注意缺陷多动障碍转换功能与NRXN1基因的关联研究

目的:探讨注意缺陷多动障碍(ADHD)转换功能与NRXN1基因的关联。方法:顺序纳入符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-IV)ADHD诊断标准的ADHD儿童756例和年龄匹配的正常对照儿童133例。采用TMT连线测试(Trail Making Test)记录被试者转换功能各指标,包括数字连线时间、数字连线错误次数、数字字母连线时间和数字字母连线错误次数。选择NRXN1基因的两个单核苷酸多态性(rs1592728和rs4971652)位点,利用Sequenom基因分型平台进行基因型检测。在全部ADHD病例儿童和正常对照采用多重线性回归分析基因型对ADHD转换功能的影响因素,其次,分别在ADHD组和对照组中采用多重线性回归分层分析转换功能与基因型之间的关联。结果:多重线性回归显示转换功能与年龄(β=0.42,P<0.001)、智商(β=0.34,P<0.001)、罹患ADHD(β=0.08,P=0.004)和rs4971652GG基因型(β=0.06,P=0.039)负向关联;ADHD组转换功能与年龄(β=0.46,P<0.001)、智商(β=0.32,P<0.001)、rs4971652的GG基因型(β=0.07,P=0.018)负向关联,与ADHD亚型(β=0.06,P=0.033)正向关联,ADHD-I型比ADHD-C型患儿受损严重;对照组转换功能与年龄(β=0.25,P=0.002)、智商(β=0.40,P<0.001)负向关联。结论:ADHD患儿转换功能可能与NRXN1基因SNPs存在关联,GG基因型患者转换功能受损相对轻。

儿童孤独症相关基因NRXN1β启动子功能分析

Neurexins是神经特异性突触蛋白,Neurexin1β结构的异常与孤独症密切相关。为分析孤独症相关基因NRXN1β最小启动子和调节基因转录的功能元件,本文构建了含NRXN1β基因上游调控区不同区域的荧光素酶报告基因质粒,转染HEK293细胞后,利用检测双荧光素酶报告基因的转录活性以确定NRXN1β基因最小启动子区,进而筛选出相应的显著增强或抑制报告基因活性的功能区;同时,为鉴定顺式作用元件,利用基因定点突变技术对基因功能区内和临近DNA序列进行连续的碱基突变;最后,采用转录因子预测工具对启动子功能区内的转录调控元件进行分析。结果首次发现NRXN1β最小启动子区位于?88^+156 bp,?88~?73 bp和+156^+149 bp可增强启动子活性,+229^+419 bp可抑制启动子活性,且?84~?63 bp为能够显著性增强启动子活性的顺式作用元件,该区域可能存在DBP(Albumin D-site-binding protein,DBP)和ABF1(Autonomously replicating sequence-binding factor 1,ABF1)两个转录因子结合位点。

珠海地区NRXN1和NLGN1基因多态性与儿童孤独症的关联性研究

目的探索珠海地区NRXN1和NLGN1基因多态性与儿童孤独症易感性的关系,为孤独症的防治提供科学依据。方法采用病例对照的研究方法,选取2011-2016年就诊于珠海市妇幼保健院的123例珠海地区的孤独症患儿和506例健康对照。采用口腔拭子采集口腔上皮细胞以提取DNA,采用Sequenom Mass Arrayplat form分型技术对NRXN1基因上的rs1045881和rs11885824以及NLGN1上的rs9855544进行基因分型。结果NRXN1基因上的rs1045881和rs11885824以及NLGN1上的rs9855544位点基因型分布在孤独症组和健康对照组比较,差异无统计学意义;但NLGN1基因上的rs9855544与NRXN1基因上的rs11885824存在基因与基因间的交互作用(预测准确率为0.480,交叉验证一致性为10/10,P=0.040)。结论NRXN1基因上的rs1045881和rs11885824以及NLGN1上的rs9855544位点基因多态性可能与孤独症易感性没有关联,但NLGN1基因上的rs9855544与NRXN1基因上的rs11885824之间的交互作用可能是孤独症易感性的影响因素。

NRXN1基因在儿童孤独症谱系障碍中的研究进展

儿童孤独症是发生在婴幼儿时期的由多种生物因素引起的广泛性大脑发育障碍。病因复杂,其中遗传变异起到关键作用。识别致病基因为能更清楚地认识该疾病的神经生物学基础提供了一条更合理的途径。不少学者在孤独症谱系障碍(ASD)候选基因中进行了单核苷酸多态性(SNPs)、突变、拷贝数变异(CNVs)的研究。最近研究显示,NRXN基因家族中影响突触功能的2p16.3上轴突蛋白基因(NRXN1)在ASD患儿中频繁出现,提示该基因家族功能异常对孤独症的形成具有重要意义。本文将对NRXN1基因变异在突触对神经发育性疾病中的作用的研究进展做一综述。

CNV-seq联合qPCR对单一基因NRXN1部分缺失的产前诊断

目的分析7例低深度全基因组测序(copy number variation sequencing,CNV-seq)检出仅涉及NRXN1基因的2p16.3杂合缺失胎儿的遗传学检查结果、拷贝数变异(copy number variation,CNV)来源及妊娠结局,为产前诊断和遗传咨询提供依据。方法7例产前诊断样本均通过CNV-seq检测发现2p16.3杂合缺失,进一步通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)进行验证,明确涉及的NRXN1基因缺失的具体区域,并对CNV进行父母验证和妊娠结局的随访。结果在16502例样本中共检出7例胎儿染色体2p16.3区存在120~900 kb的微缺失,发生率为0.424‰。该区域主要位于2号染色体的50200000-51880000位置,仅覆盖了NRXN1基因。qPCR验证了7例胎儿的CNV,其中2例涉及NRXN1基因第1~6外显子杂合缺失,1例涉及第1~19外显子杂合缺失,1例涉及第19~22外显子杂合缺失,3例涉及第6~7内含子杂合缺失。亲代验证发现父源性1例,母源性1例,新发2例,其余3例拒绝亲代验证。经随访,除1例引产,1例尚未出生外,其余5例均健康出生,年龄5个月~3岁,均未发现NRXN1相关的精神发育异常。结论CNV-seq检出7例胎儿涉及NRXN1基因的2p16.3杂合缺失,经qPCR验证NRXN1基因的具体缺失位置,通过结合CNV来源、家系分析以及妊娠结局,对每个家庭进行了个体化的遗传咨询及生育指导。

一例自闭症患者NRXN1基因缺失的分析

目的对1例自闭症患者NRXN 1基因缺失进行分析,明确其致病原因.方法应用高通量测序方法(high throughput sequencing)对患者的NRXN1基因进行拷贝数变异(copy number variation,CNV)检测.结果CNV检测结果提示患者2号染色体短臂p16.3区带远端缺失0.11 Mb,缺失位于2号染色体基因组的50820001-50922000位置,覆盖了NRXN1基因第6外显子及第7内含子部分区域,患者弟弟和父母亲均未检测到NRXN1基因缺失.结论患者NRXN1基因缺失可能是患者的致病原因.

Tourette综合征患儿轴突蛋白1基因突变研究

目的探究轴突蛋白1(neurexin 1,NRXN1)基因在Tourette综合征(Tourette syndrome,TS)患儿中的突变特点。方法纳入524例TS患儿,采集外周血提取DNA,进行NRXN1基因全部外显子靶向测序(target region sequencing)后进行Sanger测序验证,应用DNAMAN软件、SIFT、PolyPhen2、Mutation Taster、FATHMM和ClinPred对可疑变体的危害性进行生物信息学分析,最后对携带NRXN1基因变体的患儿进行基因型及表型分析。结果13例TS患者携带13个NRXN1基因变体,包括11个点突变及2个缺失突变。其中2个点突变,c.79G>T(p.A27S)和c.58G>T(p.G20C),为新发现的变体,其他9个点突变及2个缺失突变包括c.3523A>G(p.I1175V)、c.4180A>T(p.T1394S)、c.1697A>T(p.H566L)、c.3715G>A(p.A1239T)、c.878A>C(p.N293T)、c.475C>T(p.P159S)、c.320C>T(p.T107M)、c.365A>G(p.Q122R)、c.611T>A(p.L204Q)、c.68_79del(p.G23_G26del)、c.65_79del(p.G22_G26del)。生物信息学分析表明c.58G>T、c.1697A>T、c.475C>T、c.365A>G、c.878A>C、c.79G>T等6种基因变体的危害性可能相对较高。13例患儿中有6例采集到临床表现的信息,该6例患儿有不同部位的抽动,1例伴随强迫症状,1例出现情绪不稳,3例表现易激惹,6例患儿未出现重复语言、注意缺陷、多动障碍、睡眠障碍及抑郁症状的表现。结论TS患儿中检测到NRXN1基因突变位点,拓展了NRXN1突变谱。携带不同基因变体的患儿临床表现不相同,基因型及表型之间的关系需要进一步探索。

neurexin家族在突触发生和突触传递中作用的研究进展

neurexin家族属于神经细胞表面蛋白,参与细胞识别和细胞黏附,可能介导细胞信号转导。最近研究表明,neurexins在突触发生和突触传递等过程中发挥重要作用,并可能影响学习记忆功能。这些研究进展对于进一步揭示neurexins在神经突触可塑性及其在学习记忆过程中的可能作用具有重要意义。本文主要对neurexin家族的研究概况、NRXN1在突触发生和突触传递中的功能及其在学习记忆功能中的可能作用进行简要综述。

不同干预方式对ASD大鼠认知能力的影响及机制探讨

目的观察有氧运动、丰富环境及二者结合对孤独症谱系障碍(ASD)大鼠认知功能和海马组织中ASD易感基因NRXN1、NL3和Shank3表达的影响,探讨其纠正自闭症异常行为的效果及其可能机制。方法采用向Wistar孕鼠腹腔注射丙戊酸钠建立ASD大鼠模型,选取40只成功建模的子代大鼠随机分为有氧运动组、丰富环境组、有氧+环境组以及ASD模型组,每组10只;在常规饲养的母鼠所产子代中随机挑选10只作为空白对照组。有氧运动组大鼠接受持续8周、6次/周、每次在同一时间段、持续90 min的游泳运动干预;丰富环境组大鼠饲养于内有各种玩具、可供大鼠嬉戏玩耍的丰富环境饲养笼;运动+环境组接受运动干预,同时在丰富环境中饲养;ASD模型组和空白对照组不予干预。干预后,采用旷场实验和Morris水迷宫实验观察其行为学表现与改变;采用Western blot检测大鼠海马组织中NRXN1、NL3和Shank3蛋白表达情况;采用RT-PCR检测大鼠海马组织中NRXN1、NL3和Shank3的mRNA表达水平。结果与空白组比较,ASD模型组、有氧运动组、丰富环境组及有氧+环境组的穿格次数少(P<0.05)、逃避潜伏期长(P<0.05)、原平台象限活动时间缩短(P<0.05),NL3、NRXN1和Shank3蛋白的mRNA表达均明显降低(P<0.05);与ASD模型组比较,有氧运动组、丰富环境组及有氧+环境组的穿格次数明显增加(P<0.05)、逃避潜伏期明显缩短(P<0.05)、原平台象限活动时间延长(P<0.05),大鼠海马组织中NL3、NRXN1、Shank3蛋白的mRNA表达均明显升高(P<0.05,有氧+环境组P<0.01);有氧运动组、丰富环境组及有氧+环境组相互比较,其穿格次数、逃避潜伏期、原平台象限活动时间与NL3、NRXN1和Shank3蛋白的mRNA表达均无显著性差异(P>0.05)。结论有氧运动、丰富环境及二者结合均可提高丙戊酸钠诱导的ASD模型大鼠的认知能力,一定程度纠正其异常行为,有氧运动结合丰富环境的干预效果优于单纯的有氧运动、单纯的有氧运动优于单纯的丰富环境。其作用机制可能与NRXN-NLGN-SHANK通路有关。