)的流行情况及其VP1基因的遗传进化特征,试验通过巢式RT-PCR法对2015—2017年采集自中国东北地区(黑龙江省、吉林省、辽宁省)的122份样品进行PKV检测,分析PKV感染与腹泻的相关性,并针对PKV VP1基因进行遗传进化分析。结果表明:利用RT-PCR法检测本试验采集的122份样品,扩增PKV 3D基因的PCR产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳,得到的目的片段与预期大小相符。PKV总检出率为88.5%(108/122),其中腹泻样品和健康样品的阳性率分别为87.9%(94/107)和93.3%(14/15)。通过卡方检验分析发现,PKV的感染与腹泻发生不存在统计学相关性(P>0.05)。本试验鉴定的7株PKV的VP1基因核苷酸同源性为80.8%~99.9%,推导氨基酸同源性为86.6%~99.6%。PKV毒株被划分为4个进化分支,本试验鉴定的7株PKV毒株在1,3,4分支均有分布。说明PKV在中国东北地区猪群中有较高的感染率,且其毒株呈现出遗传多样性。 展开更多
关键词 猪嵴病毒(PKV) VP1基因 巢式RT-PCR 遗传进化 腹泻
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不明原因的颅内感染与博尔纳病病毒感染的研究 被引量:6
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作者 姚能云 徐平 郭振元 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2008年第2期124-127,共4页
目的分别检测不明原因的颅内感染患者外周血单个核细胞(PBMCs)和脑脊液有核细胞(CSFMCs)中博尔纳病病毒(BDV)p24基因,探讨不明原因颅内感染患者与BDV感染的关系及阳性患者的临床特征。方法用荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR... 目的分别检测不明原因的颅内感染患者外周血单个核细胞(PBMCs)和脑脊液有核细胞(CSFMCs)中博尔纳病病毒(BDV)p24基因,探讨不明原因颅内感染患者与BDV感染的关系及阳性患者的临床特征。方法用荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)方法检测不明原因颅内感染患者及对照者PBMCs或CSFMCs中BDV p24基因片段,同时用β-肌动蛋白(-βactin)作为内参照,并总结阳性患者的临床特征。结果PBMCs中BDV p24基因片段检测结果显示,实验组7例阳性,对照组均为阴性,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组进行CSF检查的32例颅内感染患者中4例外周血和CSF标本BDV p24基因片段检测均为阳性,阳性基因片段产物测序后与BDV标准病毒株V和马源的BDV病毒株H1766序列比较,结果同源性分别为95.35%和98.84%,在4个位点出现基因突变(nt1649 T→C,nt1656 G→A,nt1670 C→T,nt1676 C→T);7例BDV p24基因片段阳性患者主要以精神行为异常为起病方式,患者与动物关系密切,其他临床特征无特殊。结论贵州省遵义市部分不明原因颅内感染的发生与BDV感染有关,主要以精神行为异常为临床特征。 展开更多
关键词 逆转录聚合酶链反应 肌动蛋白类 基因 p24 博尔纳病病毒 荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应
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MAGE-3基因mRNA的表达在胸腔积液鉴别诊断中的价值 被引量:2
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作者 刘静 岳红梅 胡泉 《社区医学杂志》 2008年第11期1-3,共3页
目的研究MAGE-3基因mRNA在胸腔积液中的表达,探讨MAGE-3基因作为良、恶性胸腔积液鉴别诊断指标的价值。方法采用巢式逆转录-聚合酶链反应(nRT-PCR)方法,检测35例患者(25例恶性,10例良性)胸腔积液中MAGE-3的表达情况。结果10例良性胸腔... 目的研究MAGE-3基因mRNA在胸腔积液中的表达,探讨MAGE-3基因作为良、恶性胸腔积液鉴别诊断指标的价值。方法采用巢式逆转录-聚合酶链反应(nRT-PCR)方法,检测35例患者(25例恶性,10例良性)胸腔积液中MAGE-3的表达情况。结果10例良性胸腔积液组中,均未见有MAGE-3特异性条带;25例恶性胸腔积液组中,有14例可见MAGE-3特异性扩增条带,MAGE-3基因表达阳性率为56.00%,其敏感性、特异性、诊断符合率分别为56.00%、100.00%、68.57%。结论检测胸腔积液中MAGE-3基因mRNA的表达,可以作为鉴别良、恶性胸腔积液的一个指标。 展开更多
关键词 肺癌 MAGE-3基因 胸腔积液 巢式逆转录-聚合酶链反应
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谷氨酸钠对PC12细胞钠离子通道蛋白1.7表达的影响 被引量:4
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作者 潘帧婕 曹靖 +4 位作者 李鸣 任秀花 王剑南 邵金平 臧卫东 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2013年第5期591-594,共4页
目的:研究不同浓度谷氨酸钠刺激对PC12细胞钠离子通道蛋白1.7(Nav1.7)表达的影响。方法:PC12细胞解冻后,胰蛋白酶消化传代培养,对照组为普通培养基,实验组分别用终浓度为5、10、20、40 nmol/L的谷氨酸钠刺激PC12细胞14 h。14 h后收集细... 目的:研究不同浓度谷氨酸钠刺激对PC12细胞钠离子通道蛋白1.7(Nav1.7)表达的影响。方法:PC12细胞解冻后,胰蛋白酶消化传代培养,对照组为普通培养基,实验组分别用终浓度为5、10、20、40 nmol/L的谷氨酸钠刺激PC12细胞14 h。14 h后收集细胞,通过免疫荧光、RT-PCR、Western-blot等方法检测Nav1.7和SCN9A mRNA表达量的变化。结果:各组PC12细胞RT-PCR、免疫荧光、Western-blot结果比较,差异均有统计学意义(F=11.821、61.871、23.274,P均<0.001);且除RT-PCR结果 5 nmol/L谷氨酸钠刺激组与对照组相比外,其余各谷氨酸钠刺激组与对照组相比均升高(P均<0.05)。结论:PC12细胞Nav1.7的表达与疼痛有关。 展开更多
关键词 PC12细胞 谷氨酸钠 钠离子通道蛋白1.7 SCN9A基因
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CACTFTPPCA1(YACT)、Dof(AAAG)、MYB可能参与甘蓝型油菜对氮胁迫的响应 被引量:2
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作者 梁桂红 华营鹏 +1 位作者 宋海星 张振华 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期338-353,共16页
【目的】油菜需氮量高但氮素利用率低,氮素源库分配效率被认为是调控植物氮素利用效率的关键因子。在拟南芥中,NRT1.7基因介导了植物韧皮部硝酸盐由衰老叶片向幼嫩叶片和角果中的再转运过程。通过分析鉴定油菜中的NRT1.7基因及其对供氮... 【目的】油菜需氮量高但氮素利用率低,氮素源库分配效率被认为是调控植物氮素利用效率的关键因子。在拟南芥中,NRT1.7基因介导了植物韧皮部硝酸盐由衰老叶片向幼嫩叶片和角果中的再转运过程。通过分析鉴定油菜中的NRT1.7基因及其对供氮水平的响应,为进一步系统研究NRT1.7基因提供参考依据。【方法】以AtNRT1.7基因序列为基础序列,采用生物信息学方法鉴定了白菜、甘蓝和甘蓝型油菜中NRT1.7的同源基因,预测和分析了该基因拷贝数、系统进化、进化选择压力、分子特征、保守基序、跨膜结构域、染色体定位、基因结构及其启动子区域所能结合的顺式作用元件,同时采用荧光定量PCR分析了甘蓝型油菜BnaNRT1.7s的组织表达模式及其对氮胁迫的响应。氮素响应试验以甘蓝型油菜幼苗为材料,在NO3-N 9.0 mmol/L溶液中培养10天后,直接测定NRT1.7基因表达量;转入NO3--N 0.3 mmol/L溶液中(低氮胁迫)或在无氮溶液中饥饿处理3天后,恢复NO3-N 9.0 mmol/L溶液培养,再测定NRT1.7基因表达量。【结果】甘蓝型油菜NRT1.7s家族包含6个成员,系统进化分析表明BnaNRT1.7s与拟南芥进化相似,分布在相近的分支。BnaNRT1.7s家族所有基因成员的Ka/Ks值均小于1.0,受到强烈的纯化选择作用。BnaNRT1.7s家族所有基因成员均属于稳定的两性蛋白,含12~13个跨膜结构域。基因结构相似,均含有3个内含子,且CACTFTPPCA1(YACT)、Dof(AAAG)、MYB是启动子上丰度较大的顺式作用原件,可能参与了植物对氮素的响应。实时荧光定量PCR结果表明,甘蓝型油菜中NRT1.7基因会受到不同氮素水平的调控。长期(72 h)低氮处理,根部BnaA7.NRT1.7b和BnaC6.NRT1.7b基因的表达上调而抑制地上部BnaCn.NRT1.7基因的表达,共同调控植物对低氮胁迫的适应能力。氮饥饿3天后供氮6 h,地上部和根部BnaNRT1.7的基因表达均受到抑制。基因共表达网络分析显示,低氮胁迫下,BnaCn.NRT1.7和BnaC6.NRT1.7b基因分别在地上部和根部氮素再分配中起主导作用。【结论】甘蓝型油菜NRT1.7蛋白进化过程相对保守,基因结构相似,启动子上的顺式作用原件CACTFTPPCA1(YACT)、Dof(AAAG)、MYB可能参与了甘蓝型油菜对氮胁迫的响应。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 氮胁迫 生物信息学 nrt1.7 硝酸盐 氮素再转运
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烟草硝酸盐转运蛋白NtNRT1.7基因的克隆、亚细胞定位及表达模式分析 被引量:5
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作者 尹卓然 王驰 +3 位作者 轩栋栋 罗勇 连文力 贾宏昉 《烟草科技》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1-8,共8页
为研究硝酸转运蛋白(Nitrate transporter,NRT)在烟草吸收和转运硝酸盐中的作用,以烟草K326的cDNA为模板,克隆了一个全长1839 bp、编码612个氨基酸的硝酸盐转运蛋白基因,命名为NtNRT1.7。生物信息学分析表明烟草NtNRT1.7具有典型跨膜结... 为研究硝酸转运蛋白(Nitrate transporter,NRT)在烟草吸收和转运硝酸盐中的作用,以烟草K326的cDNA为模板,克隆了一个全长1839 bp、编码612个氨基酸的硝酸盐转运蛋白基因,命名为NtNRT1.7。生物信息学分析表明烟草NtNRT1.7具有典型跨膜结构域。同源性分析结果显示,NtNRT1.7与拟南芥AtNRT1.7的同源性达57.23%。亚细胞定位结果表明该蛋白定位在细胞膜上,是一个典型的膜蛋白。启动子分析和不同胁迫处理的qRT-PCR结果显示,NtNRT1.7主要在成熟叶中高表达,并受低氮诱导抑制表达,受干旱、低温、高盐等胁迫诱导增强表达,表明NtNRT1.7基因可能参与非生物胁迫条件下硝酸盐的再利用。 展开更多
关键词 nrt1.7 基因克隆 表达模式分析 烟草
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Efficient allelic replacement in rice by gene editing: A case study of the NRT1.1B gene 被引量:12
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作者 Jingying Li Xin Zhang +6 位作者 Yongwei Sun Jiahui Zhang Wenming Du Xiuping Guo Shaoya Li Yunde Zhao Lanqin Xia 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2018年第7期536-540,共5页
Summary Precise replacement of an existing allele in commercial cultivars with an elite allele is a major goal in crop breeding. A single nucleotide polymorphism in the NRT1.1B gene between japonica and indica rice is... Summary Precise replacement of an existing allele in commercial cultivars with an elite allele is a major goal in crop breeding. A single nucleotide polymorphism in the NRT1.1B gene between japonica and indica rice is responsible for the improved nitrogen use efficiency in indica rice. Herein, we precisely replaced the japonica NRT1.1B allele with the indica allele, in just one generation, using CRISPR/Cas9 gene-editing technology. No additional selective pressure was needed to enrich the precise replacement events. 展开更多
关键词 HDR B gene Figure A case study of the NRT Efficient allelic replacement in rice by gene editing
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